卡铂对子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长及Tie2基因表达的影响

目的:研究卡铂对子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及对肿瘤组织中酪氨酸激酶受体(Tie2)的影响.方法:应用扩增培养的Ishikawa细胞株建立子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型.随机将10只成瘤裸鼠分为卡铂化疗组(化疗组)和空白对照组(对照组),分别应用伯尔定注射液(25.0 mg·kg-1)和5%葡萄糖(0.2 ml·只-1)瘤体内注射治疗,观察移植瘤体积及瘤体质量变化,计算抑瘤率;实时定量PCR和蛋白质印迹法检测移植瘤组织中Tie2 mRNA和蛋白表达.结果:化疗组移植瘤体积为(175.99±29.57)mm3,对照组为(521.05±76.36)mm3,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);化疗组肿瘤质量较对照组减轻(P＜0.001);化疗组抑瘤率为66.22%±6.15%.化疗组Tie2 mRNA及蛋白表达水平均低于对照组(分别为P＜0.05、P＜0.001).结论:卡铂具有抑制子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用,肿瘤组织中Tie2的表达受到抑制,提示其在抗肿瘤过程中可能具有抗血管生成的作用.     

外源性hCG对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的 观察外源性hCG对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的影响,探讨hCG在子宫内膜癌治疗中的意义.方法 建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型,用hCG对裸鼠进行皮下注射,计算成瘤率,称量瘤体质量;并对瘤组织进行HE染色,观察肿瘤瘤组织形态及测量坏死面积;Masson染色观察瘤组织纤维化;免疫组织化学染色观察瘤组织Ki-67表达.结果 两组裸鼠成瘤率均为100%(10/10);与对照组相比,hCG处理组裸鼠移植瘤瘤质量有增高趋势;HE染色可见hCG处理组子宫内膜癌细胞呈腺腔样排列,瘤组织内坏死面积较少而范围较小;Masson染色见hCG处理组胶原纤维粗大而致密,而NS组胶原纤维较纤细而稀疏;Ki-67在两组表达无明显差别.结论 外源性hCG在裸鼠体内实验可促进子宫内膜癌细胞的分化.     

去势雌性裸小鼠人子宫内膜癌皮下移植瘤动物模型的建立

目的 :确立对雌性裸小鼠行卵巢切除术后建立子宫内膜癌皮下移植瘤的方法。方法 :将裸小鼠随机分为不切除卵巢 (NOVX)、切除卵巢 (OVX)和切除卵巢后给予雌二醇 (OVXE2)等3组 ,术后1周皮下注射子宫内膜癌细胞悬液 ,接种前行全身放射处理 ,观察肿瘤的生长情况 ,测量肿瘤径线并计算体积 ,于术后第4周杀鼠取瘤 ,并称重。结果 :3组成瘤率100 % ;各组肿瘤体积大小不同 ,OVXE2组>NOVX组>OVX组 ,差异显著 (P<0.05) ;3组瘤重不同 ,差异显著 (P<0.05)。结论 :成功地确立了处于3种不同内分泌条件下的裸鼠皮下建立子宫内膜癌移植瘤的方法 ,并证实保留卵巢、切除卵巢和切除卵巢后给予雌激素3种条件下肿瘤的生长速度不同。     

奥沙利铂对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长及促血管生成素-2的影响

目的:观察小剂量奥沙利铂对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用及对肿瘤组织中促血管生成素-2(Ang-2)的影响。方法:体外进行Ishikawa细胞的培养扩增后种植于裸鼠皮下,建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型。将20只成瘤裸鼠随机分为两组:奥沙利铂组和阴性对照组,分别应用奥沙利铂2.0 mg.kg-1和5%葡萄糖20 ml.kg-1进行治疗。治疗27 d后测量肿瘤体积,计算抑瘤率。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测各组肿瘤组织中Ang-2的mRNA和蛋白的表达。结果:奥沙利铂组移植瘤体积(458.20±77.56)mm3,阴性对照组移植瘤体积(771.87±89.80)mm3,二者比较差异有统计学意义(P<0.01)。奥沙利铂组Ang-2在mRNA及蛋白水平的表达低于阴性对照组,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:奥沙利铂具有抑制子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的作用;能抑制肿瘤组织中Ang-2的表达,可能与其抗肿瘤血管形成有关。     

人子宫内膜癌裸鼠移植瘤株的建立及其生物学特性

目的：建立人子宫内膜癌裸鼠移植瘤株,为开展子宫内膜癌的实验性研究奠定基础。方法：将３例了 内膜癌手术标本移植于裸鼠皮下,生长后行鼠间连续传代,对移植瘤进行相关的生物学。结果：３例标本１全获得生长并行鼠间传代,房时２４个月建成子宫内膜癌裸鼠移植瘤株ＥｎＣａ－９５Ｖ,瘤株生长稳定,已传代２１代,移植成瘤率１００％,光镜、电镜、免疫级化、流式细胞术检测移植与患者原始肿瘤特征基本一致;染色体分析显示人类肿     

丙氨瑞林联合5-Fu对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及其作用机制

目的 探讨促性腺激素释放激素(GnRH)类似物醋酸丙氨瑞林(alarelin)联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的生长和survivin mRNA表达的影响. 方法 建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,模型建立后20只实验裸鼠随机分为四组:对照组、丙氨瑞林组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)组、丙氨瑞林和5-Fu联合组.测量肿瘤体积,计算抑瘤率,4周后处死裸鼠,切取移植瘤组织称取瘤重,RT-PCR法检测各组肿瘤组织中survivin mRNA的表达. 结果 丙氨瑞林与5-Fu联合用药组抑瘤效果最好,丙氨瑞林组、5-Fu组和联合组抑瘤率依次为16.9%、32.0%、58.3%.RT-PCR法显示丙氨瑞林组、5-Fu组及联合用药组survivin mRNA的表达明显低于对照组,且丙氨瑞林组、5-Fu组及联合用药组两两之间比较表达差异也有统计学意义(P<0.05). 结论 丙氨瑞林可抑制人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长、survivin mRNA的表达.丙氨瑞林与5-Fu联合应用提高了5-Fu的抗肿瘤效果,抑瘤作用可能是通过抑制survivin mRNA的表达来实现的.     

丙氨瑞林对子宫内膜癌裸鼠移植瘤的作用及机制

目的探讨促性腺激素释放激素（GnRH）类似物丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的作用机制及对P16基因表达的影响。方法体外培养人子宫内膜癌Hec-1B细胞,建立子宫内膜癌动物模型。造模成功后分别用不同剂量的丙氨瑞林进行干预,干预过程中严密观察肿瘤生长及裸鼠情况,测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线。6周后处死裸鼠,完整取出移植瘤组织并称取瘤重,计算抑瘤率,免疫组化法（PV）检测瘤组织中P16基因的表达。结果当丙氨瑞林浓度为15μg/kg时,癌细胞即受到抑制,抑瘤率为20.79%;当其浓度为30μg/kg时,抑瘤率为34.34%;浓度为60μg/kg时,抑瘤率为39.23%。与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。不同浓度的丙氨瑞林干预6周后,瘤组织中P16的表达有不同程度的上升,与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论丙氨瑞林可抑制裸鼠移植瘤生长,且呈剂量依赖关系,其抑制作用的分子机制可能与P16基因的表达有关。     

HER2对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的影响及对COX-2/PGE2/P450arom信号通路的调控

目的 通过建立裸鼠子宫内膜癌模型,探讨人上皮细胞生长因子受体2(HER2)对子宫内膜癌细胞体内生长的影响以及对COX-2/PGE2/P450arom信号通路的调控.方法 将Ishikawa细胞、转染空质粒的Ishikawa细胞、稳定转染HER2基因的Ishikawa细胞3组细胞分别接种至裸鼠皮下,建立裸鼠皮下移植瘤模型,观察各组细胞在裸鼠体内的成瘤时间和成瘤率,测量肿瘤体积、瘤质量并绘制肿瘤生长曲线;Real-time PCR法检测瘤组织内HER2、COX-2的基因表达;Western blot法检测瘤组织内HER2、COX-2、P450arom的蛋白表达;ELISA法检测瘤组织内PGE2、E2表达水平.结果 与未转染组、空质粒转染组相比,HER2稳定转染组裸鼠移植瘤生长较快,平均成瘤时间明显缩短,成瘤率、瘤体体积和瘤质量显著增加(P＜0.05);瘤组织标本中HER2、COX-2的mRNA表达水平在HER2稳定转染组中较未转染组和空质粒转染组显著增加(P＜0.01);与未转染组、空质粒转染组相比,HER2稳定转染组的HER2、C0X-2、P450arom蛋白表达水平显著增加(P＜0.01);PGE2、E2激素表达水平HER2稳定转染组中较未转染组和空质粒转染组显著增加(P＜0.05).结论 HER2基因能显著促进Ishikawa细胞在体内的生长能力,其机制可能通过作用COX-2/PGE2/P450arom信号通路而影响子宫内膜癌组织中雌激素水平表达来实现的.     

碳纳米管丙氨瑞林对人子宫内膜癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长及对Smurf2表达的影响

目的:观察碳纳米管丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤组织中转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的泛素化调节因子2(Smurf2)表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法:以人子宫内膜癌Hec-1-B细胞株皮下移植瘤组织作为研究对象,分别给予生理盐水、碳纳米管、丙氨瑞林、碳纳米管丙氨瑞林,四种不同的干预方式,每6天1次,共5次。在干预过程中观察肿瘤生长情况,测量肿瘤体积,干预结束利用免疫组化法(PV)检测各肿瘤组织中Smurf2蛋白的表达。结果:碳纳米管丙氨瑞林组裸鼠精神饮食情况明显优于其他三组,体重明显轻于其他三组。取出移植瘤体后比较,碳纳米管丙氨瑞林组瘤体体积最小,与其他三组比较差异均有统计学意义(P0.05)。碳纳米管丙氨瑞林干预组瘤组织中Smurf2蛋白的表达较其他三组表达增多,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:丙氨瑞林可以抑制子宫内膜癌细胞裸鼠皮下移植瘤的生长,在相同药物剂量条件下,碳纳米管丙氨瑞林作为缓释剂可以更好地增加裸鼠体重和抑制移植瘤组织的生长,有利于减少药物毒副作用,其作用机制可能是通过上调移植瘤组织中Smurf2蛋白来抑制肿瘤生长的。     

人大肠癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立

目的：建立人大肠癌裸鼠皮下移植瘤模型的方法。方法：从新鲜的人大肠癌标本上切取肿瘤组织,移植于裸鼠皮下,原代移植成功后再进行传代,观察裸鼠摄食、活动状况、成瘤时间、成瘤率、潜伏期、肿瘤生长情况、移植瘤大小及组织病理学变化。结果：原代肿瘤移植成功率为40%,传代肿瘤移植成功率为75%,原代移植肿瘤及传代移植肿瘤组织形态学特征均与患者原发肿瘤保持一致。结论：初步建立了一种有效的人大肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,为大肠癌的研究奠定了基础。     

IDO基因转染对裸鼠体内宫颈癌种植瘤生长的影响

 目的 通过建立裸鼠皮下肿瘤生长模型,研究吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）在裸鼠体内对人宫颈癌细胞的生长促进作用。方法 IDO基因表达质粒和空白质粒分别稳定转染至人宫颈癌SiHa细胞。应用Western blot检测IDO在SiHa、SiHa/Mock 和SiHa/IDO细胞中的表达情况,用MTT试剂盒检测3种肿瘤细胞体外生长速度。种植3种肿瘤细胞至裸鼠皮下,比较其在裸鼠体内的生长速度。结果 IDO蛋白在SiHa/IDO细胞中表达阳性,在SiHa和SiHa/Mock细胞中无表达。3种肿瘤细胞体外生长曲线无统计学差异（P＞0.05）。3周后接种SiHa/IDO细胞的肿瘤与接种SiHa和SiHa/Mock细胞的肿瘤相比生长迅速,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 IDO可作为宫颈癌评价预后的指标之一,也可能是宫颈癌基因治疗潜在的靶点。     

替勃龙及代谢产物对人子宫内膜癌细胞系生长的影响

目的研究替勃龙和它的3种代谢产物对人子宫内膜癌细胞HEC-1B增殖的影响，探讨替勃龙对子宫内膜癌的安全性。方法MIT法检测不同浓度替勃龙和它的3种代谢产物加入HEC-1B后细胞生长率的变化，流式细胞仪检测4种药物对细胞周期的影响。结果10μm替勃龙和σ4替勃龙作用24，48，72小时使HEC-1B停滞于G0/1期，抑制HEC-1B细胞增殖。10μm的3α-OH-替勃龙或3β-OH-替勃龙作用24小时，细胞增殖受抑制，对细胞周期的影响不明显。结论10-10^-5μm的替勃龙对子宫内膜癌细胞是安全的。     

黄荆子乙酸乙酯提取物对人肝癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的:观察黄荆子乙酸乙酯提取物(EVn-50)对人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:采用人肝癌Hep G2裸鼠模型评估EVn-50在体治疗肝癌的有效性;免疫组化染色检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、CD31蛋白表达。结果:EVn-50显著抑制人肝癌Hep G2裸鼠移植瘤的生长,呈剂量依赖性;5,10,20 mg/kg的EVn-50对移植瘤的瘤重抑制率分别为55%,62%,69%。免疫组化染色结果显示,EVn-50(5,10,20 mg/kg)与生理盐水组比较,PCNA、VEGF、CD31的表达下调,亦呈剂量依赖性。结论:EVn-50具有抑制人肝癌HepG2裸鼠移植瘤生长作用,其作用机制可能与其下调PCNA、VEGF、CD31的表达有关。     

地西他滨对裸鼠子宫内膜癌移植瘤的作用及机制研究

目的 探究去甲基化药物地西他滨对裸鼠子宫内膜癌移植瘤的作用及其机制。方法 建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型后随机分为地西他滨组（AZA组）、顺铂组（DDP组）、醋酸甲羟孕酮组（MPA组）、AZA+DDP组、AZA+MPA组、DDP+MPA组、模型组,每组3只,各实验组给予相应药物（1 μg/g单用或各1 μg/g联合）,模型组给予生理盐水,每3 d一次尾静脉注射给药,共给药8次。处理后观察各组裸鼠瘤体生长情况;取出瘤体后,计算抑瘤率;采用甲基化特异性PCR（MSP）、Western blot和TUNEL染色法分别检测移植瘤组织细胞中RASSF1A基因启动子区域甲基化状态、蛋白表达及肿瘤细胞的凋亡情况。结果 AZA+DDP组抑瘤率最高,而AZA组抑瘤率最低。AZA组、AZA+DDP组、AZA+MPA组RASSF1A基因启动子区域甲基化水平明显降低,显示明显的非甲基化条带,其余组则主要显示甲基化条带。AZA组、AZA+DDP组、AZA+MPA组这三组之间RASSF1A蛋白的表达量差异无统计学意义（P>0.05）,但均高于模型组（P<0.05）;DDP组、MPA组、DDP+MPA组与模型组比较差异无统计学意义（P>0.05）。凋亡指数为模型组<3个单药组<3个联合用药组（P<0.05）。结论 地西他滨可逆转内膜癌中RASSF1A基因启动子区域的异常甲基化,恢复RASSF1A蛋白生物学功能,增强DDP与MPA的药效,对临床子宫内膜癌的治疗有很大的潜在应用价值。     

人肝癌裸小鼠模型的建立及其生物学特性的研究

将７例原发性肝癌手术切除标一分别移植于ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠皮下，１例获得成功，并能在裸鼠体内连续传代。１１个月内已传了１０代。其潜伏期为１１ｄ左右，荷瘤鼠血清可测得甲脂蛋白、γ－谷氨酰转肽酶和酸性同工铁蛋白三种有意义的肝癌血清标记物。移植癌病理结构与瘤原相似，其遗传学特征与人类恶性肿瘤相同。     

吗啡对顺铂诱导的鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠 移植瘤生长抑制作用的影响

 【目的】 以人鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤为模型,探讨吗啡对顺铂抑制肿瘤生长作用的影响及其机制&#65377;【方法】 建立CNE-2细胞裸鼠移植瘤模型20只,随机分为4组,对照组,单纯顺铂用药组&#65380;单纯吗啡用药组和吗啡联合顺铂用药组,每组5只&#65377;吗啡5 mg/kg每天给药1次,顺铂3 mg/kg每3 d给药2次,均为腹腔注射&#65377;用药14 d后处死动物,完整剥离肿瘤,记净瘤质量&#65377;TUNEL染色计算细胞凋亡数,免疫组化染色检测肿瘤组织Bax,Bcl-2,cleaved-caspase-3以及CD34的表达情况&#65377;【结果】 单纯顺铂用药组的瘤质量明显小于其它3组(P < 0.05),吗啡联合顺铂用药组的瘤质量明显小于对照组(P < 0.05);TUNEL染色及cleaved-caspase-3染色显示单纯顺铂用药组的凋亡细胞数明显多于其他3组(P < 0.05)&#65377;单纯顺铂用药组与其他3组相比Bax蛋白表达量增多,而Bcl-2表达量减少,单纯吗啡组的Bcl-2表达最强&#65377;CD34微血管染色显示单纯顺铂用药组的微血管密度显著少于其它3组(P < 0.05),单纯吗啡用药组的微血管密度显著多于对照组(P < 0.05)&#65377;【结论】 吗啡通过拮抗顺铂诱导细胞凋亡及促进CNE-2细胞裸鼠移植瘤组织的血管生成,抵抗了顺铂抑制肿瘤生长的作用&#65377;     

增殖细胞核抗原反义寡核苷酸对裸鼠肝癌生长的影响

目的 探讨增殖细胞核抗原（PCNA）反义寡核苷酸对裸鼠人肝癌生长的抑制作用。方法 接种传代培养的人肝癌细胞于裸鼠皮下,接种后24h内局部注射PCNA反义寡核苷酸进行治疗。观察裸鼠的体重变化、瘤体大小,计算抑瘤率。HE染色观察肝癌组织结构和细胞形态改变。结果 PCNA反义寡核苷酸治疗组裸鼠肝癌的生长受到抑制,抑瘤率为72．8％。瘤重、肿瘤体积明显小于正义寡核苷酸治疗组及对照组。镜下见PCNA反义寡核苷酸治疗组肝癌细胞部分细胞形态呈梭形,核分裂相较少见,细胞的异型性较小。结论 PCNA反义寡核苷酸能显著抑制裸鼠肝癌的生长。     

紫杉醇对裸鼠人肝癌血管生成和肿瘤生长、转移的作用

目的:通过建立高转移潜能人肝癌裸鼠肝原位移植模型,观察紫杉醇对人肝细胞癌(HCC)血管生成和肿瘤生长、转移的干预作用。方法:24只人肝癌裸鼠模型随机分成两组,实验组和对照组,每组12只。自模型建立次日始两组分别给予13mg·kg-1·d-1剂量紫杉醇和等体积生理盐水腹腔注射,给药第30d处死裸小鼠,观察肿瘤生长、转移情况,分别用免疫组化和RTPCR的方法检测癌组织CD34和VEGFmRNA的表达水平,记录微血管密度(MVD)。结果:紫杉醇组肿瘤重量、体积、肺转移灶计数、MVD和VEGF均低于对照组(P<0.05)。结论:紫杉醇对HCC生长有抑制作用,抑制肝细胞癌的血管生成并降低肺转移。     

人结肠癌动物皮下实体瘤模型的建立

 摘 要：【目的】 建立临床背景清楚的结肠癌动物皮下实体瘤模型,为结肠癌发病机制及治疗策略的研究提供可靠的实验动物模型。【方法】 采用组织块直接移植法将收集到的12例结肠癌组织临床标本移植到免疫缺陷小鼠右侧肩胛皮下,第1-2代用NOD-Scid小鼠;将每个病例的第二代皮下肿瘤,分别连续皮下接种至NOD-Scid小鼠和BALB/C裸小鼠两组动物中,传代至第5代。观察每个病例在两种品系动物的成瘤时间、标本的成瘤率;进行HE染色和CDX-2及 CK20免疫组化检测。【结果】 本实验NOD-Scid小鼠组的第3代和第5代皮下移植瘤的病例成瘤率分别为92%、58%,BALB/C裸小鼠组的分别为75%、50%。病理切片显示肿瘤组织细胞排列成不规则腺体状,有病理性核分裂相。CDX-2、CK20染色呈阳性。【结论】初步建立了临床背景清楚的人结肠癌的NOD-Scid小鼠和BALB/C裸小鼠皮下移植瘤模型,为进一步研究结肠癌发病机理及治疗策略奠定基础。