同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞纤溶系统的影响

目的探讨同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）对血管内皮细胞纤溶系统影响。方法（1）将体外培养的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）分为10个实验组（0、10、50、200、500μmol／L Hcy组及叶酸和上述各Hcy点共同培养组）,培养24h后,酶联免疫吸附实验法（ELISA）测定各组细胞上清液中纤溶酶原激活剂（plasminogen activator,tPA）及纤溶酶原激活物抑制剂1（plasminogen activator inhibitor1,PAI-1）抗原含量,逆转录聚合酶链反应分析（RT-PCR）法分析各组tPA及PAI-1的mRNA表达水平。（2）急性心肌梗死（AMI）患者53例及健康对照组48例,ELISA测定空腹血浆tPA及PAI-1含量,高效液相色谱法测定血浆Hcy水平。结果（1）500μmoL／L Hcy组PAI-1抗原及mRNA表达水平均明显增高（P〈0．05）。（2）以单纯培养基为对照组,生理浓度Hcy组内皮细胞tPA抗原合成及mRNA表达明显增高（P〈0．05）,而以10μmoL／L Hcy组为对照组时,500μmoL／L Hcy组tPA抗原合成及mRNA表达水平则明显减少（P〈0．05）。（3）500μmoL／L Hcy与叶酸共同培养组和单纯Hcy组相比,可以明显提高内皮细胞tPA抗原的合成及mRNA表达,减少PAI-1抗原合成及mRNA表达（P〈0、05）。（4）AMI组Hcy、tPA及PAI-1均明显高于健康对照组（P〈0．05）。结论在体外细胞时,超生理浓度Hcy可以通过下调tPA、上调PAI-1的mRNA表达,减少内皮细胞tPA抗原的分泌及增加PAI-1抗原的合成,可能降低纤溶系统的活性。叶酸则可以减少Hcy引起内皮细胞纤溶系统的损害,起到保护作用。Hcy是AMI的一个独立危险因素。     

同型半胱氨酸和叶酸对内皮细胞纤溶系统影响

同型半胱氨酸（Hcy）水平的升高与动脉粥样硬化及心脑血管疾病密切相关，叶酸补充治疗可以减少Hcy水平，然而高胱氨酸血症（HHE）的致病机制及叶酸的保护机制还不完全清楚。为了探讨Hcy及叶酸对纤溶系统的影响，我们首次研究了生理及超生理浓度的Hcy与叶酸共同作用对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）的组织型纤溶酶原激活物（tPA）和纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）的抗原合成及mRNA表达的影响。     

海带多糖对内皮细胞损伤大鼠模型的保护作用

目的探讨海带多糖对肾上腺素（Adr）致血管内皮细胞损伤的保护作用。方法皮下注射Adr建立血管内皮细胞损伤大鼠模型，主动脉切片免疫组化检测血管内皮受损情况，ELISA法测定大鼠血浆血管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF）含量；体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC），ELISA法测定HUVEC培养液vWF含量，观察海带多糖对内皮细胞损伤大鼠和Adr刺激HUVEC后vWF生成的影响。结果造模第4天和第5天主动脉切片免疫组化检测完整内皮层长度显示，海带多糖高剂量（50mg／kg）、低剂量（10mg／kg）组长度明显高于模型组（P〈0．05）；造模第4天，海带多糖高剂量组大鼠血浆vWF水平与模型组比较有显著差异（P〈0．05），第5天海带多糖高、低剂量组均呈现出同样的结果（P〈0．05）。在HUVEC培养实验中，终浓度为0．01mg／ml和0．1ms／mi的海带多糖均能降低24h培养液vWF水平，终浓度为0．1ms／mi海带多糖还能降低48h培养液vWF水平，与Adr组比较有显著差异（P〈0．05）。结论海带多糖对血管内皮细胞具有保护作用。     

同型半胱氨酸与脑梗死及动脉狭窄支数的相关性研究

目的探讨同型半胱氨酸（Hcy）与脑梗死以及动脉狭窄支数的关系。方法对80例脑梗死患者与50例健康对照者采用高效液相色谱分析法测定血浆Hcy水平，同时测定血清叶酸、维生素（Vit）B12、血脂、血糖等指标。并对脑梗死组患者行头颈部磁共振血管成像（MRA）检查。结果脑梗死组患者血浆Hcy浓度（21．10±8．98）μmol／L显著高于对照组[（12．49±7．43）μmol／L，P〈0．01]，血清叶酸、VitB12水平低于对照组（P〈0．01）。80例脑梗死组患者中，做MRA检查发现有≥2支动脉狭窄者32例，设为A组，无或有1支动脉狭窄者48例，设为B组。A组血浆Hcy浓度（24．65±11．20）μmol／L显著高于B组[（18．79±9．97）μmol／L，P〈0．05]。A组叶酸水平显著低于B组（P〈0．05），VitB12水平，A组低于B组，但差异不显著（P〉0．05）。结论高同型半胱氨酸血症是脑梗死的重要独立危险因素，Hcy水平升高与脑梗死，颈部、颅内动脉狭窄支数有关。     

血管紧张素Ⅱ及缬沙坦对培养人脐静脉内皮细胞产生纤溶因子的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）对内皮细胞纤溶功能的影响及缬沙坦的干预作用。方法用酶消化法收集并培养人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）,将10^-6,10^-7,10^-8,10^-9mol／L AngⅡ分别与HUVECs共同孵育12h;10^-7 mol／L AngⅡ和HUVECs分别孵育0,2,6,12,24,48h;10^-7 mol／L AngⅡ和10^-5,10^-6,10^-7,10^-8 mol／L缬沙坦（与HUVECs孵育12h;10^-6 mol／L缬沙坦与HUVECs孵育12h）。用酶联免疫吸附法测定上清液中组织型纤溶酶原激活物（tissue plasminogen activator,tPA）和1型纤溶酶原激活物抑制剂（plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1）抗原浓度。结果 AngⅡ呈浓度依赖性升高HUVECs的PAI-1水平,最大效应浓度10^-7 mol／L;10^-7 mol／LAngⅡ对HUVECs作用,孵育2h PAI-1含量即升高,12h达高峰（198μg／L）;缬沙坦呈浓度依赖性降低AngⅡ促HUVECs分泌PAI-1,缬沙坦最大效应浓度10^-6mol／L;AngⅡ和缬沙坦对HUVECs分泌tPA没有明显影响。结论 AngⅡ通过促进HUVECs分泌PAI-1而降低纤溶活性;缬沙坦通过抑制AngⅡ的促PAI-1分泌作用而提高纤溶活性,提示有助于动脉粥样硬化血栓性疾病的防治。     

氯沙坦对扩张型心肌病心力衰竭患者纤溶参数的影响

目的：了解扩张型心肌病心力衰竭患者纤溶参数的变化，及氯沙坦对纤溶参数的影响。方法：测定40名健康者和60例扩张型心肌病心衰患者血浆纤溶酶原激活物（tPA)活性，纤溶酶原激活物抑制物－1（PAI－1）活性以及血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）含量，将扩张型心肌病患者随机分成常规治疗组和氯沙坦组。治疗14天后复查tPA、PAI-1、AngⅡ。结果：L与正常对照组相比，扩张型心肌病心衰患者tPA活性下降、PAI－1活性升高、AngⅡ含量上升（P＜0．01）。治疗14天后，常规治疗组tPA与PAI－1的活性和AngⅡ含量无显著变化（P＞0．05）；氯沙坦组tPA活性上升、PAI－1活性下降（P＜0．01），AngⅡ含量降低（P＜0．05）。结论：扩张型心肌病心力衰竭患者纤溶参数明显异常，氯沙坦能改善纤溶参数活性。     

持续气道正压通气对OSAHS患者血管内皮细胞及纤溶系统的影响

为探讨经鼻持续气道正压通气（nCPAP)治疗前后阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）患者血管内皮细胞及纤溶系统的变化及临床意义，选择年龄，性别，体重指数（BMI）无明显差异的OSAHS患者38例和健康者对照组32例，用多导睡眠呼吸监测仪进行监测，以凝固法测定纤维蛋白原（Fg），发色底物法测组织纤溶酶原激活物活性（tPA：A）、纤溶酶原激活物抑制物－1活性（PAI－1：A），酶联免疫法测vonWillebrand因子（vWF)、组织纤溶酶原激活物抗原（tPA:Ag）、纤溶酶原含量（PLg:Ag)和纤溶酶原激活物抑制物－1含量（PAI－1：Ag）。结果OSAHS组与对照组比较，vWF,Fg,tPA:Ag、PAI－1：A明显升高（P分别＜0．01，0．001，0．001，0．01），PLg:Ag、tPA:A、tPA:Ag、最低血氧饱和度（SaO2low)明显降低（P分别＜0．01，0．001，0．001，0．01).nCPAP治疗后与治疗前比较，vWF,Fg,PAI-1:Ag,PAI-1:A明显降低（P分别＜0．05，0．01，0．01，0．01），PLg:Ag,tPA:A,tPA:Ag，最低SaO2明显升高（P分别＜0．05，0．001，0．001，0．01）。提示OSAHS患者血管内皮细胞损伤，凝血功能增强，纤溶系统功能减弱;nCPAP治疗能部分纠正各指标的异常。     

别嘌呤醇对高糖诱导损伤的人脐静脉血管内皮细胞的保护作用

目的探讨别嘌呤醇对高糖损伤后的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）的保护作用及其机制。方法以HUVEC为研究对象,体外培养至第三代,分为：①20mmol／L高糖损伤对照组;②别嘌呤醇保护组（浓度分别为0．1mmol／L、0．2mmol／L、0．3mmol／L）;③维生素C阳性对照组（浓度为100mg／L）。不同浓度别嘌呤醇及维生素C先与HUVEC孵育24h,再加入20mmol／L高糖诱导损伤48h,测定各组细胞上清液中一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）含量及细胞凋亡率。结果别嘌呤醇（0．1mmol／L、0．2mmol／L、0．3mmol／L）药物保护组的细胞凋亡率低于20mmol／L高糖组,其中以0．3mmol／L更为明显（P〈0．01）;细胞培养液中SOD、NO的量均较20mmol／L高糖组增高,其中以0．3mmd／L别嘌呤醇组更为明显（P〈0．01）。药物保护组细胞培养液中合成MDA、ICAM-1较波动性高糖组降低,且在一定浓度范围内（0．05-49．30mmol／L）呈浓度依赖性（P〈0．05）。结论①别嘌呤醇对高糖体外诱导的HUVEC损伤有保护作用,呈浓度依赖性。②别嘌呤醇对高糖体外诱导HUVEC损伤保护作用的机制包括抑制氧化应激、炎症反应及细胞凋亡。     

游离脂肪酸对人脐静脉内皮细胞eNOSmRNA及ET-1mRNA表达水平的影响

目的研究游离脂肪酸（FFA）对离体培养人血管内皮细胞（HUVEC）eNOS mRNA和ET-1mRNA表达水平的影响。方法用不同的FFA培养HUVEC，分为C16：0、C18：0、C18：1、C18：2、C24：0及对照组，每组选用4个浓度，孵育24h，用RT—PCR方法，半定量测定eNOS mRNA和ET-1mRNA的表达。结果①C18：1、C18：2组（t≥200μmol／L）eNOS mRNA表达值低于对照组（P〈0．05）且呈浓度依赖性，而C18：2组eNOS mRNA表达值比C18：1组低（P〈0．05）。②C18：1组以及C18：2组ET-1mRNA表达值低于对照组（P〈0．05），呈浓度依赖性。③C16：0、C18：0、C24：0组（≥200μmol／L），ET-1mRNA表达值增高（P〈0．05），呈浓度依赖性。④C18：0、C18：1、C18：2各组相同FFA水平相比较，ET-1mRNA表达水平依次降低（P〈0．05）。⑤C18：1、C18：2组eNOS mRNA与ET-1mRNA表达值之比高于对照组（P〈0．05）。C16：0、C18：0、C24：0各组此比值低于对照组（P〈0．05）。C18：0、C18：1、C18：2各组同浓度FFA条件下此比值依次升高（P〈0．05）。C16：0、C18：0、C24：0各组同浓度FFA条件下此比值无显著差异（P〉0．05）。结论①FFA对内皮细胞eNOS mRNA表达水平的影响与链长无关，而与FFA饱和程度有一定关系。②不饱和脂肪酸（UFA）降低eNOS mRNA以及ET-1mRNA表达；提示UFA倾向于维护血管舒张功能。③饱和脂肪酸（SFA）呈浓度依赖性促进ET-1mRNA表达可能是导致内皮功能障碍的部分原因。     

卡托普利影响冠心病患者内源性纤溶系统的临床意义及机理

为探讨卡托普利影响冠心病（CHD）患者内源性纤溶系统活性的临床意义及机理，将符合WHO诊断标准的冠心病患者45例，单盲随机分为卡托普利（Captopril）治疗组（23例）及安慰剂对照组（22例），检测两组治疗前后血浆肾素活性（PRA）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、血栓素B2（TXB2）、6-酮-前列腺素F1α（6－keto－PGF1α）、纤维蛋白原（Fg）、组织型纤溶酶原激活剂（tPA）及其抑制物（PAI）含量与活性，用t检验统计分析。结果表明，治疗组治疗前的血浆各参数及治疗后的Fg、TXB2水平，与对照组比较无统计意义（P＞0．05）；治疗4周后，治疗组的血浆AngⅡ、tPA含量及PAI活性均显著低于对照组（P＜0．05～P＜0．01），而6－keto－PGF1α、tPA活性、tPA比活性、活性型tPA及纤溶活性水平则显著高于对照组（P＜0．05～P＜0．01）。提示卡托普利可通过降低血浆AngⅡ水平，促进CHD患者受损血管内皮细胞修复，减少血管内皮细胞PAI的合成与分泌，提高其内源性纤溶系统活性。     

内吗啡肽对糖基化终末产物致人脐静脉内皮细胞表达一氧化氮、一氧化氮合酶、内皮素1的影响

目的探讨内吗啡肽（EMs）对糖基化终末产物（AGEs）培养条件下人脐静脉内皮细胞（HUVEC）合成分泌一氧化氮（NO）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、内皮素1（ET-1）的影响。方法体外制备AGEs修饰的牛血清白蛋白（AGEs—BSA）;分别用AGEs—BSA、EMs（1×10-5、1×10-6、1×10-7、1×10-8mol／LEM1或EM2）＋AGEs—BSA及EMs（1×10-5mol／LEMl或EM2）＋纳洛酮＋AGEs．BSA共同干预HUVEC,同时以只加BSA的HUVEC作为阴性对照。噻唑蓝（MTT）法检测各组HUVEC存活率;放射免疫法检测各组NO、eNOS水平;酶联免疫吸附实验（ELISA）法测定各组ET-1表达量;实时荧光定量聚合酶链反应（RT—PCR）法检测各组eNOS、ET-1mRNA的表达。采用单因素方差分析及t检验进行数据统计。结果与AGEs—BSA组相比,1×10-5mol／LEM1干预组HUVEC存活率增加,NO分泌量减少[分别为0．89±0．05VS0．67±0．02和（14．8±1．4）VS（23．0±0．7）μmol／L,t值分别为9．86、13．18,均P〈0．05],ET-1产生及其mRNA表达降低[分别为（0．85±0．01）VS（0．99±0．01）μg/L和10．6±0．7VS25．6±1．6,t值分别为31．36、50．18,均P〈0．05],eNOS活性及其mRNA表达增加[分别为（2．53±0．20）VS（0．61±0．09）U／ml和0．35±0．00VS0．05±0．00,t值分别为21．50、16．80,均P〈0．05],EM1其他浓度组和EM2各浓度组上述各指标与AGEs—BSA组比较结果相似,差异亦均有统计学意义（t值为2．24～102．4,均P〈0．05）;纳洛酮组上述指标与AGEs—BSA组差异无统计学意义（t值为0．56—2．05,均P〉0．05）,而与各浓度EM1或EM2干预组差异有统计学意义（t值为2．24～64．96,均P〈0．05）。结论EMs可提高AGEs—BSA条件下HUVEC的存活率,降低NO、ET-1浓度,提高eNOS浓度;纳洛酮可阻断EMs的上述作用,提示EMs是通过μ阿片受体发挥作用的。     

20（R）-人参皂苷Rg_3对肿瘤坏死因子-α诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨20（R）-人参皂苷Rg3对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）损伤的保护作用及其机制。方法用肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）诱导HUVEC损伤,采用噻唑蓝（MTT）法观察20（R）-人参皂苷Rg3对HUVEC活性的影响;Fura-2/AM荧光探针负载细胞,用双波长荧光分光光度法测定HUVEC细胞内游离钙离子浓度;用酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定培养的细胞上清液中组织型纤溶酶原激活物（tissue plasminogen activator,t-PA）、1型纤溶酶原激活物抑制物（type-1plasminogen activator inhibitor,PAI-1）浓度的变化。结果 （1）TNF-α损伤HUVEC的条件为：TNF-α的质量浓度为20μg/L,损伤时间为24h。（2）20μg/L TNF-α可显著降低HUVEC的吸光度A值,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;而10～80μmol/L的20（R）-人参皂苷Rg3处理后再加入TNF-α的各组细胞吸光度A值与模型组比较,均明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。（3）HUVEC受到TNF-α的刺激后细胞内游离钙浓度明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;用10～80μmol/L的20（R）-人参皂苷Rg3预处理,则TNF-α诱导的内皮细胞细胞内游离钙浓度升高的幅度均显著降低,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）,其半数抑制浓度为67.2μmol/L。（4）TNF-α20μg/L刺激内皮细胞24h后,与对照组比较,培养上清t-PA浓度显著降低,PAI-1浓度明显升高,差异均有统计学意义（P〈0.01）;20～80μmol/L的20（R）-人参皂苷Rg3预处理后,细胞培养上清中t-PA浓度明显升高,同时可降低PAI-1的分泌,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）,其抑制PAI-1浓度的半数抑制浓度为36.9μmol/L。结论 20（R）-人参皂苷Rg3对TNF-α诱导的HUVEC损伤具有保护作用,其机理可能与降低细胞内钙离子浓度、抑制PAI-1产生和提高t-PA水平密切相关。     

纤维蛋白原、纤维蛋白及其降解产物对共培养血管内皮细胞纤溶活性的影响

目的研究纤维蛋白原（Fg）、纤维蛋白（Fb）及其降解产物（FDP）对共培养体系中人脐静脉内皮细胞组织型纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制剂表达的影响。方法应用Transwell膜建立人脐静脉内皮细胞-兔主动脉平滑肌细胞共培养体系，在不同浓度（0、0．5、1．5、3．0、4．5和6．0g／L）Fg、Fb和FDP干预24h后，分别检测该共培养体系中人脐静脉内皮细胞组织型纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制剂mRNA水平（RT-PCR法）以及培养上清中组织型纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制剂抗原含量（ELISA法）与活性（发色底物法）的变化情况。结果Fg对组织型纤溶酶原激活物的表达没有显著影响，较高浓度的Fg（3．0～4．5g／L）可明显促进纤溶酶原激活物抑制剂mRNA表达、抗原含量及活性升高，但过高浓度的Fg（6．0g／L）却抑制纤溶酶原激活物抑制剂的表达。3．0-4．5g／L的Fb对组织型纤溶酶原激活物mRNA和抗原含量都起上调作用，同时显著下调组织型纤溶酶原激活物活性。较高浓度的Fb（1．5-4．5g／L）则可明显上调纤溶酶原激活物抑制剂的表达，且在mRNA、蛋白和活性水平趋势基本一致。3．0-6．0g／L的FDP均可明显下调组织型纤溶酶原激活物mRNA、蛋白和活性水平，1．5-6．0mg／ml的FDP均可促进纤溶酶原激活物抑制剂的高表达。结论Fg、Fb和FDP可以通过影响组织型纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制剂的表达，引起纤溶活性降低，参与动脉粥样硬化的发展进程。     

红芪多糖对高糖条件下人脐静脉内皮细胞功能的影响

目的研究红芪多糖（HPS）对高糖条件下人脐静脉内皮细胞（HUVEC）合成和释放一氧化氮（NO）和内皮素-1（ET-1）的影响及作用机制。方法从新鲜脐带中分离HUVEC进行鉴定、培养,细胞分为正常对照组、高糖组（30mmol／L葡萄糖）和HPS干预组。MTT比色法分析HPS对高糖诱导HUVEC增殖率的影响,流式细胞术Annexin—V／PI双染法检测细胞凋亡,硝酸盐还原酶法检测上清液中NO的水平,分光光度法检测细胞内一氧化氮合酶（NOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的浓度,酶联免疫吸附（ELISA）法检测上清液中ET-1的含量,实时荧光定量聚合酶链反应（RT—PCR）检测细胞内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、ET-1和c-Jun氨基末端激酶l（JNKl）mRNA的表达水平。组间差异显著性检验使用单因素方差分析,组间两两比较使用LSD法。结果高糖组在6h[（82．4±3．5）％]、24h[（68．2±1．4）％]、48h[（63．0±2．9）％]的细胞增殖率显著低于对照组（100％,P〈0．05）;HPS干预组细胞增殖率随浓度变化呈现先上升后下降的趋势,其中50mg／L[（85．34-4．6）％]、100mg／L[（89．6±1．1）％]、200mg／L[（88．8±3．6）％]HPS干预组较高糖组增加,差异具有统计学意义（均P〈0．05）;高糖组NO[（24．84±1．34）μmol／L]、NOS[（0．54±0．06）U／m1]含量较正常对照组呈现下降的趋势,iNOS[（0．133±0．015）U／m1]和ET_l[1（0．740±0．070）ng／m1]含量则在各时间点均高于对照组,HPS干预组升高不同时间点HUVEC内NO[（23．20±0．55）p．mol／L]、NOS[（0．46±0．10）U／m1]、以及降低iNOS[（0．08±0．020）U／m1]和ET-1[（0．710±0．030）μg/L]的变化,P〈0．05,使其趋向正常水平;HPS可提高高糖所致内皮细胞eNOSmRNA的水平[（0．33±0．02）比（0．23±0．04）],降低ET-1mRNA的水平（2．28±0．31比2．79±0．29）;高糖组细胞内JNK1mRNA水平表达（2．95±0．05）较正常对照组（1．00±0．00）显著增加（P〈0．05）,而HPS干预组（1．45±0．05）则较高糖组（2．95±0．05）明显减少（P〈0．05）。结论HPS对体外高糖诱导HUVEC损伤具有保护作用,这一作用可能与抑制JNK信号通路有关。     

纤溶酶原激活物抑制剂-1在冠状动脉疾病时表达的变化

目的：研究纤溶酶原激活物抑制剂（PAI）-1分子在吸烟患者中的表达以及与冠状动脉粥样硬化病变的关系。方法：入选冠心病患者98例,根据吸烟时间和吸烟支数分为：强吸烟组（45例）和弱吸烟组（53例）;又根据冠脉造影分为：单支病变组（56例）和多支病变组（42例）,比较各组血清PAI-1分子含量。结果：强吸烟组患者血清PAI-1含量明显高于弱吸烟组[（41．17±8．5）mol／L比（34．26±7．8）,mol／L,P〈0．055;多支病变组PAI-1含量明显高于单支病变组[（43．21±8．3）mol／L比（31.16±6．4）mol／L,P〈0．05]。结论：冠状动脉病变严重程度与纤溶酶原激活物抑制剂-1含量有关,吸烟可破坏机体的内环境平衡,对纤溶起到明显的抑制作用。     

同型半胱氨酸诱导人单核细胞分泌趋化因子的氧化应激机制的实验研究

目的探讨同型半胱氨酸（Hcy）诱导人单核细胞分泌趋化因子的致炎症作用及其氧化应激的机制,明确大剂量叶酸在这一过程中的潜在作用。方法用Hcy（100μmol／L）和叶酸（5μmol／L）处理人单核细胞24h。使用酶联免疫吸附实验检测单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、IL-8水平（n=8）。应用激光共聚焦显微镜探测单核细胞内氧自由基（ROS）的表达。使用细胞色素C还原法评价单核细胞内NADPH氧化酶活性。结果Hey显著增加了单核细胞对趋化因子MCP-1的分泌[对照组（1．88±0．51）ng／ml比Hey处理组（4．36±0．72）ng／ml,P〈0．05],而叶酸显著抑制了Hcy诱导的单核细胞分泌MCP-1[Hey处理组（4．36±0．72）ng／ml比Hey与叶酸共同处理组（2．40±0．60）ng／ml,P〈0．05]。此外,Hey显著增加了单核细胞对趋化因子IL-8的分泌[对照组（4．9±1．9）ng／ml比Hey处理组（12．7±1．5）,P〈0．05],而叶酸明显抑制了这一过程[Hey处理组（12．7±1．5）比Hey与叶酸共同处理组（7．2±1．9）ng／ml,P〈0．05]。Hcy（100μmol/L）显著增加了单核细胞ROS产生[对照组100％比Hey处理组（443．0±60．9）％,P〈0．05],叶酸（5μmol／L）抑制了Hcy诱导的单核细胞ROS产生[Hey处理组（443．0±60．9）％比Hey与叶酸共同处理组（133．0±34．7）％,P〈0．05]。Hey显著增加了单核细胞NADPH氧化酶的活力[对照组100％比Hey处理组（520±80）％,P〈0．05],叶酸（5μmol／L）及NADPH氧化酶的抑制剂DPI明显降低了Hcy诱导的人单核细胞NADPH氧化酶的活性[Hcy处理组（520±80）％比Hcy与叶酸共同处理组（310±70）％比Hcy与DPI共同处理组（280±40）％,P〈0．05]。结论Hcy可能通过活化NADPH氧化酶的途径,诱导ROS的产生及分泌趋化因子,叶酸可能通过降低NADPH氧化酶活性这一途径抑制Hcy诱导的ROS的产生及趋化因子的分泌。提示Hcy可能通过诱导炎症的机制促进动脉粥样硬化的发展,叶酸可能通过降低Hcy水平以外的抗氧化机制,对动脉粥样硬化发挥潜在的有益作用。     

不同的脂肪酸对人血管内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 了解游离脂肪酸（FFAs）对体外培养的人脐静脉内皮细胞（human umbilical veinen dothelialcells，HUVEC）凋亡及生长周期的影响。方法 用不同种类，不同浓度的FFAs培养人血管内皮细胞（VEC），然后应用流式细胞术（FCM）对培养的人VEC生长周期及细胞凋亡进行分析。结果 饱和脂肪酸（SFA）（C16：0，C18：0，C24：0），使培养的人VEC生长受到抑制，随浓度升高细胞凋亡率升高；不饱和脂肪酸（USFA）（C18：1，C18：2），当低浓度时，VEC凋亡率较低（P〉0．05，P〉0．01），而当达400或600μmol／L时凋亡率升高（P〈0．05，P〈0．01）。结论 SFA对培养的人VEC具有抑制增殖及诱导凋亡的作用。低浓度USFA对VEC凋亡及生长周期的影响不大，但高浓度时，其诱导凋亡的作用增强。     

同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的探讨同型半胱氨酸（Hcy）对体外培养的人血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡的影响。方法采用组织贴块法体外培养人VSMC,给予Hcy干预。5个不同浓度组Hcy分别为0、100、200、500、1000μmol/L,培养24 h,每个浓度设6个标本;同一浓度（1000μmol/L）分别培养0、6、12、24、48 h,每个时间设6个标本;然后用流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果单因素方差分析显示,5个不同浓度和时间的细胞凋亡率之间存在统计学差异（P〈0.01）;凋亡率与Hcy干预浓度（0-1000μmol/L）和干预时间（0-48 h）存在直线相关关系（r分别为0.998、0.999,P〈0.01）。结论Hcy可以诱导人VSMC的凋亡,而且这一效应呈浓度和时间依赖性。     

白藜芦醇对内皮细胞CD40途径的影响

目的：观察白藜芦醇对内皮细胞CD40途径活化后CD40和E-选择素表达的影响。方法：白藜芦醇（10μmol／L）预孵育人脐静脉内皮细胞（HUVEC）后,以可溶性CD40配体（sCD40L,10μg／m1）刺激,流式细胞术检测内皮细胞E-选择素和CD40分子的表达,半定量逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）检测E-选择素和CD40基因的转录。结果：sCD40L诱导内皮细胞E-选择素和CD40基因的显著转录和表达（P均〈0．01）,白藜芦醇显著抑制E-选择素和CD40基因的转录和表达（P〈0．05～〈0．01）。结论：结果提示白藜芦醇可能通过抑制CD40途径发挥抗动脉粥样硬化作用。     

血清高敏C反应蛋白、同型半胱氨酸与大脑中动脉斑块内出血的关系北大核心CSCD

目的探讨血清高敏C反应蛋白（hs—CRP）、同型半胱氨酸（Hcy）与大脑中动脉斑块内出血的关系。方法检测63例大脑中动脉主于M1段高度狭窄（狭窄率≥70％）患者（分为症状组与无症状组,斑块内出血组与斑块内无出血组）血清hs—CRP、Hey。所有患者均行常规MRI及高分辨MRI（HR—MRI）检查,分析hs—CRP、Hcy浓度水平与大脑中动脉斑块内出血的相关性。结果症状组37例,无症状组26例。症状组斑块内出血发生率15例（40．5％）高于无症状组3例（11．5％）,两者差异有统计学意义（x^2=6．29,P〈0．05）。症状组[hs—CRP（8．97±3．36）mg／L,Hcy（20．00±3．16）μmol／L3高于无症状组[hs—CRP（5．26±3．12）mg／L,Hcy（12．22±1．88）μmol／L3,两者差异均有统计学意义（t=4．43、11．23,P〈0．001）。斑块内出血组（18／63）hs—CRP（10．53±3．59）mg／L,Hcy（21．70±2．40）μmol／L高于斑块内无出血组（45／63）hs—CRP（6．20±3．02）mg／L,Hcy（11．77±1．69）μmol／L,两者差异均有统计学意义（t=4．87、18．58,P〈0．001）。hs—CRP、Hcy浓度水平与大脑中动脉斑块内出血风险呈正相关（r=0．461、0．519,P〈0．001）。结论血清hs—CRP、Hey水平与大脑中动脉斑块内出血关系较密切,可较好地评估斑块的稳定性;大脑中动脉斑块内出血可能增加同侧大脑中动脉供血区急性脑梗死风险。