汉防己甲素衍生物HL-27对BLM解旋酶生物学特性的影响北大核心CSCD

目的研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶生物学特性的影响。方法利用荧光偏振技术研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶DNA结合活性、解链活性的影响;利用孔雀绿-磷钼酸铵比色法研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶ATPase活性的影响;利用紫外吸收光谱法研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶构象的影响。结果当HL-27浓度达到33.34μmol·L^(-1)时,其对dsDNA或ssDNA与BLM^(642-1290)解旋酶结合活性的抑制率分别为41.35%、59.54%;当HL-27浓度达到50 μmol·L^(-1)时,其对BLM^(642-1290)解旋酶解链活性的抑制率为78.68%;当HL-27的浓度为100μmol·L^(-1)时,其对BLM^(642-1290)解旋酶ATPase活性的抑制率为43.8%。结论汉防己甲素衍生物HL-27可以抑制BLM^(642-1290)解旋酶的DNA结合活性、解链活性与ATPase活性。     

红细胞、血浆蛋白及溶酶体对汉防己甲素和汉防己乙素系统暴露的影响

目的:汉防己为防己科植物粉防己(Stephania tetrandra S. Moore)的干燥根。汉防己甲素和汉防己乙素是其两个主要成分,具有抗肿瘤等多方面药效活性。为了帮助进一步考察汉防己甲素和汉防己乙素的药效作用,我们对两个双苄基异喹啉类生物碱开展了大鼠和体外药代研究。方法:大鼠口服或静脉给药汉防己提取物、汉防己甲素或汉防己乙素单体化合物以阐明汉防己甲素和汉防己乙素的药代动力学特征;在体外检测汉防己甲素和汉防己乙素的血浆蛋白结合、全血-血浆分配、溶酶体捕获。以上实验产生的生物样品均采用液质联用技术进行分析。结果:研究发现汉防己甲素和汉防己乙素有两个药代特征,其一是这两个化合物的全血系统暴露水平均高于其各自血浆系统暴露水平,其二是在相同的给药剂量、动物实验条件及分析检测条件下,两个化合物在灌胃汉防己水提物后的系统暴露水平均高于其各自在灌胃单个化合物后的暴露水平。汉防己甲素和汉防己乙素的大鼠血浆游离药物分数约为2%～5%,其在大鼠红细胞浓度比在大鼠血浆浓度高5倍左右。溶酶体抑制剂阻碍溶酶体捕获这两个化合物并显著减少其在HEK-293细胞中浓度。结论:血浆蛋白结合、红细胞结合及组织细胞...     

汉防己甲素对大鼠肝保护和抗氧化作用研究

目的:使用汉防己甲素评价对四氯化碳诱导的大鼠肝损伤的保护作用以及抗氧化作用。方法:每日给予四氯化碳损伤大鼠不同的浓度汉防己甲素剂量分别为20,60,100mg/kg,随后检测血清和组织中谷胱甘肽(GSH),谷胱甘肽过氧化物酶,过氧化氢酶(CAT),超氧化和物歧化酶(SOD),谷胱甘肽S-转移酶(GST),脂质过氧化效应等指标,体外抗氧化使用使用超氧化物和过氧化物清除实验评价。结果:与对照组和四氯化碳模型组比较后发现,汉防己甲素在所用剂量下均显示出较为理想的肝保护和抗氧化效应。进一步的体外过氧化自由基清除和超氧化自由基清除实验表明,汉防己甲素较维生素C有更为优越的清除活性。结论:汉防己甲素能有效保护四氯化碳对大鼠造成的肝损伤,其保护机制可能与抗氧化和自由基清除密切相关。     

汉防己甲素及钙离子在豚鼠心脏中与强心甙的相互作用

钙离子与强心甙合用时,有协同或相加作用。但这一概念并不适用于所有的强心甙。在本实验中,羊角拗甙对豚鼠心脏的毒性作用与钙离子没有关系,这与哇巴因相似。汉防己甲素能降低强心甙的毒性,而钙离子能取消汉防己甲素的这种作用,表明汉防己甲素对抗强心甙所诱发的心律失常可能与汉防己甲素有拮抗钙的作用有关。     

汉防己甲素逆转人肝癌耐药细胞株多药耐药性的研究

目的研究汉防己甲素对人肝癌多药耐药细胞株Hep-3B／ADM耐药性的逆转作用及其机制。方法通过阿霉素（ADM）浓度梯度递增诱导法，建立人肝癌多药耐药细胞株Hep-3B／ADM。MTT法检测细胞对化学疗法药物的敏感性；流式细胞仪检测细胞表面多药耐药基因表达产物P-170及分析细胞内若丹明123染剂相对荧光强度。结果汉防己甲素（0．10～1．00μmol／L）可逆转肝癌耐药细胞的耐药性；汉防己甲素明显降低细胞表面P-170的表达。结论汉防己甲素具有增强阿霉素对Hep-3B／ADM细胞的毒性作用，其作用机制与逆转多药耐药基因有关。     

汉防己甲素聚乳酸微球小鼠肺靶向研究

目的 :研究汉防己甲素聚乳酸微球的肺靶向性。方法 :分别对小鼠尾静脉注射汉防己甲素聚乳酸微球和汉防己甲素注射剂 ,以反相高效液相色谱法测定并比较小鼠各组织中汉防己甲素的浓度。结果 :汉防己甲素在血浆中检测浓度范围为0 .519～17 000μg/ml(r=0. 9996) ,加样回收率为97 .32 % ,相对标准差平均值为4 .46 % ;应用汉防己甲素聚乳酸微球后汉防己甲素在小鼠各组织中浓度明显高于汉防己甲素注射剂 ;汉防己甲素在小鼠肺中浓度明显高于其它组织。结论 :汉防己甲素聚乳酸微球具有明显的肺靶向性。     

汉防己甲素衍生物HL-49对Bloom DNA解旋酶生物学特性的影响

目的汉防己甲素衍生物是一类双苄基异喹啉类化合物,具有明显的抗肿瘤活性。研究汉防己甲素衍生物HL-49对Bloom DNA解旋酶(bloom DNA helicase,BLM)构象和生物学活性的影响对于探索其抗肿瘤作用机制具有重要意义。方法采用紫外光谱扫描研究药物HL-49对BLM DNA解旋酶构象的影响,荧光偏振技术和孔雀绿-磷钼酸铵比色法分析HL-49对BLM解旋酶的DNA结合活性、DNA解链活性、ATPase活性。结果紫外光谱扫描结果显示,HL-49对BLM DNA解旋酶的三维构象影响不明显。荧光偏振法结果显示,HL-49对BLM解旋酶的DNA(dsDNA/ssDNA)结合活性的影响不明显,但随浓度的增加,与DNA相互结合的能力越强(P<0.01)。随着HL-49浓度的增加,BLM DNA解旋酶的DNA解链能力下降,K_obs值逐渐降低。孔雀绿-磷钼酸铵比色结果说明,随着HL-49浓度的增加或作用时间延长,HL-49能明显抑制BLM DNA解旋酶的ATPase活性。结论汉防己甲素衍生物HL-49通过与DNA的可逆性结合,抑制BLM DNA解旋酶的ATPase活性和DNA解链活性。     

汉防已甲素对四氧嘧啶糖尿病大鼠高血糖的预防作用

本研究以血糖为检测指标,观察了汉防己甲素对四氧嘧啶糖尿病大鼠高血糖的预防作用。结果表明:①预先给予不同剂量的汉防己甲素,皆可不同程度地防止四氧嘧啶升高血糖的作用,其预防效果随剂量的增加而增强。②预先给予汉防己甲素(100mg/kg)预防组和注射四氧嘧啶后24h给予汉防己甲素(100mg/kg),预防组于注射四氧嘧啶(0天)后第2、3、5、7天的血糖浓度与对照组同天血糖比较均明显降低(P<0.01)。结论:注射四氧嘧啶前后一定时间给予汉防己甲素均可预防四氧嘧啶致高血糖作用的发生。动态观察1周,预防组血糖浓度稳定,无升高趋势。     

汉防己甲素抑制肺癌A549细胞生长的研究

目的研究汉防己甲素的体外抗肺癌的作用。方法采用MTT法对汉防己甲素进行抗肺癌活性测定。结果在1．25—20ug／ml浓度范围内,表明汉防己甲素对肺癌A549细胞生长具有一定的抑制作用。结论汉防己甲素对A549细胞抑制作用与药物的浓度间呈明显正相关。     

汉防己甲素缓释微囊肺靶向给药系统的研究

目的　制备肺靶向汉防己甲素缓释微囊,以提高药物降低肺动脉高压的作用并降低其毒性。方法　汉防己甲素用喷雾干燥-热变性微囊化,用UV测定汉防己甲素微囊的体外释放特性,用反相高效液相测定小鼠体内分布,经大鼠肺动脉插管测定其压力。结果　汉防己甲素微囊外观呈圆球形,带正电荷,载药量37.88%,微囊的体外释药规律符合Higuchi方程。小鼠肺部的药物浓度明显提高,平均滞留时间延长,大鼠肺动脉高压的降压作用从157.1h延长到223.6h,体内降压百分数与体外释药百分数之间具有相关性。结论　汉防己甲素经喷雾干燥-热变性微囊化可使其高效、低毒地治疗肺动脉高压。