耐多药大肠埃希菌AmpC酶基因型及耐药性

目的探讨临床分离耐多药大肠埃希菌(E.coli)产AmpCβ-内酰胺酶(AmpC酶)现状。方法初筛试验及三维试验:检测产AmpC酶菌株;纸片扩散法(K-B法):测定临床分离71株大肠埃希菌对头孢噻肟(CTX)等10种抗菌药物的抗菌活性;PCR技术检测三维实验阳性菌株的AmpC酶基因。阳性扩增片段送上海生工生物技术公司进行基因测序。结果在71株大肠埃希菌中粗筛阳性产AmpC酶菌株共11株,通过头孢西丁三维试验分离出产AmpC酶的菌株8株,占总菌株数11.27%。药敏结果显示对亚胺培南全敏感,对阿米卡星等9种抗菌药物均有不同程度耐药;耐药模式中以耐多药菌株24株(33.80%);产AmpC酶菌株对多种常用抗生素的耐药率明显高于非产AmpC酶菌株(P<0.05);检测发现2株质粒AmpC酶基因阳性。结论大肠埃希菌的多重耐药的现象突出;产AmpC酶菌株的耐药率明显高于非产AmpC酶菌株;质粒介导的AmpC酶的基因型表现为DHA-1。     

2006～2009年临床呼吸道感染大肠埃希菌耐药性分析

大肠埃希菌是最常见的临床感染病原菌之一,近年来由于各种抗菌药物的广泛使用,导致产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）、AmpC酶菌株的出现,给临床治疗带来了极大困难。为了解大肠埃希菌对常用抗菌药物耐药性变化趋势,对指导临床合理用药,延缓细菌耐药性的产生,控制耐药菌株的播散和流行意义重大。本文分析了2006～2009年我院临床痰标本中所分离大肠埃希菌的耐药监测情况。     

96株大肠埃希菌耐药性及其产ESBLs、AmpC酶菌株基因型检测

目的 了解大肠埃希菌耐药现状及其及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和AmpCβ-内酰胺酶（AmpC酶）菌株基因型,以指导临床医师合理使用抗菌药物。方法自本院尿路感染患者标本中分离大肠埃希菌96株,采用确证试验和改良三维试验检测其ESBLs、AmpC酶表达情况,用K-B法测定其对亚胺培南等16种抗菌药物的敏感性,用PCR法检测TEM、SHV、PER、CTX-M-1群、CTX-M-2群、CTX—M-3群、DHA和ACT-1基因型分布情况,用接合转移试验了解耐药基因转移方式。结果96株大肠埃希菌单产ESBLs30株,同时产ESBLs和AmpC酶4株,单产AmpC酶2株;产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢噻肟四种抗生素耐药率达到100％,而对左氧氟沙星、复方新诺明和呋喃妥因的耐药率亦〉80％,对亚胺培南和美罗培南均敏感;ESBLs基因型以CTX—M和TEM型为主,AmpC酶基因为DHA型,两酶能通过接合转移方式将质粒携带的耐药性传递至受体菌。结论大肠埃希菌所致感染对碳青霉烯类药物较为敏感;临床应及时了解本地区产ESBLs、AmpC酶大肠埃希菌的耐药表型和基因型,以指导临床合理使用抗生素、延缓细菌耐药性产生、控制耐药菌株播散和流行。     

重症监护病房产AmpC酶大肠埃希菌的检测及耐药特性研究

目的探讨我院重症监护病房中大肠埃希菌产AmpC酶的情况及耐药特性。方法采用头孢西丁三相试验检测大肠埃希菌的产AmpC酶情况,采用纸片扩散法做药敏试验。结果重症监护病房分离的大肠埃希菌产AmpC酶情况比较严重,达到30.8%,耐药情况比较严峻。结论对于重症监护病房分离的大肠埃希菌多数为多重耐药菌株,对产AmpC酶株的大肠埃希菌临床经验用药应首选碳青酶烯类抗生素。     

236株大肠埃希菌耐药性分析

大肠埃希菌为临床常见病原菌,近年来其耐药率愈来愈高,其中产超广谱β-内酰酶(ESBLS)及AmpC酶菌株具有较高的耐药率和多重耐药性,给临床治疗带来很大困难.现对我院2009年1月～2012年4月分离的236株大肠埃希菌进行耐药性分析.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中质粒AmpCβ内酰胺酶基因型的检测

目的了解产质粒介导的AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性和基因型。方法收集2002年1月至2004年5月间呼吸科临床标本中分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共110株，用酶提取物三维试验检测AmpC酶；用等电聚焦电泳、耐药质粒电转化试验、聚合酶链反应（PCR）及测序确定AmpC酶基因型。结果大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC酶检出率分别为9．30％（4／43），4．48％（3／67）。药敏试验结果显示产酶株对头孢西丁全部耐药，对第三代头孢菌素、酶抑制剂、氨曲南、阿米卡星及环丙沙星均有不同程度耐药，对头孢吡肟及亚胺培南较敏感。7株产AmpC酶菌株中有5株通过电转化试验可将头孢西丁耐药性传递给受体菌，经PCR扩增和测序证实为质粒介导DHA-1型AmpC酶。结论临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中已经出现产质粒介导AmpC酶菌株，其耐药性能够水平传播，给临床抗感染治疗带来重大威胁。     

老年患者大肠埃希菌产质粒AmpC酶基因型特点及耐药性分析

目的了解临床分离老年患者大肠埃希菌产质粒AmpC酶的基因型及其耐药(DR)性特点,为临床合理选用抗生素提供依据。方法收集2009年度老年患者临床不重复分离大肠埃希菌233株,用三维试验和确证试验分别进行羟氨苄青霉素(AmpC)酶和超广谱β内酰胺酶(ES-BLs)检测,用接合试验证实酶基因型的转移,通过PCR检测及序列分析进行质粒AmpC酶基因型确定,采用药敏纸片扩散法(K-B法)进行药敏试验。结果 233株大肠埃希菌中,头孢西丁抑菌环直径≤17mm的有53株,占22.7%,酶提取物三维试验检测7株阳性,4株(1.7%)PCR扩增出CMY-2型质粒AmpC酶,有1株接合试验阳性;ESBLs阳性占68.7%(160/233)。药敏结果显示产质粒AmpC酶大肠埃希菌对二、三代头孢菌素、氨曲南、头孢西丁和含酶抑制剂的DR率明显高于非产酶株(P0.05),所有大肠埃希菌对亚胺培南和美罗培南均100%敏感。结论从老年患者中成功分离出产CMY-2型质粒AmpC酶大肠埃希菌,产质粒AmpC酶菌株对β-内酰胺类抗生素的耐药性明显高于非产酶株。     

耐头孢西丁革兰阴性杆菌高产AmpC酶发生率及其基因型和耐药性

目的了解耐头孢西丁革兰阴性杆菌高产AmpC酶发生率及其基因型分布和耐药性状况。方法收集2004年9月-2005年3月分离自南京军区福州总院、福建省立医院、解放军476医院、福州?第二医院住院患者155株耐头孢西丁无重复革兰阴性杆菌,采用酶提取物三维试验检测AmpC酶;API药敏试验板和K-B法测定高产AmpC酶菌株对抗菌药物的敏感性;质粒转化试验定位耐药基因;PCR通用引物扩增AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定,确定其基因亚型。结果在155株菌中有36株高产AmpC酶,高产AmpC酶发生率23.2%,分布在13种菌种中,其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌和阴沟肠杆菌的发生率,分别为29.3%、13.9%、6/10、2/6。在36株高产AmpC酶菌株中检测出DHA-1型2株(肺炎克雷伯菌)、CMY-2型4株(大肠埃希菌),新发现基因CMY-22型1株(大肠埃希菌,GenBank登录号:DQ256079),5株携带CMY基因的大肠埃希菌分别同时带有TEM-1型广谱酶,TEM-144(新发现基因,GenBank登录号:DQ256080)、CTX-M-27、和CTX-M-14超广谱β-内酰胺酶。高产AmpC酶菌株耐药性严重,且呈多重耐药,但对亚胺培南和美罗培南的敏感率>87%。结论耐头孢西丁革兰阴性杆菌高产AmpC酶发生率较高,菌种分布较宽,耐药性强,治疗相关菌造成的感染应以亚胺培南和美罗培南为首选药物。福州地区临床分离株发现产DHA-1型AmpC酶肺炎克雷伯菌、产CMY-2型和CMY-22型AmpC酶大肠埃希菌。CMY-2型和CTX-M-27型为中国大陆首次报告,CMY-22型和TEM-144型为国内外首次发现。     

2010～2011年我院住院患者肠杆菌科细菌感染情况及耐药性分析

目的了解医院临床分离肠杆菌科细菌的分布及对常用药物的耐药情况。方法对2010年3月～2011年9月临床分离的378株肠杆菌科细菌应用法国生物梅里埃公司VITEK-32微生物分析仪进行菌株鉴定,采用K-B法进行药物敏感试验。结果鉴定为大肠埃希菌173株、肺炎克雷伯菌120株、肠杆菌属67株,阴沟杆菌9株,产酸克霉伯菌4株,其他肠杆菌6株;大肠埃希菌对哌拉西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为98.41%和94.97%,肺炎克雷伯菌对氨苄西林耐药率最高(100.00%),肠杆菌属对亚胺培南的耐药率最低(0)。结论目前我院住院患者肠杆菌科细菌感染以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主,且对常用抗菌药物耐药严重;临床应加强对耐超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌及其对抗菌药物的耐药性监测,以指导临床医师合理应用抗菌药物、避免多药耐药菌株的产生,从而控制医院感染的发生。     

大肠埃希菌临床分布和耐药性变化

目的:了解大肠埃希菌临床分布以及耐药性,为合理使用抗生素提供科学依据。方法:对2009-2015年间分离的大肠埃希菌的药物敏感试验结果进行回顾性分析,数据采用WHONET5.6软件和SPSS 13.0统计软件进行分析。结果:7年共分离大肠埃希菌3 382株,主要分离自尿液、痰液、分泌物,分别为30.4%、28.6%、13.8%;其科室分布主要来源于重症监护室、肾内科、产科,分别为16.9%、11.8%、8.2%、;大肠埃希菌占分离革兰阴性杆菌的比例在6.9%~15.1%;7年间产ESBLs大肠埃希菌的检出率在48.9%;发现亚胺培南耐药的大肠埃希菌,分离率为7.8%;产ESBLs大肠埃希菌对大部分抗菌药物耐药率明显高于非产ESBLs大肠埃希菌。结论:加强大肠埃希菌细菌耐药监测,了解其耐药变迁,指导临床合理用药,防止耐药菌株,尤其是对碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌的传播。     

某医院大肠埃希菌的临床分布与耐药性分析

目的分析大肠埃希菌在临床感染的分布特点及耐药性,为临床合理选择抗菌药物提供理论参考。方法2013-05/2015-05山东省巨野县大义医院对210株临床标本分离的大肠埃希菌的分布进行回顾性分析,细菌药敏试验采用K-B纸片扩散法,PCR法检测耐药基因分布情况。结果各种临床标本中共分离出病原菌1 595株,其中大肠埃希菌210株,占13.17%;大肠埃希菌主要分离自中段尿、痰液、分泌物、血液及咽拭子,分别占分离株构成比的30.48%、21.43%、19.05%、13.33%和5.71%;产ESBLs大肠埃希菌总检出率为60.95%(128/210),其中以痰标本检出率最高,为82.22%。大肠埃希菌对亚胺培南和美罗培南敏感率均为100.0%;对厄他培南、阿米卡星、头孢西丁、头孢哌酮均敏感,总耐药率分别为1.9%、9.5%、9.5%和14.3%;对青霉素类、三代头孢菌素类及喹诺酮类药物耐药率高,产ESBLs大肠埃希菌的耐药性显著高于非产耐药性的大肠埃希菌。结论山东省巨野县大义医院临床分离大肠埃希菌耐药率较高,临床应根据药敏试验结合患者病情选择抗菌药物。     

老年科患者医院感染病原菌分布及耐药性分析

目的了解我院老年科医院感染患者病原菌分布特点及其对常用抗菌药物的耐药性。方法采用Vitek-2-Compact仪进行菌株鉴定及药敏试验,WHONET5.6软件进行统计分析。结果共检出病原菌766株,以下呼吸道痰标本检出率最高,占59.9%。病原菌检出前几位的依次是铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-酰胺酶(ESBLs)菌株的阳性率分别为70.4%和58.2%;非发酵菌中,铜绿假单胞菌对多种抗菌药物耐药率仍较低;而鲍曼不动杆菌呈多重耐药,亚胺培南耐药菌株分离率高达63.3%。金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为50.3%。结论老年科主要的病原菌对临床常用抗菌药物耐药严重,临床应加强抗菌药物的合理使用和医院感染监控。     

尿路感染患者产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析

目的了解尿路感染患者中产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrumβ-lactamase,ESBLs)大肠埃希菌的耐药现状,指导临床合理用药。方法从我院2015年1月—2016年1月间尿路感染患者的尿液中分离出大肠埃希菌株。所有菌株采用法国梅里埃公司VITEK2 Compact分析仪进行细菌鉴定,纸片扩散法检测大肠埃希菌产ESBLs的产生情况及耐药特点。结果从尿路感染患者中共检出大肠埃希菌432株,其中有226株产ESBLs,检出率为52.31%,药物敏感性试验结果显示产ESBLs菌株对亚胺培南耐药率仅为0.88%;其次为呋喃妥因,耐药率为19.91%;耐药率最高的为氨苄西林,为98.23%;对含酶抑制剂的药物其耐药率也明显增加。与非产ESBLs菌株耐药性相比,产ESBLs株的耐药率显著增高。结论尿路感染患者中分离得到产ESBLs大肠埃希菌的比例较高,积极检测和监测产ESBLs大肠埃希菌及其耐药情况对于临床合理用药、院内感染控制及流行病学调查极为重要。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及药敏结果分析

目的 了解广东东莞地区分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检测和耐药情况。方法 用确证试验对从临床分离的219株大肠埃希菌和73株肺炎克雷伯菌做ESBLs检测，ATB自动细菌分析仪做药敏试验。结果 219株大肠埃希菌检出产ESBLs94株，检出率为42．9％。73株肺炎克雷伯菌检出产ESBLs30株，检出率为41％。产ESBLs与非产ESBLs菌株的耐药率差异有显著性。结论 本院分出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs严重，产酶菌株耐药率很高，应引起临床高度重视。     

外排泵抑制剂羰酰氰间氯苯腙对多重耐药大肠埃希菌的耐药性影响

目的 探讨外排泵抑制剂羰酰氰间氯苯腙(carbonyl cyanide m-chlorophenylhydrazone,CCCP)对多重耐药大肠埃希菌的耐药性影响.方法 采用纸片扩散法(K-B法)进行71株大肠埃希菌对6种抗菌药物的药物敏感性检测,用PCR技术检测受试菌株携带的acrA和acrB基因,用常量肉汤稀释法测定2种氟喹诺酮类抗菌药物对大肠埃希菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentrations,MICs),并对比加入CCCP前后的MICs值.结果 71株大肠埃希菌对3类6种抗菌药物耐药,其中对环丙沙星耐药率最高(73.24％),对氨曲南耐药率最低(30.99％),耐药模式以多重耐药为主(52.11％);外排泵基因acrA和acrB在多重耐药菌株中阳性率高达91.89％和81.03％;加入CCCP前后多重耐药菌株和敏感菌株的MICs值变化差异有统计学意义.结论 主动外排泵抑制剂CCCP能够降低氟喹诺酮类抗菌药物对多重耐药大肠埃希菌的MICs.     

三维法测定耐头孢美唑菌β-内酰胺酶的研究

目的检测耐头孢美唑的肠杆菌科细菌持续高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)及对其他抗生素的耐药状况。方法采用三维法测定AmpC和ESBLs及纸片扩散法测定16种抗菌药物的抑菌环直径。结果50株耐头孢美唑的肠杆菌科菌有24．0％的菌株同时产AmpC酶和ESBLs,有28．0％的菌株单产AmpC酶,有6．0％的菌株单产ESBLs,有46、0％的菌株AmpC酶和ESBLs酶均阴性;AmpC和ESBLs总的阳性率分别为48．0％和26．0％;AmpC和ESBLs总的阳性率分别为44．0％和26．0％;肠杆菌属的产AmpC酶率最高,不动杆菌属、铜绿假单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌、气单胞菌属均能产生AmpC酶,而大肠埃希菌产AmpC酶的几率较小。结论耐头孢美唑的肠杆菌科细菌产AmpC酶几率较高,应加强监测。     

医院重点科室住院患者产ESBLs大肠埃希菌及耐药性动态监测结果分析

目的通过动态监测医院重点科室住院患者产ESBLs大肠埃希菌及耐药特征,指导临床各科室合理应用抗菌药物。方法对2013~2014年医院重点科室住院患者产ESBLs大肠埃希菌及耐药率进行连续监测,采用WHO细菌耐药性监测网提供的WHONET5软件进行数据分析。结果 2013年在4个细菌监测重点科室的住院患者中,共检出产ESBLs大肠埃希菌296株,占检出大肠埃希菌的51.8%;2014年共检出产ESBLs大肠埃希菌640株,占检出大肠埃希菌的54.7%;产ESBLs大肠埃希菌检出率从高到低的科室依次为ICU、神经外科、血液科及呼吸科;产ESBLs大肠埃希菌检出率呈上升趋势。各重点科室住院患者中检出的产ESBLs大肠埃希菌对各种抗生素的耐药率呈上升趋势,神经外科、ICU和血液科住院患者产ESBLs大肠埃希菌耐药率较高,对大部分抗生素的耐药率均大于50%,而呼吸科住院患者产ESBLs大肠埃希菌对各抗生素的耐药率与其他科室比较相对较低。在各重点科室使用的抗生素中,耐药率10%的有哌拉西林/他唑巴唑、亚胺培南、头孢替坦、阿米卡星;耐药率在10%~40%范围的有头孢他啶、头孢吡肟、妥布霉素。结论医院不同科室住院患者产ESBLs大肠埃希菌的检出率及耐药性不同;对于不同科室感染产ESBLs大肠埃希菌的住院患者,在经验性选用抗菌药物治疗的同时,应进行病原菌检测及细菌耐药性试验,根据医院动态病原菌监测结果合理使用抗生素。     

产超广谱3-内酰胺酶大肠埃希菌临床和药物敏感性分析

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药情况及产ESBLs感染的临床特点.方法 对126例大肠埃希菌感染患者(其中产ESBLs菌者70例为阳性组,非产ESBLs菌者56例为阴性组)耐药情况进行分析,通过病例对照分析产ESBLs大肠埃希菌感染的临床特点.结果 产ESBLs大肠埃希菌耐药率明显高于非产ESBLs菌,产ESBLs大肠埃希菌感染者较非产ESBLs者住院时间长、三/四代头孢和喹诺酮类药物的使用率、留置尿管和胃管率高,治愈好转率低.结论 产ESBLs大肠埃希菌株表现出较高的耐药性,临床上应合理使用抗生素,以减少耐药菌株的传播流行.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒中AmpC酶基因型的检测

目的探讨台州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株质粒介导的AmpC酶基因型流行状况。方法应用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,按NCCLS推荐的确证试验测定β-内酰胺酶(ESBLs);采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,并通过酶粗提物头孢西丁三维试验、接合试验和PCR测序等实验分析该菌株的基因型及基因表型。结果299株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率为19.73%(59/299),AmpC酶纸片扩散法筛选阳性率为12.04%(36/299),且36株AmpC酶筛选阳性菌株均为ESBLs阳性株;该菌株中有15株经三维试验证实为AmpC酶阳性,阳性率5.02%(15/299);15株产AmpC菌经接合试验得到15株接合子,经PCR及测序证实与原菌株表型基本一致。质粒型AmpC基因中13株为CIT型,2株为DHA型。结论台州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中已出现质粒携带的AmpC基因,基因型以CIT型为主,其次是DHA型。AmpC基因可能与编码ESBLs的基因存在于同一质粒上,编码的AmpC酶的质粒可在细菌间传递。     

老年与中青年病人产ESBLs大肠埃希菌的分布及耐药性对比分析

目的探讨老年与中青年病人产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的分布及耐药性,为临床医师抗感染治疗提供实验室依据。方法分别选取2015年1~12月住院的老年与中青年病人为研究对象,按照美国临床与实验室标准协会(CLSI)推荐的方法进行ESBLs初步筛选和表型确证试验,对产ESBLs的菌株进行耐药性分析,并对2个人群结果进行比较。结果老年病人中产ESBLs大肠埃希菌主要分布在泌尿外科和普通外科,分别占14.42%和13.46%;中青年组病人中产ESBLs大肠埃希菌主要分布在妇产科和普通外科,分别占21.00%和13.00%。老年与中青年病人产ESBLs大肠埃希菌对大多数β-内酰胺类抗菌药物的耐药率均90%,对碳青霉烯类抗菌药物均敏感,耐药率为0。除氨曲南和头孢吡肟外,老年病人与中青年病人产ESBLs大肠埃希菌的耐药率差异无统计学意义(P0.05)。结论碳青霉烯类是目前治疗产ESBLs大肠埃希菌最有效的一类抗菌药物,医师应根据药敏试验结果合理应用抗生素。