甘草内生菌代谢物的抗炎作用

目的 研究甘草内生菌代谢物的体内外抗炎作用。方法 96孔板中接种巨噬细胞RAW264.7培养,模型组加入1 mg·L^-1脂多糖（LPS）,各受试药物组分别加入10,20,40 mg·L^-1甘草水提液浸膏或内生菌发酵物,2 h后再加入LPS1 mg·L^-1培养,检测NO、IL-1β、PGE₂的含量。Wistar大鼠90只,随机分为9组,空白组、模型组、阳性对照组给予生理盐水0.01 mL·g^-1,甘草水煎液组给予甘草水煎液0.95 g·kg^-1,各内生菌代谢物组给予甘草内生菌发酵物0.95 g·kg^-1,每日1次,连续灌胃给药5 d。末次给药后1 h,除空白组外,各组大鼠尾静脉注射1 mg·kg^-1体质量LPS,制备急性肺炎模型,空白组注射等量生理盐水,阳性对照组按5 mg·kg^-1体质量腹腔注射地塞米松给药。6 h后大鼠股动脉取血,检测外周血白细胞计数及血清中TNF-α、IL-6、IL-10的含量。结果 与LPS模型组比较,40 mg·L^-1时,甘草浸膏组、5组内生菌代谢物组（JTZB006、JTZB018、JTZB059、JTZB060、JTZB063）巨噬细胞RAW264.7分泌的NO、PGE₂、IL-1β的含量显著降低（P<0.05或P<0.01）;与同一质量浓度（40 mg·L^-1）的甘草浸膏组比较,JTZB006、JTZB060组巨噬细胞RAW264.7分泌的PGE₂的含量显著降低（P<0.05）。与模型组比较,阳性对照组、甘草水煎液组、3组内生菌代谢物组（JTZB006、JTZB060、JTZB063）大鼠外周血中白细胞数量及血清中TNF-α、IL-6的含量均显著降低,IL-10的含量显著升高（P<0.05或P<0.01）;与甘草水煎液组比较,JTZB006、JTZB060、JTZB063组IL-10的含量显著升高（P<0.05或P<0.01）。结论 3株甘草内生菌代谢物（JTZB006、JTZB060、JTZB063）对LPS诱导的炎症模型具有体外及体内抗炎作用。     

甘草内生菌的鉴定及抗炎作用研究

目的对分离的甘草内生菌进行鉴定,并研究其抗炎作用。方法取对数生长期贴壁巨噬细胞RAW264.7,制成1×106cell·m L^-1的单细胞悬液,培养至细胞贴壁。空白组,加1640培养基培养;模型组,加1 mg·L^-1脂多糖(LPS)培养;对照组,分别加入10,20,40 mg·L^-1的甘草水提液浸膏;实验组,分别加入10,20,40 mg·L^-1的内生菌发酵物(JTYB006、JTYB012、JTYB029、JTYF023),药物组均预处理2 h,再加入1 mg·mL^-1LPS刺激培养;以Griess法检测一氧化氮(NO)含量,以酶联免疫吸附法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、前列腺素-E2(PGE2)含量。按照体重将昆明种小鼠随机分为7组:模型组、对照Ⅰ组、对照Ⅱ组、实验Ⅰ~Ⅳ组。通过二甲苯致小鼠耳肿胀、冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高,评价甘草内生菌发酵物的体内抗炎作用。结果甘草内生细菌JTYB006、JTYB012、JTYB029分别属于芽孢杆菌(Bacillus.)3个不同种属,内生真菌JTYF023属于曲霉属赭曲霉。模型组的NO、PGE2、IL-1β的含量分别为(89.53±8.02)μmol·L^-1,(420.85±57.85)pg·mL^-1,(35.24±5.77)pg·m L^-1,40 mg·L^-1实验Ⅰ~Ⅳ组(JTYB006、JTYB012、JTYB029、JTYF023)的NO含量分别为(65.60±4.31),(63.48±6.89),(62.30±5.92),(56.47±7.26)μmol·L^-1,PGE2含量为(254.07±43.62),(295.40±49.13),(280.65±52.91),(296.42±54.90)pg·mL^-1,IL^-1β的含量为(21.34±5.36),(20.65±4.78),(16.67±3.98),(22.54±5.30)pg·mL^-1,实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。模型组小鼠耳肿胀度、腹腔冲洗液光密度值分别为17.99±1.60,0.28±0.02;实验Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ组的小鼠耳肿胀度分别为15.05±2.38,13.68±2.69,15.36±2.03,腹腔冲洗液光密度值分别为0.24±0.04,0.18±0.05,0.21±0.05,实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 3株(JTYB006、JTYB029、JTYF023)甘草内生菌发酵物具有体外及体内抗炎作用。     

甘草次酸及其衍生物TY501对小鼠巨噬细胞RAW264.7增殖的影响

目的探究甘草次酸及其衍生物TY501对小鼠巨噬细胞RAW264.7增殖的影响。方法以小鼠巨噬细胞RAW264.7为靶细胞,设置空白组,脂多糖(LPS)1μg/mL处理组(模型组),LPS1μg/mL加80、40、20、10μg/mL药物处理组(受试药物TY501,对照药物泼尼松龙、甘草次酸、吡罗昔康),每组设置4个复孔在给药刺激24h后按照CCK-8试剂盒说明测定各药物对细胞增殖抑制率。结果TY501半数抑制浓度(IC50)为233μg/mL,泼尼松龙IC50为1571μg/mL,甘草次酸IC50为31μg/mL,吡罗昔康IC50为14187μg/mL。结论甘草次酸对RAW264.7巨噬细胞的增殖具有明显的抑制作用,甘草次酸衍生物TY501也可抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7的增殖,在同等质量浓度条件下其对小鼠巨噬细胞增殖的抑制程度强于泼尼松龙,弱于甘草次酸,表明甘草次酸及其衍生物TY501对于小鼠巨噬细胞RAW264.7增殖的抑制作用可能是其发挥抗炎作用的机制之一。     

白木香叶提取物对LPS诱导RAW264.7巨噬细胞炎症因子的影响

目的 采用LPS刺激巨噬细胞RAW264.7,建立体外的炎症模型,探讨白木香叶提取物抗炎活性和作用机制.方法 采用MTT法检测白木香叶提取物( ASPE)对RAW264.7细胞的毒性作用;采用ELISA法检测ASPE对IL-6表达情况;采用Western blotting检测iNOS和COX-2蛋白表达情况,结果 ASPE能抑制LPS刺激RAW264.7所产生的炎症反应,其作用机制可能与其抑制iNOS和COX-2蛋白表达有关.结论 白木香叶提取物有抗炎活性.     

6种内生菌对发酵人参茎叶农药残留降解和皂苷转化的影响

目的 研究6种内生菌对人参茎叶中5种农药残留降解和20种皂苷单体转化的影响。方法 在同一培养条件下,通过GC、HPLC分别对6种人参内生芽孢杆菌处理前后人参茎叶中农药残留及人参皂苷含量进行测定,计算6种内生菌对人参茎叶中农药残留率和皂苷转化率,评价内生菌对人参茎叶转化产物质量的影响,优选出降农残和转化皂苷效果好的菌株。结果 6种人参内生菌对人参茎叶中的5种农药残留均有降解作用,其中,多黏类芽孢杆菌对农药残留降解作用最强,氟啶胺、六六六、五氯硝基苯、毒死蜱、滴滴涕的降解率分别为86.90%,88.89%,79.88%,86.12%和86.67%(P<0.05);对20种单体皂苷均有转化作用,其中,赖氨酸芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌转化人参茎叶皂苷作用最强,20种单体皂苷加和值分别为5.84%和5.85%(P<0.05)。结论 6种内生菌对人参茎叶农药残留降解和皂苷转化的影响不同,多黏类芽孢杆菌降解农药残留效果最好,赖氨酸芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌转化人参皂苷效果最好,为提高人参茎叶总皂苷提供理论依据。     

羟基红花黄色素A和三七总皂苷对高脂血症的影响与机制研究

目的: 研究比较羟基红花黄色素A(HSYA)和三七总皂苷(PNS)对高脂血症大鼠的血脂及动脉粥样硬化相关炎症因子的作用和机制。方法：以高脂血症大鼠为模型,辛伐他汀为阳性对照药品,分别给予实验组大鼠不同剂量的HSYA和PNS,给药期满后取血测定大鼠血脂及CRP、IL-10和IL-6。结果：HSYA高剂量组可显著降低TC、TG,升高HDL-C,但大鼠死亡率最高;低剂量组则可显著降低CRP、IL-6,升高IL-10;PNS高、中剂量组可显著降低TC、TG和LDL-C,各剂量组对IL-6、IL-10和CRP的作用不明显,大鼠死亡率低。结论：HSYA低剂量给药具有抗炎作用,同时安全性高,临床应用建议以低剂量抗炎作用为主。治疗剂量下PNS的降血脂与抗炎作用均不优于辛伐他汀和HSYA,可认为其用于动脉粥样硬化的作用位点与HSYA不同,在临床应用时也应当考虑其适应症区别。     

麦冬总皂苷和麦冬多糖对香烟烟雾提取物诱导的16HBE细胞增殖及炎症因子的影响

目的探讨麦冬总皂苷和麦冬多糖对香烟烟雾提取物(CSE)刺激的人支气管上皮细胞(16HBE细胞)生长增殖的影响,以及炎症相关因子的表达。方法体外培养16HBE细胞,采用MTT法检测CSE、麦冬总皂苷、麦冬多糖的细胞毒性,根据实验结果确定受试物浓度。麦冬总皂苷和麦冬多糖均设置高、中、低3个剂量,孵育16HBE细胞24 h后给予CSE刺激,用MTT法测定细胞的生长情况,用ELISA法检测细胞上清液中表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)的表达。结果与模型组相比,麦冬总皂苷、麦冬多糖能提高16HBE细胞的相对生长率,上调细胞上清液中EGF、TGF-β_1的表达,使上清液中TNF-α、IL-6含量明显降低,IL-10含量明显升高,呈剂量依赖性。结论麦冬总皂苷、麦冬多糖能促进16HBE细胞的生长增殖,促进生长因子释放,抑制炎症反应。     

三七总皂苷对顺铂致肾损伤大鼠肾组织纤维化的改善作用及对相关因子表达的影响

目的:研究三七总皂苷(PNS)对顺铂致肾损伤模型大鼠肾组织纤维化的改善作用及对相关因子的影响。方法:将72只SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药物组和PNS低、中、高剂量组,每组12只。除空白组外,其余各组大鼠采用顺铂尾静脉注射(3 mg/kg×4次)建立肾损伤模型。从首次注射顺铂后第1天开始,阳性组大鼠腹腔注射安磷汀溶液(1.0 mg/kg),PNS各剂量组大鼠腹腔注射PNS溶液(15.63、31.35、62.70 mg/kg),空白组和模型组大鼠注射等体积生理盐水,给药体积均为0.2 mL,连续给药60 d。收集大鼠24 h尿液,检测β-N-乙酰胺基葡萄糖苷酶(NAG)、24 h尿蛋白(Upro/24 h)含量;检测大鼠血清中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量;采用逆转录荧光聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫组化法分别检测大鼠肾组织中结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)、Ⅰ型胶原(Col-1)、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)的mRNA和蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠尿液中NAG、Upro/24 h含量,血清中Scr、BUN含量,以及肾组织中CTGF、TGF-β_1、Col-1、TIMP-1、PAI-1的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,PNS各剂量组大鼠上述尿液和血清生化指标含量均显著降低;PNS各剂量组大鼠肾组织中CTGF、TGF-β_1的mRNA表达水平和CTGF、TGF-β_1、Col-1、TIMP-1蛋白表达水平,PNS高剂量组Col-1的m RNA表达水平,PNS中、高剂量组TIMP-1的mRNA表达水平和PAI-1蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。与阳性组比较,PNS中、高剂量组大鼠尿液中NAG、Upro/24 h含量显著降低(P<0.05)。结论:PNS能有效改善顺铂致肾损伤模型大鼠的肾功能,其可能通过下调肾组织中肾纤维化相关性因子CTGF、TGF-β_1、Col-1、TIMP-1、PAI-1的表达,从而发挥减轻顺铂致肾纤维化的作用。