海马注射缓缴肽或环胞菌素A导致大鼠行为异常及Alzheimer样Tau蛋白异常磷酸化

Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｐａｉｒｅｄｈｅｌｉｃａｌｆｉｌａｍｅｎｔｓ (ＰＨＦｓ)ｉｎｓｐｅｃｉｆｉｃｎｅｕｒｏｎｓｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｈａｌｌｍａｒｋｓｏｆｔｈｅＡｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅｄ (ＡＤ )ｂｒａｉｎａｎｄｔｈｅｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ (ＭＡＰ) ,Ｔａｕ ,ｉｓｔｈｅｍａｊｏｒｐｒｏｔｅｉｎｏｆＰＨＦｓ 1,2 　ＴｈｅｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＴａｕｉｓｒｅｇｕｌａｔｅｄｂｙｉｔｓｄｅｇｒｅｅｏｆｐｈ…     

蛋白激酶及蛋白磷酸酯酶活性改变对阿尔茨海默病样神经原纤维变性的影响

目的了解蛋白激酶与蛋白磷酸酯酶活性改变对阿尔茨海默病(AD)样神经原纤维变性的影响。方法选择SD大鼠24只,随机分为实验组和对照组,各12只。实验组采用脑立体定位注射技术,向海马区注射20 mmol/L缓激肽(BK)和4.2 mmol/L环孢菌素A(CSA)各0.2 mL,对照组注射人工脑脊液0.4 mL,电跳台法测试大鼠学习与记忆状况;免疫印迹法检测Tau蛋白质磷酸化状况。结果实验组鼠出现错误次数多于对照组(t=3.362,P<0.01),受电击时间长于对照组(t=4.537,P<0.01)。实验组海马区12E8显色强于对照组,Tau-1显色弱于对照组。结论BK和CSA可诱发Tau蛋白多个位点出现AD样异常磷酸化,导致动物学习记忆障碍。     

大鼠侧脑室单次注射Forskolin引起tau蛋白异常磷酸化和记忆障碍持续时间及其两者的关系

目的探讨侧脑室单次注射Forskolin后,大鼠海马组织中tau蛋白异常磷酸化和记忆障碍持续时间及两者关系。方法向大鼠侧脑室内单次注射80μmol/L的cAMP-依赖性蛋白激酶A(PKA)激动剂-Forskolin40μl,用特定抗体通过免疫印迹和免疫组织化学方法检测大鼠海马tau蛋白磷酸化水平的改变,同时用Morris水迷宫法检测大鼠空间记忆能力。结果侧脑室注射Forskolin后,大鼠海马tau蛋白磷酸化水平在24、48和72h均有显著升高(P<0·05),在48h达到高峰(P<0·01),在72h呈恢复趋势;大鼠在注射后24、48和72h均有空间记忆障碍(P<0·05),这种记忆障碍在48h最明显(P<0·01),在72h时亦呈明显恢复趋势;大鼠空间记忆保留障碍与海马tau蛋白PHF-1位点的磷酸化程度呈正相关(r=0·97,P<0·05),与Tau-1位点的非磷酸化程度呈负相关(r=-0·963,P<0·05),与pS214位点的磷酸化程度无相关性(r=0·705,P>0·05)。结论大鼠侧脑室单次注射Forskolin只在一定时间内引起tau蛋白异常磷酸化和动物记忆障碍,且二者的改变趋势存在一定相关性。     

神经肽Y基因转染对大鼠癫痫发作及海马磷酸化Tau蛋白的影响

目的 探讨神经肽Y基因（rAAV2/1-hNPY-EGFP）转染对大鼠癫痫发作行为、脑电图（electroencephalogram,EEG）及其海马磷酸化Tau蛋白的影响.方法 将实验组动物分为3组：对照组、KA组及NPY组,每组24只.NPY组向侧脑室注射10μl的rAAV2/1-NPY-EGFP（滴度为5×1011v.g./ml）,KA组向侧脑室注射等量生理盐水.对照组在海马CA3区及侧脑室注射等量生理盐水.利用视频监视系统观察注射后2周和4周各组大鼠癫痫发作情况、发作潜伏期以及EEG,同时应用Western blotting方法检测大鼠海马中磷酸化Tau蛋白的表达.结果 （1）2周时NPY组大鼠行为学发作级别[（12.13±8.06）分]与KA组相比[（12.10±8.07）分]无明显差异（P＞0.05）,4周时NPY组大鼠行为学发作级别降低[（6.06±3.78）分]、发作潜伏期延长[（79.06± 8.83） min]、脑电图癫痫波放电频率减少、波幅降低（P＜0.05）,对照组无发作;（2）与对照组相比,KA组和NPY组大鼠在2周和4周时磷酸化Tau蛋白表达水平均明显增加（P＜0.05）;与KA组相比（1.87±0.23 RQ value）,4周时NPY组大鼠海马组织中磷酸化Tau蛋白表达水平（1.15±0.16 RQ value）显著降低（P＜0.05）.结论 磷酸化Tau蛋白在癫痫大鼠海马组织中的表达变化与癫痫发作密切相关;rAAV2/1-hNPY-EGFP基因转染可以明显减轻大鼠癫痫发作级别,并可延长发作潜伏期.rAAV2/1-hNPY-EGFP基因转染可能通过抑制KA诱导的大鼠癫痫发作时磷酸化Tau蛋白的表达而发挥抗癫痫作用.     

Inhibition of tau hyperphosphorylation and beta amyloid production in rat brain by oral administration of atorvastatin

Background Alzheimer＇s disease （AD） is a neurodegenerative disorder and the leading cause of dementia in the elderly. The two hallmark lesions in AD brain are deposition of amyloid plaques and neurofibrillary tangles （NFTs）. Hypercholesteremia is one of the risk factors of AD. But its role in the pathogenesis of AD is largely unknown. The aim of this study was to investigate the relationship between hypercholesteremia and tau phosphorylation or β-amyloid （Aβ）, and evaluate the effect of atorvastatin on the level of tau phosphorylation and Aβ in the brains of rats fed with high cholesterol diet. Methods Sprague-Dawley （SD） rats were randomly divided into normal diet control group, high cholesterol diet group, and high cholesterol diet plus atorvastatin （Lipitor, 15 mg.kg^-1 .d^-1） treated group. Blood from caudal vein was collected to measure total cholesterol （TC）, triglyceride （TG）, low density lipoprotein （LDL） and high-density lipoprotein （HDL） at the end of the 3th and the 6th months by an enzymatic method. The animals were sacrificed 6 months later and brains were removed. All left brain hemispheres were fixed for immunohistochemistry. Hippocampus and cerebral cortex were separated from right hemispheres and homogenized separately. Tau phosphorylation and Aβ in the brain tissue were determined by Western blotting （using antibodies PHF-1 and Tau-1） and anti-Aβ40/anti-Aβ42, respectively. Results We found that high cholesterol diet led to hypercholesteremia of rats as well as hyperphosphorylation of tau and increased Aβ level in the brains. Treatment of the high cholesterol diet fed rats with atorvastatin prevented the changes of both tau phosphorylation and Aβ level induced by high cholesterol diet. Conclusions Hypercholesteremia could induce tau hyperphosphorylation and Aβ production in rat brain. Atorvastatin could inhibit tau hyperphosphorylation and decrease Aβ generation. It may play a protective role in the patho-process of hypercholesteremia-induced neurodegeneration in the brain.     

海洛因成瘾大鼠海马区PKA、tau蛋白磷酸化、成对螺旋纤维的改变

目的探索海洛因成瘾大鼠海马区蛋白激酶A（cAMP—dependent protein kinase，PKA）、tau蛋白磷酸化以及成对螺旋纤维（PHF）的改变。方法SD大鼠皮下渐增注射海洛因（1mg·kg^-1·d^-1逐日递增Img·kg^-1·d^-1至20·kg^-1·d^-1维持10d）建立海洛因成瘾大鼠动物模型。在海洛因成瘾大鼠海马区用免疫组织化学方法针对抗体PKA-α（cAMP—dependent proteinkinase—α）、PICA—β（CAMP—dependent protein kinase—p）、tau（$396）、PI-IF—l（paried helical filaments-1）进行显色。结果海洛因成瘾组大鼠脑内PKA一仪、PKA—β、tau（S396）、PHF—1（paried helical filaments-1）免疫染色均明显高于对照组。结论海洛因成瘾大白鼠脑内海马部位存在PKA含量升高、tau蛋白396位点异常磷酸化以及PHF形成。     

心脑宁胶囊对血管性痴呆大鼠认知功能及海马区Aβ和Tau蛋白表达的影响

目的：观察心脑宁胶囊对血管性痴呆（VD）大鼠认知功能及海马区β淀粉样蛋白（β-amyloid peptide, Aβ）和Tau蛋白表达情况的影响,探讨心脑宁胶囊的脑保护作用。方法采用双侧颈总动脉永久结扎法制备VD动物模型,设立假手术组、模型组、心脑宁胶囊治疗组（心脑宁组）。以Morris水迷宫试验检测大鼠的逃避潜伏期以评价认知功能,采用免疫组化法测定大鼠海马区Aβ和Tau蛋白的表达。结果术后各时间点模型组与假手术组相比,大鼠的逃避潜伏期延长（P<0.01）,Aβ和Tau蛋白表达明显增加（P<0.01）;心脑宁组与模型组相比大鼠的逃避潜伏期明显缩短（P<0.05）,Aβ和Tau蛋白表达减少（P<0.01）。结论 VD大鼠海马区Aβ和Tau蛋白表达增加,给予心脑宁胶囊治疗后,海马区Aβ和Tau蛋白的表达减少,在一定程度上改善了VD大鼠的认知功能障碍。     

丙泊酚对高脂血症大鼠空间学习记忆功能的影响及机制

目的：研究丙泊酚对高脂血症大鼠空间学习记忆功能和海马神经元Tau蛋白磷酸化表达水平及老年斑沉积的影响.方法：将成模大鼠随机分成4组：P10、P30、P75组分别腹腔注射丙泊酚（10,30,75 mg/kg·d-1）,对照组（G组）给予生理盐水75 mg/kg·d-1,连续注射5d.Morris水迷宫测试大鼠空间学习记忆功能.取海马组织行刚果红和免疫组织化学染色,ipwin32软件分析Tau蛋白磷酸化表达阳性细胞平均光密度值.结果：定位航行实验及附加实验：P30、P75组逃避潜伏期较P10、G组明显延长（P＜0.05）;空间搜索实验：P30、P75组穿越平台次数较P10、G组明显减少（P＜0.05）;免疫组织化学染色：P30、P75组平均光密度值与P10、G组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.刚果红染色：P30、P75组可见老年斑沉积物.结论：镇静或麻醉剂量丙泊酚可损害高脂血症大鼠空间学习记忆能力.其机制可能与海马老年斑沉积增多和Tau蛋白过度磷酸化相关.     

甲硫氨酸维生素B_1对妊娠期肝内胆汁淤积症模型大鼠的治疗作用

目的探讨甲硫氨酸维生素B1针（甲维比）对妊娠期肝内胆汗淤积症（intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP）模型大鼠的治疗作用。方法妊娠大鼠48只,随机分为正常妊娠组、模型组、甲维比高剂量组2ml/（kg·d）、甲维比中剂量组1ml/（kg·d）、甲维比低剂量组0.5ml/（kg·d）、腺苷蛋氨酸组100mg/（kg·d）。从其妊娠第12天开始肌内注射苯甲酸雌二醇2.5mg/（kg·d）,连续6d,同时给药1周。正常妊娠组与模型组均肌注等容积蒸馏水。检测大鼠血清总胆红素（TBIL）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、总胆汁酸（TBA）、雌二醇（E2）水平;并比较各组大鼠肝脏组织病理变化;运用免疫组化法测定大鼠肝组织Th1细胞因子及核因子NF-κB的表达。结果甲维比高、中剂量治疗组及腺苷蛋氨酸组均较模型组大鼠流产率、胚胎致死率显著降低（P〈0.01）,大鼠血清TBIL、ALT、TBA、E2水平也降低（P〈0.01）,Th1细胞因子及核因子NF-κB的表达下调（P〈0.01）,大鼠的肝脏病理变化得到较大改善。结论甲维比可通过降低模型大鼠肝组织Th1细胞因子及核因子NF-κB的表达对ICP模型大鼠发挥明显的治疗作用。     

神经元移植与鼠颞叶癫痫海马γ-氨基丁酸能神经元的变化

目的探讨脂肪干细胞(ADSCs)转化神经元移植前后大鼠颞叶癫痫海马γ-氨基丁酸(GABA)能神经元的变化及海马形态学改变。方法40只SD大鼠随机分为3组,移植组(n=15):海马内注射海人酸(KA)后,依据大鼠左侧海马CA3区坐标,立体定向将ADSCs转化神经元注入海马;移植对照组(n=15):海马内注射KA后,靶点内移植生理盐水;生理盐水对照组(n=10):海马内注射生理盐水后,不进行任何移植。比较手术前后大鼠海马GABA能神经元的变化以及海马形态学的改变。结果ADSCs转化神经元移植后,GABA能神经元较移植前显著增加(P<0.01)。移植对照组海马区神经元水肿数量较生理盐水对照组明显增多,细胞内胞质贫乏,细胞器数量减少,细胞核边界不规整;而移植组神经元水肿减轻,其余结构变化与生理盐水对照组差异不大;且术后8周较2周与生理盐水对照组的差异更小。结论ADSCs转化神经元移植对颞叶癫痫大鼠的神经元修复起到了良好的效果。     

Unilateral amyloid-β25-35 injection into the rat amygdala increases the expressions of aberrant tau phosphorylation kinases

Background Neuropathologically, Alzheimer disease （AD） is characterized by the presence of extracellular plaques enriched in β-amyloid peptides; however, the mechanism by which it results in the neurotoxicity is uncertain. The purpose of this study was to investigate whether it would prompt the progress of Alzheimer disease via enhancement of aberrant phosphorylated tau that results from its increased kinase gene expression. Methods Twenty-four male rats were divided into three groups, and each group had 8 rats： control, sham-operated, and Aβ25-35 injected AD model groups. AD rat models were created by unilateral injections of Aβ25-35 into the amygdala. The hyperphosphorylated tau protein was estimated by immunohistochemistry with paired helical filament-1 （PHF-1） antibody and paired helical filament-tau （AT8） antibody. The expressions of glycogen synthase kinase-3β （GSK-3β） and p38 mitogen-activated protein kinase （P38MAPK） mRNA were observed by in situ hybridization. Results Compared with the control and sham-operated groups, the evaluation of paired AT8 and paired helical filament-1 （PHF-1） in the cortexes and hippocampus of the AD model group showed the numbers of AT8 and PHF-1 positive cells, as well as the optical density （OD） values of the proteins were significantly higher （AT8： in CA2： 0.318±0.037 vs. 0.135±0.028, 0.136±0.031; in frontal cortex： 0.278±0.040 vs. 0.130±0.028, 0.190±0.037. PHF-1 ： in CA2： 0.386±0.034 vs. 0.139±0.010, 0.193±0.041; in frontal cortex： 0.395±0.050 vs. 0.159±0.030, 0.190±0.044, respectively, P 〈0.01）; the number of GSK-3β mRNA and P38MAPK mRNA positive cells of the AD model group, as well as the OD values, also increased significantly in the cortexes, hippocampus （GSK-3β-mRNA： in CA2：0.384±0.012 vs. 0.190±0.015, 0.258±0.064; in frontal cortex： 0.398±0.018 vs. 0.184±0.031, 0.218±0.049. P38MAPK mRNA： in CA2：0.409±0.038 vs. 0.161±0.041, 0.189±0.035; in frontal cortex： 0.423±0.070 vs. 0.160±0.032, 0.203±0.053, respectively, P 〈0.01）. Conclusion Unilateral injection of Aβ25-35 into the rat amygdala increases the generation of aberrant phosphorylated tau by increasing GSK-3β and PasMAPKgene expression, that accelerates the process of Alzhemer＇s disease.     

大鼠海马结构及其CCK神经元在学习记忆中的作用研究

目的通过毁损海马结构不同区域造成学习记忆减退模型,探讨海马结构及神经递质CCK神经元在学习记忆中的作用。方法SD大鼠48只,随机分成4组1双侧海马穹窿伞横断组;2海马CA3区锥体细胞KA损毁组;3实验对照组;4正常对照组。以大鼠被动回避反应和Morris水迷宫试验为指标测定实验动物学习记忆能力,采用免疫组织化学技术观察海马结构CCK神经元的变化。结果经两种方式毁损海马结构不同区域干扰海马传导通路后,大鼠学习记忆能力明显障碍。且经1~4W观察,学习记忆功能无明显恢复。在双侧隔海马伞横断组和海马CA3区锥体细胞KA损毁组均伴有CCK神经元质和量的改变,但以海马CA3区锥体细胞KA损毁组尤为突出,除表现为数量减少外,细胞的损伤性改变较双侧隔海马伞横断组明显。结论海马CA3区注入海人酸后引起的学习记忆障碍程度较海马穹窿伞横断所引起的严重。海马CA3区KA注射后除引起CCK神经元数量减少外,尚伴有CCK神经元的损伤,而双侧海马穹窿伞横断后CCK神经元改变主要是数量减少,神经元损伤不明显。海马功能的完整不仅依赖于结构的完整,同时也依赖于各种神经递质的参与和神经递质质和量的正常。     

p38MAPK信号通路在脓毒症大鼠海马区神经元自噬中的作用

  目的  探讨p38丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路在脓毒症大鼠海马区神经元自噬中的作用。  方法  通过盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture, CLP)建立大鼠脓毒症模型。SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(CLP组)、溶媒组(CLP+Veh组)、p38MAPK抑制剂组(CLP+SB203580组),每组分为3、6、12、24和48 h亚组;CLP+Veh组和CLP+SB203580组分别侧脑室注射1% DMSO 5 μL和0.1 mmol/L SB203580 5 μL,注射后30 min建立CLP模型,sham组仅翻看盲肠后关腹,未做其他处理。监测大鼠生命体征,包括平均动脉压(mean arterial pressure, MAP)和心率(heart rate, HR);神经行为学评分了解大鼠的脑损伤情况;大鼠脑海马区组织HE染色观察病理改变;透射电镜下观察大鼠脑海马区神经元自噬过程;Western blot检测海马区微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3, LC3)Ⅱ、LC3Ⅰ选择性自噬接头蛋白(p62/sequestosome-1, p62/SQSTM1)、MAPK激活蛋白激酶2(MAPK-activated protein kinase 2, MK-2)、磷酸化MK-2(phosphorylation MK-2, p-MK-2)的蛋白表达;免疫荧光染色观察大鼠海马区神经元LC3和p62/SQSTM1的表达。  结果  在不同时间点,CLP组大鼠MAP低于、HR高于sham组,以造模后12 h变化最明显;CLP组大鼠神经行为学评分最低,海马区组织病理改变明显,透射电镜下观察有较多自噬空泡形成。与CLP组比较,CLP+SB203580组大鼠神经行为学评分回升,海马区病理改变好转,透射电镜下自噬空泡中的包裹物降解;Western blot结果显示,与sham组比较,造模后CLP组大鼠海马组织LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ和p-MK-2/MK-2表达升高,p62/SQSTM1表达下降,前者至12 h达到高峰,后者至12 h达到谷底,CLP+SB203580组与其它组相比,在造模12 h时,大鼠海马组织LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和p-MK-2/MK-2表达升高,而p62/SQSTM1表达进一步下降(P＜0.05);免疫荧光法观察结果显示,海马区LC3和p62/SQSTM1在NeuN的定位及表达与Western blot所测得的结果一致。  结论  脓毒症大鼠抑制p38 MAPK信号通路,可以使自噬进一步激活,对海马区神经元起到保护作用。     

老年期痴呆同病异证3个典型证候Tau蛋白磷酸化位点的特异性研究

目的观察3个老年期痴呆病证结合典型证候模型的大鼠Tau蛋白磷酸化位点的情况,分析总结其磷酸化的特异性。方法间隔1周结扎并剪断左、右颈总动脉,之后腹腔注射D-半乳糖,建立老年期痴呆病大鼠模型,最后在疾病模型的基础上分别进行房劳水劳刺激、投喂高脂饲乳和低温环境刺激,建立3种病证结合(肾虚精亏证、痰浊阻窍证和寒凝血瘀证)的老年期痴呆大鼠模型,通过测定血脂、血流变、血清睾酮水平检查验证各组模型是否成功。随后通过蛋白免疫印迹的方法观察Tau各磷酸化位点在各证候模型中的不同。结果在Tau蛋白脯氨酸富集区,与病理组相比,痰浊阻窍证组主要在205和231位磷酸化水平显著增强,肾虚精亏证组主要在181、205、231位磷酸化水平显著增强,寒凝血瘀证组磷酸化水平增强主要发生在205、231、262位;在C末端区域,与病理组相比,痰浊阻窍证组在404位磷酸化水平显著升高,肾虚精亏证组在396和404位磷酸化水平均显著升高,寒凝血瘀证组两者的升高幅度最高。结论老年期痴呆各典型证候在Tau蛋白磷酸化位点上有特异性,揭示了同病异证的科学内涵。     

血浆激肽释放酶-激肽系统活化在大鼠佐剂性关节炎中的作用

目的：观察佐剂性关节炎( AA)大鼠血浆激肽释放酶-激肽系统( KKS)的活化情况,并探讨PKSI-527对大鼠关节炎及全身炎症的影响。方法采用弗氏完全佐剂建立AA大鼠模型,并通过测量足爪肿胀以及炎症反应评分的方法进行半定量评价。 ELISA法检测血浆中KKS相关指标血浆前激肽释放酶(PK)、高分子量激肽原(HK)及缓激肽(BK)的水平,实时荧光定量 PCR 检测外周血 BK 受体 B1R、B2R mRNA的表达情况。使用 PKSI-527腹腔内注射,观察抑制剂对AA大鼠KKS活化以及关节肿胀和全身炎症的改变情况。结果 AA大鼠表现继发性足爪肿胀、关节和全身的炎症反应,与正常大鼠比较,其血浆内BK、HK显著升高( P<0．05),PK未见明显升高;同时外周血B1R、B2R mRNA表达水平亦较正常大鼠出现上调,差异有统计学意义(P <0．05)。注射PKSI-527可显著降低 AA大鼠血浆BK、 HK、PK以及B1R、B2R mRNA的水平,与溶剂组比较,差异有统计学意义( P<0．05)。 PKSI-527注射后关节肿胀较溶剂组大鼠明显减轻,差异有统计学意义(P<0．05),关节炎指数以及全身评分也有下降趋势。结论 KKS在AA大鼠体内处于活化状态,使用KKS抑制剂PKSI-527能够明显改善AA大鼠的关节炎和全身的炎症程度。     

二精丸有效部位对肾阴虚模型大鼠学习记忆障碍的影响及其分子机制

目的探讨二精丸有效部位对肾阴虚模型大鼠学习记忆障碍的影响及其分子机制。方法采用大鼠ig甲状腺素加im利血平方法制备肾阴虚模型,二精丸总黄酮和总多糖ig给药结束后Morris水迷宫法测定各组的学习记忆能力;采用酶联免疫法测定血清激素水平;采用免疫组织化学法测定海马部位Bcl-2和Bax表达及Tau蛋白异常磷酸化水平。结果二精丸总黄酮和总多糖能显著提高模型大鼠的学习记忆能力;能显著恢复激素水平及海马区Bcl-2和Bax表达;能显著抑制海马区Tau蛋白Ser199/202、Ser396、Thr231三个磷酸化位点异常磷酸化。结论二精丸总黄酮和总多糖能提高肾阴虚模型大鼠的学习记忆能力。     

β淀粉样蛋白和Tau蛋白在血管性痴呆发病机制中的作用

目的:观察β淀粉样蛋白和Tau蛋白在血管性痴呆(VD)大鼠发生、发展中的作用.方法:采用永久性结扎双侧颈总动脉方法建立VD模型.40只SD大鼠随机分为假手术组(10只)、模型组(30只).模型组按手术时间又分为4,6,8周组,每组n=10只.应用Morris水迷宫检测大鼠的学习、记忆能力;免疫组化染色方法检测大鼠海马C...     

帕罗西汀对应激抑郁模型大鼠脑区蛋白激酶PKA、PKC和CaMKII活力的影响

目的 探讨帕罗西汀对应激抑郁模型大鼠脑区蛋白激酶PKA、PKC和CaMKII活力的影响.方法 将成年雄性SD大鼠随机分为6组:对照组(Ⅰ)、抑郁模型组(Ⅱ)、抑郁模型 给药1次组(Ⅲ)、抑郁模型 给药1周组(Ⅳ)、抑郁模型 给药2周组(Ⅴ)和抑郁模型 给药4周组(Ⅵ).抑郁模型为强迫大鼠游泳4周.采用同位素法检测蛋白激酶PKA、PKC和CaMKII的活力.结果 (1)在海马,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、及Ⅴ组大鼠PKA[分别为(3.92±0,23)×10-2,(3.68±0.092)×10-2,(3.56±0.1)×10-2,和(3.52±0.18)×10-2]和CaMKII[分别为(12.89±0.31)×10-2,(15.08±2.07)×10-2,(16.32±2.87)×10-2,和(17.00±1.52)×10-2]活力明显低于Ⅰ组[PKA(5.63±0.41)×10-2;CaMKII(48.91±1.86)×10-2]和Ⅵ组[PKA(4.92±0.36)×10-2;CaMKII(46.74±1.34)×10-2(P<0.01或P<0.05);Ⅱ组大鼠PKC的活力[(0.55±0.017)×10-2]明显低于对照组[(1.48±0.27)×10-2](P<0.01),各用药组大鼠海马PKC活力与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)(2)在前额叶皮质,Ⅱ、Ⅲ,Ⅳ组大鼠PKA活力[分别为(0.9±0.027)×10-2,(0.92±0.081)×10-2,(0.92±0.028)×10-2]与对照组[(0.99±0.072)×10-2]比较差异无统计学意义(P>0.05);而V[(1.14±0.045)×10-2和Ⅵ[(1.27±0.040)×10-2组的PKA活性则显著高于其它四组(P<0.01);Ⅱ和Ⅲ组的PKC活性[分别为(0.15±0.013)×10-2,(0.14±0.007)×10-2)]均显著高于对照组[(0.099±0.0007)×10-2]和其它用药组(P<0.01),Ⅳ组PKC活性[(0.1±0.0006)x10-2]与Ⅰ组比较差异无统计学意义(P>0.05),Ⅴ和Ⅵ组PKC活性[分别为(0.077±0.0005)×10-2,(0.03±0.00017)×10-2]显著低于Ⅰ组(P<0.01);模型组[(6.84±0.22)×10-2]和各用药组[分别为(6.68±0.23)×10-2,(6.89±0.15)×10-2,(6.55±0.14)×10-2,(6.53±0.13)×10-2]的CaMKII活性显著低于埘照组[(16.57±0.19)×10-2](P<0.01).结论 帕罗西汀长期用药逆转慢性应激所致大鼠海鸟PKA、PKC和CaMKII活力降低,而对前额叶皮质PKA、PKC和CaMKII活力改变的作用复杂.     

神经干细胞在海人酸毁损大鼠海马中的迁移和分化

目的：观察胎鼠神经干细胞移植入海人酸毁损成年大鼠海马中的迁移和分化情况。方法：体外培养胎鼠海马源性神经干细胞。立体定位注射海人酸毁损大鼠海马CA1区锥体细胞。毁损1周后，将Hoechst33342标记的神经干细胞移植毁损区．分别于术后1、2,4、8周取材，利用荧光技术和免疫组织化学方法，追踪移植的神经干细胞在毁损侧海马中的存活、迁移和分化情况。结果：移植的神经干细胞在海马锥体层呈链状迁移，并分化为MAP2阳性细胞和GFAP阳性细胞。结论：移植的神经干细胞在海马锥体层呈链状迁移。大部分分化为胶质细胞。     

亚急性外源性锰中毒对大鼠海马的影响

目的:研究外源性锰中毒对大鼠海马的影响。方法:SD大鼠腹腔注射染锰,用动物磁共振成像(MRI)和免疫组化法(SABC法)对大鼠海马进行研究。结果:染锰后大鼠T1加权成像和翻转恢复MRI发现大鼠海马区域信号强度显著增强;HE染色未发现海马区域明显的神经元坏死;免疫组化法则显示胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达明显增强。结论:海马对锰具有高度亲和性并大量沉积,锰可导致大鼠海马胶质细胞活化。