人肺腺癌多药耐药细胞系的建立

目的：体外建立人肺腺癌多药耐药细胞系。方法：以泰素为诱导药，人肺腺癌细胞系SPC—Al为诱导对象，逐步增加泰素浓度冲击，以一定浓度的泰素维持培养共计24周后，光镜观察细胞形态，用MTS方法进行细胞耐药检测。结果：SPC—Al／TAX形态不规则，对阿霉素、长春地辛、足叶乙甙、顺铂、5—氟脲嘧啶、泰素(紫杉酵)六种抗癌药物有不同程度的耐药性。结论：建立了相对稳定多药耐药细胞系SPC—Al／TAX，用于研究其多药耐药性的机制及逆转等下游实验。     

人肺腺癌多药耐药细胞系的建立及其生物学性状的测定

目的：体外建立人肺腺癌细胞多药耐药细胞系。方法：以阿霉素(adriamycin，ADM)为诱导药。人肺腺癌细胞系(SPC-A-1)为诱导对象。逐步增加ADM药物浓度进行诱导，以一定浓度ADM培养46周后．光镜观察细胞形态，采用MTT法检测细胞耐药指数(RF)，并同时对长春地辛、足叶乙甙、顺铂、5-氟脲嘧啶、紫杉醇、ADM6种药物进行交叉耐药检测。结果：SPC-A-1／ADM形态不规则。SPC-A-1／ADM对ADM的RF为11．3．同时对长春地辛、足叶乙甙、顺铂、5-氟脲嘧啶、紫杉醇5种抗癌药物有不同程度的耐药性。结论：建立了相对稳定多药耐药细胞系SPC-A-1／ADM，可用于多药耐药性机制及逆转的研究。     

人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系的耐药机制

目的 研究人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系A549-Gem的耐药机制。方法 免疫组织化学法检测人肺腺癌吉西他滨耐药细胞系的P-糖蛋白的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)法检测多药耐药基因(mdr1)以及脱氧胞苷激酶(dCK)mRNA的转录,并采用基因芯片检测了A549和A549-Gem的基因表达谱。结果 A549-Gem中P一糖蛋白(P—gp)呈弱阳性表达,A549未见表达。。A549-Gem细胞中出现mdr1的mRNA转录增加,却未检测到dCK mRNA的产物。基因芯片检测A549和A549-Gem基因表达谱,结果表明,18．8％的基因出现差异表达,包括癌基因和抑癌基因、细胞周期相关基因、热休克蛋白基因、细胞凋亡相关基因、DNA转录因子(如锌指蛋白等)、DNA修复和重组基因、信号传导基因、蛋白翻译基因以及大量的代谢相关基因。结论 肺腺癌细胞对吉西他滨的耐药既与dCK缺乏相关,也有mdr1／P—gp高表达的参与。在肺腺癌细胞对吉西他滨产生耐药的过程中,发生了多种基因表达的变化,提示耐药的产生是多因素参与的复杂生化过程。     

人肺腺癌多药耐药细胞系的建立及其生物学特征

目的 建立人肺腺癌多药耐药细胞系。方法 以顺铂为诱导药物,人肺腺癌细胞系SPC-A-1为诱导对象,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人肺腺癌多药耐药细胞系SPC-A-1/CDDP;MTT法测定药物敏感性,透射和扫描电镜观察形态变化,常规染色体检测分析染色体变化。结果 用192d建成人肺腺癌多药耐药细胞系SPC-A-1/CDDP,它对顺铂的耐药指数为11.2,对顺铂、5-氟尿嘧啶、丝裂霉素、长春新碱和足叶乙甙等药物有不同程度的耐药性,但对羧基喜树碱无耐药性,电镜观察可见SPC0-A-1/CDDP细胞胞核不规则,较大,有丰富的微绒毛。结论 本研究建立了稳定的人肺腺癌多药耐药细胞系（SPC-A-1/CDDP）,可应用于下游实验。     

人卵巢癌多药耐药细胞系COC1／DDP的耐药机制探讨

用体外药物连续选择法建立了一株人卵巢癌多药耐药细胞系。发现耐药细胞内谷胱甘肽含量，谷胱甘肽过氧化物酶活性，谷胱甘肽转硫酶活性的均增加。从而使细胞内药物失活增加；细胞内药物作用靶减少，拓扑异构酶活性降低，细胞内药物积聚量减少，但未见Ｐ－糖蛋白过度表达。提示卵巢癌耐药性的产生与药物失活增加，药物作用靶减少及细胞内药物积聚量减少有关。     

人前列腺癌多药耐药细胞系的建立

目的:建立人前列腺癌多药耐药细胞系。方法：以顺铂为诱导药物,人前列腺癌细胞PC3M为诱导对象,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人前列腺癌多药耐药细胞系PC3M/CDDP;MTT法检测药物敏感性,免疫细胞化学法检测P-糖蛋白（P-gP）、多药耐药相关蛋白(MRP)的表达。结果：经顺铂诱导建立的人前列腺癌细胞系PC3M/CDDP对顺铂、丝裂霉素、阿霉素、5-氟尿嘧啶、长春新碱等药物的50%抑制浓度(IC₅₀)分别为（0.603±0.102）、（0.201±0.056）、（0.267±0.067）、（1.676±0.321）和（0.657±0.227）mg•L-1,与PC3M细胞系比较差异有显著性（P<0.05）;免疫细胞化学染色结果显示,PC3M/CDDP细胞系MRP、P-gP表达强度明显大于PC3M细胞系（P<0.05）;PC3M/CDDP细胞系的细胞倍增时间为40.5 h,与PC3M细胞系（48.6 h）比较差异无显著性（P>0.05）。结论：成功建立稳定的人前列腺癌 PC3M/CDDP细胞系,该细胞系具有对多种抗癌药耐药及细胞增殖未受影响的特点,可应用于下游实验。     

凋亡抵抗在人肺腺癌SPC-A1／多西紫杉醇细胞系耐药机制中的作用

目的:比较人肺腺癌细胞SPC-A1与耐多西紫杉醇细胞系SPC-A1/多西紫杉醇(Docetaxel)经多西紫杉醇诱导后凋亡的差异,研究抗凋亡机制在肺腺癌多西紫杉醇耐药中的作用。方法:以AnnexinV/PI双染法检测SPC-A1/Docetaxel细胞与SPC-A1细胞经不同浓度多西紫杉醇诱导后的凋亡率,免疫组化法及RT-PCR法分别检测SPC-A1/Docetaxel细胞与SPC-A1细胞bcl-2、bax在蛋白和mRNA水平的表达。结果:SPC-A1/Docetaxel细胞与SPC-A1细胞的自然凋亡率分别为(7.5±1.1)%和(4.7±0.7)%;经5、10和20μg/L的多西紫杉醇作用48 h后,SPC-A1/Docetaxel细胞的凋亡率分别为(7.8±2.1)%、(11.3±3.1)%和(25.6±4.5)%,SPC-A1细胞的凋亡率分别为(23.7±4.5)%、(44.2±5.0)%和(40.9±2.8)%;各组SPC-A1/Docetaxel细胞的早期凋亡率均显著低于SPC-A1细胞(P<0.05)。免疫组化结果显示,SPC-A1/Docetaxel细胞中bcl-2蛋白表达较SPC-A1细胞明显升高(P<0.05),而bax蛋白表达明显降低(P<0.05)。RT-PCR结果显示,与SPC-A1细胞相比,SPC-A1/Docetaxel细胞的bcl-2 mRNA表达升高(P<0.05),而bax mRNA表达降低(P<0.05)。结论:抗凋亡是肺腺癌SPC-A1/Docetaxel细胞多药耐药的机制之一,且与抗凋亡因子bcl-2表达上调和促凋亡因子bax表达下调相关。     

人肺腺癌紫杉醇耐药细胞株交叉耐药性实验研究

目的 通过建立体外肺腺癌耐药细胞株,研究紫杉醇交叉耐药性,为临床治疗提供有益的实验依据.方法 应用浓度递增和短时作用相结合,建立人肺腺癌紫杉醇耐药株SPC-A1/Taxol.通过MTT法检测加入不同药物后耐药细胞的半数抑制浓度,计算耐药指数.结果 SPC-A1/Taxol耐药细胞株对多西紫杉醇、长春瑞滨、长春新碱和阿霉素显示高度耐药,对喜树碱类和鬼臼毒素类显示中度或低度耐药,对铂类药物、抗代谢药和中药榄香烯乳未见交叉耐药性.结论 SPC-A1/Taxol耐药细胞株为一个较好的多药耐药体外模型,对其交叉耐药性的实验研究可以为临床用药提供有益依据.     

肺癌多药耐药机制研究的新进展

<正>多药耐药性(Multidrug resistance,MDR)也称多向性耐药,即肿瘤细胞一旦对一种药物产生耐受,对其他结构及功能不同的化疗药物也交叉耐受。肿瘤细胞在治疗的初始阶段就对多种化疗药物无反应,称之原发性耐药或内在耐药(intrinsic drug resistance),如化疗初期效果很好,但经过几个疗程后,肿瘤细胞对所用的药物产生了耐药性,称之获得耐药(acquired drug resistance)。肺癌是人类恶性肿瘤死亡的主要原因之一,多数患者发现时已属晚期而失去手术机会,故化疗在肺癌的治疗中仍占有相当重要的地位,尤其是对小细胞肺癌效果较     

mdr1基因在多药耐药相关的几种人胃癌细胞系的表达

目的探讨mdr1在多药耐药相关的几种人胃癌细胞系中的转录、翻译、P-gp功能变动趋势.方法培养SGC7901/VCR(人胃癌多药耐药细胞亚系)、SGC7901和BGC823(人胃腺癌细胞系)于RPMI1640,用RT-PCR和原位杂交检测mdr1mRNA的表达,用免疫印迹和免疫组化检测P-gp的表达,用流式细胞仪检测阿霉素在细胞内的蓄积.结果半定量RT-PCR显示,SGC7901/VCR mdr1和β-actin吸收峰面积之比为5.63,SGC7901为0.61,BGC823为0.85.杂交信号呈紫蓝色颗粒,分布于胞质.免疫印迹显示SGC7901/VCRP-gp的表达最强,SGC7901最弱.P-gp阳性呈棕黄色颗粒,位于细胞膜上.SGC7901中,少数细胞P-gp表达极强.SGC7901/VCR平均光密度为(1.8310±0.8401),SGC7901为(0.3590±0.2512),BGC823为(0.6260±0.4996)(P＜0.05).SGC7901/VCR阿霉素特异荧光强度为(6.59±50.30),SGC7901为(35.88±14.55),BGC823为(27.44±7.06)(P＜0.001).结论在多药耐药相关的人胃癌细胞系SGC7901/VCR、SGC7901和BGC823中,mdr1基因均表达,P-gp具有药物外排功能,SGC7901/VCR的mdr1表达最强,SGC7901最弱,BGC823居中.     

双丁酰环腺苷酸对肺腺癌细胞的诱导分化作用及对其表达的凝集素受体影响

目的：研究双丁酰环腺苷酸（ＤＢｃＡＭＰ）对人肺腺癌细胞的诱导分化作用，及其与癌细胞表达凝集素受体的关系。方法：用双丁酰ｃＡＭＰ作用人肺腺癌细胞ＡＧＺＹ－８３ａ，观察细胞的生长、形态、超微结构的变化；用凝集素组化方法检测双丁酰ｃＡＭＰ对细胞表达凝集素受体的影响。结果：０．３ｍｍｏｌ／Ｌ双丁酰ｃＡＭＰ对癌细胞的生长有明显抑制作用，使细胞间接抑制有所恢复，形态结构向成熟分化；同时使细胞表达的凝集素（ＤＢＡ、ＵＥＡ－１、ｃｏｎＡ、ＷＧＡ、ＲＣＡ）受体降低。结论：双丁酰ｃＡＭＰ对人肺腺癌细胞有诱导分化作用；双丁酰ｃＡＭＰ对癌细胞表达凝集素受体的影响可能在其抑制细胞，恢复细胞识别功能，诱导细胞分化过程中有重要意义。     

龙葵氯仿提取物对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响

目的：观察龙葵氯仿提取物对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响     

金复康口服液对耐药人肺腺癌A549/DDP膜转运蛋白LRP MRPmRNA表达的影响

目的:从逆转多药耐药的角度,研究金复康口服液对耐药人肺腺癌细胞A549/DDP的化疗增效的作用和分子机制。方法:应用血清药理学方法,选择A549、A549/DDP细胞,实验分为实验组和空白对照组,从细胞水平、分子水平进行研究。结果:金复康口服液低剂量能够逆转A549/DDP对DDP的耐药,逆转耐药倍数为3.45倍,与DDP(320μmol/L)合用,使DDP(320μmol/L)对A549/DDP细胞的抑制率由47.55%升高为73.32%,且q>1.15,表明金复康口服液与DDP合用有明显的协同增效作用,增加了DDP对A549/DDP细胞的敏感度;金复康口服液低剂量能够降低A549/DDP膜转运蛋白LRP、MRP的mRNA表达。结论:(1)低剂量金复康口服液与DDP合用能够增加DDP对A549/DDP的增殖抑制作用,二者具有显著的协同增效作用。(2)金复康口服液能够降低A549/DDP膜转运蛋白LRP、MRP的mRNA表达。金复康口服液可能通过降低耐药肿瘤细胞膜转运蛋白的表达而逆转肿瘤多药耐药,为扶正方药对化疗增效机理提供了新的实验依据。     

联合应用γ-干扰素与维拉帕米对人肺癌细胞株LRP表达的影响

目的探讨联合应用γ-干扰素与维拉帕米对人肺癌细胞侏HTS，56R多药耐药及对肺耐药蛋白（LRP）表达的影响。方法采用MTT比色法来研究钙通道阻止剂维拉帕米和人类重组γ-干扰素对顺铂（DDP）细胞毒性在人类肺癌细胞侏HTB，56R上的影响。用流式细胞仪测量该细胞的LRP表达。结果 γ-干扰素与维拉帕米能部分恢复HTB，56R对DDP的敏感性。LRP的表达能被γ-干扰素和维拉帕米降低，联合两者也有同样的效果，降低的程度与浓度呈正比。但将两者单独使用与联合使用相比无显著性差异（P〉0．05）。结论γ-干扰素与维拉帕米能逆转HTB，56R的耐药性，而且联合使用有更好的效果，其逆转可能是通过降低LRP的表达来实现的。     

转TK基因的人肺腺癌细胞对三种原药敏感性的研究

构建了含有单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV－TK）基因的重组逆转录病毒载体LTKSN，经PA317细胞包装后，感染人肺腺癌细胞株A549。用G418筛选到稳定表达HSV－TK基因的细胞克隆A549／TK，A549／TK与野生型A549细胞相比，生长曲线无明显差异，细胞形态亦无改变。细胞毒试验证明．HSV－TK对GCV的敏感性很高，半杀伤浓度IC50为0．5μmol／L，比野生型细胞提高了1000倍。三种不同的原药GCV、ACV和BVDU对A549／TK具有效果不等的杀伤作用。旁杀伤效果十分明显，低浓度GCV就可以将含33％A549／TK的混合细胞中的大部分肿瘤细胞杀死。     

人盲肠未分化腺癌细胞系（HCe－8693）的细胞遗传学研究

对人盲肠未分化腺癌细胞系ＨＣｅ－８６９３）第２３代（早代）及１２５代（晚代）进行细胞遗传学研究，结果发现其染色体的数量分布比较集中，呈近二倍体核型，早代与晚代差别不大，染色体众数为４９。Ｇ显带核型分析结果表明，本细胞系比较接近于正常二倍体核型，异常染色体较少而有规律，易于进行核型分析。较明显的改变是第１号染色体短臂远端缺失及第１３号染色体三体性或部分三体性。     

胰岛素对肺腺癌A549细胞放疗增敏作用的研究

目的探讨胰岛素能否提高体外肺腺癌A549细胞的放疗敏感性。方法将胰岛素直接作用于体外培养的A549细胞，再将此细胞放于直线加速器下行X线照射，采用甲基噻唑基四唑（MTT）、流式细胞仪等检测肺腺癌A549细胞的凋亡情况。结果仅给予胰岛素作用该细胞时，MTT检测结果表明，给予胰岛素的细胞光密度（OD）值与未给予胰岛素的细胞OD值之间无明显差异（P〉0．05）。同时给予胰岛素及X线照射后，给予不同浓度胰岛素的细胞与未给予胰岛素的细胞相比凋亡率有差异（P〈0．05），其中4、8、16mU／mL浓度组有明显差异（P〈0．01）。结论不同浓度的胰岛素液并不会长时间地促进A549细胞的增殖，胰岛素可提高该肿瘤细胞的放疗敏感性，促进肿瘤细胞的凋亡，为胰岛素充当放疗增敏剂运用于临床治疗提供一定的理论依据。     

体外比较三个人肺腺癌细胞系的侵袭特性

在器官培养中发现,3个不同来源的低分化人肺腺癌细胞系(LTEP-a_2、Anip、LGC-7910)在侵袭人的心、肝脏器官时表现了不同的生物学特性,包括侵袭形式、侵袭速度、变形能力和对靶器官破坏程度以及细胞的分裂繁殖等方面。本实验对其进行了较详细的观察。     

桂皮酸诱导高转移人肺癌细胞去恶性的研究

本文作者选用桂皮酸处理克隆化高转移人肺巨细胞癌（PGCL3）细胞，发现肿瘤细胞在形态、增殖速度、分裂指数、软琼脂集落形成能力和凝集反应等方面均出现向正常细胞表型逆转，证明栓皮酸具有抑制PGCL3细胞增殖及诱导分化的作用。我们还进行了反映肿瘤细胞浸润和转移能力的粘附、运动和降解侵袭实验，结果显示桂皮酸对PGCL3细胞的上述三种能力都有明显的抑制作用，表明桂皮酸在诱导PGCL3细胞向成熟方向分化的同时，还使肿瘤细胞的浸润和转移能力减弱。