清热活血方对CIA大鼠自噬相关蛋白p62表达的影响

目的 研究清热活血方对胶原诱导关节炎(collagen type Ⅱ-induced arthritis, CIA)大鼠滑膜组织、外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)自噬相关蛋白p62的影响,进一步探讨清热活血方防治类风湿关节炎的相关机制。方法 40只SD大鼠随机分成正常组、模型组、清热活血方组、依那西普组,用免疫源性牛Ⅱ型胶原造模,造模成功后各组大鼠分别给予相应药物灌胃,连续治疗28 d后观察大鼠关节肿胀程度,检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)及白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)水平、滑膜及PBMC中p62蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠出现关节红肿,血清TNF-α、IL-1β水平上升(P<0.01),关节滑膜组织及PBMC中p62 mRNA水平上升(P<0.01),p62蛋白相对含量降低(P<0.01)。与模型组比较,清热活血方组大鼠血清TNF-α、IL-1β含量降低(P<0.01),滑膜组织及PB...     

活血通络中药联合来氟米特对胶原诱导型大鼠滑膜 HIF-1α、VEGF 的影响

目的：观察活血通络中药联合来氟米特对胶原诱导性关节炎 CIA 鼠模型和类风湿关节炎（RA）滑膜成纤维细胞的血管内皮生长相关因子 HIF -1α、VEGF 表达水平的影响。方法48只健康 SD 雄性大鼠随机分为正常对照组,模型组、来氟米特组、活血化瘀Ⅰ号方组、活血化瘀Ⅱ号方组、活血化瘀Ⅲ号方组。建立 Wistar 大鼠 II 型胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠模型,并对大鼠分别予以灌胃给药。动态观察关节炎指数（AI）,分析对比 CIA 大鼠踝关节滑膜血管中 HIF -1α、VEGF 在滑膜组织上表达及意义。结果模型组HIF -1α、VEGF 表达增强,其余各治疗组 HIF -1α、VEGF 表达与模型组相比明显减弱。采用半定量记分法结果显示各个治疗组与模型组之间 HIF -1a 、VEGF 的蛋白表达有明显差异（P 〈0.01）,与正常组比较有差异（P 〈0.05）。结论活血通络中药联合来氟米特对胶原诱导型关节炎模型大鼠可以下调滑膜血管生成相关因子抗 VEGF 与 HIF -1α的水平。     

乌头汤对CIA大鼠MCP-1/CCR2/ERK1/2信号的作用

目的:研究乌头汤对胶原诱导关节炎大鼠体内MCP-1/CCR2/ERK1/2信号的影响。方法:50只SD大鼠,随机选10只为正常组,剩下40只造胶原诱导关节炎模型,造模成功后随机分成模型组、乌头汤低剂量组(3.75 g·kg~(-1)·d~(-1))、乌头汤高剂量组(7.5 g·kg~(-1)·d~(-1))和甲氨蝶呤组(1 mg·kg~(-1)·w~(-1)),灌胃给药28 d后取材。采用ELISA法检测大鼠血清中单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)的含量,免疫组织化学法检测大鼠踝关节中MCP-1的表达水平,利用Western Blotting检测大鼠踝关节中CC趋化因子受体2(CC chemokine receptor 2,CCR2)和细胞外信号调节激酶1/2(extracellular-signal-regulated kinases 1/2,ERK1/2)及其磷酸化形式的表达水平。结果:乌头汤能显著降低胶原诱导关节炎大鼠血清及踝关节中MCP-1的含量,同时能够显著降低模型大鼠踝关节中CCR2的含量及ERK1/2的磷酸化水平,但对总的ERK1/2没有明显影响。结论:乌头汤具有下调胶原诱导关节炎大鼠体内MCP-1/CCR2/ERK1/2信号的作用。     

清热活血方对Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠相关指标的影响研究

目的:观察清热活血方对Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠血管内皮生长因子(vegf)、白细胞介素-6(IL-6)的影响,探讨清热活血方对类风湿关节炎滑膜血管新生的抑制机理。方法:应用免疫组化技术检测CD31在CIA大鼠膝关节滑膜组织中的表达,ELISA法检测CIA大鼠血清中血管内皮生长因子和白细胞介素的表达,并观察清热活血方对其的影响。结果:用免疫组化法检测微血管数量发现,清热活血方中、小剂量组与模型组比较微血管数量明显减少,清热活血方大剂量组与模型组比较微血管数量减少,差异有统计学意义。CIA大鼠血清vegf、IL-6检测中,与模型组比较清热活血方中、小剂量组vegf表达降低,清热活血方中剂量组IL-6表达降低明显。结论:中小剂量的清热活血方通过下调VEGF和IL-6的表达,可减少炎症细胞对滑膜的浸润,抑制血管新生,进而达到控制活动性RA病情的目的。     

桂枝附子汤调控AGEs/RAGE/NF-κB信号通路对类风湿关节炎大鼠的影响

目的 研究桂枝附子汤对类风湿关节炎(RA)大鼠的干预作用及对晚期糖基化终末产物(AGEs)/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 将50只大鼠随机分为空白组、模型组、桂枝附子汤组(6.1 g/kg)、RAGE抑制剂组(0.5 mg/kg)、桂枝附子汤+RAGE抑制剂组(6.1 g/kg+0.5 mg/kg),每组10只。用牛Ⅱ型胶原与不完全弗氏佐剂(IFA)混合乳化诱导建立RA大鼠模型，造模后连续灌胃给药30 d。给药结束后，测定大鼠关节炎指数和关节肿胀度，HE染色观察大鼠踝关节软骨及滑膜组织病理变化，ELISA法检测大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，Western blot法检测大鼠踝关节软骨组织RAGE、p-NF-κB p65蛋白表达，免疫组化(IHC)法观察大鼠踝关节软骨组织AGE和软骨及滑膜组织TNF-α、白细胞介素-1β(IL-1β)阳性细胞表达。结果 与模型组比较，桂枝附子汤组、抑制剂组和桂枝附子汤+抑制剂组均能有效降低RA大鼠关节炎指数、关节肿胀度、血清炎性因子IL-6、TNF-α水平...     

清热活血方对胶原诱导关节炎大鼠miR-140、TLR4、NF-κB的影响

目的 探讨清热活血方对胶原诱导关节炎(collagen type Ⅱ-induced arthritis, CIA)大鼠miR-140/Toll样受体4(toll-like receptors 4,TLR4)/核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路的影响。方法 6周龄SPF级大鼠24只,随机分为正常组、模型组、甲氨蝶呤组(0.2 mg/kg)、清热活血方组(34 g/kg),每组6只,通过对大鼠尾根部注射Ⅱ型胶原乳剂构建类风湿关节炎动物模型,连续给药6周。连续监测大鼠关节肿胀程度,Elisa法测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、IL-6含量白细胞介素6(interleukin 6,IL-6),TRAP染色观察破骨细胞(osteoclast,OC)数量,Western blot法检测大鼠骨组织中TLR4、NF-κB的蛋白表达,实时荧光定量PCR检测大鼠骨组织中miR-140、TLR4、NF-κB的mRNA表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠...     

芪参合剂对耐药肺炎克雷伯菌脓毒症大鼠的固有免疫调节作用研究

目的:研究芪参合剂对耐药肺炎克雷伯菌脓毒症大鼠的固有免疫调节作用。方法:将50只SD大鼠随机分成正常组、模型组及芪参合剂低、中、高剂量组,每组10只。耐药肺炎克雷伯菌气管注射复制脓毒症大鼠模型,造模后6小时按分组灌胃方式给予相对应剂量芪参合剂或生理盐水,干预3天后取支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)进行白细胞总数及白细胞分类计数;取支气管肺泡灌洗液(BALF)、血液(blood)、脾脏(spleen)、肾脏(kidney)进行菌落形成单位(colony-forming units,CFU)测定;ELISA法检测BALF中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和肺组织中CXC趋化因子配体(C-X-C motif chemokine ligand-1,CXCL1)、巨噬细胞炎症因子蛋白2(macrophage inflammatory protein 2,MIP-2)表达。结果:模型组大鼠BALF中白细胞总数及白细胞分类计数明显升高,BALF、blood、脾、肾组织中细菌负荷明显增加,且组织细胞因子TNF-α、IL-6、CXCL1、MIP-2表达明显升高。3种剂量芪参合剂干预后,能不同程度降低BALF中白细胞总数及白细胞分类计数,减轻主要脏器细菌负荷,且可以明显降低细胞因子TNF-α、IL-6、CXCL1、MIP-2表达,其中芪参合剂中剂量组效果最明显。结论:芪参合剂能通过调节固有免疫反应对脓毒症大鼠起到保护作用,其机制可能与降低主要脏器细菌负荷,减轻免疫细胞的过度活化,减少炎症因子的过度释放有关。     

苦杏仁苷对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠肿瘤坏死因子-α和细胞间黏附分子-1的影响

目的探讨苦杏仁苷对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的抗炎作用机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、苦杏仁苷组、雷公藤多苷组。采用Ⅱ型胶原诱导建立CIA大鼠模型,造模后第15日,各给药组予相应药物灌胃,连续28 d。ELISA检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(sICAM-1)水平,免疫组化法检测大鼠关节滑膜TNF-α表达。结果苦杏仁苷组和雷公藤多苷组关节滑膜TNF-α阳性表达相似,较模型组明显减少,且苦杏仁苷组和雷公藤多苷组大鼠外周血中TNF-α、sICAM-1水平与模型组比较均明显下降(P0.05),与正常组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论苦杏仁苷通过有效抑制TNF-α、sICAM-1水平及TNF-α表达,达到治疗类风湿关节炎的作用。     

风湿清对Ⅱ型胶原诱发类风湿关节炎大鼠白细胞介素-4、γ-干扰素及趋化因子的影响

目的 了解风湿清对类风湿关节炎大鼠血清及滑膜细胞培养上清液中白细胞介素4（IL- 4） 、γ干扰素（γ-IFN）、巨噬细胞趋化因子1α（MIP-1α）、Ⅱ型胶原抗体（CⅡ抗体）的调节作用,探讨清热活血法治疗类风湿关节炎的作用机理。方法 CⅡ抗体加弗氏完全佐剂诱发类风湿关节炎大鼠动物模型,ELISA方法检测大鼠血清及滑膜细胞培养上清液中CⅡ抗体、IL- 4 、γ-IFN及MIP-1α的含量。结果 与正常组比较,模型组血清CⅡ抗体含量均明显升高（P<0.01）,模型14天、28天组血清和滑膜细胞培养上清液中IL-4 含量下降,γ-\IFN、MIP-1α含量升高,差异有统计学意义（P<0.05 或P<0.01）;与模型组同期比较,风湿清14天组血清和滑膜细胞培养上清液IL- 4 含量升高、滑膜细胞培养上清液MIP-1α含量下降（P<0.05 或P<0.01）;风湿清28天组血清和滑膜细胞培养上清液MIP-1α含量均下降（P<0.05）。结论 风湿清能明显上调类风湿关节炎大鼠血清及滑膜局部IL- 4含量,对血清及滑膜局部γ-IFN有下调趋势,能明显下调全身和局部滑膜细胞MIP-1α的高表达,从而维持Th1/Th2细胞平衡,抑制滑膜局部的细胞及体液免疫反应,减轻慢性关节滑膜炎及血管炎病变。     

基于细胞焦亡探讨中药复方对CIA大鼠炎症的影响

目的 探讨清热活血方基于NOD样受体蛋白3(nod-like receptor protein 3,NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(cystein-containing aspartat-specific protease-1,Caspase-1)/消皮素D(gasdermin D,GSDMD)细胞焦亡通路治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)大鼠炎症的作用机制。方法 60只sprague-dawley(SD)大鼠随机分为正常组,模型组,清热活血方低(8.5 g/kg)、中(17 g/kg)、高剂量组(34 g/kg),甲氨蝶呤组(0.2 mg/kg),除正常组外,各组大鼠尾根部皮下注射牛Ⅱ型胶原乳剂构建胶原诱导性关节炎大鼠(collagenⅡ-induced arthritis,CIA)模型,造模成功后予对应药物灌胃(正常组、模型组予0.9%氯化钠溶液灌胃),连续灌胃30 d后观察不同实验组大鼠体质量及足趾容积变化,ELISA法检测血清白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-18水平,用荧光定量PCR检测各组大鼠膝关节滑膜组织...     

穿山龙总皂苷对胶原诱导关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子、血管生成素-2及受体Tie-2表达的影响

 目的 观察穿山龙总皂苷对胶原诱导关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子、血管生成素2及其受体Tie-2的影响,探讨穿山龙总皂苷治疗类风湿关节炎的抗血管新生机制。方法 建立胶原诱导关节炎大鼠模型,动物随机分为空白对照组、胶原诱导关节炎模型组、穿山龙总皂苷组、雷公藤多苷组（作为阳性对照组）和薯蓣皂苷元组,采用实时荧光定量PCR方法检测大鼠膝关节滑膜血管内皮生长因子mRNA的表达情况,采用免疫组织化学方法检测大鼠膝关节滑膜血管生成素-2及其受体Tie-2蛋白的表达。结果 胶原诱导关节炎模型组大鼠滑膜血管内皮生长因子mRNA、血管生成素-2及Tie-2蛋白表达明显高于空白对照组(P<0.01),经穿山龙总皂苷、雷公藤和薯蓣皂苷元治疗后血管内皮生长因子mRNA和血管生成素-2表达均低于胶原诱导关节炎模型组(P<0.01);而Tie-2表达呈降低趋势,差异无统计学意义。穿山龙总皂苷组血管内皮生长因子mRNA表达比雷公藤组和薯蓣皂苷元组血管内皮生长因子mRNA明显降低(P<0.01)。结论 穿山龙总皂苷可能通过降低滑膜血管内皮生长因子mRNA、血管生成素-2及Tie-2的表达,抑制滑膜血管新生,从而对类风湿关节炎发挥治疗作用。     

雷公藤多苷片抑制实验性类风湿关节炎血管新生的作用研究

为了了解雷公藤多苷片对体外血管内皮细胞(HUVEC)管腔形成能力的影响以及对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节滑膜血管新生的作用,该研究拟采用20μg·L-1血管内皮细胞生长因子(VEGF)诱导HUVEC体外模型,观察0. 1,1,10mg·L-1雷公藤多苷片作用7 h后对HUVEC管腔形成和管腔分支点数目影响的情况;另外,通过建立CIA大鼠模型,以9,18,36 mg·kg-1·d-1雷公藤多苷片连续给药42 d,采用HE染色法观察CIA大鼠关节滑膜中血管形态和密度,免疫组化和免疫荧光双染法检测滑膜中血管内皮细胞标志物血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)和α平滑肌肌动蛋白(αSMA)的表达情况,免疫组化和Western blot法观察滑膜组织中低氧诱导因子1α(HIF1α)和血管紧张素(Ang1)的表达水平。结果显示,1,10 mg·L-1雷公藤多苷片可显著降低VEGF诱导的管腔分支点数,0. 1,1,10 mg·L-1雷公藤多苷片可显著降低VEGF诱导的管腔形成面积和长度; 9,18,36 mg·kg-1·d-1雷公藤多苷片能显著降低CIA大鼠炎症关节的滑膜微小血管和血管密度,抑制CD31阳性表达量、CD31+/αSMA-不成熟血管和总血管阳性表达,同时18,36 mg·kg-1·d-1雷公藤多苷片负向调节滑膜中HIF1α和Ang1的含量。提示了雷公藤多苷片对CIA大鼠关节滑膜组织的血管新生和体外HUVEC的管腔形成有抑制作用,且这一作用可能与其调节炎症关节滑膜中失衡的HIF1α/Ang1轴有关。     

人参皂苷Re对异丙肾上腺素诱导离体灌流大鼠心脏心律失常的调节作用

目的探究人参皂苷Re对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导离体大鼠心脏心律失常的调节作用。方法提取原代乳鼠心肌细胞,通过CCK-8法检测人参皂苷Re对乳鼠心肌细胞存活率的影响。将雄性Wistar大鼠随机分为对照组、ISO组、人参皂苷Re+ISO组和人参皂苷Re组,通过Langendorff灌流系统对离体大鼠心脏进行给药,利用多电极阵列映射系统分析大鼠心肌电活动变化;通过苏木素-伊红(HE)染色观测离体大鼠心肌损伤情况;利用荧光共振能量转移成像系统实时监测心肌细胞内环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,c AMP)和蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)的含量变化;通过ELISA法检测各组离体心脏组织上清液中炎性因子水平。结果人参皂苷Re(1～50μmol/L)均对原代乳鼠心肌细胞的存活率无明显影响;与对照组相比,ISO组心室肌传导速度明显加快,传导方向变化显著,心率显著增高(P0.05),心肌细胞脂肪变性严重程度增加,cAMP和PKA含量增加,趋化因子1(C-X-C motif chemokine 1,CXCL1)、CXCL2、CXCL3、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平均明显升高(P0.05);与ISO组相比,人参皂苷Re+ISO组心率明显下降(P0.05),心肌细胞脂肪变性严重程度减轻,c AMP和PKA含量降低,CXCL1、CXCL2、CXCL3、TNF-α和IL-6水平均显著降低(P0.05)。结论人参皂苷Re可通过调节c AMP/PKA通路并抑制炎性反应干预快速型心律失常的发生。     

风湿宁对风寒湿痹证CIA大鼠模型滑膜组织中TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨风湿宁对风寒湿痹证胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型滑膜组织中Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路的影响及相关的作用机制。方法:SPF级雌性Wistar大鼠随机分为6组,分别为正常组,模型组,阳性药组(来氟米特片,2.33 mg·kg-1),风湿宁低、中、高剂量组(9.12,18.24,36.48 g·kg-1),每组9只。除正常组外,其余各组大鼠采用风寒湿外感致病因素刺激,结合牛Ⅱ型胶原乳化剂诱导的方法,制备风寒湿痹证CIA大鼠模型。造模成功后,各组大鼠给予相应药物灌胃干预,每日1次,连续4周。观察药物对大鼠关节肿胀度,酶联免疫吸附测定法(ELISA)血清类风湿因子(RF),环瓜氨酶肽(ACPA),白细胞介素(IL)-1β,IL-10,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)滑膜组织中TLR4,髓样分化因子88(My D88),NF-κB酶抑制蛋白α(IκBα),NF-κB mRNA和蛋白表达的情况。结果:与正常组比较,模型组CIA大鼠模型的关节肿胀度明显升高,血清RF,ACPA,IL-1β,TNF-α含量显著升高,IL-10含量显著降低,滑膜组织中TLR4,My D88,IκBα,NF-κB mRNA和蛋白表达显著升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,风湿宁低、中、高剂量组可明显降低风寒湿痹证CIA大鼠模型的关节肿胀度与血清RF,ACPA,IL-1β,TNF-α含量,升高血清IL-10水平,下调滑膜组织中TLR4,My D88,IκB-α,NF-κB mRNA与蛋白表达量(P0.05,P0.01)。结论:风湿宁可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,从而抑制IL-1β,TNF-α的产生,起到治疗RA的作用,且其疗效与药物剂量有一定相关性。     

姜酚对胶原诱导性关节炎的抗炎作用及其机制研究

目的探讨姜酚对牛II型胶原诱导性关节炎(Collagen Induced Arthritis,CIA)大鼠的抗炎作用及其机制。方法将6周龄雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、姜酚组和雷公藤多苷组,每组10只。制备CIA模型,观察姜酚对CIA大鼠关节病理、关节炎指数的变化及对大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)、白介素-1β(IL-1β)表达的影响。结果姜酚能够抑制CIA大鼠踝关节肿胀,降低关节炎指数,并能降低血清TNF-α、IL-1及IL-1β水平,减轻关节滑膜细胞增生、滑膜层及滑膜下层淋巴细胞浸润,其疗效与雷公藤多苷组相当(P>0.05)。结论姜酚对CIA大鼠关节炎具有治疗作用,其机制可能与下调TNF-α、IL-1和IL-1β有关。     

腺苷受体拮抗剂—咖啡因对CIA大鼠针刺抗炎作用的影响

目的:探讨腺苷受体非特异性拮抗剂咖啡因对针刺治疗CIA大鼠抗炎作用的影响。方法:采用牛Ⅱ型胶原、完全弗氏佐剂混合乳剂诱导大鼠关节炎,选取造模成功的CIA大鼠40只,随机分成生理盐水针刺组(针刺"足三里"、"三阴交")、咖啡因组(咖啡因腹腔注射)、咖啡因针刺组(针刺加咖啡因注射)和生理盐水对照组,每组10只,每日针刺结束后立即腹腔注射给药,连续干预21天。于干预前后记录CIA大鼠的足趾肿胀度、体重;干预后检测大鼠血清巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、血清肿瘤坏死因子因子-α(TNF-α)、大鼠膝关节滑膜TNF-α蛋白表达水平,用以评价各组大鼠炎症情况。结果:①针刺组大鼠足趾肿胀度、血清MIF、TNF-α和膝关节滑膜的TNF-α蛋白表达水平明显低于其余各组,差异有统计学意义(P0.05);体重明显高于其余各组(P0.05)。②咖啡因针刺组与咖啡因组与生理盐水对照组比较有明显差异(P0.05),血清MIF、TNF-α和膝关节滑膜的TNF-α的水平明显高于两组。结论:非特异性腺苷受体拮抗剂咖啡因加重了CIA大鼠的炎症并抑制了针刺对CIA大鼠的抗炎作用,推测针刺抗炎存在腺苷相关的调节机制。     

芍甘附子汤加味对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜血管新生相关因子表达的影响

目的观察芍甘附子汤加味对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管生成素1(angiopoietin-1,Ang-1)和血管生成素2(angiopoietin-2,Ang-2)的影响,探讨其治疗类风湿关节炎的抗血管新生作用机制。方法选用健康Wistar大鼠30只,随机分为正常组、模型组、对照组(雷公藤多甙片组)和小、中、大剂量治疗组(芍甘附子汤加味组),除正常组均制备胶原诱导性关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)模型,造模成功后连续给药28天。测定各组大鼠足趾肿胀体积,进行关节炎指数(Arthritis index,AI)评分,采用免疫组织化学方法检测大鼠膝关节滑膜组织HIF-1α、Ang-1和Ang-2的表达。结果与模型组比较,对照组和大剂量治疗组足趾肿胀体积有所降低(P0.05),对照组和中、大剂量治疗组AI评分明显降低(P0.01);与正常组比较,模型组HIF-1α和Ang-1表达均显著升高(P0.01),Ang-2表达有所升高(P0.05);与模型组比较,对照组和大、中剂量治疗组HIF-1α和Ang-1表达均出现显著降低(P0.01),Ang-2表达呈降低趋势。结论芍甘附子汤加味可能通过降低类风湿关节炎滑膜组织HIF-1α、Ang-1和Ang-2的表达,抑制滑膜血管新生,从而起到治疗类风湿关节炎的作用。     

活血抗生滴丸治疗佐剂型关节炎大鼠的机制研究

目的 观察活血抗生滴丸对佐剂型关节炎(AA)大鼠血清、滑膜血管内皮生长因子/内皮抑素(VEGF/endostatin)失衡的影响.方法 建立大鼠AA模型,将Wistar大鼠随机分为活血抗生滴丸低、中、高(0.63,1.25,2.5 g·kg-1)剂量组、环孢霉素A组(10 mg·kg-1)及模型组.于造模后第19天开始给药,每日1次,连续灌胃30d.检测各组大鼠关节肿胀度、关节炎指数积分.ELISA法检测各组大鼠血清VEGF、endostatin蛋白的表达.免疫组化法检测各组大鼠滑膜组织VEGF、endostatin蛋白的表达.计算VEGF/endostatin比值.结果 活血抗生滴丸高剂量组和环孢霉素A组可降低大鼠关节肿胀度、关节炎指数积分,降低大鼠血清和滑膜VEGF含量,提高endostatin含量,降低VEGF/endostatin比值,与模型组比较,差异有显著性(P<0.05或P<0.01).结论 活血抗生滴丸可抑制AA大鼠炎症发展,其机制可能与活血抗生滴丸调控VEGF/endostatin的失衡而抑制滑膜组织血管生成相关.     

清热活血方对肿瘤坏死因子α诱导的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞迁移和黏附的影响

目的观察清热活血方治疗活动期类风湿关节炎的可能作用机制。方法分离类风湿关节炎患者的滑膜组织制备原代类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS),采用肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导RA-FLS的迁移和黏附。设空白组(不加药物及TNF-α干预)、诱导组(10或20 ng/ml TNF-α诱导)、清热活血方低、中、高剂量组(20、100、500 ng/ml清热活血方+TNF-α诱导)。检测各组细胞迁移距离及面积、细胞黏附OD值和黏附抑制率,并检测细胞中PI3K/Akt信号通路相关蛋白(PI3K、p-Akt、Akt)表达。结果与空白组比较,诱导组细胞迁移距离及面积增加、黏附OD值增大、PI3K及p-Akt蛋白表达升高(P0.01);与诱导组比较,清热活血方各剂量组均可抑制细胞的迁移和黏附以及PI3K、p-Akt蛋白表达,并以500 ng/ml效果最好(P0.05或P0.01)。结论清热活血方可能通过下调RA-FLS中PI3K、p-Akt蛋白表达,抑制RA-FLS的迁移和黏附,从而减缓滑膜炎症和关节破坏的进展。