EDTA微波快速脱钙法

1材料和方法1．1材料固定后松质骨修成0．7cm×0．5cm×0．2cm；惠而浦微波炉AVM600型，功率900W，分七档；5种脱钙液：中性EDTA、PlankRycho液、10％硝酸．水溶液、Thoma’s液、Bouin＇s液。1．2方法微波设定在二档（160w），辐射smin，测量脱钙液温度，间隙Zmin，重复辐射3～4次后，以针顺利刺入骨组织为脱钙的标准。酸性脱钙液脱钙后，用5％硫酸钠水溶液碱化处理，微波辐射二档smin。中性EDTA脱钙无需碱化．常规石蜡制片，HE染色和免疫组化染色。2结果和讨论2．1经EDTA微波辐射脱钙的骨组织，石蜡切片完整，染色鲜艳，组织细胞…     

微波技术在肺脏组织整块染色切片技术中的应用

目的：探讨更好地显示肺脏结构的HE整块染色切片方法,提高制片效率。方法：对照组用常规HE整块染色切片法显示肺脏结构,实验组在常规HE整块染色切片过程中,应用微波处理,并与对照组比较。结果：实验组肺脏细胞显示效果良好,微波辐射明显促进了组织块染色,制片时间缩短。结论：使用微波辐射促进肺脏组织HE染色是显示肺脏结构的良好方法,且简便可行。     

Van Gieson与快速微波免疫组化双重染色技术

我科采用VanGieson(VG)染色和免疫组化二步双重染色方法 ,可在良恶性神经鞘膜肿瘤中显示肿瘤细胞及胶原纤维 ,使二者对比性强 ,肿瘤细胞更加清晰、直观。用快速微波法省时、有效 ,整个过程只需 1 5min。1　材料和方法1 1　材料　取自我科 2 0 0 0年 1月 - 2 0 0 2年 1月的肿瘤活检标本 ,包括神经鞘膜瘤、恶性神经鞘膜瘤等标本 ,经 1 0 %缓冲甲醛固定、常规脱水、包埋、切片厚 4 μl。1 2　试剂配制　①VG染色液 :1 %酸性品红水溶液 1 0ml,苦味酸饱和水溶液 (约 1 2 2 % ) 90ml。②抗原修复液 :2 1g柠檬酸 (C6H8O7·H2 O) ,溶于蒸馏…     

微波技术在乳腺大切片制作中的应用

以往制作乳腺大切片时 ,组织处理程序需要 2周以上的时间 ,因组织块大而且厚 ,常常出现因组织固定不透、脱水不净、浸蜡不足等因素所导致的组织松软 ,出现切片不整、组织散碎和染色不良等现象。利用微波辐射对组织的固定、脱水、透明、浸蜡等程序进行处理 ,效果较好。1　材料与方法1 .1　浙江临安产 YWY781医用微波仪 ,功率 30～ 50 0 W,功率输出分为 8档 ,频率 50 Hz。1 .2　操作步骤 :取乳腺切除标本 ,切成约 8cm×4cm× 1 cm大小的组织块 ,置于 1 0 %福尔马林中过夜 (约 1 5h) ,更换新福尔马林 、 ,置微波仪中各1 5min;流水冲洗 2 0 m…     

简便快速的肝贮脂细胞组织块银染方法

目的：探讨更好的显示肝贮脂细胞组织决银柒方法和加快其染色速度的有效方法。方法：设计与实话新组织块银染方法，并在材料固定、浸银、还原步骤中对材料进行微波辐射处理。结果：肝贮脂细胞显示效果良好，微波辐射明显促进了组织块银柒。结论：组织块银柒法是显示肝贮脂细胞的良好方法，使用微波辐射促进组织块银染是简便可行的。     

不同固定液对冷冻切片HE染色影响的比较

冷冻切片的质量直接影响术中病理诊断的快速性和准确性 ,因此制备高质量的冷冻切片具有重要意义 ,然而其受多种因素影响 ,其中固定液的选择至关重要。目前文献中有关报道结果不一 [1 ,2 ] 。笔者选用组织学技术常用、容易配制的几种固定液 [3]进行比较 ,观察 HE的染色效果 ,以期获得对冷冻切片染色效果最好的固定液。1　材料与方法1.1　材料　标本 :临床手术切除的新鲜标本 ,主要有乳腺、甲状腺等器官组织。固定液如下 :A　中性福尔马林溶液B　 95 %乙醇C　 AF(4 0 %福尔马林 10 ml,95 %乙醇 90 ml)D　 Carnoy(纯乙醇 60 ml,氯仿 3 0 ml…     

简便快速的胰腺组织块H．E染色法

目的：探讨更好的显示胰腺组织块H.E加快染色速度的有效方法。方法：快速的胰腺组织块H.E染色法显示胰岛细胞并与常规苏木精-伊红染色法以及Mallory三色染色法比较。结果：胰腺细胞显示效果良好,微波辐射明显促进了组织块染色。结论：组织块使用微波辐射促进胰腺组织H.E染色,是显示胰腺的良好方法,且简便可行。     

微波辐射在网状纤维染色中的应用

目前 ,微波辐射作为一种先进的形态学技术辅助工具 ,已广泛地应用于病理制片技术 ,如ＨＥ染色、特殊染色、组织化学染色以及免疫组化染色等 ,产生了良好的染色效果 ,明显缩短整个制片过程 ,进一步提高了病理技术质量和工作效率。本实验将微波辐射应用于网状纤维染色 ,并与常规室温下网状纤维染色进行对照 ,经反复探索得到较为满意的染色效果。1　材料与方法1.1　材料选取手术切除标本　淋巴结、肝、脾、胸腺等组织 ,4 %中性甲醛缓冲溶液固定 ,常规石蜡包埋 ,切片厚 4 μｍ。微波炉 :东芝ＥＲ 692型微波炉 ,输出功率 :65 0ｗ ,工作频率 :2 4 …     

豚鼠内耳在不同固定液中HE染色效果的比较

在目前信息高速发展的时代,实验教学中许多传统的教学手段已被电视、幻灯、投影等先进的教学手段所取代,但形态学实习中延用已久的组织切片的观察却仍然在延用,因而切片染色效果的优劣也就显得尤为重要。针对这一问题,我们把对豚鼠内耳在不同固定液中HE染色效果进行了比较,现将结果报告如下。】材料与方法1．1材料新鲜的豚鼠内耳。4种固定液分别为1）Bouin液：苦味酸饱和水溶液75ml,甲醛25ml,冰醋酸5ml。2）’Zenker氏液：升汞5g,冰醋酸5ml,重铅酸钾2．5g,蒸馏水5ml。3）Susa液：互液：三江化汞饱和水溶液。H液：氰化钠0．5g,…     

微波技术在免疫组化中的应用

免疫组织化学 (简称免疫组化 )自 1 974年用于病理诊断以来 ,已成为病理科一种常用手段。但目前进行的常规石蜡切片标本 ,一般用甲醛固定 ,其免疫组化标记敏感性明显降低 ,造成显色困难。因此在染色时 ,有些抗原须先进行修复或暴露。笔者采用本科总结的微波修复技术先对病变组织进行修复。然后再观察病变组织中激素受体的表达。并与对照组进行比较。1　材料与方法1 .1　材料　 40例乳腺浸润性导管癌病变组织均为我院 1 997年 4月～ 1 998年 1 0月乳腺手术切除标本。所有标本均为 1 0 %福尔马林固定 ,常规石蜡包埋 ,HE染色。每例取病变最为…     

大白兔胸主动脉平滑肌细胞、成纤维细胞的培养

目的：探讨以简便、高效的方法获取血管平滑肌细胞、成纤维细胞,为相关研究提供实验材料。方法：切取兔胸主动脉,组织块法培养平滑肌细胞、成纤维细胞并进行倒置显微镜下观察、HE染色和α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白免疫组化染色。结果：95%的组织块存活,5代的平滑肌细胞、成纤维细胞纯度达98%以上。组织块于接种后6～8d即有细胞以垂直方向从组织块边缘迁移游出,呈放射状排列。2～4周出现＂峰＂、＂谷＂状生长特点,倒置显微镜、HE染色和α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白免疫组化染色均示平滑肌细胞、成纤维细胞。结论：组织块培养方法可简便、高效地培养、扩增并传代胸主动脉壁平滑肌细胞、成纤维细胞。     

常规HE染色过程中分色蓝化透明方法的改良

普通HE染色是组织学、病理学技术员最基本的技术技能，也是组织学、病理学等形态学教学与科研的最基本方法，HE染色步骤在组织切片制作过程中显得尤其重要。一张HE染色切片的质量好坏不仅取决于苏木精、伊红染液的质量、染色时间、染色温度，在很大程度上还取决于染色过程中分色液、蓝化液的性质和类型的选择及分色、蓝化的时间。传统的分色液为0．5～1％的盐酸酒精；蓝化液为1％氨水溶液。在长期组织切片HE染色过程中作者发现，虽然组织切片在苏木精染液中着色较好，但一旦经过0．5～1％盐酸酒精分化液分色后，细胞核着色偏淡，而且用盐酸酒精分色时间短也不好掌握分色时间；分色后的切片再进入1％的氨水中蓝化，细胞核虽然能返蓝，     

常规HE染色中胞浆染色液的改良

HE染色是医学领域最基本、使用最广泛的技术方法,常规HE染色中胞浆染色常采用0．5％～1％伊红水溶液或醇溶性溶液,但其胞浆着色有时不稳定,而传统改进的混和伊红液为甲乙两液,甲液为醇溶性伊红,混合液中沉淀过多,浪费试剂,而且使用时间短。作者在临床病理工作中进行了一些改良,获得了较满意的工作效果,现报告如下。     

应用氯化三苯基四氮唑染色快速判定超声引导下微波凝固范围

目的: 探讨应用氯化三苯基四氮唑(2,3,5 Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色快速判定微波凝固范围的可行性。方法： 纯种新西兰长耳大白兔18只,随机分成即时、1d、3d、7d、10d、21d 6组。超声引导下,45W微波辐射肝组织3min。取凝固标本,肉眼观察,并行TTC染色、HE染色、电镜观察。结果：活体兔肝凝固灶,电镜、HE染色证明凝固坏死区TTC不染色;非凝固坏死区TTC染色成玫瑰红色。活检标本TTC染色后,染色区域行HE染色,仍然可以观察细胞形态和组织结构。结论： TTC大体染色判定微波凝固范围,即时、准确、经济且操作简单。TTC不染色区域为凝固区,染成玫瑰红色区域为非凝固区。     

细胞学涂片快速染色法

细胞学涂片一般采用常规 HE 染色。笔者介绍了一种快速染色方法,此方法可用于宫颈涂片、痰涂片、穿刺物涂片、新鲜组织印片等细胞学检查。1 材料和方法1.1 试剂配制 (1)2%结晶紫染液:结晶紫2g,蒸馏水100ml。先将结晶紫加入已加热     

内镜及穿刺标本的微波快速制片技术

胃镜、肠镜、纤支镜等内镜检查以及肝穿等各种穿刺检查已成为主要的临床检查技术 ,所取活组织做组织病理学检查是最可靠的诊断方法 ,常规病理学检查需 2～ 3日。我们把微波辐射技术应用到组织的固定、脱水、透明、浸蜡、染色等主要步骤 ,在保证制片质量的前提下 ,仅需一个半小时即可完成切片制作 ,为患者获得及时诊治赢得宝贵时间。1　材料和方法1.1　材料　选取胃镜组织 10例 ,肠镜组织 10例 ,纤支镜组织 10例 ,膀胱镜组织 10例 ,肝穿组织 10例 ,肺穿组织 5例 ,肾穿组织 5例 ,睾丸穿刺组织 5例。1.2　方法1.2 .1　试剂及配制　 10 %中性福…     

块染石蜡切片方法显示肥大细胞的探讨

肥大细胞为疏松结缔组织内一种常见细胞 ,沿小血管和小淋巴管分布 ,其特点为胞浆中充满大量异染性颗粒 ,用碱性染料染色时显异染色性[1] 。显示肥大细胞的传统方法多用铺片染色法[2～ 4] ,虽能清楚显示颗粒 ,却极易褪色 ,标本不易保存。我们选用大鼠舌体 ,运用块染和石蜡切片技术显示肥大细胞 ,获得满意效果。1　材料与方法　　Ｗｉｓｔａｒ健康成年大鼠 (第三军医大学实验动物中心提供 ) ,体重 2 5 0ｇ左右。 3%戊巴比妥钠腹腔内注射麻醉 ,取切成 0 .5ｃｍ厚块。固定液 95 %酒精 90ｍｌ;甲醛 1 0ｍｌ;醋酸钙1ｇ固定 6～ 1 0ｈ。组织块移出…     

微波治疗突发性聋的临床研究

目的 :研究微波治疗突聋的疗效。方法 :将突发性聋 94例、10 6耳随机分为单纯药物组和微波组。并观测微波组辐射前后颅内底血流及脑地形图的变化。结果 :微波组治愈率 37 1% ,显效率 4 0 % ,药物组治愈率 14 1% ,显效率 15 5 % ,2组差异有显著性 (P <0 0 5 )。微波辐射前后颅内底血流及脑地形图无差异性。采用WE 2 10 2A多功能微波机治疗突发性聋的最佳参数为输出功率 80～ 90W ,测温 4 0～ 4 1℃。剂量参照患者的主观感觉以耳温热量为度。结论 :微波治疗突发性聋的效果好于单纯的药物治疗 ,在药物治疗的基础上加微波辐射可取得更好的疗效     

微波辐射快速制备电镜标本的实验研究

用常规方法制备电镜标本时 ,标本制备周期过长一直是影响临床应用电镜及时诊断的一个突出问题。近年来 ,一些学者相继利用微波辐射协助电镜标本进行固定、脱水、浸透及聚合 ,明显缩短了标本制备的时间 ,并且不影响组织细胞超微结构[1] 。微波制样技术的原理、方法和步骤与常规制样有较大区别。微波辐射功率、加热时间、标本大小及其在微波炉中的位置等因素 ,对不同的组织标本均有较大影响 ,而且不同厂家及型号的微波炉 ,其功率大小和火力段的功率分配亦不相同。因此 ,目前尚无统一的微波辐射制样方法。我们根据现有实验室条件 ,对微波辐射快速制备电镜标本的方法进行了探讨 ,现报告如下。1　材料与方法1 1　材料小鼠肝、肾及大鼠心肌、骨骼肌组织 ,切成0 5ｍｍ3～ 1ｍｍ3 小块 ,放入 2 5%戊二醛 ( 0 1ｍｏｌ/Ｌ磷酸缓冲液 ,ｐＨ7 4 )中固定。1 2　微波辐射准备采用国产格兰仕ＷＰ - 750型微波炉 ,其输出功率在 12 7 5Ｗ、 2 77 5Ｗ、 30 0Ｗ、 4 95Ｗ、 637 5Ｗ、 750Ｗ之间可调。辐射时在微波炉内放一个盛有 30 0ｍｌ水的烧杯 ,使炉内加热物总量基本一致 ,保持温度基本恒定。...     

应用组织芯片技术对胃癌组织中cyclinE和p21~(WAF1)蛋白表达观察的体会

目的 :探讨使用组织芯片技术 ,观察细胞周期的调控因子 cyclin E和 p2 1WAF1在胃癌组织中的表达的方法。方法 :以 12 4例为观察研究对象 ,自制组织芯片 ,使用 S- P法观察单克隆抗体 cyclin E(MAB- 0 0 19)、p2 1WAF 1 (MAB-0 2 35 )在胃癌组织中的表达情况。对其中 11例使用常规制片方法进行了对照免疫组化染色。结果 :制成组织芯片 2块 ,各含 6 3块组织芯片 ,所制切片质量较满意 ,制片组织块完好率为 95 .2 %～ 98.4 %。所制成的组织芯片进行免疫组织化学染色 ,与采用常规制片方法进行免疫组化染色片对比 ,阳性率、阳性表达强度结果基本一致。结论 :使用自制组织芯片进行 cyclin E、p2 1WAF1 免疫组化染色分析 ,效果良好 ,显示了组织芯片技术应用于临床病理免疫组化染色和实验分析的良好前景。