TETs在结直肠癌中的表达及TET2抑制结直肠癌细胞增殖和侵袭

目的探讨10-11-易位-甲基胞嘧啶双加氧酶(TETs)在结直肠癌中的表达及TET2对结直肠癌细胞增殖和侵袭的影响。方法利用GEPIA和UALCAN数据库分析TETs在结直肠癌组织中的表达差异;通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blotting和免疫组织化学方法检测TETs在结直肠癌组织和细胞中的表达;分别用CCK-8和侵袭实验检测TETs对结直肠细胞癌增殖和侵袭的影响。结果 TET2在结直肠癌组织和细胞系中低表达(P0.05),TET1和TET3表达无差异;用质粒过表达TET2后,结直肠癌细胞的增殖和侵袭能力被显著抑制。结论 TET2在结直肠癌中显著低表达,且抑制结直肠癌细胞的增殖和侵袭,有望为结直肠癌的诊治提供新的靶点。     

XAF1转录变异体在结直肠肿瘤中的差异表达

背景:X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)能与XIAP结合而拮抗其caspase抑制活性,从而促进细胞凋亡,已被认定是一种肿瘤抑制基因。在多种肿瘤细胞中可检测到XAF1转录变异体,但不同转录变异体在结直肠肿瘤中的表达情况尚不明确。目的:检测XAF1及其转录变异体在不同结直肠组织中的表达,初步探讨其在结直肠肿瘤发生、发展中的作用。方法:收集结直肠癌及其配对癌旁组织、增生性息肉、腺瘤和正常结直肠黏膜组织样本,以免疫组化法和蛋白质印迹法检测XAF1蛋白表达,RT-PCR检测XAF1转录变异体表达。结果:与正常结直肠黏膜相比,XAF1蛋白在增生性息肉、腺瘤和癌组织中的胞核表达强度显著降低(P0.05),胞质表达强度有所增高(P0.05),总体表达强度显著降低(P0.05)。结直肠癌组织中的XAF1A蛋白表达显著低于相应癌旁组织(P0.05)。转录变异体XAF1A、XAF1B、XAF1C mRNA在结直肠肿瘤中的表达均显著低于正常结直肠黏膜(P0.05)。结论:XAF1及其转录变异体在结直肠肿瘤和正常结直肠黏膜中存在差异表达,腺瘤阶段即已出现XAF1表达下降并由胞核向胞质易位。转录后修饰可能影响XAF1基因功能。     

hClock基因mRNA及其蛋白在结直肠肿瘤中表达的研究

目的探讨人类生物钟基因hClockmRNA及其蛋白在不同Dukes分期结直肠肿瘤中的表达,研究它们的表达与结直肠肿瘤的侵袭及转移的关系。方法采用原位杂交检测结直肠癌与相应癌旁组织中hClock基因mRNA的表达,并采用免疫组织化学检测相应标本中hCloek基因蛋白产物（CLOCK蛋白）的表达。结果21例结直肠肿瘤中hCloekmRNA弱阳性表达率47．62％,中或强阳性表达率52．38％,且与Dukes分期相关（P〈0．05）;CLOCK蛋白均呈中或强阳性表达。相应癌旁组织中hClockmRNA及蛋白呈弱阳性表达（P〈0．01）。结论hCloek基因可能与结直肠肿瘤的发生、发展及侵袭、转移有相关性。     

XAF1基因与p53基因在结直肠肿瘤中的表达研究

目的观察两个相邻位置的抑癌基因XIAP相关因子1(XAF1)与p53基因在结直肠肿瘤中的表达。方法选取结肠癌细胞株Colo205、Colo320、LoVo、SW1116为体外研究对象,另取41例结直肠癌、28例结直肠腺瘤/息肉以及31例正常人结肠黏膜为体内研究对象。应用逆转录聚合酶链反应检测XAF1mRNA与p53mRNA在体内外的表达,应用免疫组化法检测P53蛋白在结直肠组织中的表达。结果4种细胞株中XAF1表达均较为低下,p53mRNA表达均较高。结直肠肿瘤组织中的XAF1mRNA表达显著低于正常组织(P<0.01),结直肠癌中的表达又显著低于良性肿瘤(P<0.05)。结直肠肿瘤组织中的p53mRNA表达显著高于正常组织(P<0.01),但在良、恶性肿瘤中的表达差异无统计学意义(P<0.05)。P53蛋白在正常组织中未见表达,良、恶性肿瘤组的组织P53蛋白表达之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论XAF1基因在结直肠肿瘤中表达降低,且结直肠癌XAF1mRNA表达显著低于良性肿瘤,可作为判断良、恶性肿瘤的鉴别指标。     

生物钟基因hClock蛋白在结直肠肿瘤中的表达研究

目的探讨人类生物钟基因hClock蛋白在结直肠肿瘤中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学法检测不同Dukes分期结直肠肿瘤及相应癌旁组织中hClock基因蛋白产物（Clock蛋白）的表达，并比较其差异。结果Clock蛋白红结直肠肿瘤中呈现中或强阳性表达，与肿瘤分化程度及Dukes分期无显著相关性（P〉0.05）。癌旁组织呈现弱阳性表达。结论Clock蛋白与结直肠肿瘤的发生有相关性，与侵袭、转移的关系有待更深入地研究。     

甲基转移酶基因甲基化在结直肠肿瘤中的作用

目的探讨6氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子CpG岛高甲基化在结直肠肿瘤发生、发展中的作用。方法用甲基特异性PCR检测20例正常大肠黏膜、27例散发性结直肠腺瘤和62例散发性结直肠腺癌组织DNA中MGMT基因启动子的甲基化,同时用免疫组化方法检测MGMT蛋白的表达情况。结果正常大肠黏膜组织均未显示甲基化条带,分别有40.7%(11/27)的腺瘤组织和43.5%(27/62)的腺癌组织存在MGMT基因启动子CpG岛高甲基化。正常大肠黏膜胞核和胞质表达MGMT蛋白,22.2%(6/27)的腺瘤和45.2%(28/62)的腺癌MGMT蛋白表达缺失,其差异有显著性(P=0.041)。6例MGMT表达缺失的腺瘤中5例存在甲基化(P=0.027),28例表达缺失的腺癌中24例存在甲基化(P<0.001)。结论结直肠肿瘤中存在高频率MGMT基因启动子高甲基化和蛋白表达缺失,腺癌中蛋白表达缺失比腺瘤中更常见。MGMT蛋白表达缺失与MGMT基因启动子区域高甲基化有关。MGMT基因表型遗传性失活可能在结直肠肿瘤发生过程中起重要作用。     

胰岛素样生长因子-Ⅱ在结直肠腺癌中的表达及其意义

细胞的增殖和凋亡与肿瘤的关系一直是肿瘤研究中的热点。现今已知道控制细胞分裂与增殖的最重要的因素是生长因子，而凋亡也有复杂的控制机制。胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-like growth factor-Ⅱ，IGF-Ⅱ)是一种具有很强促进细胞有丝分裂、增殖活性的细胞因子，现在发现，它在多种肿瘤组织如肺癌、肝癌、乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌、软组织肿瘤等中存在过量表达，与肿瘤的发生、发展有密切关系。本实验通过观察结直肠腺癌中IGF-Ⅱ mRNA的表达，并结合肿瘤细胞增殖和凋亡状态的研究，来探寻IGF-Ⅱ基因表达对肿瘤细胞生长和凋亡的影响，并分析其临床意义。     

Nucleostemin在结直肠癌和正常结直肠组织中的表达及其意义

背景：Nucleosterain（NS）是一个与细胞增殖相关的核蛋白,部分研究显示其仅高表达于干细胞和肿瘤细胞,成体组织分化细胞中未见NS表达。目的：探讨NS在结直肠癌和正常结直肠组织中的表达及其意义。方法：收集38例结直肠癌患者的癌组织及其相应癌旁正常组织标本．以实时RT—PCR和蛋白质印迹法检测NSmRNA和蛋白表达。结果：实时PCR扩增曲线显示结直肠癌组织和正常结直肠组织均有NS基因指数式扩增,癌组织NSmRNA表达量显著高于正常组织（1．8939±0．9529对1．P=0．011）。蛋白质印迹法证实NS蛋白在正常组织中表达较微弱或几乎无表达,癌组织中其表达显著增高（1．5397±0．3625对0．6336±0．3443,P=0．001）。结论：结直肠癌组织和正常结直肠组织中均存在NS基因．推测其微量表达可调节细胞正常增殖．而异常高表达则可通过某些机制促进细胞恶性增殖。     

Par-3及Connexin在结直肠肿瘤中的表达变化

目的:研究Connexin、Par-3在结直肠肿瘤组织中的表达变化及特征,探讨其临床意义.方法:选取2007-05/2008-03在本院诊断治疗结直肠肿瘤患者51例,取材肿瘤组织并分为3组:肿瘤组织、癌旁组织(2.0 cm)和正常组织(距肿瘤>5.0 cm).电镜下观察肿瘤细胞形态变化,HE染色观察肿瘤组织病理变化,免疫组化及Western blot检测Connexin、Par-3的表达.结果:肿瘤上皮细胞形态不规则,细胞极性消失,细胞器排列紊乱,细胞连接结构破坏,紧密连接、中间连接和桥粒结构基本消失.正常上皮细胞形态规则,细胞极性明显,细胞连接结构完整.免疫组化检测显示:正常肠道组织中Par-3与Connexin的表达水平最高(0.572±0.051,0.485±0.042),癌旁组织次之(0.432±0.049,0.367±0.035),癌组织表达水平最铑低(0.290±0.041,0.227±0.031);三种组织两两之间的差异性检测有极显著的统计学意义( P<0.05).结论:Connexin和Par-3的表达下调极可能是癌细胞恶变程度加重与复发转移的前兆.     

HMG-CoA还原酶的表达与结直肠肿瘤的相关性研究

目的初步探讨HMG-CoAR蛋白的表达与结直肠癌患者分期和预后之间的关系。方法采用免疫组织化学法检测HMG-CoAR蛋白在结直肠癌组织、腺瘤组织和正常组织中的表达情况,并检测CK20和p53作为对比,了解HMG-CoAR蛋白与结直肠肿瘤间的关系。结果 HMG-CoAR蛋白在组织中的表达定位于细胞核,各组间HMG-CoAR蛋白的表达差异有统计学意义（P〈0.001）,由正常组织至癌组织依次降低;HMG-CoAR蛋白在结直肠癌组织中的表达与肿瘤的Duke分期相关（P=0.031）,进展期者多为低表达;HMG-CoAR与CK20、p53的表达呈负相关（P〈0.001）。结论 HMG-CoAR随着结直肠肿瘤的进展而表达降低,与肿瘤的发生和分期相关,有望作为结直肠癌诊断的预测因子。     

survivin、p53蛋白在结直肠肿瘤中的表达及其临床意义

目的 检测survivin和p53蛋白在结直肠肿瘤中的表达,探讨其相互关系.方法 收集结肠镜活检的结直肠腺瘤及结直肠腺瘤并发结直肠癌组织蜡块各30例,另取30例正常结直肠黏膜组织作对照.采用链霉菌抗生物索蛋白-过氧化酶连接免疫组织化学方法检测survivin和p53蛋白表达情况.结果 survivin、p53蛋白在结直...     

PARP-1和caspase-3在结直肠肿瘤中的表达和意义

背景：聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1（PARP-1）主要参与对DNA损伤的反应,caspase-3主要参与细胞凋亡的调控,两者与结直肠癌发生的关系尚不十分清楚。目的：探讨PARP-1和caspase-3在结直肠腺瘤和腺癌中的表达及其与肿瘤临床病理特征的关系。方法：以免疫组化方法检测59例结直肠腺瘤、70例结直肠腺癌和10例癌旁黏膜石蜡包埋标本中PARP-1和caspase-3的表达,分析腺瘤和腺癌组织中两者表达与肿瘤临床病理参数的相关性,以及两者间的相关性。结果：结直肠腺瘤和腺癌组织中,PARP-1的阳性表达率显著高于癌旁结直肠黏膜（55.9%和82.9%对20.0%,P〈0.05）,caspase-3的阳性表达率显著低于癌旁结直肠黏膜（33.9%和28.6%对100.0%,P〈0.05）。结直肠腺瘤中,PARP-1的表达与腺瘤数目相关,caspase-3的表达与上皮内瘤变程度相关;结直肠腺癌中,PARP-1的表达与癌组织分化程度相关。PARP-1与caspase-3在结直肠腺瘤和腺癌组织中的表达无相关性。结论：PARP-1和caspase-3在结直肠腺癌的发生、发展过程中起有重要作用,两者联合检测对结直肠腺癌的早期诊断具有一定价值。     

CTHRC1对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的观察胶原三股螺旋重复蛋白(CTHRC)1对结直肠癌HT29细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测结直肠癌组织中CTHRC1的表达情况。采用电穿孔转染法,将pc DNA3.1-CTHRC1和CTHRC1 si RNA转染HT29细胞中,通过克隆形成实验检测CTHRC1对HT29细胞增殖的影响;通过伤口愈合实验和Boyden小室检测CTHRC1对HT29细胞迁移和侵袭能力的影响。结果 RT-PCR和免疫组织化学检测显示,CTHRC1在结直肠癌组织中的表达显著高于正常对照组织。增殖、迁移和侵袭实验结果显示,对照组、转染CTHRC1和转染CTHRC1 si RNA的结直肠癌HT29细胞克隆形成数分别为(147.34±15.86)、(234.17±27.86)和(66.03±8.95);伤口宽度百分比分别为(1.00±0.00)、(0.37±0.12)和(1.48±0.35);发生侵袭的细胞数分别为(201.24±33.54)、(415.36±45.63)和(96.13±15.46);转染CTHRC1可显著促进结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力;而转染si-CTHRC1可显著抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结论 CTHRC1可明显增加HT29细胞增殖、迁移和侵袭能力,这可能是CTHRC1参与结直肠癌发生发展的机制。     

Bves/popdc1、popdc3在结直肠癌中的表达和意义

背景:结直肠癌为常见消化道恶性肿瘤,较易发生肝、肺等远处转移,预测其远处转移风险对于指导综合治疗和判断预后具有重要意义。细胞黏附分子与肿瘤侵袭、转移关系密切。目的:检测结直肠癌组织中的细胞黏附分子Bves/popdc1、popdc3表达,探讨两者在结直肠癌侵袭、转移中的可能作用。方法:选择15例正常结直肠组织和70例结直肠癌手术标本,以免疫组化方法检测Bves/popdc1、popdc3表达,分析结直肠癌组织中的Bves/popdc1、popdc3表达与肿瘤临床病理特征的关系以及两种蛋白表达之间的相关性。结果:Bves/popdc1、popdc3在结直肠癌组织中以低表达为主,高表达率显著低于正常结直肠组织(Bves/popdc1:25.7%对86.7%,P=0.000;popdc3:20.0%对73.3%,P=0.000)。结直肠癌组织中的Bves/popdc1、popdc3低表达与肿瘤分化程度呈负相关(P<0.05),与肿瘤浸润、淋巴结转移、远处转移和TNM分期呈正相关(P<0.05)。Bves/popdc1与popdc3在结直肠癌组织中的表达呈显著正相关(P<0.01)。结论:Bves/popdc1、popdc3在结直肠癌组织中表达下调,并与肿瘤临床分期和转移相关,提示两者在结直肠癌的侵袭、转移中起一定作用。     

实时荧光定量RT-PCR检测结直肠癌中ERCC1 mRNA的表达及其临床意义

目的传统的影像学检查及肿瘤标志物检测对结直肠癌微转移的诊断价值有限。本研究旨在探讨ERCC1 mRNA在结直肠癌患者外周血中的表达情况及其临床意义。方法用实时定量荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对53例结直肠癌患者和21名健康人的外周血标本进行ERCC1 mRNA检测,分析其表达与肿瘤临床病理特征的关系并应用接受者操作特征曲线(ROC曲线)分析ERCC1 mRNA检测对结直肠癌的诊断价值。结果结直肠癌组外周血ERCC1 mRNA表达水平显著高于正常对照组(P<0.05),其表达与肿瘤淋巴结转移、血行转移和TNM分期相关(P<0.05)。ERCC1 mRNA诊断结直肠癌的ROC曲线下面积0.89,诊断界值为Ct≤32。结论实时定量荧光RT-PCR检测ERCC1 mRNA可以更好地评估结直肠癌血道微转移,有利于判断预后。     

结直肠癌组织中趋化因子受体4水平检测的临床意义

近年来研究发现趋化因子受体（CXCR）4在某些肿瘤细胞中表达，并在肿瘤的侵袭转移中发挥重要作用。本实验应用免疫组化及逆转录-聚合酶链反应（RTPCR）方法对结直肠癌、结直肠良性肿瘤组织标本中CXCR4的表达进行检测，探讨结直肠癌组织中CXCR4表达水平与侵袭、转移的关系，以及对临床的指导意义。     

细丝蛋白A在结直肠腺癌中的表达及临床意义

目的探讨细丝蛋白A(filaminA,FLNa)在结直肠腺癌中的表达及其生物学意义。方法应用免疫组织化学方法检测60例结直肠腺癌患者的癌组织及正常组织中的FLNa表达情况,并结合临床资料进行分析。结果 FLNa在腺癌组织中的阳性表达率高于正常组织,其表达水平与肿瘤的TNM分期、肝转移、淋巴结转移及肠壁浸润深度相关。结论 FLNa的低表达在结直肠腺癌的发生发展中起重要作用。     

生长抑素受体2在结直肠神经内分泌肿瘤中的表达及意义

目的:研究生长抑素受体(somatostafin receptor,SSTR)亚型SSTR2在结直肠神经内分泌肿瘤组织中的表达情况,以及与临床病理特征的关系.方法:收集结直肠神经内分泌瘤患者组织标本及相关临床病理资料,应用免疫组织化学En Vision二步法检测肿瘤组织中SSTR2表达情况.结果:56例患者纳入研究,其中SSTR2阳性表达率为76.8%.SSTR2的阳性表达与淋巴结转移、肿瘤浸润肌层、出现远处转移关系密切(P0.05),但是与性别和年龄无关(P0.05).此外,肿瘤的最大径及组织学分级也与SSTR2阳性表达有关(P0.05).结论:SSTR2异常表达与重要的临床病理学特征相关,SSTR2可能成为一个新的结直肠神经内分泌瘤诊断和预后的分子指标.     

YB-1和P53蛋白在结直肠肿瘤中的表达及意义

目的:探讨YB-1和P53蛋白在结直肠肿瘤不同发展阶段表达水平的差异及其与结直肠癌临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测结直肠20例正常组织、30例低级别上皮内瘤变组织、30例高级别上皮内瘤变组织和50例癌组织中YB-1和P53蛋白的表达.结果:YB-1蛋白在结直肠正常组织(NCM)、低级别上皮内瘤变组织(LGIN)、高级别上皮内瘤变组织(HGIN)和癌组织(CRC)中的强阳性率分别为0%、76.7%、80.0%、80.0%,低级别、高级别上皮内瘤变组织和癌组织中的强阳性表达率均与正常组织比较差异有统计学意义(P<0.05),且在癌组织中其强阳性表达与淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05);P53蛋白在结直肠正常组织、低级别上皮内瘤变组织、高级别上皮内瘤变组织、癌组织中表达分别为0%、6.7%、40.0%、60.0%,高级别上皮内瘤变组织和癌组织中其表达率均与正常组织和低级别上皮内瘤变组织比较差异有统计学意义(P<0.05),其在癌组织中的表达与分化程度、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05).在癌组织中YB-1和P53的表达呈正相关性(r=0.306,P<0.05).结论:YB-1和P53蛋白在结直肠癌的发生发展、转移中起重要作用,YB-1和P53蛋白的联合检测可能为判断结直肠癌恶性程度和转移提供重要参考.