CGC法同时测定两种莪术油在大鼠血浆中莪术醇和莪术二酮的含量

目的:研究比较莪术油、莪术残油(莪术油提取出β-榄香烯的残余物)在大鼠血浆中莪术醇和莪术二酮的含量。方法:采取大鼠灌胃给药,以对羟基苯甲酸乙酯为内标物,采用毛细管气相色谱法同时测定,内标法计算莪术油、莪术残油中标志性成分莪术醇和莪术二酮的血浆药物浓度,运用DAS2.0分析计算药代动力学参数。结果:莪术醇和莪术二酮分别在0.001028～0.6580mg/mL和0.04064～1.300mg/mL范围内呈现良好的线性关系,精密度、稳定性及融冻次数考察均符合有关要求,测定方法的绝对回收率莪术醇为72.3%～85.3%,莪术二酮为70.1%～87.0%;内标物对羟基苯甲酸乙酯的绝对回收率为74.9%～96.5%;方法回收率莪术醇为55.8%～69.0%,莪术二酮为61.6%～68.3%,均符合有关要求。通过药时曲线和药代动力学参数分析,莪术油、莪术残油中莪术醇、莪术二酮在大鼠的体内代谢过程基本符合二房室模型。结论:在莪术油和莪术残油中莪术醇的血药浓度变化相似,而莪术二酮血药浓度存在较大差异。     

莪术油冻干粉针中莪术醇的含量测定方法研究

目的:建立莪术油冻干粉针中莪术醇的含量测定方法。方法:含量测定采用GC法。结果:莪术醇与内标及其他挥发性成分分离良好,莪术醇在20.5～184.5μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为100.6%,RSD为1.0%。结论:GC法能很好的分离检测莪术油冻干粉针中的莪术醇,方法简便、准确、专属性强,可用于莪术油冻干粉针的质量控制研究。     

HPLC波长切换法测定莪术残油中莪术二酮莪术醇和吉马酮的含量

目的：建立用HPLC波长切换法同时测定莪术残油中莪术二酮、莪术醇和吉马酮含量的测定方法。方法：采用Kromasil 5μm C18（4.6mm×150mm）;流动相为乙腈-1%磷酸溶液;流速1.0 mL.min-1;检测波长213 nm,236nm;柱温35℃。结果：莪术二酮在0.1215～0.6076μg范围内线性关系良好,平均回收率为100.0%,RSD为2.4%;莪术醇在0.5760～2.880μg范围内线性关系良好,平均回收率为99.9%,RSD为2.1%;吉马酮在2.014～10.07μg范围内线性关系良好,平均回收率为100.3%,RSD为2.3%。结论：不同批号的莪术残油中3种成分的含量差异不显著。     

GC测定莪术残油中莪术醇、吉马酮和莪术二酮的含量

目的:建立以毛细管气相色谱法测定莪术残油中莪术醇、吉马酮和莪术二酮含量的方法.方法:采用气相色谱法:HP-5(0.32 mm×30 m)石英弹性毛细管柱,进样口温度250 ℃,氢火焰检测器(FID)280 ℃,进样量4μL,不分流进样,柱流量1 mL/min;程序升温:柱初始温度为100℃,以4℃/min升至140 ℃,以13 ℃/min升至170 ℃,保持8 min,以5℃/min升至200 ℃;以水杨酸甲酯为内标物.结果:莪术醇进样量在0.549 0～2.745μg内与峰面积比值(莪术醇/水杨酸甲酯)呈良好的线性关系Y=0.421 2X-0.076 6,r=0.999 7,平均回收率99.0%(RSD为1.0%);吉马酮进样量在0.1145～0.572 5μg内与峰面积比值(吉马酮/水杨酸甲酯)呈良好的线性关系Y=0.209 5X-0.014 1,r=0.999 3,平均回收率100.3%(RSD为1.4%);莪术二酮进样量在0.2715～1.357 5 μg内与峰面积比值(莪术二酮/水杨酸甲酯)呈良好的线性关系Y=0.250 8X-0.028 1,r=0.999 5,平均回收率99.2%(RSD为2.2%).结论:不同批号的莪术残油中3种成分的含最差异不显著.     

毛细管气相色谱法同时测定保妇康凝胶中莪术二酮和莪术醇的含量

目的:建立保妇康凝胶中莪术二酮和莪术醇的含量测定方法。方法:采用气相色谱法,以聚乙二醇(PEG-20M)为固定相的毛细管柱(柱长为30m,内径为0.32mm,膜厚度为0.25μm);柱温为程序升温,初始温度140℃,保持35min,以每min10℃的速率升温至200℃,保持3min;进样量1μL,分流比:10∶1。结果:莪术二酮在0.3004~4.506μg范围内,峰面积与进样量呈良好的线性关系,相关系数:r=0.9998(n=6);莪术醇在0.2076~3.114μg范围内,峰面积与进样量呈良好的线性关系,相关系数:r=0.9999(n=6);莪术二酮和莪术醇平均回收率分别为95.6%和100.6%,RSD分别为0.5%和1.4%。结论:所建立的方法简单、灵敏、重复性好,可作为保妇康凝胶中莪术二酮和莪术醇的含量测定方法。     

保妇康栓中莪术醇的毛细管气相色谱法含量测定

目的:介绍保妇康栓中莪术醇的毛细管气相色谱法含量测定.方法:采用毛细管柱气相色谱内标法测定保妇康中莪术醇的含量.结果:莪术醇、内标与其他干扰物分离良好,在0.1～0.5μg范围内线性关系良好,r=0.9995,精密度、重现性、加样回收率的相对标准误差均＜3%.结论:该法准确、可靠、重现性好,可以作为制剂及其原料莪术油的定量分析方法.     

一测多评法同时测定宽中顺气丸中8种成分

目的建立一测多评法同时测定宽中顺气丸(香附、陈皮、莪术等)中橙皮苷、川陈皮素、桔皮素、莪术二酮、莪术醇、吉马酮、香附烯酮、α-香附酮的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm);流动相乙腈-0. 1%冰醋酸,梯度洗脱;体积流量1. 0 m L/min;检测波长214、242、326 nm;柱温25℃。以吉马酮为内标,建立其他7种成分相对校正因子,测定含有量。结果 8种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0. 999 2),平均加样回收率为96. 93%~100. 00%,RSD为0. 81%~1. 63%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法简便准确,可用于宽中顺气丸的质量控制。     

毛细管气相色谱法测定复方莪术油软胶囊中莪术醇

目的建立复方莪术油软胶囊中莪术醇的毛细管气相色谱测定方法。方法色谱条件为OV-1毛细管色谱柱,程序升温,火焰离子化检测器,内标正二十烷。结果组分与内标分离良好,莪术醇在0.10～0.80mg/mL线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为99.69%,RSD为0.82%。结论该法定量准确、可靠、重现性好,可以用于复方莪术油软胶囊中莪术醇的质量评价。     

不同产地醋莪术饮片中莪术二酮、莪术醇、吉马酮和β-榄香烯含量的比较

目的:建立1种同时测定不同产地醋莪术饮片中4种成分含量的高效液相色谱法。方法:固定相为依利特Hy-persil ODS2柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;流速1 mL.min-1;柱温25℃;紫外检测器;检测波长214nm;进样量10μL。结果:在上述条件下测得莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯的质量浓度分别在0.008 3~0.264 0,0.006 7~0.213 6,0.001 6~0.052 0,0.002 9~0.253 1 g.L-1与色谱峰面积线性关系良好,平均回收率分别为98.27%,97.96%,98.20%,97.27%,各自RSD分别为2.9%,1.5%,2.0%,2.7%。结论:该方法准确、灵敏,可作为不同产地醋莪术饮片的质量控制方法,测定结果表明浙江产醋温莪术饮片中的4种成分含量相对较高。     

HPLC法测定香附油滴丸中α-香附酮的含量

目的:建立香附油滴丸中α-香附酮含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Inertsil ODS-SP(4.6×250mm,5μm),以甲醇-水(75∶25)为流动相,检测波长为245nm,流速为1.0mL·min-1。结果:α-香附酮在7.856~78.56μg.mL-1范围内呈良好的线性关系,r=0.9998,平均回收率为98.08%,RSD为1.32%。结论:本方法操作简便,结果准确、可靠,可用于香附油滴丸中α-香附酮的含量测定。     

高效液相质谱联用法分析大鼠血浆中异鼠李素-3．0-新橙皮糖苷的浓度及其药代动力学研究

目的：建立LC-MS／MS方法测定异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷的浓度并研究其在大鼠体内的药代动力学。方法：8只大鼠分别尾静脉注射异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷5mg·kg^-1。建立并确证高灵敏度的液质联用法分析大鼠血浆中异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷的浓度,采用芦丁作为内标。采用甲醇蛋白沉淀法提取血浆中的异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷和芦丁。然后用10mmol·L^-1的乙酸铵／甲醇（20：80,v／v）的流动相在C18色谱柱（150mm×2．1mm,I．D.,5μm）上进行洗脱并采用多反应检测的方式进行质谱分析。结果：异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷的在大鼠血浆中的线性范围为0．01-10μg·mL^-1。其定量下限为0.01μg·mL^-1。结论：该方法可以用于测定大鼠血浆中异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷的浓度。     

反相高效液相色谱法测定大鼠灌胃芍药甘草汤血浆中甘草酸的含量

目的建立大鼠灌胃芍药甘草汤后血浆中甘草酸的含量测定方法,为进行芍药甘草汤不同精制产物的药动学研究奠定基础。方法采用内标定量的反相高效液相色谱法,流动相:乙腈-甲醇-磷酸盐缓冲液(0.02mol·L-1,pH2.5;v/v/v=32:11:57),固定相:ODSC18柱(4.6mm×250mm,5μm),检测波长:248nm。结果甘草酸在1.34～134μg·mL-1范围呈良好线性关系;当信噪比(S/N)≥3时,血浆中甘草酸的最低检测浓度为1.34μg·mL-1;日间和日内精密度(RSD)均小于6%;准确度(RE)为-3.28%～0.174%。结论本方法经考察符合生物样品的测定要求,可用于大鼠体内甘草酸血药浓度分析及其药代动力学研究。     

反相高效液相色谱法测定香青兰中槲皮素的含量

目的：建立测定香青兰中槲皮素含量的方法。方法：色谱柱为Kromasil C18（4．6×150mm,5um）,流动相为乙腈-5％甲酸（31：69）,检测波长：280nm,流速：1.0mL·min^-1,柱温：30℃。结果：香青兰中槲皮素的线性关系良好,其线性范围为0．02mg·mL^-1～0．10mg·mL^-1（r=0．9990）。其回收率为97．2％（RSD=1．2％）。结论：所建方法准确、简便,为科学评价香青兰的质量提供了依据。     

大黄饮片在不同溶剂提取中蒽醌成分的含量分析

目的:采用HPLC法建立大黄中4种蒽醌类有效成分的含量测定方法。方法:采用色谱柱:Agi-lent C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:A为甲醇,B为0.5%磷酸水溶液,C为乙腈,洗脱梯度:0～5min(9%A,80%B,11%C),5～20min(9%～8%A,80%～72%B,11%～20%C),20～35min(8%～7%A,72%～60%B,20%～33%C),35～50min(7%～5%A,60%～50%B,33%～45%C),50～60min(5%～4%A,50%～36%B,45%～60%C),60～80min(4%～0%A,36%～9%B,60%～91%C);流速:1mL.min-1;检测波长:280nm;柱温:25℃。结果:4种蒽醌在80min内即可达到完全分离,芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄素甲醚分别在0.97～19.40μg.mL-1、1.08～21.60μg.mL-1、0.97～19.40μg.mL-1、1.60～32.00μg.mL-1范围内线性关系良好。大黄中大黄酸、大黄素在60%乙醇作为溶剂提取率最高。结论:提取溶剂不同对大黄饮片中蒽醌成分含量变化有影响。     

基于超高效液相色谱-串联质谱法研究宽缨酮在大鼠体内的生物利用度及代谢产物

目的建立快速、灵敏的UHPLC-MS/MS方法用于宽缨酮的生物利用度研究,并初步鉴定其在大鼠体内的代谢产物。方法将SD大鼠分为静脉注射组和灌胃组,给予相应剂量宽缨酮。以槲皮苷为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)法测定不同时间点血浆中宽缨酮的浓度,并采用DAS 3.0软件计算主要药动学参数。采用UHPLC-Triple-TOF/MS鉴定大鼠灌胃给药宽缨酮后血浆、尿液及粪便样品中的代谢产物,并使用Peakview软件分析其中的代谢产物。结果方法学验证表明,宽缨酮在血浆中的定量下限为1 ng·mL^-1,在1~150 ng·mL^-1范围内有良好线性关系;日内和日间的精密度及稳定性考察的RSD值均小于10%;提取回收率在89.81%~99.95%之间,基质效应为91.15%~105.29%,满足生物样品定量分析的要求;尾静脉注射及灌胃给药宽缨酮后主要药动学参数:药时曲线下面积(AUC0-24 h)分别为(331.95±40.35)、(93.69±17.83)μg·h·L^-1;消除半衰期(t1/2)分别为(15.76±7.24)、(13.06±11.08)h;达峰浓度(Cmax)分别为(691.99±197.46)、(31.00±10.29)μg·L^-1;生物利用度为2.8%。在大鼠体内发现了包括宽缨酮原型在内的12种代谢产物,代谢途径主要涉及水解、甲基化、磷酸化和牛磺酸结合等。结论宽缨酮经灌胃给药后在大鼠体内生物利用度低,体内半衰期较长,结合代谢产物研究推测可能其原型在体内经转化后主要通过尿液排泄。     

建立HILIC-UPLC联用分析法测定血浆中葫芦巴碱及在药动学研究中的应用

目的：葫芦巴碱是咖啡豆中含量较多的生物碱之一,为了研究其药代动力学特征,本研究建立了一种简便、灵敏、准确的亲水相互作用色谱一超高效液相联用分析方法,并研究了葫芦巴碱和咖啡豆甲醇提取物的药代动力学。方法：大鼠灌胃和尾静脉注射给予葫芦巴碱和咖啡豆甲醇提取物后,眼眶静脉丛取血,血液样本采用亲水相互作用色谱一超高效液相联用分析法进行分析,药代动力学参数按非房室模型,通过药动学软件87／97进行计算。结果：对所建立的方法进行了方法学的考察,线性范围为O．12—100μg·mL^-1,最低定量下限为0．12μg·mL^-1,日内日间精密度、准确度、提取回收率和稳定性等均达到体内药物分析要求。葫芦巴碱口服和尾静脉注射给药后,AUC（0-ω）分别为（4066．83±1244．41）和（3544．29±908．80）min·μg·mL^-1,生物利用度达到57.37％。咖啡豆甲醇提取物口服后,AUC（0-ω）为（4566．75±1435．64）min·μg·mL^-1,绝对生物利用度为64．42％,相对生物利用度为112．29％。结论：所建立的亲水作用色谱一超高效液相联用分析法简单、准确、重现性好;葫芦巴碱无论是纯品还是在咖啡豆甲醇提取物中都有较好的生物利用度,而且没有明显的差异。     

胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的药代动力学

目的：研究胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的药代动力学。方法：大鼠单剂量静注给予胡黄连苷Ⅱ后，采用HPLC-MS法测定大鼠血浆、组织、粪便、尿液及胆汁中的胡黄连苷Ⅱ。色谱柱为Hypersil ODS2柱，（5μm，150mm×4．6mm），流动相为甲醇：水（47：53），内标为替硝唑。ESI选择正离子检测：检测离子为[M＋Na]^＋m/z535．00（胡黄连苷Ⅱ）、[M＋H]^＋m／z247．90（内标）。结果：血浆样品中，胡黄连苷Ⅱ的线性范围为0．05．20．0μg·mL^-1（r=0.9998）；各浓度的提取回收率均大于76％；最低定量限为0．05μg·mL^-1。静注给予2.5、5.0、10.0mg·kg^-1后，大鼠体内胡黄连苷Ⅱ浓度快速降低，平均消除半衰期仅为19．6min。AUC与剂量呈现良好的线性相关性，提示胡黄连苷Ⅱ在大鼠体内的处置属于线性动力学。静脉注射给药后胡黄连苷Ⅱ广泛分布于各组织，其中肾和肝组织中浓度最高。胡黄连苷Ⅱ主要通过尿液和胆汁排泄，在尿液中的平均累积排泄百分率为11．79％；胆汁中平均累积排泄百分率为7．80％；粪便中未检测出胡黄连苷Ⅱ。胡黄连苷Ⅱ平均血浆蛋白结合率为30．0％。结论：静注给药后，胡黄连苷Ⅱ迅速从大鼠体内消除，并可在体内广泛分布。有约19．59％以原型形式从胆汁和尿液排泄。     

高效液相色谱法测定不同色泽荜茇中胡椒碱含量

目的：采用HPLC方法测定荜茇灰色、黑色、棕色胡椒碱含量。方法：色谱柱Q（4．6×150mm,5μm）;流动相：甲醇-水（77：23）;流速：1mL·min^-1;柱温30℃;测定波长：343nm。结果：胡椒碱9．2～46．0μg·mL^-1成线性关系（r=0．999）;回收率为100．4％;RSD=2．5％;荜茇灰色、黑色、棕色胡椒碱含量分别为15．00、16．35、10．28mg·g^-1。结论：灰色、黑色荜茇胡椒碱含量高于棕色荜茇胡椒碱含量。     

天然冰片在小鼠组织内的GC—MS测定法和组织分布研究

目的：建立天然冰片在小鼠组织内含量测定的GC—MS法并进行组织分布研究,初步探索天然冰片的归经特征。方法：采用DB-5MS弹性毛细管色谱柱（0．25mm×30m×0．25μm）;电子轰击（E1）电离方式,轰击能量为70eV,倍增电压1100V;选择性离子检测（SIM）,天然冰片m／z95,内标萘m／z128;小鼠组织样品用生理盐水匀浆后,加入萘作为内标,用正己烷振荡萃取,取上清液进样测定。组织分布研究以天然冰片的CMC—Na溶液给小鼠灌胃,在不同时间点分批处死小鼠后取各组织样本,经处理后用GC—MS法测定组织中的天然冰片含量。结果：本研究建立的天然冰片GC—MS测定方法,在22ng·mL^-1 -22μg·mL^-1范围内响应信号（Y）与天然冰片浓度（X）呈良好线性关系,Y=0．000486X＋0．00036,R^2=0．999（n=3）,最低检测限为10ng·mL^-1,定量下限为22ng·mL^-1,日内精密度为3．72—6．11％,日间精密度为7．29～17．6％,相对回收率和提取回收率分别为85．95～107．93％和93．04～103．03％。组织分布研究结果表明,天然冰片分布于大部分组织,单个组织内天然冰片浓度随时间延长呈现多峰现象;天然冰片在肝脏内含量最高,在心、脑、肾等重要组织内的含量也较高。结论：本研究建立的GC—MS测定方法准确、可靠,可用于天然冰片在动物体内的定量分析;天然冰片在不同组织内的分布有明显差异,肝、肾、心、脑中分布含量较高;天然冰片的归经特征中有归心经的趋势。