α-突触核蛋白与帕金森氏病

帕金森氏病最主要的病理改变是中脑黑质多巴胺能神经元的变性死亡,而α-突触核蛋白(α-synuclein)这一高度保守的小分子突触前蛋白,与帕金森氏病有密切关联,在路易小体和路易神经突中发现的淀粉样蛋白纤维的主要成分就是α-突触核蛋白[1-2],而这一特异性蛋白沉积物正是帕金森氏病的诊断标志[3].且越来越多的证据表明,低聚α-突触核蛋白本身就在帕金森氏病中通过损害细胞正常生理活动起到关键性的神经毒性作用[4].目前针对帕金森氏病的主要治疗药物为多巴胺类药物[5],但随着病程的延长,多巴胺类药物的作用将会逐渐减弱并最终消失,所以研究新的治疗方法非常必要,对α-突触核蛋白的研究有可能成为治疗帕金森氏病的下一个突破点.本文就α-突触核蛋白在帕金森氏病发病中的作用机制作一综述.     

α-突触核蛋白与帕金森病

α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)是一种中枢神经系统突触前表达的可溶性蛋白质,与帕金森病(Parkinsondisease,PD)的发生发展密切相关.α-突触核蛋白在各种因素的影响下异常表达和聚集,这一过程产生的氧化应激等生化反应和寡聚体中间构象等均在帕金森的发病过程中起重要作用.本文综述了近年的研究...     

α-突触核蛋白显像剂及小分子抑制剂诊疗药物的研究进展

目的 综述α-突触核蛋白(alpha-synuclein,α-syn)的结构及其显像剂和小分子抑制剂的研究进展,为进一步开发新型显像剂提供参考.方法 查阅近年来国内外文献,对荧光显像剂、核素示踪剂以及直接或间接靶向α-syn的小分子抑制剂进行归类总结.结果 帕金森病(Parkinson's dis-ease,PD)是第...     

基于α-突触核蛋白的帕金森病动物模型研究进展

摘要：帕金森病（PD）是第二常见的神经退行性疾病。已有研究表明α-突触核蛋白（α-syn）与PD的发病有着密切的关系。国内外研究者利用α-syn的异位表达、过表达或脑内注射等方法来建立PD动物模型。近年来,α-突触核蛋白预制原纤维（α-syn PFFs）已用于动物模型的构建。α-syn PFFs在研究PD的起源及神经元病变传播中起促进作用。这些模型与传统化学毒素模型相比能够更好地复制PD患者特征性病理改变。本文基于α-syn的PD动物模型的研究进展进行综述。     

α突触核蛋白磷酸激酶的研究进展

α突触核蛋白(α-Syn)的异常聚集常被看成是帕金森病(PD)的重要致病因素之一。近年来研究发现,沉积于PD患者脑组织路易小体的α-Syn磷酸化的程度达到90%以上,表明磷酸化的α-Syn参与了PD的发生。虽然已发现多种磷酸激酶可以磷酸化α-Syn,但这些激酶在PD发生中的作用至今仍未阐明。     

微小RNA在帕金森病中调节α-突触核蛋白表达的研究进展

α-突触核蛋白在帕金森病及其他突触核蛋白病的发病中起到了至关重要的作用,对其表达的调控有可能阻止帕金森病的发病及进展。近期研究发现,微小RNA可在转录后水平上通过直接作用于α-突触核蛋白mRNA的3'非翻译区或间接调节帕金森相关基因的表达,来调节α-突触核蛋白的表达水平。因此,微小RNA有望成为帕金森病治疗的新靶点。     

α-突触核蛋白与帕金森病的研究现状

帕金森病是一种常见于老年人的慢性神经退行性疾病。α-突触核蛋白的异常堆积形成的路易小体是该疾病发病机制的核心要素，与帕金森病的发生发展密切相关。本文主要从与α-突触核蛋白相关的寡聚体神经毒性、线粒体功能障碍、蛋白质降解紊乱、分子伴侣介导的自噬以及靶向治疗等方面进行综述，介绍近年来α-突触核蛋白与帕金森病关系研究现状，以期为深入研究帕金森病的发病机制和治疗途径提供参考。     

α-突触核蛋白对帕金森病自我免疫病理的影响

帕金森病(PD)是一种以运动功能障碍为主要症状的神经退行性疾病。近年来研究表明PD也属于一种自身免疫病。PD患者脑内炎症反应的增加和血脑屏障的破坏可以促进中枢神经系统和外周免疫系统之间的相互作用。临床研究发现,患者中枢神经系统HLA-DR阳性反应性小胶质细胞增多,胶质细胞明显激活、T淋巴细胞浸润到中枢神经系统、脑脊液和脑组织中炎症因子显著升高,这些现象与患者体内T细胞对α-突触核蛋白产生的免疫反应密切相关。小胶质细胞摄取胞外的α-突触核蛋白后形成抗原肽-MHCⅡ表达在细胞膜上,通过抗原提呈作用影响活化的T细胞或是效应T细胞,活化的效应T细胞分泌不同的细胞因子作用于神经系统,发挥着致炎或抗炎作用。本文就α-突触核蛋白与小胶质细胞中MHCⅡ表达,以及T细胞的后续分化对PD自身免疫病理的影响进行综述,以期为PD的免疫疗法供更多的理论线索。     

五味子醇甲对APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠脑组织突触素、α-突触核蛋白表达的影响

目的观察五味子醇甲对APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠脑组织的影响及机制。方法选用APP/PS1双转基因小鼠作为痴呆小鼠模型,五味子醇甲灌胃给药(10 mg·kg-1.d-1),4周后行为学测试,行为学测试后,断头处死,制作脑组织石蜡切片。HE、尼氏染色检测小鼠脑组织的病理形态改变;免疫组织化学方法检测小鼠脑组织突触素(synaptophysin,SYP)、突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)的表达。结果五味子醇甲可改善APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠脑组织的病理形态改变,提高SYP表达,降低α-syn表达。结论五味子醇甲可通过减轻脑组织神经元变性、脱失,改善突触功能等途径起到防治老年性痴呆(Alzheimer'sdisease,AD)的作用。     

帕金森病模型大鼠中脑α-突触核蛋白增加

目的观察鱼藤酮对大鼠中脑α-突触核蛋白(α-SYN)的影响。方法SD大鼠长期低剂量皮下注射1.0mg·kg-1·d-1的鱼藤酮,建立帕金森病(PD)动物模型。采用旷场实验评价动物行为学改变,观察大鼠5min的活动情况。免疫荧光化学方法检测中脑部位TH阳性神经元数目的变化。免疫组织化学和Western blot方法检测中脑部位α-SYN的蛋白水平的改变。结果同对照组相比,鱼藤酮实验组动物5min的正中格停留时间明显延长(P<0.05),方格穿行次数明显减少(P<0.05),竖起时间和次数明显减少(P<0.01);中脑部位TH阳性神经元数目明显减少(P<0.05),α-SYN蛋白水平明显增加(P<0.05)。结论给予鱼藤酮能够使SD大鼠出现运动障碍,中脑部位TH阳性神经元数目减少,该现象可能与大鼠中脑部位α-SYN蛋白水平增加有关。     

建立以α-突触核蛋白损伤为靶点的细胞筛选模型

目的建立以α-突触核蛋白损伤为靶点筛选抗帕金森病创新药物的细胞模型。方法通过PCR方法扩增目的基因,分子克隆技术构建原核表达载体。融合载体转化至大肠杆菌诱导后表达重组α-突触核蛋白,亲和层析法纯化目的蛋白并通过蛋白免疫印迹和质谱技术进行鉴定,MTT法检测细胞存活率。结果α-突触核蛋白基因的c DNA片段与理论分子量大小一致,并成功克隆至载体p ET30a;测序正确的融合载体转化至大肠杆菌E.Coli.BL21(DE3)。转化子经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达α-突触核蛋白,通过改变温度、IPTG浓度及宿主菌的增殖状态等条件,获得高表达菌株;宿主菌的裂解液通过亲和层析方法获得纯化的α-突触核蛋白,纯化蛋白通过与不同抗体免疫印迹结果证明为α-突触核蛋白,质谱结果显示其分子质量为15.3ku,与理论分子质量15.5 ku基本一致。纯化的α-突触核蛋白刺激PC12细胞及原代神经元细胞后,细胞存活率明显下降,存活率的降低程度与α-突触核蛋白刺激浓度呈正相关性。结论成功建立了以α-突触核蛋白损伤为靶点的细胞筛选模型,可用于筛选具有抗帕金森病功能的创新化合物。     

纤维状α-突触核蛋白聚集体激活NLRP3炎症小体的机制研究

目的 探索纤维状α-突触核蛋白（α-synuclein）聚集体激活NLRP3炎症小体诱导神经炎症的机制。方法 构建纤维状α-synuclein聚集体,采用纤维状α-synuclein聚集体刺激BV-2小胶质细胞,检测白介素（IL）-1β、IL-18、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等相关炎症因子和NLRP3、caspase-1、ASC等蛋白的表达和mRNA水平评价NLRP3炎症小体激活;采用乳酸脱氢酶释放（LDH）实验检测细胞焦亡的发生。机制研究部分,检测Toll样受体（TLR）2和TLR4的激活,并分别加入TLR2和TLR4抑制剂C29和TAK-242检测对纤维状α-synuclein聚集体诱导的NLRP3炎症小体激活的影响及核转录因子-κB(NF-κB)的入核情况。结果 Westernblot和硫黄素T染色实验结果显示,纤维状α-synuclein聚集体成功制备。纤维状α-synuclein聚集体刺激BV-2小胶质细胞24 h后可激活NLRP3炎症小体,表现为IL-1β释放增加,相关蛋白NLRP3、caspase-1表达升高,N LR P3、ASC和I L-1β的m R NA...     

A53T转基因小鼠体内α-突触核蛋白改变研究

目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)A53T转基因小鼠体内α-syn的分布和修饰变化情况。方法采用α-syn A53T转基因小鼠作为帕金森病(parkinson's disease,PD)模型小鼠,应用Western blot实验方法来检测A53T转基因小鼠和野生型C57BL/6小鼠的胃、黑质和纹状体中α-syn的表达含量和异常聚集情况。结果相比于野生型小鼠,A53T转基因小鼠的胃、黑质和纹状体中α-syn(C-20)、硝基化α-syn(n-syn)表达均显著增加;胃和黑质中的磷酸化α-syn(p-syn)含量降低,纹状体中p-syn含量升高;黑质和纹状体中寡聚体形式的α-syn(5G4)含量升高,胃中含量降低。其中,n-syn在胃组织中含量最高,寡聚体形式的α-syn在黑质部位含量最高,p-syn在纹状体部位含量最高。结论A53T转基因小鼠体内α-syn总蛋白增加,而异常修饰和聚集化的α-syn在不同器官内的含量变化有所差异,提示A53T相关的α-syn病变有组织特异性分布特点。     

突触核蛋白基因rs356165多态位点与山西汉族人群帕金森病的关联分析

目的探讨SNCA基因rs356165多态性与山西地区散发性帕金森病(Parkinson′s disease,PD)的相关性,尤其是与发病年龄的相关性。方法采用病例-对照研究应用微测序技术对山西地区汉族人群rs356165多态性位点进行关联分析。结果检测了211例PD患者和256名在年龄、性别和种族相匹配的不相关的对照者。分析发现PD组和对照组rs356165等位基因、各基因型频率比较差异无统计学意义(P=0.553,P=0.452)。进一步将PD组按发病年龄分层后,与对照组相比,早发PD(early-onset PD,EOPD)或晚发PD(late-onset PD,LOPD)在基因型频率上比较差异无统计学意义(P=0.9,P=0.352)。结论 rs356165多态性与山西汉族人群中散发PD患者无相关性。     

α突触核蛋白作用核苷酸序列的体外筛选研究

目的体外筛选α突触核蛋白可能作用的核苷酸序列。方法根据碱基组成特征合成一系列的核苷酸序列,与α突触核蛋白-绿色荧光蛋白(α-synuclein-green fluorescent protein,α-syn-GFP)融合蛋白混合,采用圆二色谱分析色谱峰的变化情况。结果α突触核蛋白-绿色荧光蛋白融合蛋白混合入GC-box样核苷酸序列后导致色谱峰发生较大变化。结论α突触核蛋白转位进入细胞核后,可能通过作用于GC box样核苷酸序列,参与细胞核内的基因表达调控,从而发挥其生理或病理作用。     

α-硫辛酸对神经突触生长的促进作用

目的 探讨α-硫辛酸(LA)对神经突触生长的影响.方法 (1)N2a细胞接受作用浓度为100、300和500 μM的LA刺激,分别于刺激后24～60 h在显微镜下观察突触生长情况.未接受LA刺激的细胞作为对照组.每组4份.(2)大鼠原代海马神经元接受500 μM的LA刺激,分别于刺激后24和36 h在显微镜下观察突触生长情况.未接受LA刺激的细胞作为对照组.每组4份.结果 (1)LA作用于N2a细胞24 h后,各组突触生长细胞百分比分别为:对照组(1.85±0.6)%、100μM组(5.3±4.1)%、300μM组(7.8±4.3)%、500μM组(12.5±3.3)%;与对照组比较,只有500 μM LA组的突触生长细胞百分比显著增加(P<0.01).LA作用60 h后,各组突触生长细胞百分比分别为:对照组(12.5±3.7)%、100 μM组(23.2±6.2)%、300μM组(35.0±4.9)%、500μM组(67.6±4.3)%;三个LA处理组的突触细胞百分比均比对照组显著增加(P<0.01或P<0.05).(2)LA作用于大鼠原代海马神经元后24、36 h,突触长度较对照组分别增加了22.9%、30.5%(P<0.01).结论 LA对体外培养神经元具有显着促进神经元突触生长的生物学作用.     

以α-synuclein为靶点的抗帕金森病药物研究进展

帕金森病(Parkinsons disease,PD)是常见的神经退行性疾病,目前对PD的药物治疗仅限于改善症状,尚缺乏能够延缓疾病进程并具有神经保护作用的药物。α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)是一种位于神经元突触前末端、由140个氨基酸组成的蛋白质,它的突变、聚集和过度积累与包括PD在内的一系列神经退行性疾病密切相关。开发针对α-syn及其相关靶点的药物,可能是控制PD等突触核蛋白病进程的有效途径。该文主要从抑制α-syn表达和聚集、促进其解聚和降解、调节其修饰状态等方面,对以α-syn为靶点的药物研究进展进行综述。     

肠道菌群失衡在帕金森病α-突触核蛋白诱导小胶质细胞活化中的作用

越来越多证据表明, 肠道菌群与帕金森病(PD)的发生和进展密切相关。最近研究发现, 肠道菌群可以通过调控α-突触核蛋白(α-syn), 激活脑内小胶质细胞, 加重神经炎症, 导致PD患者的多巴胺神经元丢失。本文就PD发病机制中肠道菌群失衡如何经α-syn激活小胶质细胞导致神经炎症进行综述。     

帕金森病发病机制的研究进展

帕金森病（parkinson’s disease, PD）是一种常见的中枢神经系统变性疾病,其特征性病理变化是中脑黑质致密部（substantia nigra pars compact, SNpc）含黑色素的多巴胺（dopamine, DA）能神经元变性缺失,残存的神经元胞质内出现以聚集化的α-突触核蛋白（α-synuclein,α-syn）为主要成分的嗜酸性包涵体,即路易小体（lewy body, LB）。该病好发于50岁以上的中老年人,其主要临床特征为运动迟缓、静止性震颤、肌强直和姿势步态异常,其机制尚不十分清楚。本文旨在探讨PD的发病机制。