外周血SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌筛查中的应用进展

结直肠癌(CRC)的早期诊断具有重要临床意义。外周血SEPT9基因甲基化在大量研究中被证实是CRC的特异性生物学标记物,敏感性和特异性均较高,较之目前常用的粪便隐血试验、血清肿瘤标记物和结肠镜筛查具有一定优势,但在筛查腺瘤、息肉等癌前病变中的应用价值有限,用于评估CRC术后复发和放化疗效果的潜力则尚需进一步临床验证。本文就外周血SEPT9基因甲基化检测在CRC筛查中的应用进展作一综述。     

外周血SEPT9 DNA甲基化检测在结直肠癌筛查中的应用

结直肠癌是多种致癌因素作用下发生的恶性肿瘤,预后差,病死率较高。常用的结直肠癌筛查方法包括普通结肠镜检查、弯曲乙状结肠镜检查、愈创木脂化学法粪隐血试验、免疫化学粪隐血试验、粪便DNA检测、CT结肠成像以及血清癌胚抗原检测等,但这些检查均有缺陷。SEPT9 DNA甲基化水平升高与结直肠癌的发生相关,检测外周血SEPT9 DNA甲基化水平进行结直肠癌筛查,适合在易感人群中推广普及。本文就外周血SEPT9 DNA甲基化检测在结直肠癌筛查中的应用作一综述。     

SEPT9基因甲基化在结直肠癌诊断中的研究进展

结直肠癌(CRC)是最常见的消化道恶性肿瘤之一,其预后差,病死率高。SEPT9基因是一种抑癌基因,在细胞分裂末期起重要作用,目前研究已发现SEPT9基因甲基化检测可用于CRC的早期诊断。本文就SEPT9基因甲基化在CRC筛查和诊断中的研究进展作一综述。     

外周血SEPT9基因甲基化检测联合糖蛋白肿瘤标志物在结直肠癌诊断中的应用

背景:SEPT9基因甲基化是结直肠癌的特异性生物标志物,测定其外周血表达水平可评估受检者结直肠癌的患病风险。目的:初步探讨外周血SEPT9基因甲基化检测联合糖蛋白肿瘤标志物在结直肠癌诊断中的临床意义。方法:纳入2016年12月—2017年4月苏州大学附属第一医院诊断的正常对照组57例、腺瘤组61例和结直肠癌组71例患者,应用PCR荧光探针法测定外周血SEPT9基因甲基化情况,测定肿瘤标志物CEA、CA125、CA19-9、CA72-4、CA211水平,采用ROC曲线分析各指标诊断结直肠癌的价值。建立Logistic回归方程,评估SEPT9联合CEA诊断结直肠癌的价值。结果:正常对照组、腺瘤组、结直肠癌组的SEPT9基因甲基化阳性率分别为0、6. 6%、52. 1%。结直肠癌组CEA水平显著高于正常对照组、腺瘤组(P 0. 05)。ROC曲线分析显示,SEPT9、CEA以及两者联合诊断结直肠癌的AUC分别为0. 817、0. 707和0. 793。Logistic回归分析显示,SEPT9、CEA诊断结直肠癌的OR值分别为1. 394(1. 198～1. 762)、1. 325(0. 997～1. 622)。结论:随着疾病进展,外周血SEPT9基因甲基化率明显升高,对结直肠癌的诊断价值较高。联合外周血SEPT9基因甲基化和CEA有助于提高结直肠癌的早期筛查率。     

SEPT9在结直肠癌早期检测中的研究进展

SEPT9是13个Septin同源基因家族之一,参与调控众多过程,包括细胞分裂、细胞极化、细胞迁移以及线粒体分裂等。研究表明在众多肿瘤中,SEPT9都发挥着作用,尤其在结直肠肿瘤研究领域,外周血SEPT9基因甲基化检测更是研究热点,其检测的敏感度和特异度相对于其他糖蛋白肿瘤标志物、粪便隐血试验和粪便免疫化学测试等更具有优势,相对于结直肠镜等侵入性检查更节约成本,同时有着更好的依从性。本文对SEPT9的功能、与结直肠癌之间的关系以及对结直肠肿瘤的筛查及诊断价值做一综述。     

血浆SEPT9基因甲基化对结直肠癌诊断价值的研究进展

背景:早期筛查和诊断可有效降低结直肠癌(CRC)相关死亡率,并可提高患者总体生存率。目前的CRC早期筛查方法主要包括粪便隐血试验和结肠镜检查。粪便隐血试验敏感性低,假阳性较多,而金标准结肠镜检查为有创性检查,患者依从性较低。因此,目前临床亟需寻找有效且简便的CRC早期筛查和诊断方法。血浆SEPT9基因甲基化检测是近年来国外已开始应用的新型非创伤性CRC早期筛查和诊断方法之一,此法较为准确、简便,适合大规模筛查和早期诊断。本文就血浆SEPT9基因甲基化检测对CRC的诊断价值以及相关研究进展进行概述。     

DNA/miRNA基因甲基化检测筛查结直肠癌的研究进展

DNA/miRNA基因甲基化作为一种新的结直肠癌非侵入性筛查标志物,被证实具有较高的敏感性和特异性,目前有大量有关检测血液、粪便中DNA/miRNA基因异常甲基化筛查结直肠癌的研究,但仅有个别商业化的甲基化基因试剂盒小规模应用于临床实践。本人将对目前有关检测血液/粪便中DNA/miRNA基因异常甲基化筛查结直肠癌的国内外研究进行综述,总结其潜在的临床价值。     

结直肠癌基因DNA甲基化标志物筛查的价值

结直肠癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,通过人群早期筛查和诊断结直肠癌是疾病防治的关键.近年来发现了一系列启动子高甲基化的相关基因,在结直肠癌的发生发展中发挥着重要的作用.多数在肿瘤组织中发生高甲基化基因的启动子片段在血液、粪便标本中同样被检测到.这些高甲基化基因对结直肠癌诊断的敏感性和特异性均明显优于传统筛查指标如血癌胚抗原和粪便潜血等.本文将重点介绍目前结直肠癌基因DNA甲基化标志物筛查的研究进展以及将来可能的研究方向.     

多基因甲基化检测对结直肠癌早期诊断的意义

目的 通过对结直肠癌（CRC）组织中多基因甲基化水平的检测,探讨多基因甲基化对CRC早期诊断的意义.方法 选取25例CRC患者胃镜采集标本组织,通过甲基化特异性PCR（MSP）检测CRC和炎性组织中甲基化水平,分析其与CRC患者临床各指标的关系.结果 在CRC患者中,APC、P16、MLH1、DCC甲基化率分别为52.0%（13/25）、32.0%（8/25）、44.0%（11/25）、60.0%（15/25）.炎性组织中仅有1例DCC甲基化异常表达,甲基化率为10.0%（1/10）,甲基化阳性率显著高于炎性组织（P＜0.05）,4种基因甲基化联合检测诊断CRC的阳性率为92.0%（23/25）,高于单个基因检测的甲基化阳性率,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 APC、P16、MLH1、DCC基因在CRC患者中甲基化水平异常表达,联合检测APC、P16、MLH1、DCC可能作为CRC早期诊断的标志物.     

粪便DNA的Vimentin基因甲基化检测在结直肠癌患者早期诊断中的意义

目的通过检测结直肠癌组织及粪便中Vimentin基因甲基化探讨其在结直肠癌早期诊断中的应用。方法分别收集结直肠正常新鲜组织、癌新鲜组织及粪便标本,提取组织及粪便基因组DNA,DNA经亚硫酸盐处理后进行甲基化特异性PCR检测,检测结果经3%琼脂糖电泳鉴定。结果正常结直肠组织中未检测到Vimentin基因甲基化,结直肠癌组织中Vimentin基因甲基化的检出率为80%,结直肠癌患者粪便中Vimentin基因甲基化检出率为36%,其中早期直肠癌粪便的Vimentin基因甲基化检出率为66.7%。结论Vimentin基因在直肠癌早期诊断中具有重要意义。     

EYA4基因在结直肠癌中的甲基化状态及其意义

背景：EYA4（eyes absent4）是一种非巯基蛋白酪氨酸磷酸酶,参与器官发育、细胞凋亡调控、先天性免疫、DNA损伤修复、血管生成等过程。目的：研究EYA4基因在结直肠癌中的甲基化状态及其意义。方法：选取2006年6月～2007年1月上海交通大学医学院附属仁济医院31例结直肠癌患者,采集其癌组织和相应癌旁非癌组织。以5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-Aza—dC）处理人结肠癌细胞株HT29、HCT116、SW480、SW1116。应用MSP技术检测结直肠癌组织、癌旁非癌组织、HT29、HCT116、SW480、SW1116细胞中EYA4基因启动子的甲基化状态。分析结直肠癌患者临床病理特征与EYA4基因甲基化关系。采用RT—PCR和蛋白质印迹法分别检测结肠癌细胞株中EYA4基因和蛋白的表达水平。结果：结直肠癌组织EYA4基因启动子甲基化率显著高于癌旁组织（77．4％对6．5％,P〈0．01）。EYA4基因和蛋白在启动子甲基化的HT29、HCT116、SW480细胞中不表达,在启动子非甲基化的SW1116细胞中显著表达。以5-Aza—dC处理后EYA4基因和蛋白在LIT29和SW480细胞中表达上调。结论：EYA4基因是结直肠癌发生的甲基化相关基因,有望成为结直肠癌的诊断标记物。     

SEPT9甲基化与多种血清肿瘤标志物对结直肠癌诊断价值的比较

[目的]探讨单一血浆SEPT9甲基化检测与多种血清学肿瘤标物在结直肠癌临床诊断中的意义,并对其诊断价值进行比较。[方法]选取82例不同分期的结直肠患者,64例良性息肉患者和60例正常对照,均行肠镜检查确认病理,采用定量甲基化特异性PCR检测SEPT9甲基化水平,采用化学发光法同时检测血清学中CEA、CA125、CA19-9、CA72-4、CA50和CA242六种血清学肿瘤标记物水平,并做统计学分析。[结果]血浆SEPT9甲基化检测对结直肠癌的检测灵敏度为:82.9%,单一的血清学肿瘤标物CEA、CA125、CA19-9、CA72-4、CA50和CA242对结直肠癌的检测灵敏度分别为35.4%、9.8%、18.3%、17.1%、13.4%和20.7%。6种血清学肿瘤标记物联合检测的灵敏度为57.3%。统计学分析显示,通过血清学6种肿瘤标记物联合检测后,其阳性检出率与任意一个单一肿瘤标记物的阳性检出率差异有统计学意义(P0.05)。与结直肠癌组比较,对照组6种血清学肿瘤标记物联合检测的阳性率差异有统计学意义(P0.05)。SEPT9甲基化检测对结直肠癌的检出率与6种单一的肿瘤标志物检出率差异有统计学意义(P0.05),且与6种肿瘤标记物的联合检测阳性率差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,癌症组血浆SEPT9检测的阳性率差异有统计学意义(P0.01)。[结论]临床常用的单一肿瘤标物对结直肠癌的诊断意义不大,联合检测能提升诊断价值;而单独的血浆SEPT9甲基化检测对结直肠癌的诊断价值高于上述6种标记物联合检测,可以作为结直肠癌临床辅助诊断的一种理想手段。     

联合检测 SDC2 和 SFRP2 甲基化在结直肠癌筛查中的价值

目的 评价在粪便样本中联合检测 SDC2 和 SFRP2 基因启动子甲基化在结直肠癌筛查中的应用价值。方法 选取海军军医大学长海医院、同济大学附属第十人民医院以及解放军总医院第七医学中心2018年3月至2018年12月收治的500例患者粪便标本，其中结直肠癌132例为肠癌组，进展期腺瘤38例为腺瘤组，健康标本152例为健康组，存在其他肠道病变或非肠癌肿瘤的178例为干扰组，健康组与干扰组共同构成330例肠癌与进展期腺瘤阴性的阴性组。应用甲基化特异度 PCR（methylation-specific PCR, MSP）法对上述患者粪便中SDC2 和 SFRP2 基因启动子甲基化进行检测，并与单个基因甲基化检测和粪便免疫潜血试验（FIT）的检测性能相比较，评价其筛查结直肠癌的灵敏度和特异度。结果 SDC2和SFRP2两基因联合检测在肠癌组中的灵敏度为 97.73%（129/132），显著高于单基因SDC2检测 [ 70.45%（93/132）, P=0.000]、SFRP2检测[ 81.82%（108/132）, P=0.000]以及FIT 检测[ 69.70%（92/132）, P=0.000]。腺瘤组中SDC2和SFRP2联合检测的灵敏度为57.89%（22/38），显著高于单基因SDC2检测[ 15.79%（6/38）, P=0.000]、FIT检测[21.05%（8/38），P=0.021]，与单基因SFRP2检测差异无统计学意义[ 47.37%（18/38）, P=0.358]。在健康组中，SDC2和SFRP2联合检测的特异度为 98.68%（150/152），与单基因SDC2 [100.00%（152/152）, P=0.156]、 SFRP2 [98.68%（150/152）, P=1.000]以及 FIT [95.39%（145/152）, P=0.091]相比，差异无统计学意义。在干扰组以及阴性组中，两基因联合检测的特异度分别为 90.45%（161/178）和94.24%（311/330），均显著高于 FIT [73.03%（130/178）, P=0.000；83.33%（275/330）,P=0.000]。结论 粪便中SDC2和 SFRP2两基因联合检测优于单基因检测，在肠癌、进展期腺瘤的灵敏度以及在区分良性息肉、其他癌种或非癌肠道病变的特异度上均显著高于FIT，具有潜在的应用价值。     

人粪便中波形蛋白基因甲基化在结直肠癌早期诊断中的意义

目的 分析结直肠癌患者粪便中波形蛋白基因甲基化状态,探讨其作为结直肠癌早期诊断分子标志物的可行性和临床意义.方法 从郑州大学第一附属医院收治的60例结直肠癌患者、门诊行结肠镜检查的17例结直肠腺瘤患者及30名正常对照者的粪便中分别提取DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)方法分析其波形蛋白基因甲基化状态.结果 60例结直肠癌患者粪便中波形蛋白基因甲基化阳性率为51.67％(31/60),17例结直肠腺瘤患者粪便中波形蛋白基因甲基化阳性率为4/17,30名正常对照中无一例检测到波形蛋白基因甲基化.结论 粪便中波形蛋白基因甲基化是结直肠癌进展过程中的早期事件,粪便中波形蛋白基因甲基化分析有望成为结直肠癌早期诊断的标志物之一.     

粪便DNA中MGMT、XAF1基因启动子甲基化联合检测在结直肠癌筛查中的应用研究

目的使用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测粪便DNA中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)、X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)基因启动子甲基化情况,并探讨其在结直肠肿瘤诊断中的意义。方法收集40例结直肠腺癌、40例腺瘤性息肉、52例正常对照住院患者粪便标本,使用试剂盒提取其粪便中肠道脱离细胞DNA,通过MSP方法检测其MGMT、XAF1基因启动子甲基化情况。结果 MGMT、XAF1基因启动子甲基化在结直肠腺癌中的阳性率分别为50.0%、55.9%;在腺瘤性息肉中的阳性率分别为42.1%、52.6%;二者联合检测在结直肠腺癌及腺瘤性息肉中的阳性率分别为73.5%、68.4%;特异性为52.0%。结直肠腺癌患者粪便中粪便潜血阳性率为35.3%,CEA阳性率为35.3%。结论通过试剂盒提取粪便DNA具有较高成功率;粪便DNA中MGMT、XAF1基因启动子甲基化状态用于检测结直肠腺癌及腺瘤性息肉具有较高的敏感性。检测粪便基因甲基化有望成为CRC高风险人群筛查的一个重要途径。     

多靶点粪便基因检测在老年直肠癌筛查中的应用价值

目的 研究多靶点粪便基因检测在老年直肠癌筛查中的应用价值.方法 100例老年直肠癌患者纳入观察组.另取同期接受诊治的直肠癌良性病变患者100例作为对照组.分别对所有受试者进行多靶点粪便基因检测及粪便隐血试验(FOBT),比较两种检测方式对老年直肠癌的检出效能.此外,比较两组血清癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)及糖...     

粪便Vimentin和SFRP2甲基化在结直肠癌筛查中的作用

目的探讨粪便中Vimentin和SFRP2甲基化状态在结直肠癌筛查中的价值。方法收集患者合格的粪便标本69例,其中结直肠癌23例、进展期腺瘤24例和健康人群22名,采用甲基化特异性PCR技术分析Vimentin和SFRP2甲基化状态,并与单个基因甲基化和粪便免疫隐血试验(FIT)的检测性能相比较,评价其在结直肠癌筛查中的灵敏度和特异度。结果结直肠癌组中单个Vimentin和SFRP2甲基化检出率分别为82.6%和69.6%,进展期腺瘤组为62.5%和41.7%,正常对照组为13.6%和13.6%。Vimentin和SFRP2联合检测在结直肠癌组的灵敏度为87.0%,高于FIT的56.5%(χ~2=5.25,P0.05),与单基因检测比较,差异无统计学意义(P0.05)。进展期腺瘤组中,联合检测的灵敏度为70.8%,高于SFRP2的41.7%(χ~2=4.15,P0.05)和FIT的29.2%(χ~2=8.33,P0.01),与Vimentin检测比较差异无统计学意义(P0.05)。正常对照组联合检测的特异度为86.4%,与单基因检测相同,与FIT(72.7%)比较,差异无统计学意义(P0.05)。联合检测在管状腺瘤中检出率为92.3%,高于SFRP2的53.8%(χ~2=4.9,P0.05),与Vimentin(76.9%)比较,差异无统计学意义(P0.05),在绒毛状管状腺瘤和管状腺瘤/绒毛状管状腺瘤中检出率与Vimentin相同,与SFRP2比较,差异无统计学意义(P0.05)。联合检测在伴有上皮内瘤变中的检出率与单基因检测差异均无统计学意义(P0.05)。结论粪便中联合Vimentin和SFRP2检测优于单基因及FIT检测,在结直肠癌筛查中具有潜在的应用价值。     

粪便SDC2基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用价值

目的 探讨粪便SDC2基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用价值。方法 采用定量甲基化特异性PCR技术检测接受结直肠癌（CRC）筛查的患者粪便样本中SDC2的甲基化（mSDC2）,SDC2基因甲基化检测阳性患者进一步行结肠镜检查,患者均通过结肠镜检查或术后病理检查腺癌（CRC）明确诊断,病理区分为结直肠癌、进展型腺瘤、非腺瘤性息肉、炎症。采用Pearson相关法分析SDC2基因甲基化检测结直肠肿瘤阳性预测值（PPV）与年龄的相关性。结果 纳入268例mSDC2阳性患者,其中确诊结直肠癌23例、进展型腺瘤42例、非腺瘤息肉20例、炎症18例,余下患者结肠镜检查未发现明显异常。<60岁结直肠癌患者SDC2基因甲基化检测PPV为7.04%(10/142),≥60岁者为30.23%(13/43);mSDC2在结直肠癌患者中的PPV随着年龄增长而增加,差异有统计学意义（P<0.05）。随年龄增长,mSDC2循环阈值与年龄呈负相关（r=-0.68,P<0.05）。结直肠癌患者mSDC2的Ct值比进展型腺瘤、非腺瘤息肉、炎症病变均低,差异有统计学意义（P均<0.05）。按m...     

人粪便中OSMR和TFPI2基因甲基化在结直肠癌诊断中的意义

目的:探讨检测人粪便中抑瘤素M型受体(OSMR)基因和组织因子途径抑制子2(TFPI2)基因甲基化对于结直肠癌及腺瘤诊断的可行性及临床意义.方法:从60例结直肠癌患者和17例腺瘤患者及30名正常对照者的粪便中分别提取DNA,应用甲基化特异性PCR方法检测人粪便中OSMR和TFPI2基因的甲基化状态.结果:结直肠癌患者粪便中OSMR及TFPI2基因甲基化检出率分别高于腺瘤患者和正常对照者[OSMR:35%(21/60)vs12%(2/17),7%(2/30);TFPI2:70%(42/60)vs18%(3/17),3%(1/30);均P<0.01].二者联合检测甲基化检出率为81.7%(49/60),特异性90%.结论:检测粪便中OSMR和TFPI2基因甲基化在结直肠癌诊断和筛查中有潜在的应用价值.     

粪便SDC2、TFPI2、SFRP2基因甲基化联合检测在结直肠癌早期筛查中的临床价值

目的 探讨粪便SDC2、TFPI2、SFRP2基因甲基化联合检测在结直肠癌早期筛查中的临床价值。方法 收集苏州大学附属第一医院2021年6月至2022年2月就诊患者105例,其中结直肠癌组患者30例,腺瘤组患者45例,健康对照者30名,采用荧光定量PCR法检测患者粪便SDC2、TFPI2、SFRP2的甲基化情况。分析粪便SDC2、TFPI2、SFRP2甲基化及其三者联合检测诊断结直肠癌的敏感度及特异度,以病理结果为金标准,通过ROC曲线分析该检测方法对疾病的诊断效能。结果 结直肠癌组患者粪便SDC2、TFPI2、SFRP2甲基化及其联合结直肠癌检测阳性率高于腺瘤组和正常对照组,且腺瘤组高于正常对照组。SDC2、TFPI2、SFRP2甲基化及其联合检测结直肠癌的敏感度分别为46.7%、53.3%、66.7%、76.7%;特异度分别为96.7%、93.3%、96.7%、86.7%。ROC曲线分析显示粪便SDC2、SFRP2、TFPI2甲基化联合检测筛查结直肠癌的效能较高。结论 粪便SDC2、TFPI2、SFRP2甲基化联合检测对结直肠癌早期筛查的诊断价值较高,具有重要意义。