颅骨和骨膜来源成骨细胞成骨能力的比较

成骨细胞(osteoblast)促进细胞外羟基磷灰石沉着．是骨形成过程中必不可少的功能细胞．我们可以从骨组织和骨膜中分离，培养出成熟的成骨细胞．但是，同一个体不同解剖部位来源的成骨细胞的成骨能力是否存在差别呢?我们对来自同一人胚胎，不同解剖部位的成骨细胞的成骨能力进行了比较研究．以期为骨组织工程中种子细胞的选择提供依据。     

成骨生长肽对新生大鼠颅盖骨成骨细胞样细胞影响的生化分析

为了研究成骨生长肽在体外对成骨细胞样细胞的保成骨作用。将新生大鼠颅盖骨成肾细胞样在体外培养，实验组在传第二代后加入成骨生长肽１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ），对照组不加。细胞传代两次后，于第四周起，分３、７、１０、１４和２１天收集两组合培养的细胞和细胞液，检测其中的碱性磷酸产、酸性磷酸酶胶原、蛋白糖及钙含量。结果实验组的细胞和培养液中第３、７、１０、１４、２１天碱性磷酸酶显著地高于对照组（Ｐ〈０．０１～０．     

阿胶强骨口服液含药血清对人成骨细胞钙离子摄取和钙化能力的影响

根据中医医“肾主骨”理论，既往从整体和骨组织水平的研究认为补肾中药可以通过调节下丘脑-垂体-多个靶腺轴的功能，促进肠钙吸收，调节体内微量元素的平衡，改善骨的内部结构等机制防治骨质疏松，但其他对人成骨细胞钙离子摄取和钙化能力影响的机制尚不清楚。本试验从细胞学水平观察补肾中药阿胶强骨口服液对人成骨细胞钙代谢的影响，为“肾主骨”理论提供客观依据。[第一段]     

成骨生长肽羧基端片段及其衍生物对成骨细胞作用的体外研究

目的：探讨成骨生长肽羧基端片段OGP（10-14）及其衍生物G38I、G38K在体外对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响。方法：用细胞记数和MTT法评价OGP（10-14）及其衍生物G38I、G38K对成骨细胞增殖的作用。测定细胞培养上清液碱性磷酸酶含量，细胞中Ⅰ型胶原蛋白和mRNA表达水平，了解药物对细胞分化的影响。结果：药物在10^-11mmol／L浓度时促进细胞增殖的作用增强。OGP（10-14）和G38I处理组与空白对照组比较，显著提高上清液中碱性磷酸酶含量、上调Ⅰ型胶原蛋白和mRNA表达水平（P〈0．01，P〈0．05）。结论：OGP（10-14）及其衍生物可促进成骨细胞增殖、提高细胞活性，OGP（10-14）和G38I可增加细胞中Ⅰ型胶原的合成，促进细胞分化和成骨作用。     

成骨生长肽羧基端片段及其衍生物G38I对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响

目的探讨成骨生长肽(OGP)羧基端片段[OGP(10~14)]及其衍生物G38I对大鼠成骨细胞增殖和分化的影响。方法大鼠颅盖骨成骨细胞体外培养至第3代,分别加入10-15~10-7mol/L的OGP(10~14)或G38I,48h后行细胞计数,并用噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖情况。细胞分为实验组[OGP(10~14)组和G38I组]及对照组,实验组给予10-11mol/L的药物干预48h。电镜观察细胞超微结构的变化,测定培养上清液碱性磷酸酶(ALP)含量,用免疫组织化学方法比较细胞中Ⅰ型胶原蛋白含量的变化,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定细胞中核结合因子a1(Cbfa1)和Ⅰ型胶原mRNA表达水平的变化。结果在较低浓度时,随药物浓度升高,OGP(10~14)和G38I促进细胞数增加、提高细胞活性的作用增强,10-11mol/L药物作用时成骨细胞数分别为37×104/ml和30×104/ml,进一步升高药物浓度反而抑制细胞增殖。电镜下实验组细胞粗面内质网发达,胞质中有大量分泌囊泡。对照组细胞囊泡中可见钙盐结晶。OGP(10~14)组和G38I组与对照组比较,细胞培养上清液ALP含量高(4·47U/g、3·82U/g vs2·21U/g),细胞中Ⅰ型胶原蛋白含量多,Cbfa1和Ⅰ型胶原mRNA表达水平较高,差异均具有统计学意义(P<0·01,P<0·05)。结论OGP(10~14)及其衍生物G38I具有与OGP全长肽相同的促进成骨细胞增殖、提高细胞活性的作用,OGP(10~14)和G38I可上调成骨细胞Cbfa1和Ⅰ型胶原mRNA表达水平,增加细胞中Ⅰ型胶原的合成,促进细胞分化和成骨作用。     

成骨生长肽对大鼠颅盖骨成骨细胞样细胞增殖和分化的影响

目的研究成骨生长肽(OGP)在体外对成骨细胞样细胞增殖分化的影响。方法在体外培养的新生大鼠颅盖骨成骨细胞样细胞中加入不同浓度的OGP(10-11mol/L~10-7mol/L),用MTT法检测细胞增殖,酶联免疫法检测细胞内碱性磷酸酶(ALP)的表达,RT-PCR法检测核心结合因子1(Cbfa1)mRNA的表达。结果OGP对成骨细胞样细胞增殖有促进作用(P<0.05),最大效应浓度为10-9mol/L;能增加细胞内ALP活性(P<0.05),最大效应浓度为10-8mol/L;可促进Cbfa1mRNA的表达(P<0.05),其最佳促进表达浓度为10-8mol/L,Cbfa1mRNA与β-actinmRNA像素值比值为0.89±0.02。结论OGP可促进成骨细胞样细胞增殖,增强Cbfa1mRNA的表达水平。     

阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞护骨素及护骨素配体mRNA表达的影响

目的：研究阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL表达的影响，探讨阿胶强骨胶囊治疗骨质疏松的分子机制。方法：3月龄wistar（雌雄各半）30只，随机分为阿胶强骨口服液，雌激素，及生理盐水对照组，灌胃7d后，制备实验组和对照组的含药血清。将新生SD大鼠分离的颅骨成骨细胞，制成单细胞悬液，消化传代，取二代培养的成骨细胞，制成细胞悬液。培养细胞分为5组，分别加同体积药液，对照组仅加培养液，继续培养。采用MTT比色分析法、3H-胸腺嘧啶核苷（3H—TdR）渗入法测定成骨细胞增殖，用放免法测定细胞内BGP含量，RT—PCR测定胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL mRNA的表达。蛄果：阿胶强骨口服液含药血清以剂量依赖方式促进成骨细胞的增殖，与对照组相比，差异显著（P〈0．05）。成骨细胞OPG基因mRNA表达在阿胶强骨口服液含药血清1000ml／L时最强，与雌激素组比较无显著性差异（P〉0．05），且明显高于对照组（P〈0．05）。成骨细胞RANKL基因mRNA表达在1000ml／L阿胶强骨口服液含药血清与雌激素组比较无显著性差异（P〉005），且明显低于对照组（P〈0．05）。结论：阿胶强骨口服液可在细胞水平上促进骨的合成代谢及前成骨细胞的有丝分裂，分子水平上调节OPG／RANKL表达而治疗骨质疏松。     

成骨生长肽对成骨细胞样细胞的分化和成骨作用

目的"研究成骨生长肽(OGP)对大鼠成骨细胞样细胞的分化和成骨作用.方法"大鼠颅盖骨成骨细胞样细胞体外培养分实验组与对照组,实验组加OGP,分别测定细胞的Ⅰ型胶原mRNA和骨钙素mRNA表达、胶原和钙含量;测定细胞和培养液的碱性磷酸酶活性和骨钙素含量. 结果"实验组细胞的Ⅰ型胶原mRNA和骨钙素mRNA均高度表达,对照组相对较低;实验组细胞的胶原和钙含量、细胞和培养液的碱性磷酸酶活性和骨钙素含量均显著地高于对照组(P＜0.05,P＜0.001). 结论"OGP能上调成骨细胞样细胞的Ⅰ型胶原mRNA和骨钙素mRNA表达,增加细胞的胶原合成、分泌和钙盐沉积,由此促进成骨.     

他汀类药物对成骨细胞功能的影响

目的验证不同浓度的辛伐他汀对人类成骨细胞(OB)功能表达和体外成骨能力的影响,研究雌激素促进成骨作用的机制及剂量效应关系.方法取成人的髂骨松质骨,采用胶原-胰蛋白酶消化法,获得松质骨中的成骨细胞,进行纯化和培养.在此基础上添加不同浓度的辛伐他汀(1×10-10,1×10-9,1×10-8,1×10-7,1×10-6,1×5-5mol/L)并进行培养.用生化法测定细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,用放射免疫法测定细胞培养液中骨钙素(OC)和细胞间质的钙含量.结果辛伐他汀对成骨细胞ALP活性和骨钙素分泌的影响均呈正相关,即各浓度辛伐他汀对ALP活性、骨钙素的分泌和成骨细胞的成骨能力均有刺激作用,并与辛伐他汀剂量呈正相关.结论辛伐他汀能增加成骨细胞的ALP活性和骨钙素的产生,提高成骨细胞的成骨能力.     

强骨口服液澄清工艺的比较研究

1 仪器与试药 仪器:Agilent 1100高效液相色谱议;HP化学工作站;色谱柱:Lichrospher C18 (4.6mm×25cm,5μm);高效冷冻离心机.     

祛痹口服液药效研究

目的　祛痹口服液能显著影响大鼠的胸腺、脾脏、肾上腺以及小鼠腹腔毛细血管的通透性 ,为此对抗炎消肿有一定的作用。方法　具有一定重量的大鼠、小鼠注射佐剂使其产生疼痛、肿胀、发炎、毛细血管通透性增加。结果　灌胃给予祛痹口服液后 ,可降低疼痛、消炎、消肿、降低毛细血管的通透性。结论　祛痹口服液具有一定的镇痛、消炎、降低毛细血管通透性的作用。     

抗感解毒口服液的治疗上呼吸道感染疗效观察

目的 通过随机、对照的临床试验考察抗感解毒口服液治疗外感风热感冒的疗效.方法 观察组和对照组分别使用抗感解毒口服液、双黄连口服液治疗5 d,根据疗效判定标准判定治疗是否有效,将各组患者的症状、体征、实验室检测结果 变化赋值评分,分析比较组间疗效差异.结果 抗感解毒口服液治疗风热感冒证的疗效总体与双黄连口服液相当.结论 ...     

强骨冲剂对去势大鼠骨密度及骨组织形态计量学参数的影响

本实验观察“强骨冲剂”对去势大鼠骨密度及骨组织形态计量学参数的影响。1　材料和方法1.1　药物强骨冲剂由北京中医药大学中药学院制剂室任天池教授提供 ,1ｇ含生药 10 .8ｇ ;骨疏康为辽宁东港制药厂生产 ,批号 960 90 6。1.2　动物及处理6月龄雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,体重 ( 2 75± 2 0 )ｇ ,购于中国医学科学院实验动物研究所 ;将其分为 4组 :去势组 (ＯＶＸ) ,切除双侧卵巢 ;假手术组 (ｓｈａｍ) ,打开腹腔 ,找出卵巢 ,但不切除 ,然后关闭腹腔缝合切口 ;强骨冲剂组 (Ｑ) ,去势 1周后给予强骨冲剂 0 .0 0 4Ｌ/(只·ｄ) ,含生药 12ｇ/ｋｇ…     

藿砂口服液对腹泻模型小鼠的止泻作用

目的观察藿砂口服液对模型小鼠的止泻作用。方法用生大黄浸液灌胃制作腹泻小鼠模型,用色素流动法,以炭末为指示剂,以首次排黑便时间、排便次数、粪便性状积分为指标,观察不同剂量藿砂口服液的止泻作用。结果藿砂口服液低、中、高剂量组都能推迟小鼠首次排便时间,减少排便次数,改善粪便性状,藿砂口服液剂量与排便次数呈负相关。结论藿砂口服液有止泻作用,其止泻作用强度与药物剂量有依赖关系。     

心得宁口服液对小鼠耳壳微循环的影响

目的:观察心得宁口服液对肾上腺素致小鼠微循环障碍模型细静脉、细动脉管径毛细血管开放数、微循环血流情况的影响。方法:取体质量18²1g小鼠50只,雌雄各半,随机分为5组。分别灌服大、中、小剂量心得宁口服液,芪苈强心胶囊混悬液,同体积生理盐水。用全自动图像分析仪观察各组小鼠耳廓细动脉(A)、细静脉(V)管径、血流速度及毛细血管开放数。结果:心得宁口服液组均可显著对抗肾上腺素所致小鼠耳壳细动脉、细静脉管径的收缩(P<0.01),可显著改善肾上腺素致小鼠耳壳微循环障碍模型微循环血流情况(P<0.01)。结论:心得宁口服液可显著改善小鼠微循环障碍模型耳壳微循环的作用。     

补肾强骨汤对家兔骨折愈合的影响

目的探讨中药验方＂补肾强骨汤＂对家兔骨折愈合的影响。方法将21只体重为2.0～2.5 kg的雄性兔全部造成左侧桡骨骨折模型后,随机分为三组：中药实验组、中药对照组和自然愈合组,每组7只,中药实验组给予口服＂补肾强骨汤＂,中药对照组给予口服三七片,自然愈合组不予任何治疗。主要观察指标：分别于造模后第2、4、6周行血清碱性磷酸酶（AKP）、血钙、血磷含量的检测及将各组实验兔摄正位X线片,采用盲法读片,将外骨痂和骨折线采用5分制标准进行半定量后评价骨折愈合过程中外骨痂和骨折线的情况。结果造模后血生化及X线中药对照组与自然愈合组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;中药实验组与其余两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。中药实验组与自然愈合组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）,中药实验组与中药对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 ＂补肾强骨汤＂具有促进骨折愈合的作用。     

益骨口服液对去势大鼠骨质疏松症痛阈及骨密度的影响

[目的]观察益骨口服液对去势大鼠骨质疏松症痛闽及骨密度的影响。[方法]将84只SD大鼠随机分益骨口服液组、密盖息组、益骨口服液及密盖息联合组、生理盐水对照组,每组各21只;造模成功后,分别予益骨口服液、密盖息、益骨口服液及密盖息、生理盐水等不同药物灌胃,于治疗后第lOd、第30d、第60d、第90d四个时点分别测量各组大鼠病阈、股骨骨密度。[结果]治疗第lOd、30d、60d、90d益骨口服液组、密盖息组、益骨口服液及密盖息联合组与对照组相比,去势大鼠痛阈明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗第lOd、30d,益骨口服液组、密盖息组、益骨口服液及密盖息联合组股骨骨密度与对照组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）,在治疗第60d、90d时,骨密度明显提高差异有统计学意义（P〈0.05）。[结论]益骨口服液能提高去势大鼠痛阈、骨密度,从而减轻骨质疏松大鼠疼痛。     

失交感神经支配与新骨形成及改建

目的探讨交感神经对拔牙窝骨愈合中新骨形成与改建过程的调节作用。方法SD大鼠50只,利用颈上神经节切除术建立单侧失交感神经支配大鼠模型,按术后5个时间点（1,3,7,14,21d）分为5组（n=10）,并通过H—E染色技术检测术后各时间点拔牙窝的新生骨量以及新骨组成。结果颈上神经节切除术可促进拔牙窝新骨形成,实验组新骨形成明显高于对照组;且颈上神经节切除术亦可促进新骨改建与成熟,实验组编织骨及板层骨在多个时间点大于对照组。结论交感神经在拔牙窝骨愈合期间具有重要的调节作用,失交感神经支配可以促进拔牙窝新骨的形成与骨改建。     

抗辐射口服液抗癌活性初探

应用体外细胞培养技术，观察了抗辐射口服液组方提取物对Ｋ５６２细胞系集落形成的影响。实验结果表明，抗辐射口服液提取物对Ｋ５６２细胞系有明显的抑制作用，其集落形成与药物浓度呈显著性负相关。初步证实了抗辐射口服液的抗癌效果。本文还对中药抗癌的可能机理进行了讨论。