载脂蛋白E外显子4基因多态性与Alzheimer‘s病

探讨了载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）外显子４基因多态性与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ‘ｓ病的关系。应用聚合酶链反应扩增ａｐｏＥ外显子４基因片段，对扩增片段用ＨｈａⅠ酶切消化后进行基因分型，并用ＤＮＡ测序技术对分型结果予以证实，Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ病组与年龄匹配对照组在ａｐｏＥ外显子４ε３／４基因型频率和ε４等位基因频率分布上的差异有显著性（ｘ＾２＝８．９１，Ｐ〈０．０５，Ｘ＾２＝９．４９，Ｐ〈０．０１），Ａｌｚｈ     

宁夏地区Graves′病与CTLA-4基因多态性相关性研究

目的探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CLTA-4)基因多态性与宁夏人群Graves′病(GD)的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析61例GD患者和60名对照者的CTLA-4基因第一外显子(49)A/G位点和启动子(318)C/T位点多态性。结果GD患者组与对照组之间CTLA-4基因SNP(49)A/G的基因型分布(χ2=9.277,P<0.05)及等位基因频率(χ2=10.831,P<0.05)差异有统计学意义;SNP(318)C/T的基因型分布(χ2=0.446,P>0.05)及等位基因频率(χ2=0.489,P>0.05)差异无统计学意义。结论CTLA-4基因第一外显子的(49)A/G位点的多态性与宁夏地区GD的发生可能相关。     

载脂蛋白E基因多态性与中青年脑梗死的相关性研究

目的:研究载脂蛋白E(apolipoprotein E,apoE)基因多态性与中青年脑梗死的相关性。方法:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RELP)技术检测110例中青年脑梗死患者和126例健康对照者的apoE基因型,并进行基因多态性分析。结果:中青年脑梗死组ε3等位基因频率及ε3/3基因型频率较对照组降低(P<0.05),而ε4等位基因频率及ε4/4基因型频率较对照组升高(P<0.05)。结论:apoE基因多态性与中青年脑梗死的发病存在相关性,ε3可能对中青年脑梗死发病具有抵御作用,而ε4可能在中青年脑梗死的发病中起促进作用。     

富GC apoE基因PCR扩增条件优化

目的建立一种简便、准确、高效率的富GC apoE基因的扩增方法.方法采用加入PCR增效剂和热启动方法扩增apoE增强子和外显子4两位点基因.结果改变不同增效剂及其浓度和PCR反应温度,可得到apoE内含子1增强子元件(IE1)和apoE外显子4两变异热点区特异性基因片段.结论富GC apoE基因可通过提高变性温度及加入二甲基亚砜或甲酰胺等增效剂得到相应特异片段.     

贵州地区汉族妇女p53PIN3和p21WAF1基因多态性与乳腺癌的相关性

目的探讨p53PIN3和p21WAF1基因多态性与贵州地区汉族妇女乳腺癌遗传易感性之间的关系。方法采用序列特异性引物,以PCR方法检测117例乳腺癌患者和123例对照个体外周血DNAp53基因第3内含子和p21WAF1基因第2外显子密码子31的基因多态性分布情况。结果乳腺癌组与对照组p53基因第3内含子16bp插入/缺失序列(PIN3)的A、A′等位基因频率分别为93.59%、6.41%及97.56%、2.44%,两组比较,差异有显著性(χ2=4.521,P=0.033);乳腺癌组及对照组AA、AA′、A′A′基因型频率分别为87.18%、12.82%、0和95.12%、4.88%、0,将AA′、A′A′基因型合并后与AA基因型比较,差异有显著性(χ2=4.738,P=0.030)。乳腺癌组与对照组间p21WAF1基因第2外显子密码子31的Arginine(Arg)、Serine(Ser)等位基因频率分别为54.27%、45.73%及50.00%、50.00%,两组比较,差异无显著性(χ2=0.878,P=0.349);携带Ser/Arg和Arg/Arg基因型的个体与携带Ser/Ser基因型的个体比较,乳腺癌患病风险无明显增加(OR,0.902;95%CI,0.471～1.728)。结论贵州地区汉族妇女乳腺癌遗传易感性与p53基因第3内含子多态性存在相关性;与p21WAF1基因第2外显子密码子31多态性无明显相关性。     

载脂蛋白E基因多态性与辛伐他汀调脂疗效及hs-CRP的关系

目的 研究载脂蛋白E(apoE)基因多态性与辛伐他汀调脂疗效及超敏C反应蛋白(hs-CRP)的关系.方法 采用等位基因特异性多重PCR技术,对178例高脂血症患者进行载脂蛋白E基因分型,分析基因型与血脂水平、辛伐他汀调脂疗效及hs-CRP的关系.结果 载脂蛋白E基因多态性可影响血脂水平,ε3/2组TC,LDL-C低于ε3/3组(t=2.119,P=0.046;t=3.318,P=0.003),ε4/3组TC,LDL-C高于ε3/3组(t=3.079,P=0.004;t=3.038,P=0.004);辛伐他汀治疗12周后(20 mg/d),ε3/2组血清LDL-C下降程度大于ε3/3组(t=2.124,P=0.046);辛伐他汀治疗前,携带等位基因ε4组个体hs-CRP水平低于不携带等位基因ε4组(t=2.083,P=0.043),但未发现ε4等位基因对辛伐他汀降低hs-CRP产生影响(t=0.997,P=0.324).结论 载脂蛋白E基因多态性与辛伐他汀调脂疗效相关.     

新疆哈萨克族居民载脂蛋白E基因多态性与血脂的关系

目的探讨新疆哈萨克族居民载脂蛋白E（apoE）基因多态性与血脂的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）对100例新疆石河子地区哈萨克族高脂血症患者和91例健康对照者进行apoE基因分型,并对其血脂水平进行检测。结果高脂血症患者总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）水平明显高于健康对照组（P〈0．01）。共检出5种基因型,两组各基因型、等住基因频率分布无差异（P〉0．05）,均以野生型E3／3基因型和￡3等位基因为主。ε2等位基因携带者的LDL—C水平在两组中与其他等位基因携带者相比均有统计学差异。结论apoE基因多态性对新疆石河子地区哈萨克族的血脂、载脂蛋白水平有影响,即ε2等位基因携带者的LDL—C、apoB水平较低,而84等位基因携带者的LDL—C、apoB水平较高。     

保定市中老年人群载脂蛋白E基因多态性与脑梗死遗传易感性关系的研究

目的检测并分析保定市中老年人群中载脂蛋白E（apoE）基因多态性,探讨apoE基因多态性与脑梗死遗传易感性的关系。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术,分析92例脑梗死患者和86例健康对照者apoE的3种等位基因ε2、ε3、ε4,做基因频率和基因型多态性分析。结果健康人群组apoE基因呈多态性,有6种基因型,即3种纯合子（ε2／2、ε3／3、ε4／4）和3种杂合子（ε2／3、ε3／4、ε2／4）。健康人群组apoE3种等位基因的基因频率分别为：ε25．8％、ε387．2％、ε47．0％;apoE基因型频率数为ε2／20、ε3／375．5％、ε4／41．2％、ε2／310．5％、ε2／42．3％、ε3／410．5％。脑梗死组apoE等位基因频率：ε24．3％、ε369．6％、ε426．1％;基因型频数：ε2／23％、ε3／342．3％、ε4／410．8％、ε2／311．9％、ε2／42％、ε3／430％。与健康人群组比较,脑梗死组ε3／3基因型频率较健康组明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）,ε4／4、ε3／4基因型频率较健康组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）,ε2／2、ε2／3、ε2／4基因型频率较健康组差异无统计学意义（P〉0．05）。与健康组比较,脑梗死组ε3等位基因频率明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）,ε4等位基因频率明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）,ε2等位基因频率较健康组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论保定市健康人群组apoEe3基因出现率最高,ε2和ε4频率较低,以ε3／3基因型最多,而ε2／2、ε4／4相对较少,脑梗死患者中ε3／3、ε2／3基因型频率较低,ε3对脑梗死可能具有保护作用。ε4等位基因频率在脑梗死患者中增高,ε4可能是脑梗死的易感因素和风险因素。     

早期复发性脑梗塞患者载脂蛋白E基因多态性分析

目的 探讨载脂蛋白E（apoE)基因多态性与早期脑梗塞复发的关系。方法 将年龄55－75岁之间脑梗塞患分为早期复发性脑梗塞与普通脑梗塞,和对照组三组分别以聚合酶链反应限制性片段长度分析法（PCR－RFLP）检测apoE基因型。结果 对照组apoE基因型以ε3／3最多,其次ε2／3,二组脑梗塞也以ε3／3最多,其次为ε3／4。二组病例ε3／4基因型、ε4等位基因频率均显高于对照组,尤以早期复发性脑梗塞组为突出,且其ε4等位基因频率明显高于普通脑梗塞组。结论 ApoEε4基因是脑梗塞的危险因素,并与脑梗塞早期复发有关。     

等位基因特异性重聚合酶链反应技术对载脂蛋白E基因多态性检测的评价

载脂蛋白E（apolipoproteinE、apoE）是血浆主要载脂蛋白之一，具有明显的遗传多态性，3种常见的等位基因（ε2、ε3、ε4）分别编码3种主要异构体（E2、E3、E4），产生6种不同的基因型（ε2/ε2、ε2/ε3、ε2/ε4、ε3/ε3、ε3/ε4、ε4/ε4）。apoE基因多态性不仅是心血管疾病的一种重要易患因素，而且与Alzheimer病密切相关。目前国内外检测apoE基因多态性     

睡眠呼吸暂停综合征与载脂蛋白E基因多肽性

目的通过对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome ,OSAHS)患者载脂蛋白E(apolipoprotein E,apoE)基因型检测及分析,探讨OSAHS与载脂蛋白E基因多肽性的相关性。方法我院干部医疗科及耳鼻喉科病房住院OSAHS患者50例,正常对照者40例;采用等位基因特异性多重PCR技术检测受试者apoE基因型,同时测定其甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇( HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A(apoA)、载脂蛋白B (apoB)、载脂蛋白E(apoE)的浓度,并计算TC/ HDL-C比值。结果 OSAHS组的E3/4基因型及ε4等位基因频率、TG、TC、TC/ HDL-C、apoB、apoE明显高于对照组(P值分别为0 .011、0 .024、0 .000、0 .020、0 .005、0 .014、0 .008) ;apoEε4阳性组AHI≥5次/h的百分比、AHI水平及TG、TC、LDL浓度明显高于apoEε4阴性组(P值分别为0 .000、0 .000、0 .011、0 .019、0 .042)。结论 apoEε4与OSAHS间存在一定相关性,是OSAHS的遗传易患因子之一;apoEε4携带者的早期诊断,并进行相应的预防及干预,对OSAHS的治疗及评估预后可能有重要的临床应用价值。     

应用实时荧光PCR分析apoE3、4等位基因

目的 建立实时荧光PCR进行apoE单核苷酸多态性(SNP)分析法,快速检测人栽脂蛋白E(apoE)等位基因.方法 以人apoE基因中的Cys112Arg为研究对象,用荧光染料SYBR Green Ⅰ标记PCR产物,通过熔解曲线分析结果,并进行SNP分型.用高保真DNA聚合酶提高SNP测定的特异性;通过DNA测序验证荧光定量PCR对apoE基因Cys112Arg分型结果的准确性.结果 每个样品设立2个检测管,利用下游引物P2和SNP检测引物P33、P44进行定量PCR反应,30份样品各自获得2种等位基因扩增产物的熔解曲线,通过熔解曲线的Tm值判读,在30份样本中,apoE基因型3/3、3/4分别有27例和3例,与PCR-RFLP及DNA测序结果一致.结论 建立的apoE等位基因分型法操作简便,结果准确,适合人外周血apoE等位基因的定性检测.     

载脂蛋白E基因多态性与老年人心血管疾病发病的相关性分析

目的探讨载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与老年人心血管疾病之间的关系。方法应用聚合酶链式反应———限制性片段长度多态(PCR-RFLP)的方法对351例老年心血管病患者及103例健康老人的载脂蛋白E基因进行分型,分析各等位基因,基因型与疾病的关联性。结果(1)ApoE基因各等位基因频率分布在对照组和疾病组间均存在显著性差异,表现为ε2、ε4基因频率在疾病组中增高,ε3基因频率在疾病组中降低(Z在3.3665～6.6796之间,P<0.05)。(2)经关联性分析,ε2、ε4等位基因与疾病成正相关(OR,2.7332～5.7617,P均<0.05),ε3等位基因与疾病成负相关(OR,0.1331～0.2055,P均<0.05)。结论ApoE基因的ε2、ε4等位可能构成了老年人心血管疾病的易患因素,而ε3等位基因则对此起保护作用。     

广东粤北地区瑶族载脂蛋白E基因多态性与血脂代谢的关系

目的检测广东粤北地区瑶族人群载脂蛋白E（apoE）基因多态性并探讨其与血脂代谢的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP）对750例23～80岁广东粤北地区瑶族人群进行apoE基因多态性检测,分析瑶族人群apoE基因频率分布特点,并比较分析不同apoE基因型与血脂水平的关系。结果共检测瑶族apoE6种基因型,以E3／3型最常见,占61．47％,其次E3／4型,占23．07％,E2／3、E2／4、E4／4、E2／24种基因型分别占11．87％、1．73％、1．07％、0.8％;apoE有3种等位基因,以ε3分布频率最高,为81．4％,其次是ε4,分布的频率为9．6％,ε2分布频率最低,为9．0％;男性和女性apoE基因型分布无差异;ε4等位基因携带者的TG、TC、LDL、apoB水平显著高于E2携带者和ε3携带者（P〈0．05）。结论apoE基因多态性影响广东粤北地区瑶族人群的血脂代谢,apoEε4等位基因携带者的TG、TC、TC、LDL、apoB水平较高,推测ε4等位基因可能是瑶族人群患高脂血症的危险因素之一。     

帕金森病患者载脂蛋白E基因多态性与痴呆相关性的分析

目的了解帕金森病痴呆(PDD)与载脂蛋白E(apoE)基因多态性的关系,探讨PDD的发病机制。方法应用PCR－RFLP技术检测11例PDD患者,40例帕金森病(PD)非痴呆患者和52例无关对照的apoE基因型。结果PDD组、PD非痴呆组和对照组在apoE等位基因频率及基因型分布上均无显著差异(P>0.05)。结论PDD的发病与apoE基因多态性无关,其发病的生物遗传学基础有别于Alzheimer病(AD)。     

银染单链构象多态性检测冠心病载脂蛋白E基因型

目的 ①建立一种简便、准确、实用的人栽脂蛋白E(apoE)基因型的检测方法；②研究冠心病(CHD)患者栽脂蛋白E基因多态性。方法 应用聚合酶链反应(PCR)特异性扩增apoE基因含编码112位和158位氨基酸的基因序列，用SS—SSCP技术进行apoE基因型分析。结果 运用SS—SSCP法检测了47名冠心痛患者apoE基因型，发现ε4／2、ε3／2、ε3／3、ε4／3、ε4／4基因频率分别为4．26％，14．89％，63．83％，12．76％，4．26％，并且发现ε2、ε3、ε4等位基因频率分别是9．57％，77．66％，12．77％。结论 ①该方法简单、快速、准确，对人体无害，适合于一般实验室开展；②ε4等位基因是CHD的易患因子之一，而ε3等位基因则具有保护作用。     

载脂蛋白E多态性研究的方法学进展

人载脂蛋白E（apoE）具有明显的遗传多态性，三种常见的等位基因（ε2、ε3、ε4）分别编码三种主要异构体（E2、E3、E4）。apoE多态性不仅是心血管疾病的一种重要易患因素，而且与Alzheimer病及老化密切相关。目前国内外检测apoE多态性的方法主要有两类：一类以极低密度脂蛋白（VLDL）或血清为样品检测apoE蛋白表型；另一类以DNA为样品检测apoE基因型。本文仅对apoE基因结构与多态性、apoE多态性检测方法及方法学评价作一综述，以期为apoE多态性的临床应用研究提供准确实用的方法学保证。     

载脂蛋白E基因型与冠心病和2型糖尿病的易感性研究

目的 探讨载脂蛋白E基因型与冠心病(CHD)和2型糖尿病(T2DM)的易感性.方法 应用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法、多重特异性扩增突变系统(multi-ARMS)快速分型法和PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)法,对238例CHD、316例T2DM、1 892名健康对照的apoE基因第4外显子112位Cys/Arg和158位Arg/Cys进行检测;随机抽取前2种方法分型标本进行DNA测序法验证,并对所有异常带型标本进行DNA测序,确认是否存在基因变异;同时测定空腹血糖和血浆脂质水平.结果 CHD组血浆HDL-C(t=2.66)和apoA I(t=2.30)水平显著低于健康对照组(P＜0.05),收缩压(t=8.48)、舒张压(t=5.66)、TG(t=3.38)、LDL-C(t=2.48)、apoB(t=1.67)、Lp(a)(t=4.16)和FBG(t=7.04)水平均显著高于健康对照组(P＜0.05),TC水平在两组间差异无统计学意义(t=0.94,P＞0.05);T2DM组收缩压(t=5.74)、舒张压(t=3.35)、血浆TG(t=4.56)、TC(t=5.22)、LDL-C(t:7.00)、apoB(t=2.24)、Lp(a)(t=4.15)和FBG(t=16.93)水平亦均显著高于健康对照组(P＜0.05),HDL-C(t=0.74)和apoA I(t=0.41)水平在两组问差异无统计学意义(P＞0.05).ε2/2、ε2/3、ε3/3、ε4/2、ε4/3、ε4/4基因型在3组中的频率分布为:0.4%,13.4%,58.0%,1.3%,26.5%,0.4%(CHD组);0.6%,5.7%,72.8%,1.9%,14.9%,4.1%(T2DM);0.5%,10.5%,69.6%,1.6%,16.8%,1.1%(健康对照组).CHD组和T2DM组基因型频率分布与健康对照组差异均有统计学意义(χ2:14.90,P=0.00;χ2=7.08,P=0.03),CHD组ε3/4基因型频率明显高于健康对照组(26.5%对16.8%),而ε3/3基因型频率显著低于健康对照组(58.0%对69.6%);T2DM组ε4/4基因型频率明显高于健康对照组(4.1%对1.1%),并首次在国内报道T2DM患者apoE基因第4外显子Arg 150 His突变2例,而在CHD组和健康对照组均未检出.结论 apoE ε3/4基因型频率与CHD有一定的关联;apoE ε4/4基因型频率与T2DM存在一定的关联;血压和部分血脂等指标可作为诊断CHD和T2DM参考指标.     

胱抑素C基因多态性、载脂蛋白E基因多态性与冠心病的相关性探讨

目的 探讨胱抑素C(cys C)基因多态性+148 G/A、载脂蛋白E(apoE) 因多态性与冠心痛的关系.方法 采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分别检测75例冠心病患者以及40例正常对照组cys C+148 G/A基因型及等位基因频率;等位基因特异性多重聚合酶链反应(PCR-multi-ARMS)检测apoE基因型及等位基因频率,同时结合血脂水平的测定,来探讨它们之间的关系.结果 ①冠心病组apoE4/3基因型及e4等位基因频率明显高于对照组(P<0.05);②E4/3基因型的冠心病患者TC水平明显高于E3/3基因型的冠心病患者(P<0.05); ③cysC+148 G/A基因多态性在冠心病患者反正常对照组的分布差异无统计学意义(P>0.05).结论 裁脂蛋白E,E4/3基因型及e4等位基因频率与冠心病密切相关;cys C+148 G/A基因型及等位基因频率与冠心病无关.     

载脂蛋白E等位基因频率与脑卒中相关性研究

目的探讨脑卒中与载脂蛋白E(ApoE)基因多态性的相关性.方法用聚合酶链反应-限制片段长度多态性(PCR-RFLP)方法测定673例脑卒中患者及88例正常人的ApoE基因型.结果男性脑卒中组及男性对照组ApoE等位基因ε4,ε3,ε2分别为0.2946,0.5935,0.1381和0.1809,0.7234,0.0957.两者比较ε4和ε3差异有极显著性(P<0.01).女性脑卒中组之间及女性对照组之间ApoE等位基因ε4,ε3,ε2分别为0.2981,0.5649,0.1370和0.1707,0.7195,0.1098.两者比较ε4和ε3差异有显著性(P<0.05).男女脑卒中及男女对照组相比,差异无显著性.结论在男性和女性脑卒中组ApoE ε4等位基因频率明显高于其对照组,ApoE ε4等位基因可能是脑卒中的一个遗传易感基因.