三氧化二砷诱导胃癌细胞凋亡机制探讨

目的：研究三氧化二砷(As2O3)对人胃癌细胞凋亡相关基因的影响，探讨其抗肿瘤的作用机制。方法：As2O3作用于体外培养的人胃癌细胞株，运用免疫组化技术检测p53、bcl-2、bax基因编码蛋白。结果：经As2O3作用的人胃癌细胞p53、bcl-2基因表达水平降低，bax基因表达水平增加。结论：As2O3可能通过多种途径诱导胃癌细胞凋亡。     

三氧化二砷协同肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体抗胃癌细胞的作用及其机制

目的研究三氧化二砷（As2O3）联合肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体（TRAIL）对胃癌细胞生长和凋亡的影响及其机制。方法人胃腺癌细胞株SGC7901以As2O3、rsTRAIL及两者联用处理；用MTT法检测细胞生长；用双染色流式细胞仪检测细胞凋亡；用间接免疫荧光染色结合流式细胞技术检测细胞表面TRAIL R1／DR4和TRAIL R2／DR5分子表达；RT—PCR方法检测TRAIL R1／DR4和TRAIL R2／DR5 mRNA表达。结果As2O3和rsTRAIL在单用或联用时均可以抑制胃癌细胞SGC7901生长，并在一定范围内呈时间、剂量依赖性；联合用药组抑制率显著高于单用As2O3或rsTRAIL组（P〈0．01），金正均方法分析提示两药联用有协同抑制细胞生长效应。As2O3和rsTRAIL在单用或联用时均可以诱导胃癌细胞SGC7901凋亡，联合用药组细胞凋亡率显著高于单用As2O3或rsTRAIL组（P〈0．01）。As2O3单独或联合rsTRAIL作用于SGC7901细胞24h后，死亡受体TRAIL R1／DR4和TRAIL R2／DR5在细胞表面的表达明显上调（P〈0．01），其mRNA表达水平亦相应增加（P〈0．01）。结论As2O3联合rsTRAIL可以协同抑制胃癌细胞SGC7901生长并显著增强两药诱导胃癌细胞凋亡的作用，其机制可能是As2O3增加细胞TRAIL R1／DR4和TRAIL R2／DR5 mRNA表达、上调细胞表面TRAIL死亡受体从而增加胃癌细胞SGC7901对rsTRAIL的敏感性。     

三氧化二砷治疗胰腺癌的作用机制

胰腺癌(pancreatic carcinoma,PC)是胰腺的外分泌性腺癌,在所有常见恶性肿瘤中生存率最低。目前的治疗方法包括放射疗法、化学疗法、姑息手术等只能减轻症状,不能显著延长生命。三氧化二砷(arsenictrioxide,AsO),又称亚砷酸,是中药砒霜的主要有效     

羟基喜树碱诱导胃癌细胞凋亡的作用机制初步研究

目的：研究羟基喜树碱（HCPT）诱导胃癌细胞的凋亡作用及对凋亡相关基因p53,c-myc,bcl-2,bcl-xl和bcl-xs表达的影响,探讨其诱导胃癌细胞凋亡的作用机制。方法：应用TUNEL染色、流式仪、免疫组化和RT－PCR技术等研究HCPT对胃细胞SGC－7901和MKN－45的诱导凋亡作用和对凋亡相关有达的影响。结果：HCPT作用于细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化;细胞核固缩,染色质凝集,呈新月型紧核膜周边,核碎裂,染色质片段化,凋亡小体形成等。流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”。流式细胞仪计数显示,10μg/ml的HCPT诱导胃癌细胞SGC－7901和MKN－45的凋亡率为21．88％和12．34％。TUNEL染色法显示,细胞凋亡指数在1．865－9．54％之间。免疫组化和RT－PCR结果显示：HCPT能够明显下调SGC－7901细胞的P53和bcl-2基因的蛋白和mRNA表达,对SGC－7901细胞的c-myc,bcl-xl和bcl-xs基因的蛋白表达无影响。HCPT作用后MKN－45细胞的p53蛋白和mRNA的表达增加,对MKN－45细胞的bcl-2,c-myc,bcl-xl和bcl-xs基因的表达无影响。结论：HCPT能够诱导胃癌细胞凋亡,可能是通过调控胃癌细胞的P53和bcl-2的表达而诱导胃癌细胞凋亡。     

三氧化二砷逆转白血病细胞多药耐药的作用及机制

以人红白血病多药耐药(MDR)细胞株K562/ADM作为研究对象,分别加入不同浓度的三氧化二砷(AS2O3)共同培养,用台盼蓝拒染法计数细胞,四氮甲唑蓝法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测bcl-2、P-糖蛋白(P-gP)及Annexin-V /PI-凋亡细胞数量.结果显示:①AS2O3对K562/ADM细胞生长有明显抑制作用,其强度与药物浓度及作用时间呈正相关.②AS2O3作用于K562/ADM细胞,能降低阿霉素(ADM)对K562/ADM细胞的半数抑制量(IC50),部分逆转K562/ADM细胞的MDR.③浓度<2.5μmol/L的AS2O3作用于K562/ADM细胞,对K562/ADM细胞P-gP表达无明显影响.④AS2O3作用于K562/ADM细胞,能使其bcl-2表达下降、K562/ADM细胞早期凋亡数增加.提示AS2O3对逆转白血病细胞耐药有一定作用.     

三氧化二砷诱导胰腺癌细胞系PC-3凋亡及其抑制转移的作用

目的:探讨三氧化二砷(亚砷酸,As2O3)注射液诱导人类胰腺癌细胞凋亡及其抑制转移的作用机制.方法:用AS2O3处理人胰腺癌细胞株PC-3,通过流式细胞仪观察细胞的凋亡率及生长周期的变化;用免疫组织化学的方法,检测凋亡相关基因蛋白Fas,Fas-L,Bc1-2和Bax及转移相关基因蛋白CD44和nm23表达的变化.结果:流式细胞仪检测显示明显的凋亡峰出现,并使细胞周期主要被阻滞在S期(14.9%-63.7%);免疫组化结果显示,Bc1-2( ～ ),CD44( ～ )基因的表达下调,Fas( ～ )、Fas-L(-～ )及nm23( ～ )基因的表达上调.结论:As2O3注射液可诱导人类胰腺癌细胞株PC-3凋亡并具有抑制转移作用,这可能与调节Bc1-2,Fas,Fas-L及CD44,nm23蛋白的表达有关.     

三氧化二砷对人胃癌细胞转移相关基因表达的研究

目的 研究三氧化二砷（As2O3）对人胃癌细胞CD44、p53、nm23、H-ras及PCNA等五种转移相关基因的影响,探讨其抗瘤作用。方法 以AS2O3作用于体外培养的人胃癌细胞株,通过免疫组化技术对以上五种基因编码蛋白的表达进行检测。结果 经ASO3作用的人胃癌细胞CD44、p53、PCNA基因编码蛋白表达减少,nm23基因编码表达改变不明显,H-ras基因编码蛋白表达相对处于较低水平。结论 初步证实,AS2O3的抗肿瘤作用可能与下调CD44、P53、PCNA基因编码蛋白表达有关,从而抑制肿瘤的转移。     

三氧化二砷抗肝癌作用研究进展

三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞性白血病取得肯定的临床效果,但对实体瘤作用的研究尚不够深入,其临床治疗肝癌的效果仍需进一步探讨。此文复习国内外文献,对三氧化二砷抗肝癌作用的研究进展作一综述。     

三氧化二砷诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用

目的 探讨三氧化二砷（As2O3）诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用。方法 应用普通光学显微镜、荧光显向镜和流式细胞仪观察As2O3对HepG2细胞株的形态学改变和诱发凋亡率。结果 As2O3作用于细胞后,可看到较典型的细胞凋亡形态学改变,细胞体积缩小,染色质固综合成斑块状,呈半月型紧贴于核膜周边,核碎裂,凋亡小体形成等,AO/EB荧光染色法显示。细胞凋亡率为4.3%-9.1%.As2O3诱导HepG2细胞凋亡作用呈时间依赖性,最佳浓度为2umol/L。流式细胞仪DNA直方图上呈现典型的亚二倍体凋亡峰。As2O3主要作用于细胞周期的G2/M期。结论 As2O3具有诱导HepG2细胞凋亡作用,存在治疗肝癌的潜在价值。     

三氧化二砷治疗肝肿瘤的机制研究

As2O3对肝细胞肝癌(HCC)的抗肿瘤机制尚不明确。一般认为其主要作用途径包括：(1)诱导肿瘤细胞凋亡；(2)抑制肿瘤转移；(3)影响肝癌细胞免疫功能；(4)通过抑制VEGF合成间接抗肿瘤血管形成；(5)与化疗药联用的增效作用。本实验以原发性肝细胞肝癌模型为基础，观察砷剂的抗肿瘤作用。     

氧化砷对胃癌细胞的细胞毒和诱导凋亡作用

目的:研究三氧二化砷(氧化砷)对胃癌细胞的细胞毒和诱导凋亡作用。方法:应用MTT、TUNEL染色、流式细胞仪技术研究氧化砷对不同分化程度的胃癌细胞的细胞毒和诱导凋亡的作用。结果:氧化砷对不同分化程度的胃癌细胞均具有较强的细胞毒作用.10μmol/L氧化砷作用24小时细胞杀伤率为24.6％ 48小时接近50％,氧化砷作用于不同分化程度的胃癌细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化:细胞核固缩,染色质疑集.呈新月型紧贴于核膜周边.核碎裂.染色质片断化,凋亡小体形成等,流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”TU-NEL染色法显示,细胞凋亡指数为1.4％～9.5％。氧化砷的细胞毒作用呈时间和剂量依赖性,且表现为细胞周期特异性,作用48小时后,SGC-7901细胞的细胞周期变化明显,G0/G1期细胞从54.2％下降到17.7％ 而G2/M期细胞则从20.2％上升到63.4％,说明氧化砷主要作用于细胞周期的G2/M期,抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。结论:氧化砷对胃癌细胞具有较强的细胞毒和诱导细胞凋亡的作用.具有治疗胃癌的潜在价值。值得进一步研究     

药物诱导胃癌细胞凋亡的初步探索

目的:了解羟基喜树碱和氧化砷体外诱导胃癌细胞凋亡的能力.探索最佳诱导时间和剂量.并初步阐明其作用机制。方法:利用HE染色法、流式细胞仪和DNA末端原位标记染色法(TUNEL)观察羟基喜树碱和氧化砷在体外对胃癌细胞MKN-28(高分化腺癌)。SGC-7901(中分化腺癌)。MKN-45(低分化腺癌)的作用 结果:药物作用48小时后,羟基喜树碱0.01mg/ml组胃癌细胞MKN-28、SGC-7901、MKN-45的凋亡率分别为30.26％、21.88％和12.35％,氧化砷10μmol/L组胃癌细胞MKN-28、SGC-7901、MKN-45的凋亡率分别为22.52％、13.83％和9.68％其中羟基喜树碱在细胞周期的S期诱导胃癌细胞发生凋亡,而氧化砷则主要作用于G2/M期。     

三氧化二砷对炎症细胞的影响及其分子机制

目的观察三氧化二砷(As2O3)对人T淋巴细胞和人树突状细胞(DCs)凋亡以及对树突状细胞表型、细胞因子分泌的影响,探索As2O3洗脱支架局部抗炎作用的有关机制。方法分离培养人T淋巴细胞,用rhGM-CSF和rhIL-4诱导单个核细胞分化为树突状细胞,流式细胞仪检测As2O3对T淋巴细胞和树突状细胞凋亡的影响;用LPS诱导树突状细胞分化成熟,流式细胞仪检测As2O3干预对树突状细胞成熟表型的影响,ELISA检测As2O3对树突状细胞分泌细胞因子的影响。结果 As2O3在1umol/L浓度时即可明显诱导人T淋巴细胞凋亡,在5umol/L浓度时可诱导树突状细胞凋亡,且均呈剂量依赖性;As2O3在低于凋亡诱导剂量时即可抑制LPS诱导的树突状细胞成熟,下调树突状细胞表面分子CD83和CD86的表达率,并减少树突状细胞IL-10、IL-12和IFN-γ等细胞因子的释放。结论 As2O3具有诱导T淋巴细胞、树突状细胞凋亡以及抑制树突状细胞的免疫成熟的作用,As2O3洗脱支架的局部抗炎作用和As2O3的上述作用有关。     

三氧化二砷对肝癌细胞增殖的影响

为探讨三氧化二砷 (As2 O3)对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用 ,应用台盼蓝拒染法、MTT比色法及细胞克隆形成试验 ,研究As2 O3 对肝癌细胞的增殖抑制和细胞毒作用。结果发现As2 O3 能显著抑制肝癌细胞的生长 ,5 μmol/LAs2 O3 抑制程度明显强于 1μmol/L。 5 μmol/L和 1μmol/LAs2 O3 作用后细胞克隆形成率分别为 1.5± 1.2 %和 12 3± 2 .2 % ,明显低于对照组的 30 .0± 4.2 % (P <0 .0 1)。As2 O3 对肝癌细胞有较强的细胞毒作用 ,且呈显著剂量和时间依赖性。其对于肝癌细胞的杀伤率高于 5 氟脲嘧啶 ( 5 FU )和丝裂霉素 (MMC) ,但无显著差异。As2 O3 与 5 FU及MMC存在协同效应 ,联合应用 ,对肝癌细胞的杀伤率明显升高。说明As2 O3 具有明显的抑制肝癌细胞增殖的作用 ,有必要进一步探讨其对肝癌的治疗价值     

氧化砷对人结肠癌裸鼠腹腔种植的抑制作用

目的 :研究氧化砷 (As2 O3)对结肠癌裸鼠腹腔转移的影响及其作用机制。方法 :建立BALB/C nu/nu裸鼠SW 480结肠癌腹水型移植瘤模型 ,腹腔内注射As2 O3,观察As2 O3对荷瘤鼠的抗癌作用。结果 :5 氟脲嘧啶 (5 FU)、低剂量As2 O3和高剂量As2 O3均可明显延长腹水型荷瘤鼠的生存时间 ,其延命率分别为 40 .1± 7.83 %、47.2 2± 8.69%和 92 .1 0± 1 4 .2 % ,高剂量As2 O3延命率明显高于 5 FU ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 1 )。治疗组腹水CEA水平明显低于阴性对照组。在普通光学显微镜下观察腹水标本 ,部分结肠癌细胞发生了较典型的细胞凋亡形态学改变。腹水细胞流式细胞仪检测可见凋亡峰。低剂量As2 O3凋亡率为 8.36± 2 .1 4 % ,高剂量As2 O3凋亡率为 1 5 .3± 3 .82 % ,均明显高于生理盐水组的 2 .40± 1 .1 8% (P <0 .0 1 )。结论 :As2 O3对结肠癌荷瘤鼠具有延长生命的作用 ,其作用机制主要是诱导结肠癌细胞凋亡。     

三氧化二砷对人髓性白血病HL-60细胞作用机制

目的：为临床治疗提供实验依据；方法：用MTT方法检测了不同浓度的三氧化二砷（As2O3）对人髓性白血病HL－60细胞的生长抑制作用。结果：As2O3对HL－60细胞的抑制作用主要发生于一定浓度［（1～5）×10－5M）］和一定时间（24h内），在此期间形态学出观凋亡小体，DNA电泳可见典型的梯状带，流式细胞学分析出现亚二倍体峰；且发现低浓度的As2O3（10－6～10－7M）对HL－60细胞有诱导分化作用，As2O3对耐维甲酸的HL－60细胞亚系仍有诱导凋亡及分化作用。结论：As2O3主要通过诱导凋亡而使HL－60细胞死亡，低浓度也有诱导分化作用，且与维甲酸之间无交叉耐药性。     

氧化砷诱导胃癌细胞凋亡的实验研究

目的 研究三氧二化砷（氧化砷）对胃癌细胞的诱导凋亡作用。方法 应用ＴＵＮＥＬ染色、流式细胞仪技术研究氧化砷对胃癌细胞ＭＫＮ－４５、ＭＫＮ－２８的诱导凋亡作用。结果 氧化砷作用于不同分化程度的胃癌细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化：细胞核固缩,染色质凝集,呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,染色质片断化,凋 亡小体形成等。流式细胞仪ＤＮＡ直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”。ＴＵＮＥＬ染色法     

生长抑素受体SSTR 3基因对胃癌细胞生长的影响

目的克隆生长抑素受体SSTR3基因,构建其真核表达载体,外进行转染研究,探时SSTR3基因在胃癌细胞中的作用。方法从永生化的胃上皮细胞系GES中提取总RNA,经RT－PCR扩增出SSTR3基因．并构建真核表达载体pcDNA 3．1（＋）－SSTR3,转染胃癌细胞系MKN 45,以MTT法和流式细胞仪观察转染SSTR基因前后使用奥曲肽对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。结果克隆的SSTR 3基因测序正确;构建的真核表达载体pcDNA3．1（＋）SSTR3能高表达SSTR3蛋白;转染SSTR3基因的胃癌细胞系MKN 45加用奥曲肽后,出现明显的增殖抑制和凋亡发生。结论SSSTR3基因介导了生长抑素类似物引起的胃癌细胞的增殖抑制和凋亡发生。通过基因转移使原来不表达SSTR3基因的胃癌细胞再表达,为生长抑素和SSTR3基因治疗胃癌提供了又有效途径。     

氧化砷抗胰腺癌作用及其机制的实验研究

目的:探讨氧化砷(As_2O_3)体外体内抗胰腺癌作用及其可能机制。方法:应用MTT比色法、流式细胞仪、裸鼠肾包膜下移植瘤抑制试验和细胞形态学方法进行检测。结果:As_2O_3抑制胰腺癌细胞生长并具有时间与浓度依赖性,6天组抑制50％细胞生长的药物浓度(IC_(50))为0.625～1.25μg/ml。癌细胞在As_2O_3作用下,G0/G1期细胞比例、凋亡指数(AI)增高,增殖指数(PI)下降,AI/PI比例增大。As_2O_3能显著抑制肾包膜下胰腺癌移植瘤生长。电镜检查证实As_2O_3诱导的胰腺癌细胞具有凋亡与分化特征。结论:As_2O_3抗胰腺癌细胞作用主要通过诱导细胞凋亡与分化而得到体现。