腹膜腔给予SAHA通过上调大麻素受体1的表达改善大鼠骨癌痛的研究

目的:观察腹膜腔给予辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对于骨癌痛(cancer-induced bone pain,CIBP)模型大鼠脊髓背角内大麻素受体1(cannabinoid-like receptor 1,CB1R)表达的影响。方法:将健康雌性SD大鼠随机分为4组:Sham+saline组、CIBP 7 d+saline组、CIBP 14 d+saline组、CIBP 14d+SAHA组。后三组动物胫骨内注射Walker 256乳腺癌肿瘤细胞制作骨癌痛模型。CIBP+SAHA组术后第1 d开始每日连续腹膜腔给予50 mg/kg SAHA至第14 d。利用机械刺激法连续观察各组大鼠的痛行为变化。应用免疫组织化学染色和Western Blot方法观察大鼠腰膨大节段脊髓背角内CB1R的表达情况。结果:自术后第7 d开始,与假手术组相比,CIBP组大鼠机械性缩足阈值(paw withdrawal threshold,PWT)明显下降(P0.01),这种变化一直持续到至少术后第14 d。从术后第1~14 d连续腹膜腔内给予SAHA能明显缓解大鼠机械性痛敏(P0.05)。免疫荧光组织化学染色显示:CB1R主要表达于脊髓背角浅层,CIBP组大鼠脊髓内CB1R表达上调,而腹膜腔内给予SAHA后可进一步促进脊髓背角内CB1R的上调。Western Blot结果显示:与对照组相比,造模后第7d和14 d脊髓背角内CB1R表达上调(P0.05)。与骨癌痛相比,从术后第1~14 d连续腹膜腔给予SAHA能明显促进脊髓背角内CB1R的表达(P0.05)。结论:在骨癌痛状态下,大鼠脊髓背角内CB1R表达增加,可能与体内内源性镇痛系统的激活有关,但此时与对照组相比,上调的CB1R不足以发挥镇痛效果;而腹膜腔内给予SAHA后,脊髓背角内CB1R受体表达进一步上调,从而发挥其镇痛效果。     

脊髓小胶质细胞和IL-1β在骨癌痛中的表达和意义

目的观察大鼠骨癌痛时脊髓小胶质细胞以及IL-1β的变化。方法 96只雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)和CIBP组,每组48只。CIBP组大鼠胫骨内注射Walker256乳腺癌细胞构建骨癌痛模型。于注射瘤细胞前和后6、14、21d取出L_4~L_6节段脊髓,检测IL-1β的变化趋势,利用免疫组化方法进一步明确小胶质细胞标记物(OX-42)在脊髓背角的分布及表达情况。结果与Sham组比较,接种瘤细胞后6d,CIBP组大鼠术侧脊髓背角OX42积分光密度值明显增加(P0.01)。可见肿瘤细胞的植入能诱导大鼠同侧脊髓背角OX-42的表达显著增加,并使小胶质细胞的胞体变得肥大。CIBP组IL-1β于接种肿瘤细胞后6d开始表达增加,在整个观察期内持续高表达,明显高于Sham组(P0.01)。结论大鼠胫骨接种肿瘤细胞后,脊髓背角内小胶质细胞被广泛激活,IL-1β释放增加。     

骨癌痛大鼠NRG1-ErbB2和脊髓胶质细胞纤维酸性蛋白的表达

目的观察NRG1、Erb B2和脊髓星形胶质细胞在骨癌痛大鼠中的表达。方法雌性SD大鼠,随机分为2组,每组48只。Sham组(假手术组)和骨癌痛模型(CIBP,胫骨内注射Walker256乳腺癌细胞)组。于注射瘤细胞前和后6、14、21d取出L4~L6节段脊髓,利用免疫组化方法明确星形胶质细胞标记物胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)在脊髓背角的分布及表达,q RT-PCR检测NRG1、Erb B2和GFAP m RNA的变化。结果 CIBP组大鼠接种瘤细胞后14天,GFAP蛋白和m RNA表达水平明显高于Sham组,并持续至接种后21d(0.05),星形胶质细胞的胞体变得肥大。接种瘤细胞后6d大鼠脊髓NRG1m RNA和Erb B2 m RNA表达水平比Sham组显著增加,持续至接种瘤细胞后21d(0.05)。结论髓背角NRG1、Erb B2参与了骨癌痛,可能与星形胶质细胞活化相关。     

谷氨酰胺合成酶在神经病理性疼痛大鼠脊髓背角的表达

目的:检测谷氨酰胺合成酶(GS)在保留性坐骨神经分支选择性结扎模型(SNI)大鼠脊髓背角的表达与定位,并探讨其在神经病理性疼痛中的作用机制。方法:48只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)和SNI组。两组大鼠分别于术前1 d、术后1、3、7和14 d测量机械痛域(PWT),并于术后相应时间点处死,采用Western Blot检测L_(4-6)节段脊髓组织中GS、p-p38、IL-10和TNF-α的表达情况;免疫荧光观察脊髓背角GS的表达与定位情况。结果:与sham组相比,SNI组大鼠PWT于术后1 d开始降低(P 0.05),术后3、7和14 d出现明显差异(P 0.05),模型制备成功。术后3 d和7 d,SNI组大鼠脊髓背角GS、TNF-α和p-p38表达量较sham组明显增高(P 0.05); IL-10表达逐渐下降,在术后7 d和14 d有统计学差异(P 0.05)。结论:GS高表达并主要定位于脊髓背角的星形胶质细胞,GS可能通过p38 MAPK通路参与神经病理性疼痛中的炎症因子的调控。     

鞘内应用GIP受体拮抗剂抑制大鼠切口痛的敏化

目的利用大鼠足底切口痛模型,探究葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽(GIP)受体在疼痛中枢敏化中的作用。方法将大鼠随机分为5组:空白对照组(Ctrl组)、假手术组(sham组)、切口痛组(P组)、切口痛+鞘内注0.9%氯化钠溶液溶液组(I组)和切口痛+鞘内注GIP受体拮抗剂(Pro3)组(M组)。测定切口痛术前及术后3 h及1、3和5 d大鼠累计疼痛评分(CPS)和机械缩足阈值(PWT);Western blot检测GIP受体的表达;免疫荧光技术确定大鼠脊髓背角GIP受体的时空表达。结果切口痛术后3 h时CPS评分最高(P0.05),PWT最低(P0.05);脊髓背角GIPR的表达水平在切口痛术后1 d显著上调(P0.001);GIP受体拮抗剂(Pro3)可提高大鼠的机械缩足阈值,并在给药30 min时镇痛效果最佳(P0.001);GIP受体位于脊髓背角浅层的神经元上,在小胶质细胞及星形胶质细胞上没有分布。结论 GIP受体参与了疼痛的中枢敏化,是切口痛的潜在治疗靶点。     

8-O-乙酰山栀子苷甲酸通过抑制脊髓背角JNK的磷酸化水平改善大鼠炎性痛的研究

目的:探究8-O-乙酰山栀子苷甲酸(8-O-acetyl-SM,8-Oa S)对于慢性炎性痛模型大鼠痛行为及脊髓背角星形胶质细胞内c-Jun氨基酸末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)磷酸化水平的影响。方法:运用大鼠足底注射完全弗式佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)的方法建立慢性炎性痛模型;通过腹膜腔注射8-Oa S进行干预;采用von Frey丝测定大鼠足底50%机械性缩足反射阈值;应用免疫荧光组织化学染色法观察大鼠腰膨大节段脊髓背角胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)及磷酸化的JNK(phosphorylatedc-Jun N-terminal kinase,p JNK)表达;应用Western Blot方法对大鼠脊髓背角内GFAP、JNK以及p-JNK的表达水平进行定量分析。结果:(1)行为学结果显示:与对照组相比,CFA模型大鼠机械性痛阈明显降低(P0.01),腹膜腔注射8-Oa S可有效提高CFA诱导的机械性痛阈值(P0.05);(2)免疫荧光染色结果显示:CFA模型脊髓背角内GFAP的表达量明显高于正常组,且p JNK基本表达于星形胶质细胞内;(3)Western Blot结果显示:与对照组相比,CFA造模后7 d脊髓背角内GFAP和p JNK表达明显上调,腹膜腔给予8-Oa S可以显著下调CFA诱导的脊髓背角内GFAP和p JNK的水平(P0.01)。结论:腹膜腔内给予8-Oa S可有效提高炎性痛大鼠的机械性痛阈,其机制是通过下调脊髓背角星形胶质细胞内JNK信号通路的磷酸化水平进而抑制星形胶质细胞的激活。     

大麻素抑制坐骨神经损伤导致的神经痛及脊髓背角HCN4通道表达

目的:观察CB1受体在坐骨神经缩窄性损伤(CCI)所致的神经痛中的作用及对CCI大鼠脊髓背角HCN4通道表达的影响。方法:7~8周龄SD大鼠分为4组:(1)sham组(假手术组);(2)CCI组;(3)CP55940+CCI组;(4)AM251+CP55940+CCI组。采用von Frey电子测痛仪测定各组大鼠损伤侧机械缩足阈值(MWT);免疫印迹法检测损伤侧L_4~L_6脊髓背角HCN4的表达。结果:CCI术后1~14 d大鼠MWT明显降低,呈现稳定的机械痛敏;鞘内给予大麻素受体激动剂CP55940(0.05 mg/kg)可显著升高CCI大鼠MWT(P0.05);预先给予CB1受体拮抗剂AM251(0.05 mg/kg)可明显阻断CP55940的镇痛效果(P0.05)。免疫印迹检测结果显示,CCI大鼠损伤侧L_4~L_6脊髓背角HCN4通道表达明显增加(P0.05);鞘内给予CP55940可显著降低CCI大鼠的HCN4表达(P0.05),CP55940抑制HCN4表达的效应可被AM251阻断(P0.05)。结论:脊髓CB1受体激活对外周神经损伤导致的神经痛具有良好的镇痛作用,其镇痛效应可能与抑制神经痛大鼠脊髓背角HCN4通道表达有关。     

鞘内注射甘珀酸降低CX43的表达对大鼠镜像痛的影响

目的:研究大鼠脊髓星形胶质细胞CX43的表达变化及对镜像痛的影响。方法:96只SD大鼠随机分为四组:Sham组,SNI组,SNI+NS组,SNI+CBX组,每组24只。各组分别于术前l d、术后3、7、10、l4和21 d观察大鼠疼痛行为学变化,其中Sham组,SNI组于术后14 d采用免疫组化法分析缝隙连接蛋白43(Cx43)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况;SNI+CBX组于术后第5~9 d鞘内注射甘珀酸10μl(20μg),SNI+NS组注射等量生理盐水,并于术后10、14和21 d三个时间点采用Western Blot的方法检测脊髓内CX43蛋白表达情况,采用免疫组化法分析GFAP的表达变化情况。结果:SNI组与Sham组相比,行为学上大鼠双侧机械缩足阈值降低,脊髓星形胶质细胞CX43及GFAP表达增加(P0.05);SNI+CBX组与SNI+NS组相比,Western Blot显示CX43表达降低,免疫组化显示脊髓背角双侧GFAP表达降低(P0.05),术后14 d,21 d大鼠双侧机械缩足阈值升高。结论:鞘内注射甘珀酸降低CX43的表达可抑制星形胶质细胞的活化,并缓解大鼠双侧的机械痛。     

脊髓背角HCN通道在神经病理性疼痛中的作用

目的:观察脊髓背角超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN通道)在坐骨神经缩窄性损伤(CCI)所致的慢性神经病理性疼痛中的作用。方法:8周龄成年雄性SD大鼠48只随机分为6组:(1)sham组(假手术组)、(2)CCI组(鞘内注射生理盐水)、(3)~(6)ZD7288+CCI(鞘内分别注射1,10,30,50μg ZD7288),每组8只。CCI及CCI+ZD7288组大鼠在鞘内置管5 d后行CCI术,术后鞘内给药,每日两次,连续14 d;sham组大鼠不进行鞘内置管,仅游离坐骨神经,不结扎。分别于CCI术前1 d,术后1、3、5、7、10、14 d鞘内给药2 h后测定热缩足潜伏期(TWL);术后第7、14 d处死大鼠,取术侧L4~L6脊髓背角,采用Western Blot技术检测脊髓背角HCN1,3,4及磷酸化蛋白激酶A(P-PKA)表达的变化。结果:大鼠CCI术后即形成稳定的热痛敏,TWL明显缩短;与CCI组相比,鞘内给予HCN通道阻滞剂ZD7288可明显延长CCI大鼠的TWL(P0.05)。Western Blot结果显示,与假手术组相比,CCI组大鼠在术后7、14 d术侧脊髓背角HCN1,3,4及P-PKA表达显著增加(P0.05);鞘内给予ZD7288可显著降低CCI大鼠HCN1,3,4及P-PKA的表达(P0.05)。结论:脊髓背角HCN通道的激活可促进CCI所致的神经病理性痛的发生与维持,HCN通道阻滞剂ZD7288具有良好的镇痛效应,ZD7288的镇痛作用可能与其抑制PKA的活性密切相关。     

电针刺激对炎性痛大鼠脊髓背角小胶质细胞活化的影响

目的:探索电针(EA)刺激是否通过下调糖原合成酶激酶3β(GSK3β).抑制小胶质细胞活化缓解大鼠慢性炎性痛。方法:利用完全随机数字法将Sprague Dawley(SD)雄性大鼠分为对照组(control)、完全弗氏佐剂注射组(CFA)、CFA+电针刺激组(CFA+EA)和CFA+GSK3β抑制剂TDZD-8组(CFA+TDZD-8)。通过足底注射CFA方法制备大鼠炎性痛模型,利用电针刺激和给予不同的药物处理各组大鼠。采用经典von Frey丝检测各组大鼠机械缩足反射阈值(PWT),用WesternBlot法或免疫荧光检测脊髓背角GSK3β和小胶质细胞离子钙接头蛋白(Iba-1)表达的变化情况。结果:与control组相比,CFA组大鼠在各时间节点的PWT值均显著降低(P<0.01);脊髓背角中GSK3β和Iba-1表达明显增加(P<0.05)。与CFA组相比,CFA+EA组大鼠PWT显著升高(P<0.01),GSK3β和Iba-1表达量显著下调(P<0.05);CFA+TDZD-8组大鼠PWT显著升高(P<0.01),Iba-1的表达量显著下调(P<0.05)。结论:电针刺激可能是通过下调大鼠脊髓背角细胞中GSK3β表达,抑制小胶质细胞活化.减少炎性介质释放,达到缓解慢性炎性痛的治疗效果。     

糖皮质激素受体激动剂地塞米松对大鼠血清促炎因子IL-6、TNF-α表达及神经病理性疼痛的影响

目的:探索坐骨神经分支选择性损伤诱导的早期神经病理性疼痛(SNI)模型中给予糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)激动剂对痛行为及促炎因子IL-6、TNF-α分泌的影响。方法:成年雄性SD大鼠随机均分为四组:Sham+Vehicle(生理盐水组),SNI+Vehicle组,SNI+DEX(GR激动剂地塞米松)组,SNI+RU(GR抑制剂米非司酮)组。Von Frey纤维丝检测各组大鼠缩足阈值(paw withdrawal threshold,PWT)的变化;Western Blot和免疫荧光染色检测各组脊髓中GR的表达水平;Elisa检测血清IL-6和TNF-α表达变化。结果:与SNI+Vehicle组比较,SNI+DEX组大鼠PWT阈值和脊髓GR的表达增高(P<0.05),血清IL-6和TNF-α浓度降低(P<0.05);SNI+RU组大鼠PWT阈值和脊髓GR表达降低(P<0.05),血清IL-6和TNF-α浓度升高(P<0.05)。结论:GR在脊髓水平能够通过下调促炎因子IL-6和TNF-α的表达缓解SNI诱导的早期神经病理性疼痛。     

雌激素对运动防治骨质疏松效果的影响

目的 探讨雌激素对运动防治骨质疏松效果的影响.方法 48只5个月龄SD雌性大鼠随机分为假手术组(Sham组)、假手术加运动组(Sham+run组)、单纯去卵巢组(Ovx组)、去卵巢加运动组(Ovx+run组)、去卵巢加运动加1/4雌激素组(Ovx+run+e1组)和去卵巢加运动加雌激素组(Ovx+run+e2组).其中Ovx+run+e1组和Ovx+run+e2组于术后1周开始皮下注射不同剂量的己烯雌酚,Ovx+run+e1组剂量为0.025mg/kg,1次/4d;Ovx+run+e2组为0.025mg/kg,1次/d,持续12周.Sham+run组、Ovx+run组、Ovx+run+e1组、Ovx+run+e2组于术后1周开始采用大鼠专用跑笼进行运动训练12周.术后13周行股骨远端骨密度和生物力学测量,并对胫骨近端进行骨组织计量学测量.结果 (1)Ovx组股骨远端骨密度值最低[(0.10±0.01)g/cm2],与其他各组相比差异有统计学意义(均P＜0.05);Ovx+run+e2组与Sham+run组骨密度值相当[分别为(0.14±0.02)g/cm2和(0.13±0.02)r/cm2],均显著高于其他各组(均P＜0.05);Sham组、Ovx+run组和Ovx+run+e1组之间骨密度值差异无统计学意义[(0.11±0.01)g/cm2比(0.12±0.01)g/cm2比(0.12±0.01)g/cm2,均P＞0.05].(2)Sham组骨小梁的厚度、骨小梁面积百分比和骨小梁数量与Ovx+run+e2组、Sham+run组差异无统计学意义,且均高于Ovx+run+e1组、Ovx+run组和Ovx组(均P＜0.05);而骨小梁分离度在Sham组、Ovx+run+e2组和Sham+run组之间差异也无统计学意义,但低于Ovx+run+e1组、Ovx+run组和Ovx组(均P＜0.05).骨小梁面积百分比和骨小梁数量:Ovx组＜Ovx+run组＜Ovx+run+e1组(均P＜0.05);骨小梁分离度:Ovx组＞Ovx+run组＞Ovx+run+e1组(均P＜0.05);骨小梁厚度在3组间差异无统计学意义.(3)Ovx组极限剪切载荷、剪切强度极限、最大剪应变、剪切弹性模量明显低于其他各组(均P＜0.05).Ovx+run+e2组的极限剪切载荷、剪切强度极限、最大剪应变与Sham+run组相当,均高于其他各组(均P＜0.05);剪切弹性模量则与Sham+run组、Ovx+run组相当,均高于Sham组、Ovx组、Ovx+run+e1组(均P＜0.05).Sham组、Ovx+run+e1组与Ovx+run组极限剪切载荷、剪切强度极限、最大剪应变之间差异均无统计学意义.Sham组剪切弹性模量小于Ovx+run组(P＜0.05),但Sham组与Ovx+run+e1组、Ovx+run+e1组与Ovx+run组之间差异无统计学意义.结论 雌激素水平对运动防治骨质疏松的效果有显著影响.雌激素充足,对运动防治骨质疏松效果起协同作用;雌激素不足,则对运动防治骨质疏松效果无协同作用.     

Increased expression of tetrodotoxin-resistant sodium channels Nav1.8 and Nav1.9 within dorsal root ganglia in a rat model of bone cancer pain

In attempt to understand the underlying mechanisms of cancer-induced bone pain, we investigated the presence of two tetrodotoxin-resistant sodium channels, Nav1.8 (SNS/PN3) and Nav1.9 (SNS2/NaN), in dorsal root ganglia (DRG) neurons in an animal model of bone cancer pain. Thirty-six female Sprague-Dawley rats were randomized into three groups: Sham operation group (Sham), cancer-bearing animals killed after 7 days (C7) and cancer-bearing animals killed after 14 days group (C14). After establishment of bone cancer pain model, behavioral tests were carried out to determine the paw withdrawal threshold (PWT) of mechanical and thermal hyperalgesia, respectively. Real-time RT-PCR, Western bolt and Immunofluorescence were used to determine the mRNA and protein expression of Nav1.8 and Nav1.9 in ipsilateral lumbar 4-5 DRG. Compared to Sham group, PWT of mechanical and thermal hyperalgesia in C14 group displayed a significant decrease (P < 0.01) from post-operation day (POD) 5 and POD7 to the end point of the observation, respectively. Compared to Sham group, the relative mRNA expression of Nav1.8 and Nav1.9 exhibited a significant up-regulation in C14 group (8.9 times and 9 times, respectively, P < 0.01) but not C7 group (1.5 times and 2.4 times, respectively). Western blot and Immunofluorescence revealed an apparent increase of Nav1.8 (P < 0.05) and Nav1.9 (P < 0.05) protein in C14 group compared with Sham group. The up-regulation of mRNA and protein levels of Nav1.8 and Nav1.9 suggested their potential involvement in the development and maintenance of bone cancer pain.     

电针预处理对MCAO大鼠模型血脑屏障和MMP-9的影响

目的:探讨电针(EA)预处理对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障(BBB)通透性及脑内基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:96只成年雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、单纯电针(EA)组、缺血(MCAO)组及电针预处理(EA+MCAO)组,每组24只。使用线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,缺血120 min再灌注48 h后处死取脑。分别采用干湿重法测定各组动物脑水含量,伊文斯蓝(EB)法检测血脑屏障通透性,Western Blot检测紧密连接蛋白(TJP)及MMP-9表达水平,同时明胶酶谱法检测MMP-9活性。结果:与Sham组相比,MCAO组大鼠脑水含量及EB含量增多(P0.05),缺血侧脑组织TJP水平下降(P0.05),MMP-9表达及活性明显升高(P0.05);与MCAO组大鼠比较,EA+MCAO组脑水含量及EB含量减少(P0.05),缺血侧脑组织TJP水平升高(P0.05),同时MMP-9表达及活性显著降低(P0.05)。结论:电针预处理通过抑制缺血后脑内MMP-9的表达及活性,维持BBB完整性,有效改善脑缺血后的脑水肿症状。     

汉黄芩苷对大鼠脊髓损伤的修复效果

目的 通过观察不同剂量汉黄芩苷对大鼠脊髓损伤后介导的炎症反应的干预情况,探讨汉黄芩苷对脊髓损伤的影响.方法 建立大鼠脊髓横断损伤模型(n=95),随机分成5组:正常组(N)、生理盐水组(NS)、汉黄芩苷低剂量组(WG12.5)、汉黄芩苷中剂量组(WG25)及汉黄芩苷高剂量组(WG50).采用ELISA检测炎性因子肿瘤坏...     

大麻素CB_1受体活化对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角嘌呤能P2X_2受体表达的抑制作用

目的:观察脊髓背角大麻素CB_1受体(CB_1R)在坐骨神经缩窄性损伤(CCI)所致的神经病理性疼痛中的作用及其对嘌呤能P2X_2受体表达的调节。方法:7~8周龄SD大鼠分为4组:(1)sham组;(2)CCI组;(3)CP55940+CCI组;(4)AM251+CP55940+CCI组。分别于CCI术前1 d,术后1、3、5、7、10、14 d测定热缩足反射潜伏期(TWL);免疫印迹技术检测各组大鼠损伤侧L_4~L_6段脊髓背角P2X_2受体表达。结果:CCI术后大鼠出现热痛敏,TWL明显缩短;鞘内给予非选择性大麻素受体激动剂CP55940可明显延长CCI大鼠TWL(P0.05);预先鞘内注射CB_1R拮抗剂AM251(0.05 mg/kg)可显著降低CP55940的镇痛效果(P0.05)。免疫印迹实验结果显示:CCI大鼠脊髓背角P2X_2受体在术后7、14 d表达明显增加(P0.05);鞘内给予CP55940可显著降低P2X_2受体表达(P0.05),而预先给予AM251可降低CP55940抑制P2X_2受体表达的效应(P0.05)。结论:脊髓背角CB_1受体激活对CCI所致的神经病理性疼痛具有良好的镇痛作用,其镇痛效应可能与抑制CCI大鼠嘌呤能P2X_2受体表达有关。     

氯胺酮鞘内给药对神经病理性痛大鼠脊髓背角小胶质细胞活化、TNF-α和IL-1β产生的影响

目的:探究鞘内注射氯胺酮(ketamine,KTM)对坐骨神经结扎(CCI)神经病理性疼痛大鼠模型行为、脊髓背角肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素1β(IL-1β)以及小胶质细胞标记蛋白OX42表达的影响。方法:(1)建立CCI模型大鼠,鞘内注射KTM或MI(米诺四环素)进行干预,测定大鼠机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。(2)运用ELISA法检测TNF-α和IL-1β表达水平。(3)使用Western Blot法检测OX42的表达情况。结果:(1)KTM组和MI组大鼠MWT和TWL值较CCI组显著升高;KTM组大鼠MWT和TWL值高于CCI组(P0.05)。(2)KTM组和MI组TNF-α和IL-1β表达水平低于CCI组(P0.05);其中KTM组TNF-α和IL-1β表达水平显著高于MI组(P0.05)。(3)KTM组和MI组OX42表达水平显著低于CCI组;KTM组OX42表达水平高于MI组(P0.05)。结论:鞘内KTM可以抑制脊髓背角小胶质细胞激活,减少TNF-α和IL-1β表达,显著改善坐骨神经结扎引起的神经病理性疼痛。     

α-硫辛酸对大鼠全横断脊髓损伤后GAP-43和Caspase-3表达的影响

目的:研究α-硫辛酸对脊髓全横断损伤(SCI)大鼠损伤部位神经生长相关蛋白(GAP-43)、神经细胞凋亡相关蛋白(Caspase-3)的表达,探讨α-硫辛酸对大鼠脊髓全横断损伤功能恢复的作用。方法:制作并评价SD大鼠SCI模型后,64只大鼠随机分为假手术组、脊髓损伤组(SCI组)、SCI+游泳训练组(游泳组)和SCI+α-硫辛酸组(硫辛酸组)。各组按手术后7、14、21、28 d等4个时间点收集标本,每个时间点大鼠均为4只。各组大鼠进行BBB评分。各组4个时间点的GAP-43和Caspase-3表达用免疫组化测定,同时用Western Blot检测GAP-43表达。结果:游泳训练和用硫辛酸均能提高脊髓损伤大鼠的BBB评分(P0.05)。与SCI组比较,游泳组和硫辛酸组GAP-43表达显著增加,Caspase-3表达则明显降低(P0.05),且硫辛酸组比游泳组的GAP-43表达增加和Caspase-3表达降低更为明显(P0.05)。结论:游泳训练和α-硫辛酸可以上调脊髓损伤大鼠GAP-43表达和抑制Caspase-3表达促进损伤神经修复,对改善大鼠运动功能有一定疗效。