CD55、CD59免疫表型对PNH相关疾病诊断的观察研究

目的探讨CD55、CD59免疫表型与PNH及相关疾病诊断及鉴别诊断价值。方法用流式细胞仪检测PNH及相关疾病CD55、CD59免疫表型。结果发现PNH患者血细胞膜表面与糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚连蛋白有关抗原CD55、CD59表达减低或缺乏,再障-PNH综合症CD55、CD59也呈不同程度降低。其它贫血血细胞膜表面CD55、CD59抗原表达正常。结论CD55、CD59GPI锚连蛋白分子表达可做PNH以及再障-PNH综合症诊断和鉴别诊断的最敏感、最准确的检测指标。     

CD55、CD59在阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断中的作用

目的：探讨衰变加速因子(CD55)、反应性溶血膜抑制物(CD59)在阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)诊断中的意义。方法：用流式细胞仪检测CD55、CD59的表达量(％)。结果：PNH组CD55、CD59明显低于AA—PNH组和AA组、对照组。结论：检测患者外周血粒细胞膜表面抗原CD55、CD59可作为PNH的早期确诊指标,其中CD59是较敏感指标,CD55是特异性指标。     

CD55,CD59抗原表达在PNH合并全血细胞减少症诊断中的应用

目的 探讨红细胞和粒细胞膜CD55与CD59抗原表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)合并全血细胞减少症(PCP)诊断中的应用.方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法,检测PCP患者病因可疑为PNH的的外周血红细胞和粒细胞膜 CD55与CD59抗原的表达.结果 125例中,PNH32例,非PNH 93例(包括再生障碍性...     

CD55、CD59表达缺陷在几类常见贫血诊断中的比较分析

目的比较CD55、CD59在几类常见贫血中表达缺陷的不同,分析其对于诊断的鉴别意义。方法流式细胞检测连续收治的176例贫血、骨髓衰竭患者CD55、CD59表型。结果 PNH组CD55、CD59在红细胞、粒细胞表面均有不同程度下降;自身免疫性溶血性贫血、骨髓增生异常综合征患者CD55、CD59的表达也存在一定程度下降。结论 CD55、CD59表达缺陷是PNH的主要特征,但确诊仍需结合临床及实验室多参数联合检测。     

各种贫血血细胞CD55、CD59免疫表型观察研究

目的观察各种贫血血细胞CD55、CD59免疫表型相互变化关系,探讨其临床意义。方法用流式细胞仪技术检测各种贫血患者骨髓、外周血细胞CD55、CD59免疫表型。结果发现PNH患者血细胞膜表面与糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚连蛋白有关抗原CD55、CD59免疫表达异常减低或缺乏,再障-PNH综合症CD55、CD59也呈不同程度降低。而且较传统常规溶血检测指标敏感。其它贫血血细胞膜表面CD55、CD59抗原表达正常。结论检测血细胞膜表面CD55、CD59GPI锚连蛋白分子表达可做PNH以及再障-PNH综合症确诊诊断和鉴别诊断的最敏感、最特异、最准确的检测指标,并对观察PNH发展、转化、治疗、愈后有重要指导价值。     

CD55、CD59在诊断再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿综合征中的应用

目的研究CD55、CD59在再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿(AA-PNH)综合征中的诊断价值。方法用流式细胞仪对19例AA-PNH综合征进行CD55及CD59的检测,同时做酸化血清溶血试验(Ham试验),比较二者的阳性检测率。结果红细胞CD55异常者17例(89.4%),粒细胞CD55异常者19例(100%);红细胞CD59异常者18例(94.7%),粒细胞CD59异常者19例(100%)。Ham试验异常率为26.3%。红细胞和粒细胞CD55、CD59的异常率明显高于Ham试验(P<0.05)。结论CD55、CD59有助于提高AA-PNH综合征的诊断。     

CD55、CD59在恶性血液疾病中的表达

目的检测恶性血液疾病患者外周血中红细胞补体调节蛋白CD55、CD59表达。方法采用荧光素标记的CD55和CD59单克隆抗体,流式细胞术检测10例正常人、20例急性白血病、15例淋巴瘤和10例慢性粒细胞白血病患者外周血红细胞上CD55、CD59表达百分率。结果CD55在淋巴瘤(9/15)、急性白血病(13/20)和慢性粒细胞白血病(7/10)患者红细胞上表达率均下降,其中以慢性细胞白血病下降最显著,CD59表达均正常。结论红细胞上CD55表达下降可作为恶性血液疾病标志。     

流式细胞术检测CD55及CD59对诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿的意义

目的探讨流式细胞术检测免疫表型对诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）的意义。方法采用流式细胞术测定60例正常人和9例阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）患者外周血中性粒细胞和红细胞膜抗原的表达,用荧光标记分化群中的CD55、CD59单克隆抗体。结果 PNH患者中性粒细胞CD55、CD59,红细胞CD59表达率较正常人低,且与疾病的严重程度相关。结论用流式细胞术检测CD55、CD59表型是目前诊断PNH的较直接而又高特异、高敏感的方法。     

再生障碍性贫血患者外周血CD55、CD59的表达分析

目的 通过检测再生障碍性贫血患者外周血粒、红细胞表面锚定蛋白CD55、CD59的表达以及血清补体C3、C4的变化,探讨其在再生障碍性贫血发生、发展中的作用。 方法 运用流式细胞仪对81例再障患者和31例对照人群外周血粒、红细胞CD55、CD59表达进行检测,同时通过免疫比浊方法对血清补体C3、C4进行检测。结果 再障组外周血粒、红细胞CD55、CD59(91.92±17.72、93.83±9.17;94.54±7.88、93.06±15.28)与对照组(99.28±0.69、97.88±2.20;97.92±1.40、97.85±1.67)相比,显著下降(p<0.05);补体C3、C4(0.86±0.11;0.20±0.05)较对照组(1.03±0.26;0.30±0.10)相比,显著降低。 结论 再生障碍性贫血患者外周血粒、红细胞表面锚蛋白CD55和CD59表达缺失,补体数量下降,其介导的体液免疫功能异常可能是再障发生、发展的一种因素。     

流式细胞术检测CD55、CD59对阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断价值的探讨

目的探讨患者外周血细胞膜上CD55和CD59缺陷对阵发性睡眠性血红蛋白尿(paroxysmal nocturnalhemoglobinuria,PNH)的诊断价值。方法采用流式细胞术对CD55-PE及CD59-FITC标记的患者外周血中性粒细胞和红细胞进行检测。对2009年1月～2012年3月来我院就诊的13例PNH患者、13例再生障碍性贫血(aplasticanemia,AA)、21例骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者、12例缺铁性贫血(irondeficient anemia,IDA)患者与同期80例健康体检者进行回顾性分析。结果 PNH患者中性粒细胞及红细胞膜表面CD55、CD59较AA、MDS、IDA及健康体检者均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论利用流式细胞术检测贫血患者外周血红细胞及中性粒细胞膜上CD55和CD59缺陷,是临床鉴别诊断PNH与AA、IDA、MDS可靠而敏感的指标。     

外周血细胞膜上CD55和CD59缺陷对鉴别诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿与贫血的意义

目的 探讨患者外周血细胞膜上CD55和CD59缺陷对鉴别诊断阵发性睡眠性血红蛋白尿(parosysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH)与贫血(anemia)的意义.方法 采用荧光素标记的CD55和CD59单克隆抗体,流式细胞术检测30例正常人、32例再生障碍性贫血(AA)、28例阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)或AA-PNH综合征、38例小细胞低色素性贫血(IDA)、24例巨幼细胞性贫血(MA)、12例自身免疫溶血性贫血(AIHA)患者外周血中红细胞及中性粒细胞CD55-和CD59-的百分率.结果 CD55-、CD59-正常人红细胞和中性粒细胞的百分率均＜5%;PNH或AA-PNH患者均＞20%;部分再障患者＞5%(均＜15%).约有40%的小细胞低色素贫血患者CD55-、CD59-红细胞＞5%(均＜20%);但中性粒细胞CD55-、CD59-百分率均＜5%.巨幼贫、自身免疫溶血性盆血患者的CD55-、CD59-红细胞和中性粒细胞均＜5%.结论 利用流式细胞术同时检测患者外周血中红细胞和中性粒细胞膜上CD55和CD59缺陷是临床鉴别诊断PNH、AA-PNH及再障、小细胞低色素性贫血、巨幼贫及自身免疫溶血性贫血可靠,较敏感的方法.     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓正常细胞及异常克隆分析

目的 分析阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者骨髓正常细胞（CD59^ )及异常克隆细胞（CD59^－）的细胞构成。方法 骨髓有核细胞免疫荧光标记后用流式细胞术分析。结果 （1）PNH患者骨髓正常及异常克隆的细胞组成在有核细胞水平是显著不均衡的，正常的CD59^ 细胞以淋巴细胞窗内细胞为主，异常的CD59^－细胞则以粒细胞窗及原始细胞窗内细胞为主。（2）PNH患者骨髓CD59^ 正常细胞群所含CD59^ 细胞总数较异常者显著减少，淋巴细胞窗及粒细胞窗内CD59^ 细胞均较异常者显著减少，前者减少更为显著。结论 PNH患者骨髓正常细胞及异常克隆的细胞构成在有核细胞水平及CD59^ 细胞水平都有显著差异，正常造血呈衰竭状态。因此，在考虑用患者自体骨髓体外净化去除异常克隆后回输给患者重建造血时，应对正常造血细胞作进一步处理，否则正常造血细胞可能不具备重建造血的能力。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿患者测定CD55、CD59的意义

本文采用流式细胞技术测定6例阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）．11例再障-PNH综合征,10例再生障碍性贫血（AA）患者外周血淋巴细胞膜CD55和CD59标记率。6例PNH患者均表现出CD55和CD59下降（P＜0.01）．11例再障-PNH综合征患者也表现出CD55和CD59下降（P＜0.05）。10例再生障碍性贫血患者中8例CD55和CD59标记率在95％以上．2例标记率在85％以上,与对照组相比无统计学意义。结果表明：血细胞膜上糖基磷脂酰肌醇（GPI）“锚”相关蛋白CD55和CD59的缺陷与PNH有密切关系。流式细胞技术测定血细胞膜CD55和CD59可作为诊断PNH的有效方法。     

CD34、CD59在阵发性睡眠性血红蛋白尿中的表达及意义

目的研究阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）患者骨髓CD34^＋细胞比率及外周血粒、红细胞CD59表达阳性率并探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测20例PNH患者骨髓单个核细胞（BMMNC）中CD34^＋细胞比率及外周血中粒、红细胞CD59表达阳性率。结果PNH患者CD34^＋细胞比率显著低于正常人（P〈0．01）;其中增生减低组CD34^＋细胞比率低于增生活跃、增生明显活跃组（P均〈0．05）,而后两组之间差异无显著性（P〉0．05）。正常人外周血粒、红细胞CD59表达阳性率均〉95％,其中粒细胞CD59表达稳定性较好;PNH患者外周血粒、红细胞CD59表达阳性率与正常对照组相比均显著减低（P〈0．01）;粒细胞CD59在不发、偶发、频发组中表达逐渐减低且差异均有显著性（P〈0．05）,红细胞CD59表达则在三组之间差异无显著性（P〉0．05）。结论CD34^＋造血干细胞减少可能参与PNH发病;外周血粒、红细胞CD59检测是诊断PNH的特异性及敏感性方法,其中粒细胞CD59缺失程度对判断病情严重与否具参考价值。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者骨髓CD34+CD59+细胞与正常人CD34+细胞生存、增殖、扩增性能的比较

目的探索阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者骨髓CD34CD59细胞体外扩增的方法,并对其与正常人CD34 细胞的生存、增殖及扩增性能进行比较,为PNH患者实现自体骨髓移植(ABMT)或自体外周血干细胞移植(APBSCT)提供重要的实验基础。方法应用免疫磁珠富集纯化CD34 细胞,然后用流式细胞仪分选出PNH患者的CD34 CD59 细胞及正常人CD34 细胞。对两种细胞在不同造血生长因子组合下,进行体外扩增液体培养2周。并对扩增前及扩增不同阶段的细胞进行体外半固体培养。结果(1)PNH患者CD34 CD59 细胞在体外能得到有效的扩增,在细胞因子合理组合作用下,第7天时CD34 CD59 细胞绝对数扩增约23.49倍。2PNH患者CD34 CD59 细胞与正常人CD34 细胞存在部分相同或相似的特性。在体外扩增过程中,对细胞因子的反应有相同的趋势,均为扩增第7天达到扩增高峰,均在SCF IL-3 IL-6 FL Tpo Epo组合条件下达到最大扩增能力。并且扩增后的细胞仍有形成CFU的能力,均能很好地保持CD59抗原,无GPI锚连蛋白的丢失。(3)正常人CD34 细胞在生存、增殖、形成CFU的能力及扩增能力上均明显强于PNH患者的CD34 CD59 细胞。结论(1)PNH患者CD34 CD59 细胞在体外能得到有效的扩增,临床上应用具有一定的可行性,能满足大多数PNH患者ABMT或APBSCT的需要。(2)PNH患者     

Phenotypic analysis of affected peripheral erythroid for CD59 in paroxysmal nocturnal hemoglobinuria

Objective To determine whether affected reticulocytes could be a reliable marker for the diagnosis of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH), we analyzed CD59-antigen expression on the membranes of reticulocytes and erythrocytesMethods We studied 10 PNH patients and 5 healthy volunteers by two-color flow cytometry with a membrane permeable fluorescent dye, thiazole orange (TO), and anti-CD59 monoclonal antibodies (MoAb) TO was introduced to gate reticulocytes and anti-CD59 MoAb were used to identify glycosylphosphatidylinositol (GPI)-deficient cellsResults Cells from healthy individuals were only CD59 positive However, in all PNH patients, CD59-antigen expression could be divided into 3 types: type Ⅰ cells (CD59 normally positive), type Ⅱ cells (CD59 partly positive) and type Ⅲ cells (CD59 negative) The majority of reticulocytes belonged to type Ⅲ cells, GPI-deficient cells (610%) In addition, the percentage of affected reticulocytes was higher than that of erythrocytesConclusions Analyzing PNH reticulocytes was important, because most patients had elevated numbers of reticulocytes, which represent more closely the recent erythroid output of BM However, circulating mature erythrocytes were subject to complement- mediated intravascular lysis Therefore, the percentage of abnormal erythrocytes may not accurately reflect the proliferation rate of normal and abnormal erythroid progenitor cells Thus, affected reticulocytes could be a more reliable indicator for the diagnosis of PNH than mature erythrocytes.