bFGF增强rhBMP-2诱导成骨中Ⅰ、Ⅱ型胶原及碱性磷酸酶的表达

目的：对bFGF增强rhBMP-2诱导成骨中CollagenⅠ、Ⅱ及碱性磷酸酶（ALP）的表达进行研究。方法：110只BALB/c小鼠随机分为2组，每组55只，rhBMP-2/bFGF为实验组，rhBMP-2为对照组，分别于术后3-21d8个时间点取材，用免疫组化法对新生骨组织中的Ⅰ、Ⅱ胶原进行检测；对ALP活性进行定量分析，观察2组在诱导成骨中CollagenⅠ、Ⅱ及ALP的表达情况。结果：⑴Ⅱ型胶原和成软骨、软骨细胞的出现相伴随，但肥大、变性的软骨细胞并不表达Ⅱ型胶原。⑵作为成骨细胞成熟标志物的Ⅰ型胶原，ALP在骨形成期即有表达，但随着成骨细胞的出现，骨组织的形成Ⅰ型胶原表现为高表达，而ALP的表达则呈下降趋势。⑶实验组CollagenⅠ、Ⅱ及ALP的表达早于对照组。结论：bFGF增强了rhBMP-2诱导成骨中CollanenⅠ、Ⅱ及ALP的表达。     

碱性成纤维细胞生长因子增强人重组骨形态发生蛋白-2诱导成骨的调节机理

目的：对ｂＦＧＦ增强ｒｈＢＭＰ－２诱导成骨的调节机理进行探讨。方法：２１０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分为３组,每组７０只,试验侧均位于右后肢。设立ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体、单纯牛松质骨载体为对照组,分别于术后１２ｈ～２１ｄ共１１个时间点取材,观察其诱导成骨过程。结果：ｒｈＢＭＰ－２／ｂＦＧＦ／聚乙烯吡咯啉酮／牛松质骨载体组在诱导间充质细胞增殖、分化,软骨细胞、新生骨形成方面均早于ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体组,成骨量优于ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体组,而单纯牛松质骨载体组在２１ｄ仅出现了少量增殖的间充质细胞。结论：ｒｈＢＭＰ－２和ｂＦＧＦ在诱导成骨调节中存在着协同作用。     

碱性成纤维细胞生长因子增强重组人骨形态发生蛋白-2诱导成骨能力的剂量依赖性

目的 对碱性成纤维细胞生长因子（basic　fibroblast growth factor,bFGF）增强重组人骨形态发生蛋白-2（recombinant human bone　morphogenetic protein-2,rhBMP-2）诱导成骨能力的剂量依赖性进行研究。方法280只BALB/c小鼠随机分为8组,每组35只,实验组rhBMP-2的剂量均为0.5mg,bFGF的剂量分别为0、2、10、40、80、300、500活性单位（IU）;设立单纯牛松质骨载体组为对照组。按实验设计,分别将rhBMP-2混悬液及bFGF-PVP溶液与牛松质骨载体充分混匀,负压下真空抽吸,冻干。将复合植骨材料植入小鼠右侧股部肌袋内,各组分别于术后第3、5、7、9、14、21d六个时间点取材,进行组织学、X线分析以及钙含量测定,观察各组的诱导成骨情况。结果（1）bFGF剂量为10～80IU时,间充质细胞增殖、分化,软骨细胞及新生骨形成均早于其它各组,成骨量多于其它各组,组织钙含量明显高于其它各组（P<0.05）,提示此剂量bFGF使rhBMP-2的诱导成骨能力明显增强。（2）bFGF剂量为0.2、300 IU时,各组在间充质细胞增殖、分化,软骨细胞及新生骨形成以及组织钙含量方面差异均无显著性意义（P>0.05）,提示此剂量bhBMP-2的诱导成骨能力无明显影响。（3）bFGF剂量为500IU时,术后第21d,仅1例标本可见散在的极少量新骨形成,其组织钙含量明显低于其     

β转化生长因子增强人重组骨形态发生蛋白—2诱导成骨的调节机理

随着分子生物学的发展，多种生长因子参与骨和软骨的生成过程逐渐为人们所认识。骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）为一种诱导成骨因子，目前已能利用基因工程获得具有生物活性的ｒｈＢＭＰ２〔１〕，体外和体内实验均证明ｒｈＢＭＰ２〔１〕有明显骨诱导活性〔２〕。它能诱导...     

rhBMP-2在体内诱导成骨中Ⅰ、Ⅱ型胶原mRNA及碱性磷酸酶的表达

目的：研究rhBMP-2在体内诱导成骨中CollagenⅠ、ⅡmRNA及碱性磷酸酶（ALP）的表达。方法：将含rhBMP-2 0.5mg的松质骨载体植入BALB/c小鼠的右股部肌袋内，于术后3-21d间8个时间点取材，用原位杂交法对新生骨组织中的Ⅰ、Ⅱ型胶原mRNA进行检测；定量分析ALP活性，观察rhBMP-2在诱导成骨中CollagenⅠ、ⅡmRNA及ALP的表达。结果：⑴Ⅱ型胶原mRNA的出现是和成软骨、软骨细胞的出现相伴随。肥大、变性的软骨细胞并不表达Ⅱ型胶原mRNA。⑵作为成骨细胞成熟标志物的Ⅰ型胶原mRNA、ALP在软骨形成期即有表达，随着成骨细胞的出现，骨组织的形成，Ⅰ型胶原mRNA仍表现为高表达，而ALP的表达则呈下降趋势。结论：在体内诱导成骨中rhBMP-2促进了CollagenⅠ、ⅡmRNA及ALP的表达。     

TGF-β增强rhBMP-2诱导成骨中Ⅰ、Ⅱ型胶原mRNA及碱性磷酸酶的表达

目的：对TGF-β增强rhBMP-2诱导成骨中Collagen Ⅰ、ⅡmRNA及碱性磷酸酶(ALP)的表达进行研究。方法：BALB／c小鼠110只随机分2组，每组55只。rhBMP-2／TGF-β为实验组，rhBMP-2为对照组，于术后3～21d 8个时间点取材，用原位杂交方法对新生骨组织中的Ⅰ、Ⅱ型胶原mRNA进行检测；对ALP活性进行定量分析，观察2组在诱导成骨中CollageⅠ、ⅡmRNA及ALP的表达情况。结果：(1)Ⅱ型胶原mRNA的出现是和成软骨、软骨细胞的出现相伴随的；(2)做为成骨细胞成熟标志物的I型胶原mRNA、ALP在软骨形成期即有表达，随着成骨细胞的出现，骨组织的形成Ⅰ型胶原mRNA仍表现为高表达，而ALP的表达则呈下降趋势；(3)实验组CollagenⅠ、ⅡmRNA及ALP的表达早于对照组。结论：TGF-β增强了rhBMP-2诱导成骨中CollagenⅠ、ⅡmRNA及ALP的表达。     

成纤维细胞生长因子增强骨形态发生蛋白在小鼠体内骨诱导作用

在啮类动物体内植入骨形态发生蛋白后，引起细胞内一系列生化和形态学变化，在植入物内和其周转形成新骨。这过程受多因素影响。本实验将重组人成纤维细胞生长因子与部分纯化的ＢＭＰ悬液混合后注入小鼠肌肉，观察成骨反应。单独注射牛骨ＢＭＰ组和ｂＦＧＦ组为对照。     

转化生长因子β及重组人骨形成蛋白2对雪旺细胞生物学行为影响的实验研究

目的研究转化生长因子β(transformin ggrowth factorβ,TGF-β)、重组人骨形成蛋白2(recom binant humanbonemor phogenetic protein2,rhBMP-2)对雪旺细胞生物学行为的影响。方法体外培养SD乳鼠雪旺细胞,按5×103/孔接种96孔板,分为3组。A组:加入50ng/mlTGF-β;B组:加入50ng/mlrhBMP-2;C组不作任何处理,作为空白对照组。采用MTT法每天取4孔连测9d细胞数,并绘制生长曲线;流式细胞仪测定细胞周期以观察雪旺细胞增殖情况;ELISA双夹心法测定培养液中神经生长因子(nervegrowth factor,NGF)含量。结果MTT法检测显示A、B组细胞生长曲线远离C组,逐渐上升到第8、9天差异明显,A组较B组上升趋势更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪测定显示A组和B组细胞增殖指数较C组高(P<0.05)。ELISA法检测A组上清NGF含量最高,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论外源性TGF-β、rhBMP-2均能促进雪旺细胞增殖和分泌NGF的功能,而TGF-β更优于rhBMP-2。     

rhBMP-2体外诱导骨质疏松大鼠BMSCs成骨及VEGF表达的研究

目的:观察骨形态发生蛋白-2对骨质疏松时骨髓基质干细胞(BMSCs)体外成骨及成骨因子VEGF表达的影响,为骨质疏松证的防治提供新的方法。方法:将20只6月龄,体重(300±20) g雌性SD大鼠双侧卵巢切除,术后3个月利用双能X线骨密度仪测量大鼠全身骨密度并与术前比较,确保造模成功,并运用全骨髓贴壁法培养骨质疏松大鼠BMSCs,倒置相差显微镜下观察BMSCs形态。随机把骨质疏松大鼠BMSCs 第2代(p2)细胞分成实验组和对照组,分别加入完全培养基(含rhBMP-2)、成骨诱导液进行成骨诱导。2周后茜素红染色法检测各组细胞钙结节的形成,酶标仪测定碱性磷酸酶活性及RT-PCR法检测VEGF的表达量。结果:(1)大鼠全身骨密度:手术前后大鼠全身骨密度分别为(0.179±0.007),(0.158±0.006) g/cm²,差异有统计学意义(t=4.180,P<0.05).(2)茜素红染色:BMSCs(P2)成骨诱导2周后实验组染色效果明显强与对照组。(3)碱性磷酸酶活性:BMSCs(P2)成骨诱导2周后碱性磷酸酶活性实验组明显高于对照组,分别为(15.62±1.27),(8.62±0.93) μg/prot,差异有统计学意义(t=7.709,P<0.01).(4)BMSCs(P2)成骨诱导2周后VEGF表达:实验组明显高于对照组,分别为3.723±0.143,0.950±0.072,差异有统计学意义(t=29.462,P<0.01).结论:rhBMP-2能提高去卵巢骨质疏松大鼠BMSCs的体外成骨能力,可促进成骨因子VEGF的表达,调控VEGF的表达可能是骨形态发生蛋白-2参与骨代谢的机制之一。     

微小颗粒骨自体异位成骨过程中BMP-2、TGF-β1的表达

目的:探讨自体微小颗粒骨在异位诱导成骨过程中BMP-2及TGF-β1的表达及该方法的成骨机制。方法:日本大耳白兔48只,随机分为微小颗粒骨(A组)和块状骨(B组)两组,每组24只,取左侧髂骨,修剪成0.3×0.5×l.0cm骨块,A组将骨块制成微小颗粒骨,B组骨块不处理,均植入右侧臀大肌肌袋,于术后1、3、5、7、11、14、21、28d取材(包括移植物及周围软组织)切片,免疫组化染色后显微镜下观察结果,并行计算机图像分析。结果:术后5d颗粒骨组开始有软骨生成,7d时达到高峰,21d后有骨吸收;块骨组则以骨吸收为主。各时段颗粒骨组BMP-2和TGF-β1含量与块状骨组比较均有显著性增高,差异有显著性。结论:自体微小颗粒骨异位成骨强于块状骨,BMP-2及TGF-β1在此过程中发挥重要作用。     

骨质疏松与骨诱导生长因子

随着人类平均寿命的延长,人口老龄化日益严重,由老年人生理老化引起的疾病,给家庭和社会带来了一系列社会经济问题.骨质疏松症(Osteoporosis)以其发病普遍及后果严重而受到广泛关注.骨质疏松症以骨量减少和骨折易感性增加为特征,一旦发生骨折,临床治疗非常困难,并发症发生率高,严重危害老年人的身体健康,是老年人致死、致残的重要原因.目前国内外学者多注重骨质疏松症发病原因及预防措施的研究,而对骨质疏松症的直接不良后果-骨质疏松性骨折的研究较少.     

血管内皮生长因子在骨形态发生蛋白-2诱导成骨过程中的表达

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）在骨形态发生蛋白-2（BMP-2）诱导成骨过程中的表达。方法采用昆明鼠20只，外科手术建立股部肌袋诱导成骨模型，以左侧为实验组，右侧为对照组。实验组肌袋内植入以明胶和羟基磷灰石复合物为载体的重组人骨形态发生蛋白（rh-BMP）-20．25mg；对照组仅植入空白载体。分别于术后3、7、14和21d取材，采用免疫组织化学和Western blot法检测VEGF的表达情况。结果术后3d可见大量问充质细胞聚集，胞质出现VEGF的表达（Western blot IA=4221．323±178．672），但随着间充质细胞分化为前软骨细胞并不断成熟，VEGF在间充质细胞内的表达逐渐消失，而在成软骨细胞和软骨细胞内的表达水平迅速提高（Western blot IA=7139．558±289．347），VEGF在成熟软骨细胞中的表达最为活跃（Western blot IA=15849．848±137．462），至到新骨形成，在成骨细胞和骨细胞中仍可检测到VEGF的强烈表达（Westernbid IA=9463．268±548．453）；而对照组则未检测到VEGF的表达。结论VEGF的表达贯穿BMP-2诱导成骨的全过程，并在成熟软骨细胞和成骨细胞呈现强烈表达；BMP-2具有促进VEGF合成与分泌的作用．rhBMP-2对成骨细胞VEGF表达的促进作用。     

重组合异种骨在小鼠体内诱导成骨活性的剂量依赖性研究

本文是本所重组合异种骨（ＲＢＸ）的系列研究之一。采用碱性磷酸酶和钙量测定，成骨量微机图像分析，对牛骨形态发生蛋白含量不同的ＲＢＸ诱导成骨活性进行了研究。结果提示了ｂＢＭＰ含量不同的ＲＢＸ诱导面骨能力的差异及其下限，并认为实验采用的成骨定量方法，是较可靠易行的指标。     

成骨蛋白的生物学与应用

成骨蛋白又称骨形态发生蛋白，成骨蛋白－１（ＯＰ－１）又称ＢＭＰ－７与ＢＭＰ－２的均属转化生长因子β（ＴＧＦ－β）超家族成员，将重组人ＯＰ－１和ＢＭＰ－２应用于骨缺损的动物实验的结果令人满意，并已开始向临床应用过渡。     

rhBMP-2/异体骨复合骨应用于兔腰椎植骨融合的实验研究

目的评价rhBMP-2/异体骨复合骨在兔腰椎后路横突间植骨融合中的效果,探讨此复合骨替代自体骨用于腰椎后路横突间植骨融合的可能性。方法30只新西兰大白兔随机分为三组,行后路腰椎横突间植骨融合术,分别植入自体髂骨条、rhBMP-2/异体骨复合骨及单纯异体髂骨条。术后喂养6周,处死动物,取出标本,分别采取盲法进行手工测试,影像学、组织学观察及单向拉伸的生物力学测试,并用图像分析系统定量分析植骨区内成骨量,取得数据后进行综合评价。结果手工测试显示rhBMP-2/异体骨复合骨组融合率(90%)明显优于自体骨(40%)及异体骨组(20%)(P＜0．05)。影像学及组织学显示rhBMP-2/异体骨复合骨组成骨速度及骨成熟程度均优于其它两组。单向拉伸生物力学测试结果表明复合骨组和自体骨组两组间无明显差别(P＞0．05),但均明显优于异体骨组(P＜0．05)。定量分析显示植骨区内新骨形成面积复合骨组和自体骨组两组间无明显差别(P＞0．05),但均明显优于异体骨组(P＜0．05)。结论在兔腰椎后路横突间植骨融合术中,rhBMP-2/异体骨复合骨可促进骨形成并提高融合率,可作为替代自体骨的理想材料。     

多孔β—磷酸三钙和骨形态发生蛋白复合物异位诱导骨的实？…

目的 研究β－磷酸三钙（β－ＴＣＰ）和骨形态发生蛋白（ＭＢＰ）的复合物（β－ＴＣＰ／ＢＭＰ）诱导成骨的作用。方法 在理化性质检测和生物安全性评价的基础上进行小鼠体内诱导成骨的实验，评价该材料的骨诱导能力。结果 多孔β－ＴＣＰ钙磷比为１．５，平均孔径为４００μｍ，平均气孔率为４２．３％，抗压强度为０．８２６ＭＰａ（１ＭＰａ＝７７７７．８ｍｍＨｇ），在生理盐水中有一定的溶解度。溶血、急性毒性和致热检测     

双梯度羟基磷灰石涂层复合rhBMP-2研究

目的 :检验双梯度生物活性涂层假体材料的生物学特性 ;检测rhBMP 2对HA涂层与骨界面之间生物连接的影响。方法 :将同一规格的 3种不同植入体 (Ti、Hati、rhBmp 2HaTi)植入狗股骨 ,术后 3、6、16周分别处死三组动物 ,通过X线照片、不脱钙带植入体的组织切片、计算机图像分析、顶出试验、扫描电镜等检查手段进行观察。结果 :早期骨 -假体界面骨性结合率比较 :Ti 相似文献   

β转化生长因子与骨改建

β转化生长因子(TGF-β)对骨形成有重要作用。有关TGF-β生物学的研究将有助于了解TGF-β及有关分子对骨形成的影响。在活体内及活体外开展研究可以得到有关有效剂量、适当的治疗时期、组织特异性、受体结合、细胞内信号发放,以及调节其活性的局部和全身因素方面的资料,这样,TGF-β所以能增进骨的生长,帮助骨折愈合的机理得以明确。     

BMP—2在成纤维细胞对BMP—3表达的调节作用

目的：观察在BMP－2作用下,成纤维细胞表达BMP－3的情况,探讨BMP－2促进成纤维细胞成骨表型表达的机制。方法：向培养的成纤维细胞内添加BMP－2,当细胞生长到60％时免疫组化观察正常与BMP－2作用下的成纤维细胞内表达BMP－3的情况。结果：下成纤维细胞内无BMP－3表达,在BMP－2作用下成纤维细胞出现BMP－3表达。结论：在成纤维细胞,BMP－2可促进BMP－3的表达。