PGC-1ɑ在多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢组织的表达变化

  目的  探讨多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome, PCOS）大鼠模型及肥胖PCOS大鼠模型卵巢组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α（PGC-1α）的表达,以及PCOS 发生的可能机制。  方法  SD大鼠30只,随机分为对照组、PCOS组及肥胖PCOS组,PCOS两组大鼠每日一次予脱氢表雄酮〔DHEA,60 mg/（kg·d）〕溶于0.2 mL注射用大豆油中皮下注射,共21 d,制备PCOS模型,肥胖PCOS模型组大鼠在DHEA制模基础上加入高脂饮食,每组大鼠各10只。造模前（0 d）和造模后第22天称体质量,取腹主动脉血检测血清睾酮（testosterone,T）水平,取大鼠卵巢组织,HE染色观察组织形态学改变,免疫组织化学染色和Western blot检测PGC-1ɑ蛋白表达。  结果   造模前3组大鼠体质量差异无统计学意义,造模后第22天,大鼠增加的体质量以及大鼠血清 T 质量浓度,均为肥胖PCOS组>PCOS组>对照组,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。大鼠卵巢组织HE染色结果显示,对照组大鼠卵巢组织镜下可见不同发育时期的卵泡和少量黄体,颗粒细胞排列多为4～6层;PCOS组及肥胖PCOS组大鼠卵巢组织中未成熟的小卵泡数量明显增加,颗粒细胞1～3层排列、较松散,部分卵泡闭锁,肥胖PCOS组大鼠卵巢闭锁卵泡直径增大,颗粒细胞层数减少,卵母细胞消失等现象更明显。免疫组化染色结果显示,对照组大鼠卵巢组织PGC-1ɑ蛋白阳性表达主要分布于卵丘及颗粒细胞。从PGC-1ɑ蛋白在卵巢组织的表达平均灰度均值来看,PCOS组（0.53±0.06）和肥胖PCOS组（0.36±0.03）均低于对照组（0.75±0.03）,差异有统计学意义（P<0.05）,肥胖PCOS组PGC-1ɑ表达低于PCOS组（P<0.01）。Western blot检测结果与免疫组化染色结果一致。  结论  PGC-1ɑ表达降低与高脂环境下卵巢颗粒细胞损伤有关。PGC-1ɑ在卵巢卵泡的颗粒细胞中表达降低可能是PCOS发生发展的重要原因。     

养心2号方对慢性心力衰竭大鼠心肌组织ATP及MMP的影响

目的 研究养心2号方对慢性心力衰竭（CHF）大鼠心肌组织能量代谢的影响,探讨其治疗CHF的作用机制。方法 将45只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组（A组,n=6）及CHF组（n=39）,CHF组采用连续28d皮下注射异丙肾上腺素(ISO)方法建立慢性心力衰竭模型。造模成功后,将存活的CHF组大鼠随机分为模型组（B组,n=6）、卡维地洛组（C组,n=6）及养心2号组（D组,n=6）。A组、B组大鼠予蒸馏水灌胃,C组、D组分别予卡维地洛、养心2号方灌胃。各组均连续灌胃28d后,水合氯醛麻醉下取心肌组织,分别测定组织中三磷酸腺苷（ATP）浓度及线粒体膜电位（MMP）水平。结果 ①ATP浓度变化:B组ATP浓度下降,与A组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;D组ATP浓度升高,与B组及C组比较,差异有显著统计学意义（P＜0.01）;②MMP水平变化:B组MMP水平显著下降,与A组比较差异有显著统计学意义（P＜0.01）;D组、C组MMP水平均明显升高,与B组比较差异有显著统计学意义（P＜0.01）。结论 养心2号方能升高慢性心衰模型大鼠心肌组织的ATP浓度,同时升高MMP水平,具有明显改善心肌组织能量代谢的作用,该作用可能是养心2号方治疗CHF的作用机制之一。      

锡类散栓剂治疗大鼠溃疡性结肠炎的实验研究

目的　观察自制锡类散栓对大鼠实验性溃疡性结肠炎的疗效。方法　用免疫学方法制造溃疡性结肠炎大鼠模型,实验鼠随机分为４ 组：锡类散栓剂组（ Ａ 组） ;柳氮磺胺吡啶（ Ｓ Ａ Ｓ Ｐ） 栓剂组（ Ｂ 组） ;基质栓剂组（ Ｃ 组） ;空白对照组（ Ｄ 组） 。前３ 组各予中药栓、 Ｓ Ａ Ｓ Ｐ栓及基质栓塞肛,连用２ 周, Ｄ 组不作处理。第１６ 天处死大鼠,作结肠粘膜 Ｓ Ｏ Ｄ 活性测定及病理检查。结果　病理结果显示 Ａ、 Ｂ组治疗效果相仿,其结肠粘膜仅有充血水肿,明显好于 Ｃ组; Ｃ 组仍有糜烂及溃疡。 Ｓ Ｏ Ｄ 活性： Ａ 组明显高于其他组,差异有显著意义（ Ｐ＜ ０ ．０１） , Ｂ组与 Ｃ、 Ｄ 组比较无明显差异（ Ｐ＞ ０ ．０５） 。结论　自制锡类散栓对大鼠溃疡性结肠炎有较好的治疗作用,其作用机制可能是通过提高肠粘膜内 Ｓ Ｏ Ｄ 活性而实现的。     

五味子乙素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的：观察五味子乙素（SchB）对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对HSPA12B/PI3K/Akt信号通路的影响,并探讨其作用机制。方法：将130只SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注损伤模型组（模型组）、低剂量五味子乙素组（SchB 3 mg·kg^-1,SchB₁组）、中剂量五味子乙素组（SchB 10 mg·kg^-1,SchB₂组）和高剂量五味子乙素组（SchB 30 mg·kg^-1,SchB₃组）。假手术组大鼠不插栓线;模型组大鼠建立脑缺血2 h再灌注22 h模型;SchB₁、SchB₂和SchB₃组分别用不同剂量的SchB预先给药7 d后再造模。神经功能缺损评分检测大鼠神经功能障碍情况,通过脑组织含水量的测定检测脑组织水肿情况,甲苯胺蓝染色检测脑组织形态学改变,ELISA法检测脑组织匀浆中核因子kappa B（NF-κB）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1（IL-1）和白细胞介素6（IL-6）水平,Western blotting法检测脑组织中热休克蛋白A12B（HSPA12B）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）和磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（p-Akt）表达水平。结果：与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分明显升高（P<0.01）,脑组织含水量升高（P<0.01）,脑组织结构疏松,间质出现水肿,NF-κB、TNF-α、IL-1和IL-6水平升高（P<0.01）,HSPA12B和p-Akt蛋白表达水平降低（P<0.01）;与模型组比较,SchB₁、SchB₂和SchB₃组大鼠神经功能评分明显降低（P<0.01）,SchB₂和SchB₃组脑组织含水量减少（P<0.05）,神经细胞水肿减轻,空泡减少,NF-κB、TNF-α、IL-1和IL-6水平降低（P<0.05或P<0.01）,SchB₂和SchB₃组HSPA12B蛋白表达水平升高（P<0.05）,SchB₁、SchB₂和SchB₃组p-Akt蛋白表达水平升高（P<0.01）。结论：SchB对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其机制可能与调控HSPA12B/PI3K/Akt信号通路、抑制再灌注时炎症反应对神经细胞的损伤有关。     

睾酮联合hCG诱导大鼠多囊卵巢综合征模型的实验研究

目的：研究皮下注射睾酮及人绒毛膜促性腺激素（hCG）是否可制造出理想的多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）大鼠模型。方法：对青春期前大鼠持续皮下注射睾酮及hCG,观察发情周期、体重、睾酮及卵巢组织病理学变化。结果：5周、11周后PCOSI组、II组大鼠血清睾酮升高（P〈0.01）;卵巢呈典型多囊样改变;阴道开口日龄提前（P〈0.01）;发情周期紊乱;体重增加（P〈0.01）。13周后PCOSI组血清睾酮回落至正常水平（P〉0.05）,同时伴有囊性卵泡数量的减少,并出现黄体。结论：对青春期前大鼠持续皮下注射睾酮及hCG可成功诱导出PCOS动物模型,其具有血清性激素改变及卵巢多囊样变等特点,适用于观察具有短期疗效的药物。     

BDNF 及其受体在多囊卵巢综合征大鼠中的表达?

目的：研究脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体基因在来曲唑诱导的多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型卵巢组织中的定量表达。方法将 SD 大鼠分成两组,模型组20只,对照组20只,每日定时称量大鼠体质量并观察两组大鼠的体质量变化。应用来曲唑诱导大鼠 PCOS 模型,放射免疫法测定血清性激素水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察卵巢组织学变化,实时定量荧光 PCR 法检测 BDNF 及 TrkB、p75基因的表达。结果模型组增加的体质量显著高于对照组(P <0.01)。与对照组比较,模型组血清睾酮、促黄体生成激素、促卵泡激素水平显著增高,雌二醇、孕酮水平显著降低,差异均有统计学意义(P <0.05)。模型组卵巢体积增大,囊状扩张卵泡明显增多,黄体数量明显减少。模型组卵巢组织中 BDNF mRNA 和 p75 mRNA 水平显著高于对照组(P <0.05),而 TrkB mRNA 水平显著低于对照组(P <0.05)。结论卵巢组织内 BDNF/TrkB/p75表达水平的变化可能与 PCOS 卵泡发育障碍相关。     

四物汤改善多囊卵巢综合征大鼠卵巢功能实验研究

目的 观察四物汤(Siwu tang,SWT)对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,P-COS)大鼠动情周期、卵巢形态学及血清激素水平的影响.方法 选取SPF级雌性Wistar大鼠25只,随机分为对照组、模型组、SWT低剂量组、SWT高剂量组和二甲双胍组,每组5只.除对照组外,各实验...     

厄贝沙坦对糖尿病大鼠心肌损伤中MAPKs信号通路及相关因子的影响

目的观察厄贝沙坦在糖尿病大鼠心肌损伤中发挥的作用,并探讨其对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPKs)信号通路及其相关因子表达影响。方法雄性SD大鼠50只,随机分为糖尿病4周(DM4W)组、糖尿病8周(DM8W)组、糖尿病8周+厄贝沙坦(DM8W+Ir)组、对照(Con)组、高糖高胆固醇饮食(HC)组,各10只。复制2型糖尿病大鼠模型成功后,DM8W+Ir组给予厄贝沙坦溶液灌胃干预;饲喂第4周时,处死DM4W组大鼠并留取心脏组织标本;饲喂8周后,处死剩余组大鼠。比较各组大鼠空腹血糖、体质量、心体比和左心室质量指数;取大鼠离体心肌行Masson染色观察心肌细胞纤维化改变;ELISA法检测心肌细胞内炎症细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-1表达水平;Western blotting法检测心肌组织丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(mitogen-activated protein kinase phosphatase-1,MKP-1)、P38丝裂原激活蛋白激酶(P38 mitogen-activated protein kinase,P38MAPK)、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-related kinases,P-ERK1/2)蛋白表达水平。结果HC组大鼠空腹血糖、体质量、心体比、左心室质量指数与Con组差异均无统计学意义(P>0.05),IL-1β、IL-6、IL-1表达水平和MKP-1、P38MAPK、P-ERK1/2蛋白表达与Con组差异亦均无统计学意义(P>0.05)。与Con组、HC组相比,各糖尿病组大鼠Masson染色心肌细胞明显纤维化改变;体质量减轻,心肌细胞内炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-1表达水平升高,心肌组织MKP-1蛋白表达降低,P38MAPK、P-ERK1/2蛋白表达升高(P < 0.05~P < 0.01);与DM4W、DM8W组比较,DM8W+Ir组大鼠IL-1β、IL-6、IL-1表达水平降低,MKP-1蛋白表达升高,P38MAPK、P-ERK1/2表达蛋白降低(P < 0.05~P < 0.01)。结论厄贝沙坦通过调控MAPKs信号通路发挥改善糖尿病心肌损伤的作用。     

淫羊藿苷对去卵巢大鼠骨质疏松症的保护作用及其机制

目的：观察淫羊藿苷对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响,并探讨其作用机制。方法：50只6月龄雌性大鼠,随机分为假手术组、模型组、阳性药组、低剂量和高剂量淫羊藿苷组,每组10只。阳性药组大鼠每周灌胃给予1 mg·kg^-1尼尔雌醇;低和高剂量淫羊藿苷组大鼠每天灌胃给予50和100 mg·kg^-1淫羊藿苷。手术摘除双侧卵巢建立骨质疏松动物模型,术后2周开始给药,给药12周后麻醉状态下腹主动脉取血处死大鼠,观察大鼠骨密度（BMD）、骨组织形态学、血清生化指标和细胞凋亡相关蛋白的变化。结果：与假手术组比较,模型组大鼠BMD降低（P<0.01）,血清中钙水平下降（P<0.05）,血清磷水平升高（P<0.05）,血清骨钙素（BGP）、血清碱性磷酸酶（ALP）、一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）水平明显降低（P<0.05或P<0.01）;与模型组比较,阳性药组和高剂量淫羊藿苷组大鼠BMD明显升高（P<0.01）,血清钙水平升高、血清磷水平下降（P<0.05）,BGP和ALP水平明显升高（P<0.05）。与假手术组比较,模型组皮质变薄,骨小梁宽度变窄,Bax和caspase-3表达水平上调（P<0.01）,Bcl-2表达水平下调（P<0.01）;与模型组比较,低和高剂量淫羊藿苷组大鼠可见骨皮质增厚,骨小梁宽度变宽,Bax和caspase-3表达水平下调（P<0.05或P<0.01）,Bcl-2表达水平上调（P<0.05或P<0.01）。结论：淫羊藿苷对去卵巢所致的大鼠骨质疏松症具有保护作用,该作用可能与抑制细胞凋亡有关。     

齐墩果酸预处理对大鼠肝脏缺血再灌注时糖原含量的影响

目的:探讨齐墩果酸(OA)预处理对大鼠肝脏缺血再灌注(IR)时糖原含量的影响及其意义.方法:128只雄性SD大鼠随机均分为假手术组(A组),IR组(B组),0.5%羧甲基纤维素钠组(CMC-Na)(C组),0.5%CMC-Na和OA的混悬液组(D组).术前D组以100mg/kg的OA混悬液,A、B组以相同容积水,C组以相同容积的单纯0.5%CMC-Na分别每日灌胃1次,连续7日.第8日建立70%肝脏IR(缺血60 min后行再灌注)模型,分别测定术前,再灌注0、3、6 h血清丙氨酸转移酶(ALT)活性、肝组织的糖原含量和乳酸值,并在光镜下观察肝组织病理学改变.结果:术前D组糖原含量分别高于其他各组,差异有显著性(P<0.05),再灌注0、3、6 h,B、C、D组糖原含量分别低于A组,差异有显著性(P<0.05),但D组糖原含量分别高于B和C组,差异有显著性(P<0.05).再灌注0 h D组乳酸值分别高于其他各组,差异有显著性(P<0.05);B和C组乳酸值分别高于A组,差异有显著性(P<0.05).再灌注3、6 h,B、C、D组ALT活性均高于A组,差异有显著性(P<0.05);D组ALT活性分别低于B和C组,差异有显著性(P<0.05);D组肝脏病理形态学改变分别较B、C组减轻.结论:OA预处理可增加大鼠肝脏的糖原含量,减轻肝脏IR时的损伤,其机制可能与增加IR时的能量供给有关.     

腰段连续硬膜外阻滞对大鼠妊娠期高血压疾病防治作用的研究

目的:观察连续硬膜外阻滞对大鼠妊娠期高血压疾病的防治作用。方法:Wistar大鼠40只复制妊娠期高血压疾病模型,分为4组,于妊娠14d开始,A组皮下注射生理盐水;B组皮下注射左硝基精氨酸甲酯(L-NAME);C组硬膜外腔置管,但不给药;D组硬膜外腔注入布比卡因。监测妊娠13,20d的体质量、食量、尿量、入水量;从妊娠的13d起,应用鼠尾动脉仪每日监测血压;以磺柳酸法检测孕鼠第13,20日尿蛋白浓度;硝酸还原酶法检测子宫、胎盘组织的一氧化氮(NO)含量。结果:孕20dB、C组与A、D组比较体质量增加(P<0.01),食量下降(P<0.01),入水量无差别(P>0.05),尿量下降(P<0.01);孕20dB、C组与A、D组比较收缩压、心率均显著增高(P<0.01),A组与D组比较心率显著增快(P<0.01);孕20dB、C、D组与A组比较尿蛋白含量明显增加(P<0.01),D组与B、C组比较明显减少(P<0.01);孕20dB、C组与A、D组比较存活率明显下降(P<0.01);孕20dA、D组与B、C组比较NO浓度明显增加(P<0.01)。结论:腰段连续硬膜外阻滞可能对大鼠妊娠期高血压疾病具有防治作用。     

内脏脂肪素和二甲双胍对多囊卵巢综合征大鼠胰岛素抵抗和生殖内分泌的治疗作用

目的比较内脏脂肪素（visfatin）和二甲双胍对多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠胰岛素抵抗及生殖内分泌紊乱的治疗作用,为
visfatin进一步应用于PCOS治疗的临床研究提供理论依据。方法40只SD大鼠随机平均分为A、B、C、D组4组,A、B、C三组
采用DHEA造模法建模,通过连续阴道液涂片及血清学检测判断建模成功与否,A、B组为实验组,C组为PCOS建模对照组,D
组为空白对照组。建模成功后,A组大鼠予visfatin 10 μg/只单次给药,B组大鼠予二甲双胍14 mg/100 g体质量连续灌胃15 d。
干预前后采血测定T、LH、FSH、FINS 及OGTT各时段血糖,并计算HOMA-IR指数及LH/FSH 比值,最后剖取卵巢行病理切
片。结果（1）干预前后对比,A、B组大鼠血FINS、FPG、T、HOMA-IR及OGTT各时段血糖均显著降低（P<0.05）;（2）干预后,A
组和B组中分别有8只（80%）及7只（77.8%）大鼠恢复规律的发情周期,均可见正常卵泡的发育;（3）visfatin与二甲双胍在改善
PCOS大鼠胰岛素抵抗及高雄激素血症方面的疗效相同。结论visfatin和二甲双胍均能改善PCOS大鼠的胰岛素抵抗及高雄
激素血症,并能促进其规律动情周期的建立及正常卵泡的发育,且两者疗效相同。
     

来曲唑配合高脂膳食诱导胰岛素抵抗多囊卵巢综合征大鼠代谢表型的实验研究

目的  建立来曲唑及高脂饲料诱导的大鼠多囊卵巢综合征（PCOS）胰岛素抵抗（IR）动物模型,探讨其生殖内分泌异常及代谢表型特征。方法  将24只3周龄雌性SD大鼠随机分为PCOS-IR组、PCOS组、高脂组、对照组,每组6只。PCOS-IR组予高脂饲料喂养12周,第6周龄时开始每日灌胃来曲唑羧甲基纤维素钠（CMC-Na）溶液,连续9周;PCOS组常规饲料喂养12周,第6周龄时开始每日灌胃来曲唑CMC-Na溶液,连续9周;高脂组予高脂饲料喂养12周,第6周龄时开始每日灌胃0.5%CMC-Na溶液,连续9周;对照组常规饲料喂养12周,第6周龄时开始每日灌胃0.5%CMC-Na溶液,连续9周。观察体重和卵巢组织学变化,测定血脂水平、糖耐量、胰岛素耐量、空腹血糖（FPG）和空腹胰岛素（FINS）浓度,并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。结果  PCOS-IR组和PCOS组卵巢呈多囊样改变,卵巢闭锁卵泡增多,闭锁卵泡的直径较大,颗粒细胞层数有所减少,未见黄体分布;高脂组及对照组卵巢分布有各级卵泡,可见较多黄体分布。与对照组比较,PCOS-IR组的体重增加（P =0.000）,总胆固醇升高（P <0.05）,低密度脂蛋白升高（P <0.01）,糖耐量曲线下面积（AUC）增加（P <0.05）,胰岛素耐量AUC增加（P <0.01）,FINS升高（P <0.01）,HOMA-IR升高（P <0.05）。结论  来曲唑合并高脂膳食可成功诱导胰岛素抵抗PCOS大鼠典型的代谢表型。

     

双歧杆菌对2型糖尿病大鼠血浆酪酪肽和胰岛素抵抗的影响

目的观察双歧杆菌对2型糖尿病（T2DM）大鼠血浆酪酪肽（PYY）和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）的影响。方法30只周龄为9周SD雄性大鼠链脲佐菌素（STZ）造模后,根据双歧杆菌灌胃剂量分成4组:正常对照组（N组）、糖尿病组（T2DM组）、高剂量组和低剂量组,双歧杆菌连续灌胃6周后,测所有大鼠空腹血糖（FBS）,处死后取血浆检测PYY、糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹胰岛素（FINS）、血脂,计算HOMA-IR,比较4组大鼠上述指标的差异。结果高剂量组和低剂量组HbA1c、FBS、FINS、HOMA-IR和三酰甘油低于T2DM组（P < 0.01）,但高于N组（P < 0.05~P < 0.01）;高剂量组和低剂量组PYY高于T2DM组（P < 0.01）,但低于N组（P < 0.01）,高剂量组和低剂量组上述指标差异均无统计学意义（P>0.05）,PYY和HOMA-IR呈负相关（r=-0.783,P < 0.01）。结论双歧杆菌可以降低T2DM大鼠HbA1c、FBS、FINS、TG和HOMA-IR,升高PYY。     

红景天苷对不育症大鼠睾丸生精细胞增殖凋亡的影响

目的 探讨红景天苷对不育症大鼠睾丸生精细胞增殖凋亡的影响。方法 从60只大鼠中按随机数字表法取15只大鼠为对照组(A组),剩余45只建立不育症模型并根据随机数字表法分为B组、C组、D组,各15只。C组、D组分别以50、100 mg/kg红景天苷灌胃,A组、B组等量生理盐水灌胃。检测血清睾酮、卵泡刺激素、黄体生成素;酶联免疫吸附法(ELISA)检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA);苏木精-伊红(HE)染色法检测生精细胞形态学;免疫组化法测定增殖细胞核抗原(PCNA);TUNEL法检测生精细胞凋亡率;Western Blotting法检测脂肪酸合成酶(Fas)、脂肪酸合成酶配体(Fasl)、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)蛋白相对表达量。结果 与A组比较,B组、C组、D组SOD降低,B组C组>D组(均P<0.05)。与B组比较,D组睾丸细胞结构、生精小管萎缩、生精细胞脱落改善更显著。A组睾丸生精细胞PCNA百...     

基于“治未病”理论探讨电针对DOR大鼠Th1/Th2免疫平衡的影响

目的 基于“治未病”理论,探讨电针对雷公藤多苷诱导的卵巢储备功能减退(Diminished ovarian reserve, DOR)模型大鼠卵巢功能和Th1/Th2免疫平衡的影响。方法 将27只动情周期正常的雌性SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组和电针组,每组9只。模型组和电针组采用雷公藤多苷片混悬液按50 mg·kg^-1·d^-1连续灌胃14 d,每日1次,空白组每日给予1次等体积的生理盐水灌胃,连续14 d。电针组大鼠在灌胃1 h后,进行电针干预,选取“中脘”“关元”或双侧“肾俞”穴,2组穴位隔日交替,每日1次,每次10 min,连续14 d。电针参数设置为2/100 Hz疏密波(疏波与密波交替持续的时间各约1.5 s),电流强度为1.0 mA。每日采用阴道脱落细胞涂片观察大鼠动情周期;干预结束后,采用HE染色观察卵巢组织学形态;ELISA检测大鼠血清FSH、E₂、IL-4、IFN-γ含量;免疫组化、Western blot和qPCR分别检测大鼠卵巢组织中T-bet、GATA3蛋白及mRNA的表达情况;流式细胞术...     

白头翁皂苷B4对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织的保护作用及其机制

目的：探讨白头翁皂苷B4对慢性肾功能衰竭（CRF）大鼠氧化应激、炎症状态和肾组织中细胞凋亡相关蛋白表达的影响,阐明白头翁皂苷B4保护CRF大鼠肾组织的作用机制。方法：75只雄性SD大鼠分为对照组、模型组、阳性对照组、低剂量白头翁皂苷B4组和高剂量白头翁皂苷B4组。采用腺嘌呤连续灌胃21 d建立CRF大鼠模型。造模成功后,阳性对照组大鼠给予0.5 mg·kg^-1地塞米松,低和高剂量白头翁皂苷B4组大鼠分别灌胃给予1和2 mg·kg^-1白头翁皂苷B4,连续给药28 d,对照组和模型组大鼠灌胃给予等量生理盐水。采用生化分析仪检测大鼠血清中血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）水平,试剂盒法检测大鼠肾组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平,ELISA法检测大鼠肾组织中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,Western blotting法检测肾组织中磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）通路的激活及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2（Bcl-2）、B淋巴细胞瘤2相关X蛋白（Bax）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）蛋白表达水平。结果：与对照组比较,模型组大鼠血清中Scr和BUN水平明显升高（P<0.01）,正常肾小球和肾小体数量明显减少,肾组织中SOD活性降低（P<0.01）,MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α水平明显升高（P<0.01）,Bax和Caspase-3蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,磷酸化Akt（p-Akt）和Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。与模型组比较,阳性对照组、低和高剂量白头翁皂苷B4组大鼠血清中Scr和BUN水平降低（P<0.01）,正常肾小球和肾小体数量明显增加,肾组织中SOD活性升高（P<0.01）,MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α水平明显降低（P<0.01）,Bax和Caspase-3蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,p-Akt和Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。结论：白头翁皂苷B4可通过降低血清中Scr和BUN水平,降低氧化应激反应,减少炎症因子的释放,激活肾组织PI3K/Akt通路,对肾组织损伤起到保护作用。     

脂肪间充质干细胞移植对环磷酰胺诱导的大鼠卵巢功能损伤的影响

目的：探讨脂肪间充质干细胞对化学药物治疗(以下简称化疗)药物环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导的卵巢功能损伤的影响及其作用机制。方法：从雌性SD大鼠脂肪组织中分离脂肪间充质干细胞并进行体外培养,将其分为空白对照组和CTX组,每组15只;再选取45只正常动情周期的SD大鼠,用CTX 75 mg/kg腹腔注射给药1次的方式建立模型,再随机分为对照组(不再予其他处理,A组)、尾静脉注射组[尾静脉注射脂肪间充质干细胞0.6 mL(6×105个细胞),B组]和卵巢原位注射组[经卵巢原位注射脂肪间充质干细胞40 µL(每侧20 µL,2×104个细胞),C组],每组15只。比较A,B,C 3组大鼠用药前后生存质量、体重变化;ELISA法测定血清卵泡刺激素、雌二醇水平;HE染色观察卵巢组织及卵泡计数;免疫组织化学法、real-time PCR法及蛋白质印迹法测定骨形态发生蛋白-15(bone morphogenetic protein 15,BMP-15),Bcl-2和Bax的表达;TdT介导的脱氧尿嘧啶缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测A,B,C 3组大鼠卵泡细胞凋亡率。结果：尾静脉注射或卵巢原位注射脂肪间充质干细胞后,与A组比较,B组和C组大鼠生存质量提高,移植前后的体重增长值明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.01);与A组比较,B组大鼠血清雌二醇水平明显升高,卵泡刺激素水平明显下降(均P<0.01),C组大鼠血清雌二醇水平升高,卵泡刺激素水平明显下降(分别P<0.05,P<0.01);B组和C组大鼠卵巢组织切片HE染色见颗粒细胞层明显增多,黄体数量增多,各级卵泡计数均增加,可见多个新生卵泡及成熟的卵母细胞;与A组比较,B组大鼠的原始卵泡数、窦状和排卵前卵泡数以及总卵泡数均明显增加,窦前卵泡数也增加(分别P<0.01,P<0.05),C组大鼠的原始卵泡数、窦前卵泡数、窦状和排卵前卵泡数以及总卵泡数均明显增加(均P<0.01);与A组比较,B组和C组大鼠卵巢组织BMP-15和Bcl-2的表达明显增多,Bax的表达明显减少(均P<0.01),大鼠卵巢颗粒细胞的凋亡率明显降低(P<0.01);B组与C组之间比较,大鼠体重增长值,血清雌二醇及卵泡刺激素水平,各级卵泡计数,BMP-15,Bcl-2及Bax的表达水平,卵巢颗粒细胞凋亡率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论：脂肪间充质干细胞移植能够有效地修复CTX化疗所致的卵巢功能损伤,该作用可能是通过抑制颗粒细胞的线粒体凋亡途径实现的。     

绿原酸通过TLR4/NF-κB信号通路调控脓毒症大鼠肠上皮细胞屏障功能的研究

目的 观察绿原酸通过调控TLR4/NF-κB信号通路减轻脓毒症(sepsis)大鼠肠道氧化应激损伤、改善肠上皮细胞屏障功能的作用。方法 选取SD大鼠60只,采用随机数字表法分成假手术组、模型对照组、绿原酸(低、高剂量)组,每组15只。术后24 h,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-10;比色法测定小肠组织中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;采用Western blotting法测定小肠组织中的蛋白表达[密封蛋白-1(Claudin-1)、闭锁连接蛋白-1(ZO-1)及TLR-4/NF-κB通路相关的蛋白]。结果 与模型对照组[(4.45±0.14)分]比较,低剂量组[(4.17±0.22)分]、高剂量组[(1.95±0.08)分]Chiu评分明显下降(t=4.159、60.048,均P<0.001);高剂量组血清TNF-α、IL-6、IL-10水平及小肠组织中NO、MDA含量均显著降低(均P<0.05),SOD含量、Claudin-1、ZO-1蛋白表达量及MyD88...     

法舒地尔对去势大鼠阴道平滑肌RhoA/Rho激酶的影响

目的:研究法舒地尔对去势大鼠阴道平滑肌RhoA/Rho激酶的影响。方法:30只10周龄雌性SD大鼠随机均分成:对照4周组(A组)、对照6周组(B组)、去势4周组(C组)、去势6周组(D组)、去势+法舒地尔治疗4周组(E组)和去势+法舒地尔治疗6周组(F组)。法舒地尔治疗4、6周测定各组大鼠血清雌二醇(E2)水平,并取阴道平滑肌组织测定ROCKⅠ、ROCKⅡ的表达。结果:血清E2水平C组、E组较A组显著降低(P<0.01),D组、F组较B组显著降低(P<0.01),C、D、E、F组之间无统计学意义(P>0.05)。阴道平滑肌细胞ROCKⅠ、ROCKⅡ的表达C组较A组、E组显著升高(P<0.05),D组较B组、F组显著升高(P<0.05),A、B、E、F组之间无统计学意义(P>0.05)。结论:法舒地尔可抑制去势大鼠阴道平滑肌RhoA/Rho激酶高表达。