正海复方煎剂对小鼠NK细胞杀伤活性的调节作用

目的　研究正海复方煎剂对免疫低下小鼠NK细胞杀伤活性的调节作用 ,为其开发应用提供实验依据。方法　制备荷S180 移植肿瘤模型和环磷酰胺制备免疫低下模型 ,用阳性对照药云芝肝泰和不同剂量正海复方煎剂灌胃进行免疫治疗 ,采用LDH释放法检测小鼠NK细胞杀伤活性。结果　正海复方煎剂 5 0 0 %和 2 5 0 %剂量治疗荷瘤小鼠后 ,其NK活性分别为 2 3.5 5 %± 4.17%、和 2 2 .6 6 %± 4.5 2 % ,接近于阳性对照组的 2 3.98%± 4.0 2 % ,显著高于荷瘤对照组的 16 .31%± 5 .2 9%。 5 0 0 %正海复方煎剂治疗免疫低下小鼠后 ,其NK活性为 2 6 .0 1%± 6 .71% ,接近于阳性对照组的 2 5 .94%± 4.89% ,显著高于免疫低下对照组的 17.6 0 %± 6 .6 2 % ,并均达正常鼠水平。结论　正海复方煎剂具有提高免疫低下小鼠NK活性的免疫调节作用     

石见穿对实验性子宫内膜异位症模型超微结构的影响

目的：探讨石见穿对实验性子宫内膜异位症超微结构的影响。方法：根据Vemon采用自体子宫内膜盆腔移植法改进建立子宫内膜异位症动物模型，将建模成功大鼠随机分为模型组、石见穿治疗组、阿拉瑞林药物对照组，将正常大鼠设为正常对照组。从异位内膜超微结构水平上探讨石见穿治疗子宫内膜异位症的作用机理。结果：模型组在位、异位子宫内膜与正常组子宫内膜比较接近，石见穿组、阿拉瑞林组异位子宫内膜组织形态发生不同程度的改变，可见到凋亡细胞的形态特征。结论：石见穿、阿拉瑞林治疗子宫内膜异位症使其异位内膜超微结构发生不同程度的改变，并且促进异住内膜组织的细胞凋亡，以达到其治疗目的。     

模拟HCV HVR1免疫7肽对免疫细胞分泌细胞因子的影响

目的 了解在模拟HCV HVR1免疫7肽(7P)的刺激下,正常人免疫细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素4(IL-4)的细胞频数变化,并探讨其作用机制.方法分离正常人外周血单核细胞(PB-MCs),分为CD4~+ CD8~- T细胞组、CD4~- CD8~+ T细胞组、NK细胞组、NKT细胞组四组,各组设阴性对照及豆蔻酸-佛波醇-乙酸酯(PMA)阳性对照,与7P共同孵育后,应用IL-10、IFN-γ、TNF-α、IL4流式抗体进行细胞内因子检测,采用FAGS Calibur流式细胞仪及FACS Calibur软件进行检测分析.结果 与阴性对照组相比,分泌IFN-γ的细胞频数在NK细胞、NKT细胞以及CD4~+ CD8~-、CD4~-CD8~+ T淋巴细胞均明显增高(P<0.01);分泌IL-4的细胞频数变化不明显;分泌IL-10的细胞频数在CD4~+ CD8~-、CD4~- CD8~+ T淋巴细胞表现为升高(P<0.01,P<0.05),在NK细胞、NKT细胞表现为下降(P<0.01);分泌TNF-α的细胞频数在CD4~+ CD8~- T淋巴细胞表现为下降(P<0.01),在NK细胞表现为升高(P<0.01).结论 7P能够通过调节细胞因子分泌改变免疫细胞的免疫反应方式,这种调节在以NK、NKT细胞为代表的固有免疫细胞和以CD4~+ CD8~-、CD4~- CD8~+ T细胞为代表的适应性免疫细胞之间存在差异,可能有利于在清除病毒的同时缓解炎症反应.     

补充蒺藜提取物对过度训练大鼠T淋巴细胞亚群和NK、NKT细胞的影响

目的:研究补充蒺藜提取物对过度训练大鼠免疫功能的影响及其可能机制。方法:30只雄性健康SD大鼠随机分为安静对照组、过度训练组和蒺藜+过度训练组。后两组进行6周递增负荷跑台运动(每周训练6天,从第1周的15 m/min×30 min,坡度5%逐渐增至第6周的35 m/min×120 min,坡度15%)。蒺藜+过度训练组每日运动前灌胃蒺藜提取物(120 mg/kg体重)1次,每周6次,其余两组补充等体积生理盐水。于第7周周一检测外周血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)、辅助性T细胞(Th)1、Th2细胞因子IFN-、IL-4,自然杀伤细胞(NK)、自然杀伤T细胞(NKT)及皮质酮(C)、睾酮(T)等免疫和内分泌指标。结果:①与对照组相比,过度训练组大鼠体重、T/C比值均显著下降,在运动后期反应迟钝,精神萎靡,眼神暗淡,毛发脱落等,CD3+T细胞和NK细胞数量显著降低。②与过度训练组相比,蒺藜+过度训练组大鼠外周血T水平、T/C比值、CD4+/CD8+比值均显著升高,但CD3+T细胞数量无明显;NK和NKT细胞显著增加,超过安静对照组水平。③与安静对照组相比,过度训练组大鼠IFN-(Th1细胞的特异性细胞因子)/IL-4(Th2细胞的特异性细胞因子)比值显著下降,其Th1/Th2失衡,向Th2偏移。与过度训练组相比,蒺藜+过度训练组大鼠IFN-/IL-4比值显著增加,其Th1/Th2失衡情况改善,平衡恢复。④蒺藜+过度训练组大鼠血浆C水平显著降低,约是过度训练组的50%。结论:补充蒺藜提取物能增强过度训练大鼠免疫功能,防止运动性免疫抑制的发生,包括增加CD4+/CD8+比值、促进Th1/Th2平衡的恢复、增加NK和NKT细胞数量。蒺藜提取物增强过度训练大鼠免疫功能的作用很可能与其降低血浆皮质酮有关。     

甲壳胺胶囊对长航核潜艇艇员免疫功能的影响

目的考察甲壳胺胶囊对长航核潜艇艇员免疫功能的影响。方法将艇员随机分为2组：对照组不服用任何药物,用药组在航行期间服用甲壳胺胶囊,每次3粒,每天2次,共计25 d。检测出航前后各组外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞（CD16＋）活性、T淋巴细胞凋亡率、IL-2和IL-2受体（sIL-2R）变化以及免疫球蛋白IgA、IgM、IgG及C3、C4水平。结果甲壳胺胶囊可提高CD3＋、CD4＋T淋巴细胞亚群的百分率,显著改善CD4＋/CD8＋比值,使NK细胞的活性增强。促进IL-2分泌、使sIL-2R水平降低。明显增加IgA、IgM、IgG、C3、C4水平。结论甲壳胺胶囊对长航核潜艇艇员的细胞免疫及体液免疫功能均具有显著的调节作用。     

新辅助放化疗对直肠癌手术围术期免疫功能影响的观察

目的：观察术前新辅助放化疗对直肠癌手术围术期免疫功能的影响。方法：将中低位直肠癌64例随机分为新辅助放化疗＋手术组（A组）和单纯手术组（B）各32例,另选门诊常规体检者32例为对照组（C组）。比较3组总T细胞、CD4＋、CD8＋、CD4/CD8和NK细胞水平变化。结果：A、B组治疗后或手术前、后NK细胞活性、总T细胞、CD4＋水平显著低于C组（P〈0.05）,而CD8＋水平显著高于C组（P〈0.05）。A、B组治疗前、后及术后7天,总T细胞、CD4＋、CD8＋、CD4/CD8水平差异不显著（P〉0.05）;A、B组治疗前、后NK细胞活性差异不显著（P〉0.05）。结论：术前新辅助放化疗对中低位直肠癌患者细胞免疫功能无显著影响。     

抗子宫内膜抗体与CA125对于子宫内膜异位症的诊断价值

目的探讨了血清抗子宫内膜抗体（EMAb）和血清CA125水平对子宫内膜异位症（EMS）的诊断价值。方法应用ELISA法和放免法分别测定了53例子宫内膜异位症患者血清EMAb和CA125水平,并和50例正常健康人作比较。结果子宫内膜异位症患者EMAb阳性检出率显著高于正常人组（P〈0．01）,CA125水平也明显高于正常人组（P〈0．01）。结论测定子宫内膜异位症患者血清EMAb和CA125水平对子宫内膜异位症有一定的诊断价值,联合测定EMAb和CA125水平更有实用价值。     

运动性免疫抑制大鼠肝、脾糖皮质激素受体表达变化探讨

目的:研究运动性免疫抑制时糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)mRNA和蛋白表达变化,探讨GR在运动性免疫抑制发生中的作用。方法:40只SD大鼠随机分为安静对照组(C组,n=10)、中强度运动组(M组,n=10)和过度疲劳运动组(O组,n=20)。后两组分别进行不同强度的8周递增负荷训练,每周训练6天。每周称量大鼠体重。8周训练结束后采血,检测Hb、血睾酮、皮质酮水平,外周血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)、自然杀伤细胞(NK细胞)数量和辅助性T淋巴细胞1、2(Th1、Th2)特异性细胞因子IFN-γ、IL-4水平。之后断头处死动物,采用real time PCR和Western blot方法分别检测大鼠肝、脾GR mRNA和蛋白水平。结果:(1)与安静对照组和中强度运动组相比,过度疲劳运动组大鼠体重从第4周起明显下降(维持至实验结束),Hb、血浆睾酮水平、睾酮/皮质酮比值均显著下降,血浆皮质酮水平显著升高,表明过度疲劳训练组大鼠已发生过度疲劳。(2)8周训练后,与安静对照组和中强度运动组相比,过度疲劳运动组大鼠CD3+细胞、NK细胞数量显著减少、IFN-γ/IL-4比值显著下降,Th1/Th2失衡,但CD4+/CD8+比值无显著性差异,表明运动性免疫抑制大鼠模型建立成功。(3)与安静对照组和中强度运动组相比,8周训练后,过度疲劳运动组大鼠肝、脾GR mRNA和蛋白水平均显著下降;与安静对照组相比,中强度运动组大鼠肝、脾GR mRNA和蛋白水平均无显著变化。(4)相关性分析显示,肝、脾GR mRNA和蛋白水平与血浆GC的相关系数分别为-0.752、-0.613、-0.144和-0.397,均P<0.05。结论:(1)运动性免疫抑制大鼠肝、脾GR mRNA和蛋白表达水平较安静对照组和中强度运动组显著降低。(2)运动性免疫抑制大鼠肝、脾GR mRNA减少和脾GR蛋白水平下降可能与血浆GC升高有关。     

复方丹参对失血性休克大鼠早期炎症反应影响的研究

目的 通过观察复方丹参对失血性休克大鼠血清IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF-α)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)表达水平的影响,探讨复方丹参是否能抑制休克后早期炎症反应,从而防止失血性休克后多器官功能衰竭综合征的发生.方法 30只Wistar大鼠随机分为3组,每组10只,分别为对照组(A组)、失血性休克组(B组)和失血性休克丹参组(C组),采用ELISA法测定血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量;采用化学反应法测定SOD活性及MDA含量.结果 失血性休克组血清IL-1β、IL-6、TNF-α及MDA浓度均显著高于对照组(P＜0.01),SOD活性明显低于对照组(P＜0.01).而丹参治疗组与失血性休克组比较,丹参治疗组血清IL-1β、IL-6、TNF-α及MDA浓度显著降低(P均＜0.05),而SOD活性显著升高(P＜0.06).结论 复方丹参能有效抑制失血性休克后早期炎症因子的表达,增强SOD的活性,从而抑制休克后早期炎症反应.     

洋参多糖提高放射性免疫功能低下小鼠免疫功能实验观察

目的 观察洋参多糖提高放射性免疫功能低下小鼠免疫功能的药效作用。方法 采用^60Coγ射线一次全身照射7Gy诱发放射性免疫功能低下小鼠动物模型。照射前后小鼠每日口服洋参多糖87．5mg/kg，连续服药10d。测定模型小鼠服药后脾NK细胞活性、淋巴细胞转化能力、T淋巴细胞亚群(CD4、CD8)、白介素2(IL-2)和足垫迟发超敏反应(DTH)等免疫功能变化。结果 洋参多糖可明显增加IL-2含量和T淋巴细胞亚群(CD4、CD8)数量，提高鼠脾NK细胞活性和淋巴细胞转化能力及促进模型鼠足垫迟发超敏反应。结论 洋参多糖可减轻辐射诱发的机体免疫功能改变，该化合物可能是一种治疗免疫功能低下的有效制剂。     

大运动量训练对排球运动员淋巴细胞亚群的影响

本文研究了大运动量训练对上海男子排球运动员ＮＫ细胞活性和淋巴细胞亚群分布的影响。结果指出大运动量训练后即刻ＮＫ细胞活性显著地低于训练前测定值（Ｐ＜０．０１），运动后１小时及１５小时ＮＫ细胞活性恢复到了训练前水平。Ｔ３（ＣＤ３）和Ｔ８（ＣＤ８）淋巴细胞百分数在运动不同时期均无显著改变，但Ｔ４（ＣＤ４）淋巴细胞百分数在运动后１小时及１５小时显著地低于训练前水平，因而ＣＤ４／ＣＤ８细胞比率也相应地显著降低，至于大运动量训练对细胞免疫功能影响的机理有待进一步研究。     

脑囊虫病患儿细胞免疫功能研究

目的检测28例脑囊虫病患儿外周血白细胞介素2（IL-2）、可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）、白细胞介素6和8（IL-6和IL-8）和T淋巴细胞亚群,以探讨其免疫学发病机制。方法IL-2、sIL-2R、IL-6、IL-8和T淋巴细胞亚群检测,分别采用ELISA、双抗体夹心ELISA和APAAP法进行。结果脑囊虫病患儿外周血CD3＋、CD4＋细胞百分率、CIM＋／CD8＋比值和IL-2水平均显著低于对照组（P〈0．01）,sIL-2R、IL-6、IL-8水平均显著高于对照组（P〈0．01）。结论脑囊虫病患儿细胞免疫功能低下且紊乱,患儿机体的免疫功能障碍在该病的发生中起一定作用。     

低聚原花青素对糖尿病肾病大鼠足细胞上皮-间质转化的抑制作用

 目的 探讨低聚原花青素(oligoprocyanidins, OPC)对糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)大鼠足细胞上皮-间质转化(Epithelial-to-Mesenchymal transition, EMT)的影响。方法 选择雄性SD大鼠20只,用链脲佐菌素、高脂高糖饮食制造DKD模型。成模后随机分为模型组和OPC组(常规饲养基础上加喂OPC),另取10只雄性SD大鼠作为对照组。8周后比较各组大鼠的肾功能及组织形态学变化。Western blot分析EMT相关蛋白的水平。结果 OPC能明显降低糖尿病肾病大鼠血糖、血肌酐、尿素氮和尿蛋白水平(P<0.05),减轻DKD大鼠的肾组织形态学改变。电镜下OPC组大鼠足细胞部分融合,出现自噬泡。OPC上调DKD大鼠足细胞的E-cadherin蛋白的表达,下调Vimentin、Twist1蛋白的表达。结论 OPC可诱导DKD大鼠足细胞自噬,减轻足细胞EMT,为DKD的进一步研究提供了基础。     

结直肠癌患者免疫状况与肿瘤分期的关系

目的:研究结直肠癌患者免疫状况及其与肿瘤分期的关系。方法:用放免法和酶免法分析60例结直肠癌患者外周血中T淋巴细胞亚群、自然杀伤(NK)细胞活性、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)和血管内皮生长因子(VEGF)水平,比较各项指标与结直肠癌Dukes'分期的关系。结果:结直肠癌患者抑制性细胞毒性T细胞(CD+8)、sIL-2R和VEGF水平明显高于对照组,成熟T细胞总数(CD+3)、辅助性诱导性T细胞/抑制性细胞毒性T细胞(CD+4/CD+8)及NK细胞活性明显低于对照组;随着结直肠癌Dukes'分期的增高,CD+3、CD+4/CD+8及NK细胞活性逐渐降低,sIL-2R逐渐增高。结论:结直肠癌患者的细胞免疫功能与肿瘤分期有关,其恶性程度越高,免疫功能越低,预后越差。     

131I诱导甲状腺功能减退大鼠主动脉内皮功能异常相关机制的研究

目的 探究放射性131I诱导大鼠甲状腺功能减退（简称甲减）模型中血清一氧化氮（NO）、炎症介质肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）的表达水平及在大鼠甲减模型中主动脉内皮细胞中一氧化氮合酶（NOS）蛋白的表达情况，以期寻找一个较为安全的131I治疗剂量。 方法 健康雄性SD大鼠45只，其中36只分别腹腔注射2.775、5.550、11.100、16.650 MBq 131I+0.5 mL生理盐水，构建大鼠甲减模型，分为4组，每组9只；剩余9只作为正常对照组，只注射0.5 mL生理盐水。分别于注射后第4、8、16周时每组各处死大鼠3只，用ELISA法检测大鼠血清中NO、TNF-α和IL-6水平，用化学发光免疫分析法检测血清中游离三碘甲状腺原氨酸（FT₃）、游离甲状腺素（FT₄）、促甲状腺激素（TSH）水平，提取主动脉标本检测总的NOS活性，应用Western-blotting分析大鼠主动脉标本中主动脉内皮型NOS（eNOS）、神经型NOS （nNOS）与诱导型NOS（iNOS）蛋白表达水平。组间两两比较采用t检验。 结果 血清中FT₃、FT₄、TSH水平检测结果发现除2.775 MBq剂量组外的其他3组大鼠均甲减模型构建成功，且5.550 MBq组作为放射性131I治疗的剂量是较为合适的。5.550 MBq组大鼠血清NO水平在注射131I后第4周升高至24.01 μmol/L后逐渐减少；血清中IL-6水平在第4、8、16周时分别为209.23、291.87、302.97 pg/mL，与正常对照组相比，第8、16周差异均有统计学意义（t=8.841、14.224，均P<0.05）。TNF-α水平在第4、8、16周时分别为1441.23、1601.85、1521.51 pg/mL，与正常对照组相比，差异均有统计学意义（t=21.021、17.578、14.498，均P<0.05）。eNOS在不同时间点的表达量为25 985、16 306、6248，各组蛋白水平明显降低，与正常对照组相比，除第4周时蛋白水平差异无统计学意义（t=3.546，P>0.05）外，第8、16周时差异均有统计学意义（t=8.841、14.224，均P<0.05）。nNOS表达量为24 562、36 114、58 211，第4周时下降，第8、16周时逐渐升高，与正常对照组相比，第4、16周时的差异均有统计学意义（t=5.751、7.251，均P<0.05）。iNOS在不同时间点的表达量为55 973、50 575、62 364，与正常对照组相比，各组均明显增加，差异均有统计学意义（t=21.017、16.412、24.981，均P<0.05）。 结论 放射性131I所致甲减对于心脏具有一定的影响，大剂量的131I可能会刺激合成甲状腺激素减少，从而导致甲减，最终影响其血管内皮NOS基因及蛋白表达，对心血管系统产生影响。      

中小负荷运动对反复心理应激大鼠血清皮质酮、IL-2和血浆T淋巴细胞亚群的影响

目的:研究身体运动对反复心理应激大鼠免疫功能的影响及其可能机制.方法:54只SD雄性大鼠随机分为安静对照组、心理应激组、应激 30min运动组、应激 60min运动组、30min运动组、60min运动组、电击组(除30min运动组和应激 30min运动组每组7只以外,其余每组8只).应激大鼠不受电击,而是旁观电击组大鼠遭受电击的过程,通过视觉、听觉等产生心理应激,每次应激持续30 min,隔天1次,连续2周.运动方案为无负重游泳,每天1次,共8周.结果:(1)应激组大鼠血清IL-2水平显著低于对照组,与对照组相比,CD3 、CD4 、CD8 水平无显著差异但有下降趋势,血清皮质酮含量显著高于对照组.(2)与对照组相比,30min和60min运动组血清IL-2水平和血浆T细胞亚群数目均显著高于对照组,而血清皮质酮含量显著低于对照组.(3)与应激组相比,应激 60min运动组血清IL-2和CD3 ,CD4 /CD8 水平显著高于应激组,应激 30min运动组CD4 /CD8 水平无显著差异,但不低于应激组,皮质酮含量显著低于应激组.说明运动训练可以通过改变HPA轴应激激素对抗心理应激造成的免疫功能低下,且中等负荷对于对抗心理应激有着十分重要的意义.结论:反复的心理应激引起大鼠较强的心理反应并对大鼠免疫功能产生抑制,中小负荷运动对心理应激大鼠的免疫功能有较好的保护作用,且中等负荷运动更能提高大鼠抗应激能力,其机制可能是中小负荷运动使大鼠HPA轴产生较好的适应,改变应激激素在体内的分泌,从而维持了机体免疫功能的稳定.     

左卡尼汀对大鼠横纹肌溶解急性肾损伤炎性反应因子表达的影响

 目的 探讨左卡尼汀对大鼠横纹肌溶解急性肾损伤的保护作用及其作用机制。方法 48只大鼠,随机分为空白组、模型组、盐水治疗组及左卡尼汀治疗组。肌内注射50%甘油建立横纹肌溶解急性肾损伤模型,盐水治疗组、左卡尼汀治疗组分别腹腔注射生理盐水和左卡尼汀。测血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)、尿素氮(urea nitrogen,BUN)和肌酐(serum creatinine,Scr)水平,光镜下观察肾脏病理;RT-PCR和免疫组化分别检测肾脏TLR4、NF-kB;酶联免疫吸附法检测肾脏IL-6、TNF-α。结果 与空白组相比,模型组及盐水治疗组CK、BUN、Scr、TLR4、NF-kB、IL-6、TNF-α及急性肾小管坏死(acute tubular necrosis,ATN)评分均明显升高(F=9.12~211.77,q=5.40~20.3,P<0.05);与模型组相比,左卡尼汀治疗组CK、BUN、Scr、TLR4、NF-kB、IL-6、TNF-α及ATN评分水平明显降低(q=4.37~16.03,P<0.05)。结论 左卡尼汀缓解横纹肌溶解急性肾损伤的机制可能与其抗免疫炎性反应通路TLR4/NF-kB有关。     

束缚应激对大鼠免疫功能的影响

目的探讨束缚应激对大鼠免疫功能的影响。方法大鼠随机分为4组:正常对照组(Ctr)、束缚1周组(R1)、束缚2周组(R2)和束缚4周组(R4)。取大鼠血清用ELISA方法检测糖皮质激素(GC)、白介素-6(IL-6)和白介素-17(IL-17)水平,单向免疫扩散法检测免疫球蛋白G(IgG)水平。分离外周血中单核细胞,用吞噬中性红法检测大鼠单核巨噬细胞(Mo/Mφ)的吞噬能力。结果束缚组大鼠GC、IL-6水平显著高于Ctr组,IL-17、IgG含量和外周血单核巨噬细胞吞噬能力显著低于Ctr组。结论束缚应激可以使大鼠免疫功能显著降低。