血管内皮生长因子受体3与阴茎鳞癌淋巴转移的关系

目的 本实验旨在探讨血管内皮生长因子受体3（VEGFR-3）在阴茎鳞癌淋巴道转移中的作用和意义。方法 应用SP免疫组织化学技术检测26例阴茎鳞状细胞癌原发灶及18例腹股沟淋巴结转移灶中VEGFR-3蛋白的表达。结果 VEGFR-3蛋白在阴茎鳞癌中的阳性率（53．8％）显著高于正常阴茎鳞状上皮。VEGFR-3蛋白的表达与阴茎癌淋巴结转移呈正相关（P=0．005）。与年龄、临床T分期、组织分级、病理类型无相关性（P〉0．05）。阴茎鳞癌原发灶与淋巴结转移灶之间VEGFR-3的表达有显著性差异（P=0．042）。结论 VEGFR-3在阴茎鳞癌的淋巴道转移中发挥重要作用。     

VEGF-C及其受体VEGFR-3在肾细胞癌淋巴转移中的作用

目的：探讨血管内皮生长因子-C（VEGF-C）及其受体VEGFR-3在肾细胞癌淋巴道转移中的作用和意义。方法：应用SP免疫组织化学技术检测47例肾细胞癌原发灶中VEGF-C及其受体VEGFR-3蛋白的表达。结果：VEGF-C及其受体VEGFR-3蛋白在肾细胞癌中的阳性率（59．6％，51．1％）均显著高于正常肾组织。VEGF-C及其受体VEGFR-3蛋白的表达与肾细胞癌淋巴结转移呈正相关（P=0．014，P=0．025），与性别、临床T分期和病理类型无相关性（P〉0．05）。结论：VEGF-C通过受体VEGFR-3在肾细胞癌的淋巴道转移中发挥重要作用。     

VEGF-C、VEGFR-3在直肠癌组织中的表达及其相关因素分析

目的探讨血管内皮生长因子C(VEGF-C)和血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)在直肠癌中的表达及其与临床病理学特征之间的关系。方法运用免疫组织化学(SP法)检测55例直肠癌组织及相应切缘组织中VEGF-C、VEGFR-3蛋白的表达。结果 VEGF-C和VEGFR-3蛋白在直肠癌组织中,表达率分别为63.6%和60.0%,在切缘组织表达率较低,差异有统计学意义(P<0.05),且VEGF-C和VEGFR-3在直肠癌中的表达呈正相关关系(r=0.386,P<0.05),有无淋巴转移及不同Dukes分期的癌组织中VEGF-C和VEGFR-3表达率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 VEGF-C和VEGFR-3在直肠癌组织中均呈高表达,并且两者的表达与直肠癌淋巴结转移情况密切相关。     

联合检测survivin、VEGF-C和VEGFR-3蛋白表达水平在食管癌诊治中的意义

目的探讨联合检测survivin、VEGF-C和VEGFR-3蛋白表达水平在食管癌诊治中的意义。方法采用免疫组化法检测141例食管癌手术切除标本中survivin、VEGF-C和VEGFR-3蛋白表达水平,分析三者与食管癌临床病理特征的关系以及三者的相互关系。结果 (1)在141例食管癌中105例survivin(+)。survivin表达与患者的病理T分期、淋巴结转移、神经束浸润和分化程度有相关性(P0.05),与患者性别、年龄无相关性(P0.05)。(2)141例中,110例VEGF-C(+);95例VEGFR-3(+)。VEGF-C和VEGFR-3表达与患者的病理T分期、淋巴结转移有相关性(P0.05),与患者性别、年龄、神经束浸润、分化程度无相关性(P0.05)。(3)VEGF-C与VEGFR-3在食管癌组织中的表达呈正相关(P0.05)。(4)survivin与VEGF-C、VEGFR-3在食管癌组织中的表达呈正相关(P0.05)。结论 survivin与食管癌侵袭及远处转移有关,肿瘤分期越晚、分化恶性度越高,survivin阳性率愈高。VEGF-C和VEGFR-3与食管癌淋巴结转移有关,VEGF-C和VEGFR-3高表达提示食管癌伴有淋巴结转移且预后不良。可以联合检测食管癌survivin、VEGF-C和VEGFR-3帮助食管癌的早期诊断和食管癌侵袭、淋巴结转移的判断,评估预后。     

2种检测VEGF-C和VEGFR-3基因表达的方法在诊断食管癌淋巴结转移中的价值

目的 评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)和免疫组织化学法(IHC)测定食管癌组织中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)基因表达在诊断食管癌淋巴结转移中的意义.方法 分别采用实时FQ-RT-PCR和IHC检测食管癌组织中VEGF-C/VEGFR-3 mRNA和VEGF-C/VEGFR-3蛋白.结果 有淋巴结转移组食管癌组织VEGF-C/VEGFR-3 mRNA和蛋白的表达均显著高于无淋巴结转移组;实时FQ-RT-PCR检测VEGF-C mRNA诊断食管癌淋巴结转移的敏感性、特异性以及与病理学诊断的符合率与IHC检测VEGF-C蛋白差异无统计学意义;实时FQ-RT-PCR检测食管癌组织VEGFR-3 mRNA诊断食管癌淋巴结转移的敏感性、特异性以及与病理学诊断的符合率均明显高于IHC(P<0.05).结论实时FQ-RT-PCR检测VEGF-C/VEGFR-3 mRNA可较好地反映食管癌淋巴结转移状况.     

2种检测VEGF-C和VEGFR-3基因表达的方法在诊断食管癌淋巴结转移中的价值

目的评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)和免疫组织化学法(IHC)测定食管癌组织中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)基因表达在诊断食管癌淋巴结转移中的意义。方法分别采用实时FQ-RT-PCR和IHC检测食管癌组织中VEGF-C/VEGFR-3 mRNA和VEGF-C/VEGFR-3蛋白。结果有淋巴结转移组食管癌组织VEGF-C/VEGFR-3 mRNA和蛋白的表达均显著高于无淋巴结转移组;实时FQ-RT-PCR检测VEGF-C mRNA诊断食管癌淋巴结转移的敏感性、特异性以及与病理学诊断的符合率与IHC检测VEGF-C蛋白差异无统计学意义;实时FQ-RT-PCR检测食管癌组织VEGFR-3 mRNA诊断食管癌淋巴结转移的敏感性、特异性以及与病理学诊断的符合率均明显高于IHC(P<0.05)。结论实时FQ-RT-PCR检测VEGF-C/VEGFR-3 mRNA可较好地反映食管癌淋巴结转移状况。     

喉鳞癌组织中VEGF-C和VEGFR-3的表达及临床意义

目的探讨喉鳞癌组织中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)及其受体VEGFR-3的表达以及与喉癌病理特征的关系。方法应用免疫组化SP法分别检测60例喉癌组织和32例癌旁组织中VEGF-C和VEGFR-3蛋白的表达情况,并分析二者表达强弱与喉鳞状细胞癌发生发展的相关关系。结果喉鳞癌组织中VEGF-C、VEGFR-3表达水平均显著高于相应癌旁组织(P0.05);VEGF-C和VEGFR-3的表达在不同喉癌的分化程度、有无淋巴结转移及不同临床分期组间均有统计学意义(P0.05),而不同性别、年龄、吸烟史、肿瘤大小及临床分型组间差异均无统计学意义(P0.05)。结论 VEGF-C和VEGFR-3在喉癌的发展中起重要作用,二者的联合检测可作为喉癌是否有淋巴结转移及预后的预判指标。     

血管内皮生长因子-C及其受体在肾细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨肾细胞癌组织中血管内皮生长因子-C（VEGF-C）及其受体（VEGFR-3）的表达水平及其与肿瘤临床、病理因素间的关系。方法采用免疫组织化学方法测定54例肾细胞癌和20例正常肾脏组织中VEGF-C和VEGFR-3蛋白表达水平,观察VEGF-C和VEGFR-3的表达与肿瘤分级、肿瘤分期、淋巴管浸润或淋巴结转移间的相关性。结果肾细胞癌组织中VEGF-C和VEGFR-3蛋白表达水平显著高于正常肾脏组织,两者间差异有统计学意义（P〈0.05）。肿瘤分级、肿瘤分期与VEGF-C和VEGFR-3蛋白的表达强度存在相关性（RR=0.83;0.78）。在伴有淋巴管转移浸润或淋巴结转移的病例中,其VEGF-C和VEGFR-3蛋白的表达明显升高（P〈0.05）。结论通过检测肿瘤组织VEGF-C/VEGFR-3的表达情况,有助于了解肾细胞癌的淋巴管浸润和淋巴结转移的倾向,可能对临床治疗术式选择以及术后辅助治疗选择具有指导意义。     

血管内皮生长因子C及其受体表达与乳腺癌淋巴结转移的相关性研究

目的检测乳腺癌组织中血管内皮生长因子c/血管内皮生长因子受体-3(VEGF-C/VEGFR-3)、淋巴管密度(LVD)的表达情况,探讨其表达水平淋巴结转移的相互关系,进一步研究肿瘤转移的机制,为抗淋巴管形成、进而为抗乳腺癌淋巴转移的治疗提供理论依据。方法应用免疫组织化学(SP)法检测83例乳腺癌手术标本的原发灶的VEGF-C及其受体VEGFR-3的表达及LVD。结果83例乳腺癌组织VEGF-C阳性表达者36例(43.3%),淋巴结转移组的VEGF-C阳性表达率为54.6%(24/44),显著高于无淋巴结转移组30.8%(12/39),(P<0.05);在VEGF-C表达阳性组、阴性组中LVD统计学上差异显著(P<0.05)。结论乳腺癌组织VEGF-C表达可能促进肿瘤内淋巴管的生成;乳腺癌的淋巴结转移和VEGF-C的高表达密切相关;。     

鼻咽癌VEGF-C及VEGFR-3的表达与其淋巴结转移的关系

目的探讨鼻咽癌VEGF-C、VEGFR-3的表达与鼻咽癌淋巴结转移的关系。方法采用改良的S-P免疫组化法标记VEGF-C、VEGFR-3。研究其表达与鼻咽癌生物学特性的关系。结果VEGF-C、VEGFR-3阳性表达率分别为67.5%、55.6%,有、无淋巴结转移的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论VEGF-C、VEGFR-3的表达与鼻咽癌淋巴结转移相关。     

真核表达载体血管内皮生长因子转染血管内皮细胞及对新生血管形成的影响

背景:血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)能与存在内皮细胞表面的特异性受体结合,刺激体内新生血管形成,但在体内半衰期极短,在移植局部难以维持足够的浓度,限制了其临床应用.目的:观察VEGF与增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent,EGFP)共表达载体转染对大鼠血管内皮细胞形成新生血管的影响.设计、时间及地点:随机分组设计、对照动物实验,于2004-09/2005-01在中国医科大学附属第一医院器官移植实验室完成.材料:30只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为3组,每组10只.质粒pIRES2-EGFP/VEGF165由第四军医大学提供.方法:采用层析法大量提取pIRES2-EGFPNEGF165质粒,采用阳性脂质体法进行转染,计数1×106血管内皮细胞植入雄性Wiser大鼠肾被膜下.实验组:植入转染质粒pIRES2-EGFP/VEGF165的内皮细胞:空白转染组:植入转染质粒pIRES2-EGFP的内皮细胞:对照组:植入正常大鼠血管内皮细胞.主要观察指标:①转染72 h后观察EGFP及VEGF表达情况.②流式细胞仪检测转染效率.③植入后14 d苏木精-伊红染色观察植入血管内皮细胞处组织形态学变化.结果:30只大鼠均进入结果分析.①荧光显微镜下实验组内皮细胞有特异性的EGFP表达.②流式细胞仪分析转染效率为13.06%.③实验组血管内皮细胞胞核和胞浆中均有VEGF表达.反转录-聚合酶链反应显示实验组大鼠血管内皮细胞中有人源化VEGF165基因在mRNA水平表达.④移植后14 d.实验组大鼠肾被膜下可见成团的新生毛细血管网形成,而对照组及空白转染组虽血管内皮细胞仍存活,但未形成明显血窦.结论:转染VEGF基因是促进内皮细胞早期(14d内)形成新生血管的有效途径.     

血管内皮生长因子及血管内皮生长因子受体-2在肾脏疾病中的研究新进展

血管内皮生长因子(VEGF)是一种内皮细胞的特殊生长因子,可以促进内皮细胞的增生、分化和生存,还可以提高血管的通透性,促进血管的形成。血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2),是VEGF的特异性受体,VEGF/VEGFR-2信号系统的激活是刺激血管内皮细胞的主要机制。本文首先对VEGF及VEGFR进行概述,其次介绍VEGF/VEGFR-2肾脏的旁分泌和自分泌机制。最后,对VEGF/VEGFR-2在各种肾脏疾病中的表达及其作用以及靶向VEGF/VEGFR-2信号通路对新药的研发和临床应用进行综述。     

球囊导管转导血管内皮生长因子对局部血管内皮细胞生长的影响

背景：血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）能促进实验性动脉成形及支架置入后血管内皮迅速再生，使血栓形成减少，新生内膜厚度和管腔狭窄程度减轻。 目的：在建立动脉粥样硬化兔模型基础上，观察局部转染VEGF基因对被扩张动脉内皮形成的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2004—11／2006—11在华中科技科技大学同济医学院微生物实验室完成。 材料：高脂饲养建立动脉粥样硬化兔模型，20只模型兔随机分为对照和基因治疗组两组，每组10只。 方法：基因治疗缌利用球囊导管扩张左肾动脉开口上段腹主动脉并导入pcDNA3．0载体介导的hVEGF165，对照组导入空载体。 主要观察指标：术后1，2，4周MRI观察左肾动脉开口处上段被扩张腹主动脉的管腔面积。术后2，4周处死家兔取材，采用HMIAS-2000高清晰度彩色医学图文分析系统观察内膜面积，中膜面积比值，采用Ⅷ因子相关抗原免疫组织化学染色观察血管内皮细胞再生情况。 结果：利用球囊导管能成功转导pcDNA3．0／hVEGF165。基因治疗组术后2，4周管腔面积大于对照组（P〈0．05），内膜面积，中膜面积比值小于对照组（P〈0．05）；基因治疗组扩张血管内皮细胞再生在术后2周即完成，而对照组到4周才完成。 结论：转导pcDNA3．0／hVEGF165基因能够促进局部血管内皮化，明显减轻再狭窄程度及内膜增厚。     

血管内皮生长因子与促血管生成素1对大鼠血管内皮细胞的作用

背景：血管内皮生长因子、促血管生成素1是血管形成过程中始动并且使之持续的重要因子,研究其对血管内皮细胞的作用具有重要的意义。目的：观察血管内皮生长因子与促血管生成素1对培养血管内皮细胞迁移与增殖能力的影响,并探讨其在血管生成方面的作用机制。方法：在大鼠脐静脉内皮细胞内单独或联合加入血管内皮生长因子、促血管生成素1后,划痕实验和MTT检测对细胞迁移与增殖的影响,观察内皮细胞形态、活性、迁移能力。结果与结论：划痕实验显示单独血管内皮生长因子作用时,与空白对照组细胞迁移无明显差异,单独促血管生成素1作用时,不仅不能增加细胞的迁移作用,反较空白对照组有所减弱,当血管内皮生长因子与促血管生成素1联合作用时,细胞迁移较空白对照组明显增强;MTT实验结果表明：单纯加入血管内皮生长因子或促血管生成素1,均不能起到有效促进内皮细胞增殖的作用;联合应用血管内皮生长因子及促血管生成素1可有效促进增殖。结果可见当血管内皮生长因子与促血管生成素1联合应用时,才能有效促内皮细胞迁移与增殖,发挥促血管生成作用。     

血管内皮生长因子与促血管生成素1对大鼠血管内皮细胞的作用

背景:血管内皮生长因子、促血管生成素1是血管形成过程中始动并且使之持续的重要因子,研究其对血管内皮细胞的作用具有重要的意义.目的:观察血管内皮生长因子与促血管生成素1对培养血管内皮细胞迁移与增殖能力的影响,并探讨其在血管生成方面的作用机制.方法:在大鼠脐静脉内皮细胞内单独或联合加入血管内皮生长因子、促血管生成素1后,划痕实验和MTT检测对细胞迁移与增殖的影响,观察内皮细胞形态、活性、迁移能力.结果与结论:划痕实验显示单独血管内皮生长因子作用时,与空白对照组细胞迁移无明显差异,单独促血管生成素1作用时,不仅不能增加细胞的迁移作用,反较空白对照组有所减弱,当血管内皮生长因子与促血管生成素1联合作用时,细胞迁移较空白对照组明显增强;MTT实验结果表明:单纯加入血管内皮生长因子或促血管生成素1,均不能起到有效促进内皮细胞增殖的作用;联合应用血管内皮生长因子及促血管生成素1可有效促进增殖.结果可见当血管内皮生长因子与促血管生成素1联合应用时,才能有效促内皮细胞迁移与增殖,发挥促血管生成作用.     

Role of vascular endothelial growth factor receptor 1 and vascular endothelial growth factor receptor 2 in the vasodilator response to vascular endothelial growth factor in the neonatal piglet lung

OBJECTIVE: Vascular endothelial growth factor (VEGF) regulates vascular proliferation and causes vasodilation. In the pulmonary circulation, the vasorelaxing effect of VEGF has been attributed to nitric oxide, whereas in other vascular beds, prostacyclin and other mechanisms are also involved. This vascular effect follows binding to two receptors, VEGF receptor 1 (VEGFR1) and VEGF receptor 2 (VEGFR2), the latter of which is thought to be the main receptor responsible for the vasorelaxing effect of VEGF. The role of VEGFR1 in the neonatal pulmonary vasculature remains to be determined. DESIGN: Prospective randomized laboratory investigation. SETTING: Animal laboratory. SUBJECTS: Newborn Yorkshire-Landrace piglets. INTERVENTIONS: To determine the mechanisms of action of VEGF in the neonatal pulmonary vasculature, the effect of VEGF (10-10 M) was tested in isolated perfused piglet lungs, alone and in the presence of a VEGFR2 kinase inhibitor, N-nitro-l-arginine (L-NNA), indomethacin (Indo), L-NNA + Indo, and GF109203X, a protein kinase C inhibitor. The effect of a VEGFR1 agonist, placenta growth factor (PlGF), was also studied with or without L-NNA. Perfusate was collected, and cyclic guanosine monophosphate (cGMP), as well as 6-keto prostaglandin F1alpha and thromboxane B2, the stable metabolites of prostacyclin and thromboxane, respectively, was measured. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: VEGF caused vasorelaxation with a concomitant increase in cGMP. PlGF also decreased vascular tone and increased cGMP. VEGFR2 kinase inhibitor did not prevent the reduction in perfusion pressure seen with VEGF but blocked the increase in cGMP. Pretreatment with L-NNA completely inhibited VEGF and PlGF vasodilation and prevented the increase in cGMP seen with both agonists. Pretreatment with Indo or GF109203X did not reduce the dilator response to VEGF. CONCLUSIONS: VEGF vasodilation may follow nitric oxide release in the piglet pulmonary circulation. VEGF vasorelaxation may not only occur through binding to VEGFR2, since PlGF, the specific VEGFR1 agonist, also causes vasodilation. Therefore, vasodilator response to VEGF may involve both types of receptor in the neonatal piglet pulmonary vasculature.     

Parathyroid hormone stimulates the endothelial expression of vascular endothelial growth factor

Background We showed previously that parathyroid hormone (PTH) may stimulate the endothelial expression of pro‐atherosclerotic and pro‐inflammatory markers. Considering the impact of PTH on vasculature, we decided to evaluate its effect on mRNA and intra‐cellular protein expressions of endothelial vascular endothelial growth factor (VEGF) taking into account that VEGF may play a role in the pathogenesis of endothelial dysfunctions. Materials and methods Human umbilical vein cords endothelial cells (HUVEC) were stimulated for 24 h with 10^?12–10^?10 mol L^?1 PTH. The VEGF‐165 mRNA expression (critical in stimulating endothelial cell proliferation) was evaluated by RT/PCR and the intra‐cellular VEGF protein expression by flow cytometry. The pathways by which PTH may have an effect on VEGF expression were also evaluated. Results PTH (10^?10 mol L^?1) significantly increased VEGF‐165 mRNA expression (P < 0·05). The addition of 50 nmol L^?1 protein kinase C (PKC) and 10 µmol L^?1 protein kinase A (PKA) inhibitors significantly reduced the VEGF‐165 mRNA expression (P = 0·01). We also examined whether nitric oxide (NO) may be involved in the PTH‐induced stimulation of VEGF‐165 expression. Pre‐treatment of the cells with 200 µmol L‐nitro arginine methyl ester (L‐NAME, NO synthase inhibitor) was found to inhibit VEGF‐165 mRNA expression (P = 0·006). VEGF protein could not be detected in the medium of HUVEC but it was present in the cell cytoplasm. PTH had no significant effect on cytoplasmatic VEGF protein expression. Conclusion The stimulatory effect of PTH on endothelial VEGF‐165 mRNA expression is partly through PKC and PKA pathways and is also NO dependent.     

Telmisartan-enhanced hypercholesterolaemic serum-induced vascular endothelial growth factor expression in immortalized human umbilical vascular endothelial cells

OBJECTIVE: To clarify whether hypercholesterolaemia can increase vascular endothelial growth factor (VEGF) expression in human umbilical vascular endothelial cells (HUVECs) through the phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) pathway, and whether a special angiotensin II receptor blocker, telmisartan, can attenuate VEGF expression induced by hypercholesterolaemia. METHODS: Levels of VEGF expression, PI3K activity and angiogenesis in vitro were determined by various methods after HUVECs were incubated with hypercholesterolaemic serum or combined with telmisartan and/or wortmannin. RESULTS: We found that hypercholesterolaemic serum (cholesterol > or = 0.08 mmol/L) can increase VEGF expression in HUVECs and that telmisartan cooperates with hypercholesterolaemic serum in promoting VEGF expression. The increased VEGF expression was associated with enhanced PI3K activity and could be significantly inhibited by wortmannin, a potent PI3K inhibitor. Likewise, hypercholesterolaemic serum significantly promoted angiogenesis in vitro, which could be inhibited when PI3K activity was suppressed. CONCLUSIONS: Our study suggests that hypercholesterolaemic serum induces VEGF expression through PI3K in HUVECs and that telmisartan cooperates with hypercholesterolaemia in promoting VEGF expression.     

缺氧时内皮细胞中血管内皮生长因子受体的表达

目的 探讨脐带静脉内皮细胞在缺氧条件培养下血管内皮生长因子特异受体的表达，为进一步研究血管内皮生长因子及其受体在新血管生成中的作用提供理论依据。方法 体外培养脐带静脉内皮细胞，不同缺氧时间处理及血管活性因子刺激，提取组织总RNA，应用Northern杂交和逆转录聚合酶连扩增反应（RT－PCR）等方法，观察基因表达的变化。结果 内皮细胞无缺氧和缺氧3h均未见flt-1表达，缺氧6h可见flt-1摸板核糖核酸（mRNA)的表达。内皮细胞缺氧6h，内皮素（ET）、一氧化氮（NO）、LNNA对flt-1表达有影响。ET促进flt-1 mRNA的表达，NO抑制其表达，而LNNA部分恢复其表达。在无缺氧和缺氧3，6h KDR基因均有表达。内皮细胞缺氧6h，ET、NO、LNNA对KDR无影响。LNNA阻断了内源性NO后，明显促进KDR mNRA的表达，其他无作用。结论 在缺氧条件下血管内皮细胞生长因子的受体flt-1表达明显增加并受血管活性因子调节，KDR有表达且部分受血管活性因子调节。