原发性肝癌患者红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力与红细 …

目的 研究原发性肝癌患者红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力与红细胞ＣＲ１基因组密度多态性及活性的相关性。方法 采用ＰＣＲ和ＨｉｎｄⅢ酶切技术测定红细胞ＣＲ１基因组密度多态性变化，同时用ＥＬＩＳＡ和肿瘤红细胞花环试验测定红细胞ＣＲ１活性，并进行比较。结果 原发性肝癌患者红细胞ＣＲ１基因型点突变比率（４３．６％）明显上升，与正常人（２０％）相比，差异有显著性（Ｐ〈０．０５）；原发性肝癌患者３种ＣＲ１基因型的红     

肺癌患者红细胞CR1基因密度型分布与红细胞免疫变化的研究

目的检测３２例肺癌患者红细胞ＣＲ１基因密度型分布、红细胞免疫粘附肿瘤细胞功能及ＳＯＤ酶活性、β－内啡肽含量。方法ＰＣＲ法检测红细胞ＣＲ１基因密度多态性；红细胞花环法检测红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力；放免法测定ＳＯＤ酶活性；ＲＩＡ法测定β－内啡肽含量。结果经与３１例正常人比较显示：肺癌患者ＣＲ１基因密度多态性分布与正常人不一致（χ２＝３．１９，Ｐ＜０．０５）；红细胞免疫功能及ＳＯＤ酶活性较正常人明显降低（Ｐ＜０．０１）；β－内啡肽较正常人明显升高（Ｐ＜０．０１）。同时还发现肺癌患者的红细胞粘附肿瘤细胞功能与ＳＯＤ酶活性呈正相关（ｒ＝０．３９．Ｐ＜０．０５）。结论肺癌患者红细胞免疫功能低下；ＳＯＤ酶活性降低；β－内啡肽含量升高有部分与红细胞ＣＲ１基因密度型改变有关     

白血病患者红细胞CR_1活性及其免疫调节因子测定的临床应用研究

本文采用多种指标检测４２例白血病患者的红细胞、白细胞免疫功能，并与正常人作了比较。肿瘤细胞花环法测定白血病患者红细胞ＣＲ１活性结果比正常人明显降低（Ｐ＜０．０１）；红细胞ＣＲ１活性抑制因子升高、促进因子降低与正常人相比均有显著差别（Ｐ＜０．０１），ＣＩＣ比正常人明显升高（Ｐ＜０．０１）；ＣＤ４、ＣＤ８也比正常人明显降低（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。提示：白血病患者红细胞和白细胞免疫功能均发生异常变化。此外，对急性白血病患者部分病例治疗前后的红细胞ＣＲ１活性及其免疫调节因子的变化进行了追踪检测以探讨其临床意义。     

肿瘤患者红细胞CR1基因组密度多态性的变化

目的研究恶性肿瘤患者红细胞ＣＲ１基因组密度多态性变化规律。方法采用ＰＣＲ和ＨｉｎｄⅢ酶切技术对恶性肿瘤红细胞ＣＲ１基因组密度多态性变化进行研究。结果１６４例恶性肿瘤患者红细胞ＣＲ１基因突变率４１．５％，明显高于１８９例正常人群（２１％），特别是年轻恶性肿瘤患者红细胞ＣＲ１基因点突变率可达６６．７％（２１例中），明显高于年轻正常人群（１９．８％，９６例）。在恶性肿瘤患者中红细胞ＣＲ１基因ＨＨ型的红细胞ＣＲ１活性高于红细胞ＣＲ１基因ＬＬ型患者，但低于正常人红细胞ＣＲ１活性。结论这些结果表明，红细胞ＣＲ１基因点突变率升高与免疫发病机理有相关性。     

紫外线照射全血对红细胞免疫功能及脂质过氧化的影响

为了研究Ｂ波段紫外线（ＵＶＢ）照射全血对红细胞免疫功能及全血抗氧化能力的影响，利用１．５Ｊ／ｃｍ２的ＵＶＢ对全血进行照射，结果发现照射后红细胞Ｃ３ｂ受体花环促进率（ＲＦＥＲ）明显升高（Ｐ＜０．０５），而红细胞Ｃ３ｂ受体（ＲＣＲ）花环率升高更为明显（Ｐ＜０．０１），红细胞免疫复合物（ＲＢＣ－ＩＣ）花环率及与红细胞Ｃ３ｂ受体花环抑制率（ＲＦＩＲ）在照射前后无明显改变（Ｐ＞０．０５），红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性在照射后明显升高（Ｐ＜０．０１），而血浆中丙二醛（ＭＤＡ）含量无明显改变（Ｐ＞０．０５）。说明紫外线照射能改善红细胞免疫功能及全血的抗氧化能力。     

肺癌患者红细胞CR1基因密度型分布与红细胞免疫变？…

目的 检测３２例肺癌患者红细胞ＣＲ１基因密度型分布，红细胞免疫粘附肿瘤细胞功能及ＳＯＤ酶活性、β－内啡肽含量。方法 ＰＣＲ法检测红细胞ＣＲ１基因密度多态性，红细胞花环法检测红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力；放免法测定ＳＯＤ酶活性；ＲＩＡ法测定β－内啡肽含量。     

乙型肝炎患者红细胞CR1密度相关基因多态性与CR1活性的相关性

为研究乙型肝炎患者红细胞ＣＲ１活性与ＣＲ１密度相关基因多态型别的关系,采用ＰＣＲ加ＨｉｎｄⅢ酶切技术测定红细胞ＣＲ１密度相关基因多态型别（ＨＨ、ＨＬ、ＬＬ型）,采用红细胞ＣＲ１（ＥＣＲ１）免疫粘附活性（ＲＣＩＡ）和粘附ＩＣ量免疫酶联（ＥＬＩＳＡ）法测定红细胞ＣＲ１活性。乙型肝炎患者ＨＨ型比率是７３９％（３４／４６）,正常人ＨＨ型比率是８０％（６４／８０）,ＨＨ型乙型肝炎患者ＥＣＲ１ＲＣＩＡ（３７８±０２９ｎｇＡＨＧ／１０７ＲＢＣ）明显高于ＨＬ型乙型肝炎患者（１８８±０２６ｎｇＡＨＧ／１０７ＲＢＣ）和ＨＨ型正常人（２６０±０３０ｎｇＡＨＧ／１０７ＲＢＣ）。提示乙型肝炎患者红细胞免疫功能低下是获得性的。     

多抗甲素对荷S180瘤小鼠红细胞免疫功能的影响

观察了荷Ｓ１８０瘤小鼠红细胞免疫功能的改变及多抗甲素治疗对其红细胞免疫功能的影响。试验分三组，即正常组、肿瘤组、多抗甲素治疗肿瘤组。荷瘤１０天后，检测各组红细胞免疫功能各项指标。结果显示：荷瘤小鼠的红细胞免疫功能较正常对照组全面下降（Ｐ＜０．０１）。表现为：１．ＲＢＣ－Ｃ３ｂ受体花环率下降，ＲＢＣ－ＩＣ花环率上升，为继发性红细胞Ｃ３ｂ受体免疫粘附功能下降。２．血清中红细胞Ｃ３ｂ受体免疫粘附促进因子活性下降，而抑制因子活性上升。３．红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力下降。经多抗甲素治疗后，可使荷瘤小鼠红细胞抗肿瘤免疫功能较未治疗组全面上升（Ｐ＜０．０１）。提示荷瘤小鼠的红细胞免疫功能低下，多抗甲素抗肿瘤活性与提高红细胞免疫功能有关     

糖皮质激素受体阻断对大鼠白细胞粘附的作用

目的明确ＧＲ阻断后对白细胞粘附的作用及可能的作用机制。方法１．在体实验。观察肠系膜微循环白细胞贴壁粘附数。 ２．高体实验。（１）ＰＭＮ与玻璃珠粘附;ＰＭＮ粘附率（％）粘附：ＰＭＮ粘附率（％）＝粘附前ＰＭＮ计数一洗脱液ＰＭＮ计数（３）ＰＭＮ粘附 粘附前ＰＭＮ计数分子ＣＤ１８：ＥＬＩＳＩＡ检测;（４）ＣＤ１８表达和ＰＭＮ与ＩＣＡＭ－１包被磁珠粘附的关系：ＰＭＮ与ＩＣＡＭ－１包被磁珠粘附,同时测定ＣＤ１８表达。结果１．在体实验。对照组仅有少量白细胞贴壁粘附（２．５０±２．１７）,阻断ＧＲ后白细胞贴壁粘附±Ｄｅｘ组的粘附率与ＴＮＦ组相比无显著差异（Ｐ＞０．０５）,Ｄｅｘ±ＴＮＦ组的粘附率与ＴＮＦ组相比有下降趋势．但差异不显著。ＴＮＦ＋Ｄｅｘ＋ＲＵ４８６组的粘附率与ＴＮＦ组和对照组相比均有差异（分别是 Ｐ＜０． ０５,Ｐ＜０． ０１）。 ２． ＰＭＮ与 ＥＣ粘附： ＴＮＦ组与ＴＮＦ＋Ｄｅｘ组结果同ＰＭＮ与玻璃珠粘附。Ｄｅｘ＋ＴＮＦ组的粘附率与ＴＮＦ组相比差异显著（Ｐ＜０．０５）。ＴＮＦ＋Ｄｅｘ＋ＲＵ４８６组的粘附率与对照组相差十分显著（Ｐ＜０．０１）,与ＴＮＦ组相比,两者无明显差异。３．ＰＭＮ与ＩＣＡＭ－１包被磁珠粘附：ＴＮＦ     

大鼠严重体表烫伤后心脏β－肾上腺素能受体腺苷酸环化酶系统的变化

大鼠背部３０％体表面积皮肤三度烫伤后３、６、１２、２４、４８ｈ，心肌ｃＡＭＰ含量分别减少１７．１％、２４．７％、３８．１％、３４．２％、２５．６％（Ｐ＜０．０５或０．０１）；心肌腺苷酸环化酶（ＡＣ）基础活性分别降低３２．７％、４２．３％、５７．７％、４６．２％、４０．４％（Ｐ＜０．０５或０．０１）；心肌磷酸二酯酶活性无明显变化；β－肾上腺素能受体（β－ＡＲ）密度明显降低（下调），但亲和力无明显变化。相关分析表明，ｃＡＭＰ含量的减少与ＡＣ活性降低呈显著正相关。实验还发现，烫伤后３、６ｈ，心肌膜ＡＣ基础活性及异丙肾上腺素（Ｉｓｏ）刺激活性均明显降低，而氟化钠（ＮａＦ）和法司可林（ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ，ＦＳＫ），刺激活性无明显变化，提示此时ＡＣ活性降低主要由β－ＡＲ下调所致。烫伤后１２、２４、４８ｈ．ＡＣ基础活性和Ｉｓｏ刺激活性降低更为明显，ＮａＦ刺激活性也显著降低，但ＦＳＫ刺激活性仍无变化，提示此时ＡＣ活性的降低与β－ＡＲ下调和Ｇ－蛋白偶联ＡＣ催化亚基的功能障碍有关。上述β－ＡＲ－ＡＣ系统功能的减低是体表烫伤后心功能障碍的重要机制之一。     

卵巢癌患者红细胞CR1密度相关基因组多态性与血细胞天然免疫活性相关性研究

目的　对卵巢癌患者血细胞天然免疫活性与红细胞CR1密度相关基因组多态性的相关性进行对比研究。方法　对 5 1例卵巢癌、4 3例良性肿瘤患者和 4 0例正常妇女采用PCR RFLP方法测定红细胞CR1(ECR1)密度相关基因多态性 ,采用红细胞或淋巴细胞免疫粘附肿瘤细胞的方法对血细胞天然免疫活性进行了测定。结果　发现卵巢癌患者红细胞和淋巴细胞CR1天然免疫活性明显低于良性卵巢肿瘤患者和正常人。红细胞CR1密度相关基因高表达 (HH)型组的血细胞天然免疫活性明显高于中表达 (HL)型 ,而HL型明显高于低表达 (LL)型。加红细胞组淋巴细胞CR1天然免疫活性明显高于不加红细胞组 (P <0 .0 1)。结论　红细胞增强淋巴细胞CR1天然免疫活性与红细胞CR1密度相关基因型密切相关。     

卵巢恶性肿瘤患者红细胞CR1密度相关基因多态性与NK细胞活性相关性研究

对 5 1例卵巢癌、 43例良性肿瘤和 40例正常妇女采用PCR PFLP方法测定红细胞CR1(ECR1)密度相关基因多态性 ,采用K5 6 2细胞毒试验测定NK细胞活性。发现卵巢癌患者NK细胞活性明显低于正常人和良性卵巢肿瘤患者 (P <0 0 1)。ECR1密度相关基因多态性高表达型 (HH )的NK细胞活性明显高于ECR1中表达型 (HL )的NK细胞活性 ,而ECR1密度相关基因组HL型的NK细胞活性明显高于ECR1低表达型 (LL )的NK细胞活性。这些结果表明红细胞增强NK细胞活性与红细胞CR1密度相关基因组多态性型别密切相关     

正常人红细胞CR1密度相关基因组多态性分布分析

采用PCR和Hind Ⅲ酶切技术研究了正常人红细胞CR1密度相关基因组多态性,发现在189例中国正常人群中,红细胞CR1密度相关基因HH型比率是79％,HL型比率是18％,LL型比率是3％。在30岁以上成年人中,64例男性的HH型（85.9％）明显高于63例女性HH型比率（68.2％,P<0.01）。在94例女性组中,60岁以上人群的HH型比率是62％与10～19岁女性人群的HH型比率94％相比有显著差异（P<0.05）。这些结果表明老年人红细胞CR1密度相关基因多态性与性别相关。     

癌症患者红细胞CR_1基因多态性研究

为了探讨女性癌症患者红细胞补体受体Ⅰ型(ECR_1)密度相关基因多态性的变化,采用血细胞DNA PCR和HindⅢ酶切技术对44例癌症女性患者红细胞CR_1密度相关基因多态性分布进行了测定,发现癌症女性患者红细胞CR_1密度相关基因点突变率高达54.5％,尤其是40岁以下的女性癌症患者红细胞CR_1密度相关基因点突变率(72.73％)比40岁以下女性正常人(20.80％)明显增高。表明年轻女性癌症患者癌变易感性与红细胞CR_1密度相关基因缺陷有一定的关系。     

慢性肝炎患者ECR1基因多态性、数量及活性的变化

目的　研究慢性肝炎 (CH)患者红细胞Ⅰ型补体受体 (ECR1)密度相关基因多态性、数量表达及活性的变化。方法　采用PCR和HindⅢ酶切技术测定ECR1分子基因多态性 ,采用酶联免疫法定量测定ECR1分子的数量 ,采用红细胞天然免疫粘附功能试验测定ECR1粘附活性。结果　慢性肝炎患者ECR1密度相关基因多态性与健康人群相比差异无显著性。活动性慢性肝炎、肝功能异常的肝炎后肝硬化患者ECR1的数量表达及活性明显低于健康人群 (t=9 87,P <0 0 0 0 1) ,失代偿性肝炎后肝硬化患者的ECR1分子数量明显低于代偿性肝炎后肝硬化患者 ,但肝功能正常的慢性肝炎患者ECR1数量与健康人群比较无明显变化。结论　慢性肝炎患者ECR1数量表达及活性缺陷系后天引起 ,测定慢性肝炎患者ECR1的数量对临床病情判断及发展预测有重要参考价值。     

Genomic determination of the CR1 (CD35) density polymorphism on erythrocytes using polymerase chain reaction amplification and HindIII restriction enzyme digestion.

The density of CR1 (the C3b receptor, CD35) on erythrocytes from normal individuals is determined by a codominant bi-allelic system associated with a single base mutation within an intron of the CR1 structural gene, leading to an additional polymorphic HindIII endonuclease site. The CR1 genotype is determined by HindIII digestion of genomic DNA and Southern blotting. We have developed a method based on polymerase chain reaction (PCR) amplification of the genomic DNA fragment of interest followed by HindIII endonuclease digestion and agarose gel electrophoresis which permits a more rapid and reliable determination of the CR1 genotype. The method is suitable for large scale clinical studies in diseases with altered expression of CR1 on erythrocytes.     

晚期肝癌患者红细胞与淋巴细胞粘附肿瘤细胞能力的研究

目的　探讨晚期肝癌患者红细胞和淋巴细胞对肿瘤细胞的免疫粘附能力。方法　采用红细胞和淋巴细胞免疫粘附肿瘤细胞及红细胞促淋巴细胞免疫粘附肿瘤细胞实验方法 ,对 43例晚期肝癌患者进行研究。结果　晚期肝癌患者红细胞和淋巴细胞免疫粘附肿瘤细胞能力都明显下降(P <0 0 1) ,特别是淋巴细胞对肿瘤细胞的免疫粘附功能下降更明显。肝癌患者和正常人的红细胞对自身淋巴细胞具有免疫粘附促进作用 ,但肝癌患者红细胞对自身淋巴细胞的免疫粘附促进作用明显低于正常人 (P <0 0 5 )。结论　红细胞、淋巴细胞免疫粘附肿瘤功能试验 ,可考虑作为肝癌患者免疫功能测定指标之一 ,红细胞免疫粘附功能的变化在晚期肝癌疾病发展及预后中具有一定作用     

原发性肝癌患者免疫原快速激活红细胞调控IL-8和球蛋白变化仿真实验研究

目的 研究原发性肝癌患者血浆中红细胞固有免疫反应与来自白细胞的IL-8和球蛋白之间规律变化的关系.方法 灭活癌细胞(S180株5×106/ml)或生理盐水(对照组)0.2 ml加到枸橼酸抗凝的0.2 ml全血细胞悬液(自然实验组)或白细胞悬液(白细胞分离实验组)和新鲜血浆0.3 ml中,混匀后放37℃温育1 h,测定反应液中IL-8和球蛋白含量.结果 原发性肝癌患者自然实验组IL-8含量(376.35 ±243.96)Pg/ml和球蛋白(7.86 ±2.01)g/L,明显高于正常人自然实验组的IL-8含量(11.36±6.93)Pg/ml和球蛋白含量(7.21 ±1.75)g/L,(P＜0.01),正常人自然实验组IL-8含量(11.36 ±6.93)pg/ml和球蛋白含量(7.21 ±1.75)g/L明显高于正常人自然对照组IL-8含量(4.98 ±4.35)pg/ml和球蛋白含量(5.38±1.61)g/L,(P＜0.05),正常人自然实验组IL-8的激活指数2.49 ±2.33明显高于原发性肝癌患者自然实验组IL-8的激活指数0.22 ±0.24,(P＜0.05).结论 红细胞能快速调控血浆中的IL-8和球蛋白含量,但原发性肝癌患者红细胞调控IL-8和球蛋白的能力明显低于正常人,在原发性肝癌患者系统血液固有免疫反应中,红细胞固有免疫反应活性与白细胞固有免疫反应活性之间的关系处于失衡状态.     

The rate of loss of CR1 from ageing erythrocytes in vivo in normal subjects and SLE patients: no correlation with structural or numerical polymorphisms.

The stability of CR1 (complement receptor type 1) on ageing erythrocytes in vivo was examined in a group of normal subjects who had been genotyped using a restriction fragment length polymorphism (detected using a cDNA probe for CR1) that correlates with the numerical expression of CR1 on normal erythrocytes (H = allele correlating with high expression, L = low). Erythrocytes were separated into 5 fractions of increasing age on discontinuous Percoll gradients. Mean CR1 numbers on erythrocytes fell from 636 molecules per cell in the first fraction to 384 in the fifth in the HH group and from 478 to 315 in the LL group. There was no difference in the rate of decline of CR1 numbers between the groups. A group of nine SLE patients was also studied in the same way; their genotypes were HH (four) and HL (five). Mean CR1 numbers amongst all of these patients fell from 477 to 232, a faster rate of decline than in a genotypically matched group of normal subjects. There was no difference in the prevalence of the different structural allotypes amongst 30 SLE patients compared with 21 normal subjects. These data provide further evidence that there are enhanced extracellular mechanisms for the removal of CR1 from erythrocytes of SLE patients and do not support the hypothesis that inherited variation in CR1 expression on erythrocytes increases disease susceptibility to SLE.