汉黄芩素对脂多糖诱导细胞因子IL-6和趋化因子RANTES的影响

目的:研究汉黄芩素对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞激活时所分泌的白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)和趋化因子调节激活正常T细胞表达和分泌因子(regulated upon activation,normal T cell expressed and secreted,RANTES)的影响.方法:采用体外LPS诱导小胶质细胞活化模型,用ELISA测定细胞外液中IL-6和RANTES的含量.结果:LPS能激活小胶质细胞并且能使IL-6和RANTES分泌增加,汉黄芩素明显抑制IL-6和RANTES的含量.结论:汉黄芩素有抑制LPS所致小胶质细胞IL-6和RANTES分泌的作用.     

中药天花粉蛋白增强诱导CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数量和功能的初探＊

目的 探讨中药天花粉蛋白（Trichosanthin，Tk）增强诱导CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）数量和功能的作用。方法 研磨6-8周C57BL/6小鼠脾脏，裂解红细胞后得到单个脾脏淋巴细胞悬液，按5×10⁵/mL细胞密度均匀接种在圆底96孔板，设空白组、对照组（增殖体系：1 μg·mL^-1 anti-CD3/28 mAb）、三个不同诱导方案组，培养7天后收集细胞运用流式细胞术检测CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞比例以此确定最佳诱导方案；将低浓度Tk（0.25、0.5、1 μg·mL^-1）作用于诱导体系，7天后采用流式检测Tk对CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞比例的影响；Annexin V-PI染色法检测细胞凋亡情况；Western blotting法测定各组中Treg细胞特异性转录因子Foxp3蛋白表达情况；实时荧光定量 PCR法检测转录因子Foxp3和细胞因子TGF-β、IL-10、IL-6、IFN-γ基因水平的表达；酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组细胞培养上清中分泌IFN-γ和IL-10的浓度。结果 与对照组相比，添加TGF-β（5ng·mL^-1）诱导小鼠脾脏淋巴细胞生成Treg的数量和比例最高，此诱导方案最佳（P < 0.01）；与诱导组相比，低浓度中药天花粉蛋白可显著增强诱导CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞数量和比例，呈剂量依赖性（P < 0.01），且Tk需在诱导体系下发挥作用，单加不能诱导生成Treg细胞，此浓度Tk无细胞毒性；与对照组相比，诱导组和低浓度Tk组Treg特异性转录因子Foxp3蛋白和基因表达水平均显著上调（P < 0.01），II型辅助性T细胞（Th2）分泌的炎症抑制因子IL-10、TGF-β基因表达不同程度上调，反之，I型辅助性T细胞（Th1）分泌的促炎因子IFN-γ、IL-6基因表达呈相反趋势下调（P < 0.01）；与对照组相比，诱导组和低浓度Tk组细胞上清中分泌的IL-10浓度显著增加，IFN-γ浓度明显降低（P < 0.01）。结论 低浓度中药天花粉蛋白可显著增强诱导CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺调节性T细胞，上调Foxp3和Th2型炎症抑制因子IL-10、TGF-β的表达，下调Th1型促炎因子IFN-γ、IL-6的表达，从而发挥免疫抑制功能。     

五种中药提取物对正常小鼠细胞免疫的影响

目的：探讨五种中药（黄芪、枸杞、蒲公英、苦参、肉苁蓉）提取物对小鼠细胞免疫功能的调节作用。方法：以小鼠T淋巴细胞转化反应、小鼠腹腔巨噬细胞IL-1的分泌、小鼠脾淋巴细胞IL-2生成、NK细胞活化、T细胞亚群变化等指标评价五种中药单味提取物对小鼠细胞免疫功能的影响。结果：本实验使用的五种中药均可增强T淋巴细胞增殖反应、巨噬细胞产生IL-1，淋巴细胞释放IL-2，活化NK细胞，T细胞表面标志CD3、CD4、CD8表达增加。结论：五种中药对小鼠的细胞免疫功能具有显著的调节作用。     

黄芩主要成分对PDB＋Ion诱导的Jurkat T 细胞CD69表达的影响

目的 :探讨治疗银屑病的临床有效外用药芩柏软膏中黄芩的主要成分黄芩苷(baicalin)、黄芩素(baicalein)和汉黄芩素(wogonic)对T细胞早期活化标志CD69表达的影响。 方法 :以体外培养的Jurkat T细胞为模型,以二丁基佛波醇酯(phorbol 12,13-dibutyrate,PDB)和离子霉素(Ionomycin,Ion)为刺激剂,采用单荧光染色流式细胞技术,检测Jurkat T细胞经PDB＋Ion刺激4 h后早期活化表面分子CD69的表达,以观察黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素对Jurkat T细胞体外活化的影响。 结果 :在体外培养条件下,黄芩苷(200,100,50 mg ·L^-1)、黄芩素(54,27,13.5 mg ·L^-1)和汉黄芩素(8,4 mg ·L^-1)均能抑制PDB＋Ion刺激时Jurkat T细胞CD69的表达,且有剂量依赖性。 结论 : 黄芩主要成分黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素可明显抑制Jurkat T细胞的体外活化,这可能是黄芩用于治疗银屑病的作用机制之一。     

雷公藤甲素对小鼠淋巴细胞体外活化的抑制作用

目的:研究雷公藤甲素(TRD)对小鼠T淋巴细胞活化标志CD69、CD25及细胞因子IL-2及IFN-γmRNA表达的影响,为阐明其免疫抑制作用提供分子药理学依据.方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的雷公藤甲素预先孵育1 h,用多克隆刺激剂刀豆蛋白(ConA)刺激T细胞活化,利用荧光标记的单克隆体双染技术,流式细胞仪检测TRD对小鼠T细胞CD69、CD25表达的影响;采用半定量RT-PCR技术从mRNA水平检测TRD对细胞因子IL-2、IFN-γ mRNA的表达的影响.结果:TRD能抑制T细胞早期活化标志CD69和CD25,同时TRD也能抑制IL-2及IFN-γmRNA的表达.结论:TRD对T细胞早期活化分子及细胞因子表达的抑制作用可能是其发挥免疫抑制作用的机制之一.     

三氧化二砷对MRL/lpr小鼠CD4+T细胞增殖和IFN-γ、IL-4分泌的调节作用

 目的探讨三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4^+T细胞增殖以及IFN-γ和IL-4转录和翻译水平的影响。方法免疫磁珠分别分选15只MRL/lpr狼疮小鼠和15只C57BL正常对照小鼠脾脏CD4⁺T细胞,进而将CD4⁺T细胞随机分为空白组(RPMI1640),对照组(PHA20mg·L^-1+IL-21000u·mL^-1),ATO组[PHA20mg·L^-1+IL-21000u·mL^-1(48h)后+ATO1.0μmol·L^-1],体外共培养至72h。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测3组CD4⁺T细胞的增殖和抑制水平;酶联免疫吸附反应(ELISA)检测上清液中IFN-γ和IL-4水平;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测上述细胞因子基因的转录水平。结果①分选后获得的CD4⁺T细胞纯度为(94.12±1.08)%,细胞存活率为(95.82±3.41)%;②MRL/lpr小鼠对照组CD4⁺T细胞的增殖水平(A值)(0.343±0.019)较空白组(0.054±0.008)高(P<0.001);却低于C57BL小鼠对照组的水平(0.375±0.018)(P<0.05);③MRL/lpr和C57BL小鼠ATO组CD4⁺T细胞增殖水平(A值)分别为(0.324±0.013)和(0.362±0.013),均低于对照组(P<0.05,P<0.05);④MRL/lpr小鼠对照组IFN-γ的表达水平[(562.287±60.345)ng·L^-1]明显高于C57BL小鼠对照组[(253.208±59.434)ng·L^-1](P<0.05);ATO对MRL/lpr小鼠IFN-γ的抑制程度大于C57BL小鼠(P<0.05);MRL/lpr小鼠对照组的IL-4表达水平[(41.332±8.039)ng·L^-1]与ATO组[(23.046±3.253)ng·L^-1]和C57BL小鼠对照组[(29.303±8.038)ng·L^-1]比较,也具有明显的统计学差异(P<0.05和P<0.05);ATO对MRL/lpr小鼠IL-4的抑制程度高于C57BL小鼠(P<0.05);⑤在转录水平上,与C57BL小鼠相比,ATO对MRL/lpr小鼠IFN-γmRNA和IL-4mRNA的抑制程度更加明显(P<0.05和P<0.05);ATO对IFN-γ和IL-4表达水平的抑制和转录水平的抑制正相关,r=0.720(P<0.001)和r=0.557(P<0.01)。结论MRL/lpr小鼠存在CD4⁺T细胞的异常增殖,ATO能在不影响细胞存活率的浓度下抑制MRL/lpr小鼠CD4⁺T细胞的异常增殖活化,通过抑制其细胞因子IFN-γ和IL-4的mRNA分泌影响两者的表达,且对MRL/lpr小鼠抑制程度大于C57BL小鼠,表明ATO能抑制狼疮鼠的异常免疫功能,可进一步用于SLE的治疗。     

风湿宁胶囊对类风湿关节炎大鼠Th17/Treg平衡和局部炎性因子的影响

目的：通过观察风湿宁胶囊（FSN）对类风湿关节炎大鼠外周血Th17/Treg平衡和对关节腔滑液中炎性细胞因子的影响,进一步探讨其治疗类风湿关节炎（RA）的作用机制。方法：制备II型胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠模型,采用流式细胞学检测方法观察风湿宁胶囊对CIA模型大鼠外周血辅助性T细胞亚群中Th17（IL-17⁺CD4⁺）细胞水平和调节性T细胞（CD4⁺CD25⁺Treg细胞）平衡状态的影响,并采用流式多重液相芯片技术检测CIA模型大鼠关节腔滑液中炎性细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-17A、IL-4、IL-10）的含量,同时与正常大鼠、CIA模型大鼠和雷公藤多苷片（TPT）治疗大鼠比较。结果：与模型组比较,FSN中、高剂量组大鼠Th17细胞比率明显降低（P<0.05）,各治疗组调节性T细胞比率有上调趋势,但差异不显著（P>0.05）,各治疗组对Th17细胞和Treg细胞的影响与TPT组比较,均无显著性差异（P>0.05）;与模型组比较,FSN中、高剂量可明显降低大鼠关节滑液炎症因子TNF-α、IL-6、IL-17A水平（P<0.05）,FSN各组对关节滑液IL-4、IL-10水平未见明显的上调作用（P>0.05）,与TPT组比较,各治疗组对局部细胞因子IL-6、TNF-α、IL-17A、IL-4、IL-10的影响均无显著性差异（P>0.05）。结论：FSN能够明显降低外周Th17细胞比率,减少关节滑液炎症因子IL-6、TNF-α、IL-17A的分泌,但对外周Treg细胞比率和关节滑液中抗炎相关因子IL-4、IL-10的分泌无明显影响。风湿宁胶囊调节Th17细胞、改善机体免疫失衡状态、抑制滑膜细胞炎症介质过度分泌等作用可能是其治疗RA的重要机制。     

可溶性重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用及其可能的机制

 目的　研究可溶性重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白 (rhu-TNFR-Fc)对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用及其初步机制。方法　测非致炎侧继发性足肿胀,用ELISA法测血清中IL-1β ,TNF-α的水平;Griess法测上清NO的含量;流式细胞术检测T淋巴细胞亚群;L929细胞杀伤法、ELISA法检测rhu-TNFR-Fc对大鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α的影响。结果　rhu-TNFR- Fc(0.44,0.88,1.75mg·kg^-1)皮下给药对佐剂性关节炎(AA)大鼠的继发性足肿胀有显著的治疗作用,并呈现较明显的剂量依赖性,改善AA大鼠多发性关节炎病变症状 ;通过中和TNF-α对AA大鼠过高的血清IL-1β、细胞上清NO的产生有明显的抑制作用(P<0.01);但对CD4⁺T淋巴细胞与CD8⁺T淋巴细胞的比值无明显的影响。结论　rhu-TNFR-Fc有明显的抗炎作用,其抗炎作用可能与其中和TNF-α,并进一步使IL-1分泌及NO的生成减少有关。     

氟伐他汀对兔动脉内膜损伤后血管平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨氟伐他汀对兔动脉内膜损伤后血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响.方法将20只新西兰兔随机分为正常组(n=6)、模型组(n=7)、氟伐他汀组(n=7).通过高脂饲料配合腹主动脉内膜剥脱术建立兔动脉内膜损伤模型.取腹主动脉下段,电镜观察血管平滑肌细胞形态;应用RT-PCR法测定原癌基因c-myc和血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)水平;免疫组化法测定胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平.结果氟伐他汀组与模型组相比血管平滑肌细胞增殖水平明显减低;PDGF-BB和IGF-1水平显著降低(P＜0.05);c-mye和PDGF-BB mRNA表达的相关性分析显示二者呈正相关,模型组相关系数为8.603(P＜0.05).氟伐他汀组相关系数为2.467(P＜0.05);而IGF-1与c-myc无相关性.结论氟伐他汀通过抑制PDGF和IGF-1的合成和分泌抑制VSMCs增殖,这种作用部分是通过抑制c-myc表达实现的.     

灵芝三萜对T淋巴细胞的活化作用

目的探讨灵芝三萜对人淋巴细胞活化时CD69和HLA-DR表达的影响。方法淋巴细胞与不同浓度的灵芝三萜分别培养6h和72h后,用流式细胞术测定四色荧光标记抗体,分析T淋巴细胞的活化。结果灵芝三萜对T淋巴细胞的CD69表达有促进作用,以10μg/mL的浓度对CD3CD4亚群上CD69的表达最明显(P<0.05);10μg/mL和20μg/mL两个浓度促进T细胞表达HLA-DR(P<0.05),对CD3CD4亚群上HLA-DR表达促进更显著(P<0.01);同时灵芝三萜对T淋巴细胞亚群的比例无显著影响。结论适当浓度的灵芝三萜能促进人T淋巴细胞的活化,主要是促进CD3CD4亚群的活化,对HLA-DR表达的作用超过对CD69的作用,而对细胞亚群的比例无影响。     

原发性胆汁性肝硬化患者调节性T细胞及相关细胞因子与肝功能损伤的相关性研究

目的观察原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者不同时期外周血CD4+CD25+调节性T细胞亚群表达及细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α水平,探讨其与肝功能损伤的关系。方法以流式细胞术检测PBC患者外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+、CD16+CD56T淋巴细胞;以双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测外周血细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α水平;以20例健康体检者作为正常对照组。结果 PBC患者外周血CD4+CD25+T细胞比例显著低于正常对照组(P<0.05),CD4+、CD8+T细胞群与正常人相比无显著性差异,NK细胞比例显著高于正常对照组(P<0.05)。肝功能严重损伤的PBC患者外周血CD4+CD25+T细胞比例显著低于肝功能轻度损伤者(P<0.05),PBC患者外周血CD4+CD25+T的数量与肝功能损伤指标ALP、GGT呈负相关。PBC患者血清IL-2、TNF-α与对照组比较明显升高,肝功能严重损伤的PBC患者IL-2和TNF-α水平明显高于肝功能轻度损伤者,血清IL-2和TNF-α水平与肝功能损伤指标ALP和GGT呈正相关。结论 PBC患者外周血CD4+CD25+T细胞比例及细胞因子浓度与肝功能损伤密切相关,因此推测T淋巴细胞免疫功能及细胞因子的紊乱在PBC发病机制中起一定作用。     

原发性胆汁性肝硬化患者调节性T细胞及相关细胞因子与肝功能损伤的相关性研究

目的观察原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者不同时期外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞亚群表达及细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α水平,探讨其与肝功能损伤的关系。方法以流式细胞术检测PBC患者外周血CD3＋、CD4＋、CD8^＋、CD4^＋CD25^＋、CD16＋CD56T淋巴细胞;以双抗体夹心酶联免疫吸附（ELISA）法检测外周血细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α水平;以20例健康体检者作为正常对照组。结果 PBC患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞比例显著低于正常对照组（P〈0.05）,CD4＋、CD8^＋T细胞群与正常人相比无显著性差异,NK细胞比例显著高于正常对照组（P〈0.05）。肝功能严重损伤的PBC患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞比例显著低于肝功能轻度损伤者（P〈0.05）,PBC患者外周血CD4^＋CD25^＋T的数量与肝功能损伤指标ALP、GGT呈负相关。PBC患者血清IL-2、TNF-α与对照组比较明显升高,肝功能严重损伤的PBC患者IL-2和TNF-α水平明显高于肝功能轻度损伤者,血清IL-2和TNF-α水平与肝功能损伤指标ALP和GGT呈正相关。结论 PBC患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞比例及细胞因子浓度与肝功能损伤密切相关,因此推测T淋巴细胞免疫功能及细胞因子的紊乱在PBC发病机制中起一定作用。     

环孢素A对小鼠髓源性树突状细胞的影响

 目的研究环孢素A(CsA)对小鼠髓源性树突状细胞(BMDC)的影响。方法以小鼠BMDC为对象,在其培养过程中加入不同质量浓度的CsA(0,0.5和1 mg·L^-1)、脂多糖(LPS)诱导细胞成熟,流式细胞分析其免疫表型的改变,氚-胸腺嘧啶核苷(³H-TdR)掺入法和ELISA法检测其刺激同种T细胞增殖能力和分泌细胞因子等功能变化。结果CsA处理后的树突状细胞(DC),其表面共刺激分子CD80,CD86表达下调,抑制性分子B7-DC表达进一步上调,而另一抑制性分子B7-H1表达无明显变化,该DC刺激同种T细胞增殖能力下降,TNF-α和IL-12P70分泌降低,IL-10分泌增加。结论在BMDC的分化过程中,CsA能直接作用于DC,使其具有不成熟DC的特性,该DC可以诱导免疫耐受,这种作用是通过共刺激分子CD80,CD86表达下调和抑制性分子B7-DC表达上调实现的。     

乳猪胸腺肽对小鼠T淋巴细胞增殖和活化的影响

 目的：研究由乳猪胸腺制备的胸腺肽对T细胞增殖和活化的影响。方法：用³H-胸腺嘧啶核苷掺入法检测细胞增殖反应，并以生物素-链霉亲和素系统作免疫细胞化学法测定膜白介素2受体(mIL-2R)阳性细胞百分率。结果：胸腺肽组的细胞增殖反应(cpm值)和mIL-2R阳性细胞百分率均明显高于对照组(P<0.01)。结论：乳猪胸腺肽对小鼠T细胞增殖和mIL-2R的表达均有促进作用。     

��������������BD759��Tϸ����ֳ�Ļ����о�

??OBJECTIVE To determine the immunosuppressive activity of a novel benzothiazole derivative BD759 on T cell proliferation and its potential mode of action. METHODS T cell proliferation, CD25 expression and cell cycle distribution were measured by flow cytometer. Cytokine levels, including IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17A and IFN-??, were determined by ELISA. RESULTS BD759 significantly inhibited human T cell proliferation, stimulated either by anti-CD3/anti-CD28 monoclonal antibodies or by an alloantigen, in a dose-dependent manner with IC₅₀ values of (3.5??0.7) and (3.3??0.9) ??mol??L^-1, respectively. No obvious cytotoxic effects of BD759 were observed on human resting na??ve T cells and peripheral blood mononuclear cells in our experimental conditions. Furthermore, BD759 did not inhibit CD25 expression or IL-2, IL-4 and IL-10 secretion, but inhibited IL-6, IL-17A and IFN-?? production and induced cell cycle arrest at the G₀/G₁ phase in activated T cells. CONCLUSION These data indicate that BD759 has no effect on T cell activation, but induces T cell cycling arrest at G₀/G₁ phase. BD759 also inhibits the secretion of inflammatory cytokines, such as IL-6, IL-17A and IFN-gamma. Thus, BD759 has the potential to be used as a lead compound for the design and development of new immunosuppressants for treating autoimmune diseases and preventing graft rejection.     

Macrophages, rather than T and B cells are principal immunostimulatory target cells of Lycium barbarum L. polysaccharide LBPF4-OL

Aim of the study

Lycium barbarum L. is a renowned Yin strengthening agent in traditional Chinese medicine. Lycium barbarum L. polysaccharide-protein complex is well-known for its immunoregulatory and antitumor effects. LBPF4-OL is the glycan part of Lycium barbarum L. polysaccharide-protein complex fraction 4 (LBPF4). LBPF4-OL's active contribution in LBPF4 is still blank. In the study, we enrich the polysaccharide part of Lycium barbarum L. polysaccharide-protein complex, and investigate its immunostimulatory effects on mouse spleen cells, T cells, B cells and macrophages.

Materials and methods

Balb/C mice were used in vitro and in vivo studies. In in vitro study, lymphocyte proliferations were analyzed with ³H-TdR incorporation method. Miltenyi MicroBeads were used in the purification of lymphocytes. Activation of T and B cells was analyzed by flow cytometry. In order to obtain the peritoneal macrophages, mice were injected i.p. with 1 mL of sodium thioglycollate 3 days prior to killing. Spleen cells were stimulated with LBPF4-OL and cytokine concentrations in the supernatants were determined by multiplex bead analysis. In in vivo study, mice were injected i.p. with 1 mL of normal saline or 100 μg/mL LBPF4-OL daily for 6 days. Peritoneal macrophage functions were analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay and flow cytometry assay.

Results

Spleen cells and lymphocyte proliferation assay indicated that LBPF4-OL markedly induced the spleen cell proliferation, but could not induce proliferation of purified T and B lymphocytes. Further research revealed that B cell proliferation took place in the presence of activated macrophages or LPS. Multiplex bead analysis showed that LBPF4-OL can obviously induce IL-6, IL-8, IL-10 and TNF-α production of the spleen cells in a concentration-dependent manner. Flow cytometric analysis showed that LBPF4-OL (i.p.) prompts CD86 and MHC-II molecules expression on macrophages. ELISA assay showed that LBPF4-OL can greatly strengthen macrophage releasing of TNF-α and IL-1β.

Conclusion

These results suggested that glycan LBPF4-OL plays an important role in the immunopharmacological activity of Lycium barbarum L. polysaccharide-protein complex, and primary mouse macrophages, rather than T and B cells, are the principal target cells of it.     

桂枝茯苓胶囊对子宫内膜异位症大鼠脾脏 CD4+T淋巴细胞数和NK细胞杀伤活性的影响

目的:观察桂枝茯苓胶囊对子宫内膜异位症(EMs)模型大鼠脾脏CD4+T淋巴细胞数和NK细胞杀伤活性的影响。方法:改进制作大鼠子宫内膜异位症动物模型,ig桂枝茯苓胶囊0.256,1.024 g.kg-1,28 d后取脾脏,分离淋巴细胞,采用流式细胞分析术测定大鼠脾脏中CD4+T淋巴细胞数;将分离的NK细胞与K562细胞共孵育后,MTT法检测其杀伤活性。结果:低剂量组CD4+T淋巴细胞数比模型组提高19.0%,NK细胞杀伤活性提高54.1%,具有显著意义。结论:桂枝茯苓胶囊可显著提高CD4+T淋巴细胞数和NK细胞杀伤活性。     

Aqueous extracts from Menyanthes trifoliate and Achillea millefolium affect maturation of human dendritic cells and their activation of allogeneic CD4+ T cells in vitro

Ethnopharmacological relevance: Menyanthes trifoliate and Achillea millefolium have been used in traditional medicine to ameliorate chronic inflammatory conditions. The aim of this study was to identify the effects of ethanol and aqueous extracts of Menyanthes trifoliate and Achillea millefolium on maturation of dendritic cells (DCs) and their ability to activate allogeneic CD4⁺ T cells.

Materials and methods

Human monocyte-derived DCs were matured in the absence or presence of lyophilised aqoueous or ethanol extracts from Menyanthes trifoliate or Achillea millefolium and their expression of surface molecules analysed with flow cytometry and cytokine secretion measured by ELISA. DCs matured in the presence of aqueous extracts from Menyanthes trifoliate and Achillea millefolium were co-cultured with allogeneic CD4⁺ T cells and the expression of surface molecules by T cells and their cytokine secretion and cell proliferation determined.

Results

Maturation of DCs in the presence of aqueous extracts from Menyanthes trifoliate or Achillea millefolium did not affect expression of the surface molecules examined but reduced the ratio of secreted IL-12p40/IL-10, compared with that by DCs matured in the absence of extracts. Allogeneic CD4⁺ T cells co-cultured with DCs matured in the presence of aqueous extract from Menyanthes trifoliate secreted less IFN-γ, IL-10 and IL-17 than CD4⁺ T cells co-cultured with DCs matured without an extract. Maturation of DCs in the presence of aqueous extract from Achillea millefolium decreased IL-17 secretion but did not affect IFN-γ and IL-10 secretion by allogeneic CD4⁺ T cells.

Conclusions

Aqueous extract from Menyanthes trifoliate induces a suppressive phenotype of DCs that has reduced capacity to induce Th1 and Th17 stimulation of allogeneic CD4⁺ T cells, whereas aqueous extract from Achillea millefolium reduces the capacity of DCs to induce a Th17 response.     

通络散结汤对2型糖尿病大鼠调节性T细胞及炎症因子的影响

目的:探讨通络散结汤对高脂饲料联合链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠模型调节性T细胞及炎症因子的影响。方法:以链脲佐菌素诱导SD大鼠复制2型糖尿病模型,并将造模成功的30只大鼠随机分为三组,即模型组(M组)、通络散结汤高剂量(10 g/kg)组(S组),通络散结汤低剂量(5 g/kg)组(T组),每组10只,同时以10只未造模大鼠为正常对照组(N组)。造模后,通络散结汤各剂量组分别予相应剂量药物灌胃,M组和N组予等体积的生理盐水灌胃; 末次给药后12 h,采集各组大鼠腹主动脉血液,检测血清中空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)等炎症因子及CD₄⁺、CD₈⁺等T淋巴细胞表达水平,同时取大鼠脾脏组织,采用Western blotting法检测CD₄⁺、CD₈⁺等T淋巴细胞蛋白表达水平。结果:与M组比较,N组大鼠血清中FBG、TC、TG等水平显著升高,TNF-α、IL-6、CRP等炎症因子水平显著升高,CD₄⁺T淋巴细胞表达显著升高,CD₈⁺T淋巴细胞表达显著降低,CD₄⁺/CD₈⁺比值显著提升,组间差异均具有统计学意义(均P<0.05); 与N组比较,S、T组大鼠血清中FBG、TC、TG等水平均显著降低,TNF-α、IL-6、CRP等炎症因子水平均显著降低,CD₄⁺T淋巴细胞表达均显著降低,CD₈⁺T淋巴细胞表达显著升高,CD₄⁺/CD₈⁺比值显著降低,组间差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论:通络散结汤对对高脂饲料联合链脲佐菌素诱导的2型糖尿病大鼠具有治疗作用,其作用机制可能与调控炎症因子及T细胞水平有关。