不同级别胃黏膜上皮内肿瘤和胃癌组织sFas/mFas mRNA表达比的改变及意义

目的:研究Fas基因的两种拼接异构蛋白基因表达在胃黏膜瘤变形成与发展过程中的变化,在基因水平上探讨Fas系统的表达与胃上皮组织瘤变及免疫逃逸形成的关系,评估胃镜下活检的胃黏膜组织进行Fas基因检测的临床价值和意义.方法: 采用半定量RT-PCR法,对胃镜下活检的30例正常胃黏膜组织,30例胃黏膜低级别上皮内肿瘤,20例高级别上皮内肿瘤和30例胃癌组织检测sFas/mFas mRNA表达比.结果: sFas/mFas mRNA表达比在正常胃黏膜组织为0.47±0.07,低级别上皮内肿瘤组织为0.55±0.05,高级别上皮内肿瘤组织为0.22±0.04,胃癌组织为0.19±0.03,正常胃黏膜上皮组织的sFas/mFas mRNA表达比低于低级别上皮内肿瘤(P<0.01),低级别上皮内肿瘤sFas/mFas mRNA表达比明显高于高级别上皮内肿瘤组(P<0.001),高级别上皮内肿瘤组表达明显高于胃癌(P<0.001).结论: 正常胃黏膜及瘤变胃黏膜组织Fas mRNA以可溶型Fas mRNA (sFas mRNA)为主,伴少量的膜型Fasm RNA (mFas mRNA),胃黏膜不同级别上皮内肿瘤和胃癌组织sFas/mFas表达比的强度各不相同,胃黏膜瘤变过程中的Fas基因表达形式具有可修饰性并伴有凋亡易感性的改变,胃镜下Fas基因表达形式的检测,有望指导临床在瘤变发生的早期,即免疫逃逸阶段这一基因水平上提早预知.     

不同级别胃黏膜上皮瘤变组织TLR4表达与HP感染的相关性研究

目的：观察低级别和高级别上皮瘤变组织和胃癌组织TLR4的表达和HP感染的关系,探讨两者的相关性。方法：应用免疫组化方法检测30例正常胃黏膜,30例低级别上皮内瘤变组织,30例高级别上皮内瘤变组织及30例胃癌组织中的TLR4的表达。利用^14C幽门螺杆菌呼气试验及改良Giemsa染色法检测HP,两项均阳性者诊断为HP感染。结果：TLR4在低级别上皮内瘤变组的阳性表达率为90．0％,高级别上皮内瘤变组为86．7％,胃癌组63．3％,正常组26．7％,HP阳性率在低级别上皮内瘤变组为93．3％,高级别上皮内瘤变组90％,正常组33．3％;低级别上皮内瘤变组、高级别上皮内瘤变组、胃癌组TLR4阳性率与正常组比较,P〈0．05,低级别上皮内瘤变组、高级别上皮内瘤变组TLR4阳性率与胃癌组比较,P〈0．05。TLR4表达与HP感染检测结果：HP感染的胃黏膜组织TLR4的阳性表达率为83．53％,HP阴性组TLR4阳性表达率为25．71％,TLR4表达和HP感染具有相关性r=0．152,P=0．012。HP感染与不同级别胃黏膜上皮瘤变组织TLR4表达的相关性检测结果：低级别胃黏膜组织11LR4的阳性表达率为88．89％,高级别胃黏膜组织为88．00％。胃黏膜上皮组织瘤变级别与TLR4表达无相关性,P〉0．05。结论：低级别上皮瘤变和高级别上皮瘤变胃黏膜组织TLR4的阳性表达明显高于胃癌组织;HP感染和TLR4阳性表达呈正相关,HP感染的不同级别胃黏膜上皮瘤变组织之间TLR4表达无相关性。     

不同级别胃黏膜上皮瘤变组织TLR4表达与HP感染的相关性研究

目的:观察低级别和高级别上皮瘤变组织和胃癌组织TLR4的表达和HP感染的关系,探讨两者的相关性.方法:应用免疫组化方法检测30例正常胃黏膜,30例低级别上皮内瘤变组织,30例高级别上皮内瘤变组织及30例胃癌组织中的1LR4的表达.利用14C幽门螺杆菌呼气试验及改良Giemsa染色法检测HP,两项均阳性者诊断为HP感染.结果:TLR4在低级别上皮内瘤变组的阳性表达率为90.0%,高级别上皮内瘤变组为86.7%,胃癌组63.3%,正常组26.7%,HP阳性率在低级别上皮内瘤变组为93.3%,高级别上皮内瘤变组90%,正常组33.3%;低级别上皮内瘤变组、高级别上皮内瘤变组、胃癌组TLR4阳性率与正常组比较,P＜0.05,低级别上皮内瘤变组、高级别上皮内瘤变组TLR4阳性率与胃癌组比较,P＜0.05.TLR4表达与HP感染检测结果:HP感染的胃黏膜组织TLR4的阳性表达率为83.53%,HP阴性组TLR4阳性表达率为25.71%,TLR4表达和HP感染具有相关性r=0.152,P=0.012.HP感染与不同级别胃黏膜上皮瘤变组织TLR4表达的相关性检测结果:低级别胃黏膜组织TLR4的阳性表达率为88.89%,高级别胃黏膜组织为88.00%.胃黏膜上皮组织瘤变级别与,TLR4表达无相关性,P＞0.05.结论:低级别上皮瘤变和高级别上皮瘤变胃黏膜组织TLR4的阳性表达明显高于胃癌组织;HP感染和TLR4阳性表达呈正相关,HP感染的不同级别胃黏膜上皮瘤变组织之间,TLR4表达无相关性.     

microRNA34a／p53信号通路在大鼠肺鳞癌发生过程中的表达及意义

目的：探讨microRNA34a／p53信号通路在大鼠肺癌发生过程中的表达及意义。方法：用免疫组化检测大鼠模型不同组织中p53蛋白表达情况;qRT－PCR技术检测正常大鼠肺组织、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变（原位癌）、浸润癌中microRNA34a的相对表达量。结果：p53蛋白阳性表达率在正常对照组0（0／40）、低级别上皮内瘤变组45．5％（5／11）、高级别上皮内瘤变组（原位癌）76．5％（13／17）和浸润性癌组80．0％（16／20）中表达逐渐增高,阳性强度增高。p53蛋白在正常对照组与低、高级别上皮内瘤变、浸润癌阳性表达比较,差异有统计学意义（P＜0．05）。microRNA34a在正常对照组、低级别上皮内瘤变组、高级别上皮内瘤变组、浸润癌组中平均表达量逐渐降低,分别为0．9890±0．0942、0．8654±0．0356、0．0446±0．0017、0．0091±0．0041,浸润癌表达水平显著低于对照组、低级别上皮内瘤变组、高级别上皮内瘤变组（P＜0．05）。p53蛋白与microRNA34a在肺癌中的表达呈负相关性（P＜0．01）。结论：microRNA34a／p53通路与肺癌的发生发展具有密切关系,联合检测有利于肺癌的早期诊断。     

NDRG 1基因与宫颈鳞癌发生发展及转移的关系

目的：探讨N-myc下游调节基因（N-mycdownstream reglated genel，NDRG1）与宫颈鳞癌发生发展及转移的关系。方法：采用免疫组织化学ABC法检测42例宫颈鳞癌组织、30例宫颈高级别上皮内瘤变组织、28例宫颈低级别上皮内瘤变组织及20例正常宫颈上皮组织中NDRGl蛋白的表达。RT-PCR检测10例新鲜宫颈鳞癌组织与10例正常宫颈上皮组织中NDRGlmRNA的表达。结果：宫颈鳞癌组织中NDRGlmRNA和蛋白的表达较正常宫颈上皮组织明显降低（P〈0．01）。从正常宫颈上皮到低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变、再到宫颈鳞癌的发生发展过程中NDRGl蛋白的表达水平逐渐降低，差异有统计学意义（P〈0．01）。有转移的宫颈鳞癌组织中NDRGlmRNA与蛋白的表达较无转移组明显降低（P〈0．05）。结论：NDRGlmRNA与蛋白在宫颈鳞癌组织中的下调表达提示NDRGl基因可能与宫颈鳞癌的发生发展及转移有关。     

DPEP1在结直肠上皮内瘤变组织中的表达及临床意义

目的:通过检测二肽酶1(dipeptidase 1,DPEP1)mRNA及其蛋白质在人结直肠上皮内瘤变组织中的表达,探讨其与临床病理特征的关系。方法:应用实时荧光定量（real-time fluorescence quantitative,RFQ）-PCR和免疫组织化学方法分别从mRNA和蛋白质水平检测DPEP1在60例结直肠上皮内瘤变（腺瘤并高级别上皮内瘤变35例,腺瘤并低级别上皮内瘤变25例）组织,结直肠正常黏膜上皮组织30例,高分化腺癌组织20例石蜡包埋标本中的表达水平,并分析其与临床病理特征的关系。结果:DPEP1 mRNA 在35例高级别上皮内瘤变,25例低级别上皮内瘤变组织中的表达量分别为0.560±0.052和0.328±0.040（P=0.001）,在60例结直肠上皮内瘤变组织、30例结直肠正常黏膜上皮组织及20例高分化腺癌组织中的表达量分别为0.684±0.108、0.235±0.045和0.832±0.136（P＜0.001）。DPEP1蛋白在高分化腺癌组织中的表达率为100%（20/20）,明显高于结直肠上皮内瘤变83.33%（50/60）和结直肠正常黏膜上皮组织20%（6/30）,弥漫性分布于细胞质中（P＜0.01）。DPEP1在高级别上皮内瘤变组和低级别上皮内瘤变组的阳性表达率分别为88.57%(31/35)、76%(19/25);DPEP1表达水平与上皮内瘤变病理分级及进展相关（P＜0.05）,但在不同性别、年龄中的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:DPEP1在结直肠上皮内瘤变和早期结直肠癌中表达并可影响肿瘤细胞的侵袭性,与肿瘤的进展相关。     

p16INK4a和Ki67在胃癌及癌前病变中的表达和意义

目的:探讨p16INK4a、Ki67在慢性胃炎、胃上皮内瘤变、胃癌及癌旁非肿瘤性胃黏膜中的表达和临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测23例慢性胃炎、16例胃低级别上皮内瘤变、16例胃高级别上皮内瘤变、45例胃癌及癌旁非肿瘤性胃黏膜组织样本中p16INK4a、Ki67的表达。结果:p16INK4a在慢性胃炎、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变和胃癌细胞中均呈核浆型表达,阳性表达率分别为4.34%、25.00%、62.50%、66.67%,在癌旁非肿瘤性胃黏膜腺体上皮细胞中呈阴性表达;Ki67在慢性胃炎、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变和胃癌组织细胞中呈核型表达,Ki67指数分别为17.39%、37.50%、56.25%和77.78%。结论:p16INK4a代偿性高表达是胃癌和胃癌前病变的重要免疫表型特征,联合检测p16INK4a和Ki67表达可作为胃癌诊断的分子靶标和可靠方法。     

血管内皮生长因子-C及p63在早期食管癌和上皮瘤变组织中的表达

目的探讨血管内皮生长因子-C（VEGF—C）和p63蛋白在早期食管癌及上皮内瘤变组织中的表达及其临床意义。方法随机选取正常食管黏膜、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变及早期食管癌组织共146例,应用免疫组织化学EnVision二步法检测VEGF—C和p63蛋白在不同病理阶段中的表达。结果不同病理阶段的VEGF—C表达差异有统计学意义（X^2=47．455,P〈0．001）。正常黏膜与高级别上皮内瘤变（X^2=26．483,P〈0．001）、正常黏膜与早期癌（X^2=36．721,P〈0．001）、低级别上皮内瘤变与高级别上皮内瘤变（X^2=10．025,P〈0．0083）、低级别上皮内瘤变与早期癌（X^2=16．734,P〈0．001）之间VEGF-C的表达量构成比差异均有统计学意义。病理阶段与VEGF-C表达程度间呈正相关（r=0．462,P〈0．001）。不同病理阶段的p63表达量构成比差异有统计学意义（X^2=28．962,P〈0．05）。正常黏膜分别与低级别上皮内瘤变（X^2=12．735,P=0．005）、高级别上皮内瘤变（X^2=20．421,P〈0．001）、早期癌（X^2=20．854,P〈0．001）各组间的p63表达量构成比差异均有统计学意义;病理阶段与p63表达程度间呈正相关（r=0．272,P〈0．05）。结论VEGF—C和p63蛋白与早期食管癌和上皮内瘤变发生显著相关,可作为预警指标。     

胃黏膜瘤变过程中差异蛋白的表达

目的 探讨胃癌发生发展的不同阶段（正常胃黏膜组织、反应性增生、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变及黏膜内腺癌）差异蛋白的表达。方法 以胃窦部肠型胃癌为研究对象,选取正常、反应性增生、低/高级别上皮内瘤变、黏膜内癌5组各30例共150例组织标本,用非标记蛋白质组学（labelfree）联合液性色谱质谱（LC-MC/MC）筛选差异蛋白,并评估差异蛋白潜在的生物学功能。结果 筛选出了8个差异蛋白,和正常黏膜相比,在低级别上皮内瘤变—高级别上皮内瘤变及黏膜内癌的发展过程中,LAMN1、ERGIC1、UQCRFS1、UQCRH和CISD1这5个蛋白质的表达量逐渐降低,表达量逐渐升高的蛋白质有HMGB1、DNA-PKcs和14-3-3。结论 在胃癌发生发展的不同阶段,蛋白质的表达存在明显的差异,这些差异蛋白具有成为胃癌早期诊断及靶向分子治疗标志物的潜能。     

eIF4E在食管鳞状上皮癌变过程中的表达及意义

 目的 探讨eIF4E在食管鳞状上皮癌变过程中的表达及其意义。 方法 采用免疫组织化学方法,检测食管正常鳞状上皮（15例）、食管鳞状上皮内瘤变（85例）和食管鳞状细胞癌（60例）中eIF4E在蛋白水平的表达情况。 结果 eIF4E在正常食管鳞状上皮组织,食管鳞状上皮内瘤变组织和鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为26.7%、44.7%和63.3%,eIF4E在食管鳞状细胞癌中表达明显高于食管正常鳞状上皮组织及食管鳞状上皮内瘤变组织（P<0.05）;高级别食管鳞状上皮内瘤变组织中eIF4E的阳性表达率显著高于正常食管鳞状上皮组织、低级别食管鳞状上皮内瘤变组织（P<0.05）;低分化鳞癌组织中eIF4E的阳性表达率明显高于高分化鳞癌组织（P<0.05）。eIF4E的表达与临床病理特征不相关（P＞0.05）。 结论 在食管鳞状上皮癌变过程中,eIF4E的表达呈增高趋势。eIF4E在食管鳞癌中的表达随肿瘤分化程度降低而增高,提示eIF4E在食管鳞状上皮癌变和进展过程可能发挥一定的作用。     

雄激素受体基因及其蛋白在胃癌中的表达及临床意义

目的探讨胃癌组织中雄激素受体（AR）基因和蛋白的表达及临床意义。方法用免疫组化SP法检测胃癌组织AR蛋白的表达,运用RT—PCR方法检测胃癌组织中AR—mRNA的表达水平。结果胃癌组织AR阳性率为47．6％,癌旁组织AR阳性率为61．9％,两组比较有显著性差异;AR在胃癌中的阳性表达与肿瘤的组织类型、分化程度、淋巴结转移情况以及TNM分期有关。AR基因在胃癌组织和配对的癌旁组织中表达量分别为0．752±0．140和0．326±0．216,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论AR、AR基因阳性表达的胃癌具有性激素依赖性,检测胃癌组织中的AR基因及其蛋白对临床判定预后及讲行内分泌治疗有一定的指导意义．     

胃癌组织中Survivin、COX-2蛋白表达及其与肿瘤血管生成的关系

目的：探讨Survivin,COX-2蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征和肿瘤血管生成的关系。方法：用免疫组化方法对65例胃癌组织Survivin,COX-2,CD34的表达进行检测。结果：胃癌组织中Survivin蛋白阳性表达率为70．77％（46／65）,COX-2蛋白阳性表达率为76．93％（50／65）。Survivin表达与分化程度和淋巴结转移有关（P〈0．05）,而与临床分期无关（P〉0．05）;COX-2的阳性表达与分化程度、临床分期和淋巴结转移有关（P〈0．05）。Survivin表达与COX-2的表达密切相关（r=0．235,P〈0．05）。Survivin阳性表达组织中的MVD值为10B．04±15．06,阻陛组为81．89±12．15,二者有显著差异（P〈0．01）。COX-2阳性表达胃癌组织中的MVD值为104．82±14．05,阴性组为81．02±13．73,二者有显著差异（P〈0．01）。结论：Survivin和COX-2对凋亡的抑制的协同作用及其促进血管生成的作用在胃癌的发生发展中起关键作用。     

胃癌组织MMP-9基因及蛋白表达与肿瘤临床病理关系研究

目的：研究胃癌患者基质金属蛋白酶-9表达与肿瘤临床病理参数之间相关性。方法：应用酶联免疫吸附（ELISA）方法检测术前外周血清及胃液中MMP-9蛋白水平。结果：胃癌组、对照组血清中金属蛋白酶平均水平分别为406．03±257．18ng／ml、167．35±54．04ng／ml,（P〈0．01）;TNM晚期、淋巴结转移阳性者术前外周血清蛋白含量显著高于TNM早期、淋巴结转移阴性者（P〈0．01）。胃癌组术前胃液中MMP-9蛋白平均水平为77．59±191．97ng／ml,对照组胃液中MMP-9蛋白平均水平为0．81±2．39ng／ml,（P〈0．01）。肿瘤侵犯至浆膜层、TNM晚期、淋巴结转移阳性者蛋白含量显著高于肿瘤未侵犯至浆膜层、TNM早期、淋巴结转移阴性者（P〈0．01）。结论：检测胃癌患者术前胃液中血清中蛋白酶水平能反映肿瘤进展。     

Bag1在胃癌组织中的表达及其意义

目的：研究抗凋亡基因Bag1在胃癌组织中的表达及其与临床病理因素和预后的关系。方法：应用免疫组织化学法对62例胃癌及11例正常胃组织中Bag1基因的表达进行检测。所有的病人均电话随访。结果：胃癌组织中Bag1阳性表达率为41.9%（26/62）,显著高于胃正常组织的9.1%（1/11）（P〈0.05）;Bag1在胃癌中的表达与性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤发生的部位、浸润深度无关（P〉0.05）,但与胃癌病理分级、有无淋巴结转移及预后密切相关（P〈0.05）。Bag1阳性的患者生存期短于阴性患者。结论：胃癌组织中存在不同水平Bag1基因的高表达,对胃癌的预后有重要意义。     

胃癌组织中Survivin、PTEN的表达及其临床相关性

目的：探讨胃癌组织中Survivin、PTEN的表达及其与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组化（Elivision^TM plus法）检测35例胃癌及12例浅表性胃炎组织中Survivin、PTEN的表达。结果：胃癌组织中Survivin阳性率为77．1％（27／35）,显著高于浅表性胃炎组16．7％（2／12）（P〈n01）;PTEN阳性率为34．3％（12／35）,显著低于浅表性胃炎组91．7％（11／12）（P〈0．01）;Survivin表达与组织分化程度、TNM分期密切相关（P〈0．01）;PTEN表达水平与组织分化程度、TNM分期密切相关（P〈0．01）。Survivin和PTEN二者表达呈显著负相关（P〈0．01）。结论：Survivin在胃癌中高表达,与组织分化程度、TNM分期呈正相关;PTEN在胃癌中表达下调,与组织分化程度、TNM分期呈负相关。联合检测Survivin和PTEN有助于判断胃癌预后,可能是临床评价胃癌恶性程度的重要指标。     

癌基因iASPP在胃癌中的表达及临床意义

目的：研究iASPP（inhibitor member of the ASPP family）在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法：用RT-PCR方法检测iASPP mRNA在60例胃癌及对应的癌旁组织中的表达,并研究其与临床病理特征的关系。结果：胃癌组织中iASPP阳性表达率明显高于癌旁组织（P〈0.05）,胃癌组织中iASPP表达水平（0.503±0.336）明显高于癌旁组织（0.205±0.108）。胃癌中iASPP的高表达同肿瘤分化程度和肿瘤浸润深度以及患者无瘤生存时间有关（P〈0.05）。结论：iASPP与胃癌的发生发展有关,影响胃癌的分化及患者预后,有望成为胃癌治疗的新靶点。     

小剂量顺铂联合5-氟尿嘧啶对胃癌细胞增殖抑制及其机制的研究

目的：探讨小剂量顺铂（DDP）、5-氟尿嘧啶（5-FU）在体外联合用药对SGC-7901胃癌细胞及胃癌耐药细胞株SGC-7901／5-FU细胞增殖及其相关基因表达的影响。方法：采用MTT法观察在小剂量DDP、5-Fu联合用药前后SGC-7901与SGC-7901／5-FU存活率的差异,同时应用免疫组化方法检测SGC-7901与SGC-7901／5-FU中p53、Fas／FasL基因的表达情况。结果：DDP与5-FU均有抑制肿瘤细胞增殖作用,且有浓度相关性;尤以DDP联合5-FU后对细胞存活率的影响明显高于两种药物的单独使用（P〈0．01）,小剂量DDP联合应用5-FU时效果最明显,但对SGC-7901／5-FU细胞增殖抑制作用明显小于SHC-7901;小剂量联合DDP＋5-FU,p53、FasL基因表达的阳性率显著高于单纯的5-FU组或DDP组（P〈0．01）,而Fas基因表达则相反。结论：小剂量DDP联合5-FU对胃癌细胞具有明显抑制作用,对耐药株也有-定抑制作用,但效果弱于非耐药株。p53、Fas／FasL基因对胃癌细胞的增殖活性有重要作用,在小剂量DDP联合5-FU比各单药应用组基因的改变更明显（P〈0．01）。     

Soluble and membrane isoforms of Fas/CD95 in fresh adult T-cell leukemia (ATL) cells and ATL-cell lines

Fas, also designated as Apo-1 and CD95, is a cell membrane receptor (mFas) involved in apoptotic cell death. A soluble form (sFas) lacking the transmembrane domain due to alternative splicing has been isolated. Abnormal expression of sFas and mFas is likely to be involved in lymphoproliferative disorders and auto-immune diseases. Adult T-cell leukemia (ATL) caused by human T-cell-leukemia virus type-1 (HTLV-1) is well known to be a T-cell neoplasm with strong mFas expression, suggesting a role of Fas in the pathology of the disease. We examined protein and mRNA expression of the 2 isoforms of Fas in fresh ATL cells and ATL cell lines. In general, mFas was strongly expressed in ATL cells, and sFas levels in sera were high, especially in malignant ATL. However, expression of the isoforms in some cases of ATL varied; there was no mFas expression on the cell surface and sFas levels were high in serum. In contrast, all ATL cell lines examined showed strong mFas expression and scarce production of sFas in the supernatant, corresponding to strong expression of full-length Fas mRNA and weak to negative expression of alternatively spliced mRNA lacking the transmembrane domain. Our findings indicate that the mode of expression of Fas isoforms in ATL cells is not always homogenous and that Fas may play a role in the malignant behavior and oncogenesis of ATL. Int. J. Cancer 72:128–132, 1997. © 1997 Wiley-Liss Inc.     

组织因子和癌基因 Her -2 在胃腺癌中的过表达及临床意义简

目的：探讨胃癌组织中组织因子（tissue factor,TF）和人表皮生长因子受体-2（human epidermal growth factor receptor2,Her-2）的表达与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学（IHC）sP染色法检测TF和Her-2在134例胃癌组织中的表达。分析TF和Her-2表达的关系及二者与临床病理指标的关系。结果：TF和Her-2在134例胃癌组织中的阳性表达率分别为67．9％和16．4％。TF蛋白表达阳性与肿瘤大小呈正相关;Her-2蛋白表达与肿瘤大小无关（P〉0．05）;TF及Her-2表达阳性与胃癌分化程度、临床分期及淋巴结是否转移呈正相关。结论：TF和Her-2高表达的胃癌组织病理学恶性程度更高,更易发生淋巴结转移。