良性前列腺增生组织中细胞凋亡和Bcl—2,Bax基因的表达

目的：探讨细胞凋亡和凋亡相关基因Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ在正常前列腺和前列腺增生症中的表达情况,明确细胞凋亡和Ｂｃｌ－２,Ｂａｘ在ＢＰＨ形成中的作用。方法：采用ＤＮＡ原位末端标记法和免疫组织化学ＳＡＢＣ法分别测定正常和增生的前列腺组织中细胞凋亡和凋亡相关基因Ｂｃｌ－２,Ｂａｘ的表达情况。     

喉癌Bcl—2和Bax基因表达与放疗敏感性的研究

目的：探讨喉癌Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ基因表达与放疗敏感性的关系。方法：采用免疫组化ＳＰ法测定３３例喉癌组织标本中Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ基因表达。结果：３３例喉癌放疗患者中，术后生存３年，５年和１０年患者喉癌组织中Ｂｃｌ－２阳性检出率分别为８４％、６８．７５％、３７．５％、差异有显著性，Ｐ〈０．０５；Ｂａｘ的阳性检出率分别为６８％，９２．７％、１００％，差异有显著性，Ｐ〈０．０５Ｂａｘ与Ｂｃｌ－２表达呈相关     

白血病程序性细胞凋亡的调控

众多研究揭示白血病细胞克隆的过度增殖与白血病细胞程序性凋亡的异常调节有关。本文从白血病细胞分化与凋亡；白血病相关性特异癌基因与凋亡的角度，综述了白血病状态下细胞凋亡调节的研究进展；并对凋亡调节基因Ｂｃｌ－２，Ｂｃｌ－ｘ及Ｂａｘ在白血病细胞凋亡过程中的表达及演变；ｂｃｒ－ａｂｌ，ＰＭＬ／ＲＡＲａ融合基因对凋亡的抑制作用及机制进行了文献复习。     

抗bcl—2核酶在HL—60细胞中的表达及促进其凋亡的研究

为消除白血病细胞中ｂｃｌ－２基因对细胞凋亡的抑制作用开辟白血病基因治疗的途径。将合成的针对ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的“锤头型”核酶基因定向克隆于真核表达本ＰＤＯＲ－ｎｅｏ，构ｐＤＯＲ－ＲＺ重组体。通过脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导的ＤＮＡ转染法，把ｐＤＯＲ－ＲＺ导入ＨＬ－细胞。     

As2O3对K562细胞BCR/ABL蛋白酪氨酸磷酸化的影响

目的　进一步阐明Ａｓ２Ｏ３ 诱导Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长的可能机制,为Ａｓ２Ｏ３ 在临床上的应用提供理论依据。方法　采用免疫沉淀、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、生物化学及免疫荧光等方法研究了Ａｓ２Ｏ３对ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化及其所介导的信号途径和某些凋亡相关蛋白表达的影响。结果　１μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 使细胞内多种蛋白酪氨酸磷酸化减少,而且ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白自身酪氨酸磷酸化亦减少,但０ ．１ μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸化的影响不明显;Ａｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸酶（ＰＴＰ） 活性未见明显影响;Ａｓ２Ｏ３ 下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达,但对ＳＴＡＴ１ 和ＳＴＡＴ２ 蛋白的表达以及ＳＴＡＴ１ 蛋白酪氨酸磷酸化无影响;Ａｓ２Ｏ３ 亦不影响凋亡相关蛋白Ｂｃｌ２、ＢｃｌｘＬ／Ｓ、Ｂａｘ、ＩＣＨ１Ｌ、ｐ５３、ＰＡＲＰ的表达,Ａｓ２Ｏ３ 亦使Ｋ５６２ 细胞的ＰＭＬ蛋白降解。结论　Ａｓ２Ｏ３ 可能通过减少细胞内某些蛋白,尤其是ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化和（ 或）下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达而干扰ＢＣＲ／ＡＢＬ致癌信号的传导,引起Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长。     

9—顺式维甲酸诱导HL—60细胞凋亡

目的：检测９－顺式维甲酸（９－ｃｉｓＲＡ）诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的能力，并探讨其分子机制。方法：应用形态学观察、ＤＮＡ电泳、流式细胞仪分析检测细胞凋亡，应用流式细胞仪检测ＨＬ－６０细胞ｂｃｌ－２含量。结果：９－ｃｉｓＲＡ可以诱导ＨＬ－６０细胞在分化后发生典型的凋亡。在ＨＬ－６０细胞分化和凋亡的过程中ｂｃｌ－２含量逐渐下降。９－ｃｉｓＲＡ诱导ＨＬ－６０细胞凋亡能力和降低ｂｃｌ－２表达的能力均显著强于全反式维甲酸（Ａ－ＴＲＡ）。结论：９－ｃｉｓＲＡ具有诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的作用。ｂｃｌ－２表达水平的降低可能是经诱导分化成熟的白血病细胞走向凋亡的重要条件。     

凋亡相关基因Bcl-2和C-myc在阴茎癌组织中的表达

目的 探讨Ｂｃｌ－２和Ｃ－ｍｙｃ在阴茎癌组织中的表达及其意义。方法 应用免疫组化法（ＳＡＢＣ）对４９例阴茎癌组织和９例正常阴茎组织标本进行ｂｃｌ－２和ｃ－ｍｙｃ蛋白产物检测。结果 ４９例阴茎癌标本中２６例ｂｃｌ－２检测阳性（５３．１％）,２５例ｃ－ｍｙｃ检测阳性（５１％）,９例正常阴茎２例ｂｃｌ－２检测阳性（２２．２％）,Ｃ－ｍｙｃ未见阳性染色。Ｂｃｌ－２阳性率在高、中、低分化肿瘤中分别为８３．３     

抗凋亡基因Bcl—2在肺癌组织中的表达及意义

目的：探讨抗凋亡基因Ｂｃｌ－２与肺癌发生、发展的关系。方法：应用免疫组化ＳＡＢＣ法检测Ｂｃｌ－２蛋白在７５例肺癌组织中的表达情况，并与癌旁组织和正常肺组织进行对比，结合肺癌的病理特征及预后进行分析。结果：正常肺组织、癌旁组织和肺癌组织中Ｂｃｌ－２蛋白的阳性表达率分别为８．３％、８３．３％和４８．０％；Ｂｃｌ－２蛋白表达与肺癌组织学类型和分化程度无关（Ｐ〉０．０５），而与肺癌临床分期呈负相关（Ｐ〈０     

连接蛋白CRKL在正常血细胞和表达BCR／ABL细胞中的研究进展

ＣＲＫＬ是由２２号染色体ｑ１１的ｃｒｋｌ基因编码的含ＳＨ２、ＳＨ３结构域的３９ｋＤａ的连接蛋白。ＣＲＫＬ羧基端ＳＨ３结构域与Ｃ３Ｇ、ＳＯＳ、Ｐ１３－Ｋ、ＨＰＫｌ、ｃ－ＡＢＬ或ＢＣＲ／ＡＢＬ结合,ＣＲＫＬ氨基端ＳＨ２结构域与酷氨酸磷酸化的蛋白如ＣＢＬ、ＨＥＦ１、ＣＡＳ、ＳＴＡＴ５或ｐａｘｉｌｌｉｎ结合,在正常造血细胞和白血病中ＢＣＲ／ＡＢＬ的主要底物,与ＢＣＲ／ＡＢＬ和ｃ－ＡＢＬ形成连接复活复合物。     

bcl—x和bcl—2基因在急性白血病患者的表达及其临床意义

观察凋亡调控基因ｂｃｌ－ｘ和ｂｃｌ－２在急性白血病患中的表达,探索ＡＬ的病理和化疗反应的分子机制。方法应用半定量逆转录－聚合酶链反应技术检测ｂｃｌ－ｘ和ｂｃｌ－２在３４例ＡＬ患中ｍＲＮＡ水平的表达。结果抑凋亡基因ｂｃｌ－ｘＬ和ｂｃｌ－２在ＡＬ细胞中的表达比在完全缓解和正常对照组骨髓细胞中的表达明显增高（Ｐ〈０．０１）,同时在复发患ＡＬ细胞中的表达水平分别是初治患的１．８倍和１．９倍（Ｐ〈０     

抗bcl－2核酶在HL－60细胞中的表达及促进其凋亡的研究

为消除白血病细胞中ｂｃｌ－２基因对细胞凋亡的抑制作用，开辟白血病基因治疗的途径。将合成的针对ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的“锤头型”核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ，ＲＺ）基因定向克隆于真核表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ，构成ｐＤＯＲ－ＲＺ重组体。通过脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导的ＤＮＡ转染法，把ｐＤＯＲ－ＲＺ导入ＨＬ－６０细胞。用Ｓｏｕｔｈ－ｅｒｎ印迹，ＲＮＡ斑点杂交法观察ＲＺ基因在ＨＬ－６０细胞内表达，并通过电镜、流式细胞仪（ＦＣＭ），光镜和ＤＮＡ电泳观察ＲＺ对ＨＬ－６０细胞的影响。结果：①ＲＺ在转染ＨＬ－６０后７２小时得以表达，细胞内ｂｃｌ－２蛋白合成受到抑制。②在ＦＣＭ图谱上可见到明显的凋亡峰，形态观察ＲＺ处理的ＨＬ－６０细胞呈典型的凋亡形态。③足叶乙甙（促凋亡）敏感性试验表明，与未转染的细胞和转染空载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ的细胞相比，转染ｐＤＯＲ－ＲＺ的细胞ＤＮＡ电泳易出现梯状条带。结果说明ＲＺ基因通过逆转录病毒表达载体导入ＨＬ－６０细胞后可成功地表达并抑制ＨＬ－６０细胞ｂｃｌ－２蛋白的合成，并促进ＨＬ－６０细胞凋亡     

细胞凋亡相关基因与白血病

细胞凋亡是当前生命科学研究的热点之一，凋亡相关基因ｂｃｌ－２，Ｐ５３，ｃ－ｍｙｃ，ＩＣＥ家族，ＡＰＯ＝－１／Ｆａｓ，ｂｃｒ－ａｂｌ，ＰＭＬ－ＲＡＲα等涉及白血病发病机制，治疗和耐药，通过调控凋亡相关基因促进白血病细胞凋亡，可能是治疗白血病的新途径。     

前列腺中凋亡抑制基因Bcl-2的表达研究

目的　了解前列腺组织中　Ｂｃｌ－２蛋白的表达。方法　采用免疫组化技术，检测　　１１例胎儿、２７例成人和　　６０例增生前列腺中Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果　胎儿前列腺Ｂｃｌ－２蛋白表达于全部胚芽上皮细胞；成人前列腺Ｂｃｌ－２蛋白表达主要定位于腺上皮基底细胞，分泌细胞偶见阳性表达；增生前列腺Ｂｃｌ－２阳性表达主要定位于腺上皮基底细胞，分泌细胞亦见不同程度阳性表达；增生前列腺基底细胞、分必细胞Ｂｃｌ－２阳性表达均高于正常前列腺，差异有显著性；正常前列腺与增生前列腺上皮基底细胞Ｂｃｌ－２阳性表达均高于分泌上皮细胞，差异有显著性。结论　基底细胞层可能为成人前列腺的干细胞层，参与前列腺细胞的生长与增殖；Ｂｃｌ－２基因蛋白可能在调节前列腺上皮的凋亡中具有重要作用；Ｂｃｌ－２基因蛋白在前列腺基底细胞增生中起主要作用，而在分泌细胞中不占主要地位。     

胃癌Bcl-2、P53蛋白表达与细胞凋亡的关系研究

目的：了解胃癌细胞凋亡与凋亡调控基因Ｂｃｌ－２、Ｐ５３蛋白表达的关系,并探讨胃癌细胞凋亡与组织学分型的关系。方法：采用原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测细胞凋亡,采用ＡＢＣ免疫组化法检测Ｂｃｌ－２和Ｐ５３蛋白的表达。结果：从高分化、中分化到低－未分化腺癌的细胞凋亡指数逐步下降,而Ｂｃｌ－２和Ｐ５３蛋白表达无显著差异。在Ｌａｕｒｅｎ分型,肠型胃癌与弥漫型胃癌比较,细胞凋亡指数高、Ｂｃｌ－２蛋白低表达及     

白血病细胞Bcl—2和P53基因蛋白表达与化疗的关系

为研究人白血病细胞Ｂｃｌ－２和Ｐ５３基因蛋折表达以及它们的表达与化疗的关系,用ＡＢＣ免疫组织化学方法检测白血病细胞Ｂｃｌ－２和Ｐ５３蛋白。结果表明,５２例患白血病细胞Ｂｃｌ－２和Ｐ５３蛋白表达阳性率分别为６７％和４１％,其中急性淋巴细胞白血病细胞Ｐ５３蛋白表达较急性非淋巴细胞白血病低（Ｐ〈０．０５）,Ｂｃｌ－２蛋白表达在二间无差异（Ｐ〉０．０５）;慢性粒细胞白血病随着向急性期转化Ｂｃｌ－２和Ｐ     

实验性大鼠急性心肌梗死心肌细胞中Bcl2与Cmyc的表达

目的：探讨实验性大鼠性心肌梗死中心肌细胞凋亡与Ｂｃｌ－２,Ｃ－ｍｙｃ表达的关系。方法：利用末端标记技术（ＴＵＮＥＬ）标记凋亡的心肌细胞,免疫组织化学法研究Ｂｃｌ－２与Ｃ－ｍｙｃ的表达。结果：ＴＵＮＥＬ法发现：大鼠急性心肌梗死模型中存在心肌细胞凋亡。冠状动脉结扎１小时后出现Ｂｃｌ－２蛋白阳性表达,３小时后逐渐下降,结扎６小时后出现Ｃ－ｍｙｃ阳性表达,２４小时内呈现上升趋势。相关分析表明：心肌细胞凋亡数与Ｂｃｌ－２表达呈负相关,与Ｃ－ｍｙｃ表达呈正相关。结论：急性心肌梗死时心肌细胞的凋亡与Ｂｃｌ－２、Ｃ－ｍｙｃ表达有密切关系,为进一步探讨急性心肌梗死的发病机制提供了一条新思路。     

慢性缺氧对胸腺细胞凋亡的影响及Bcl—2基因的调控作用

目的：为了观察慢性缺氧对胸腺细胞凋亡的影响和Ｂｃｌ－２基因的调控作用。方法：本研究检测了大鼠腺细胞的增殖能力（ＭＴＴ比色法）、ＤＮＡ降解（琼脂糖凝胶电泳）、原位细胞凋亡（ＴＵＮＥＬ染色）、Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达（点杂交）。结果：缺氧１周、２周、３周后大鼠胸腺细胞ＤＮＡ琼脂凝胶电泳都再现典型的“梯状”条带,ＴＵＮＥＬ染色阳性细胞明显增多,细胞增殖能力的明显降低,Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达量显著或极显     

骨良恶性肿瘤Bcl-2和p53蛋白表达及意义

【目的】探讨Ｂｃｌ－２、ｐ５３在良恶性骨肿瘤组织中的蛋白表达情况及其生物学意义。【方法】应用ＡＢＣ免疫组化方法对３３例恶性骨肿瘤,包括１９例骨肉瘤,１４例软骨肉瘤和２２例良性骨肿瘤（骨软骨瘤）组织中Ｂｃｌ－２,ｐ５３的蛋白表达进行研究。【结果】恶性骨肿瘤组织中Ｂｃｌ－２,ｐ５３蛋白的阳性表达率分别为５１．５％和５４．５％,其中骨肉瘤组织为６３．２％和４７．４％,软骨肉瘤组织为３５．７％和６４．３％;良性骨肿瘤组织阳性表达率为１８．２％和２２．７％。恶性骨肿瘤组织Ｂｃｌ－２,ｐ５３蛋白阳性表达率明显高于良性骨肿瘤（Ｐ＜０．０５）,骨肉瘤组织Ｂｃｌ－２蛋白阳性表达率明显高于骨软骨瘤（Ｐ＜０．０１）,软骨肉瘤组织ｐ５３蛋白阳性率明显高于骨软骨瘤（Ｐ＜００５）。ＡＫＰ值增高组的恶性骨肿瘤组织ｐ５３蛋白阳性表达率（７５％）明显高于ＡＫＰ值正常值组（２０％,Ｐ＜０．０５）。【结论】Ｂｃｌ－２癌基因介导的凋亡紊乱和ｐ５３肿瘤抑制基因突变失活与恶性肿瘤的发生有关,Ｂｃｌ－２蛋白表达活性可能与骨肿瘤的恶性程度有关,ｐ５３肿瘤抑制基因突变失活是恶性肿瘤细胞成骨活性增强的因素之一。标记羊抗鼠ＩｇＧ和ＡＢＣ试剂,购自Ｓｉｇｍａ公     

HLA-DRB1基因分型在移植配型及亲子鉴定中的应用

应用聚合酶链反应－序列持异性引物（ＰＣＲ＿ＳＳＰ）方法对南京地区汉族人群ＨＬＡ－ＤＲＢ１位点基因特异性及骨髓移植配型、亲子鉴定等进行了分析。ＤＲＢ１基因频率范围在０．００３３～０．１８３３之间，以ＤＲ９１ＤＲ４占多数；骨髓移植通过配型移植成功３例，２例存活情况良好；ＤＲＢ１位点排除亲子关系５例，其中２例为ＨＬＡ－ＤＲＢ１单独排除亲缘关系。本法具有操作简单、快速、结果可靠的特点，不仅适用于移植配型、     

急性呼吸窘迫综合征患者肺组织Fas/FasL系统表达的变化及其意义

目的：探讨细胞凋亡在急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）发病中的作用及基因调控机制,为进一步阐明ＡＲＤＳ的发病机制和在细胞凋亡水平防治本病提供理论依据。方法：ＡＲＤＳ组９例,对照组５例,采用ＴＵＮＥＬ法以及免疫组化技术观察ＡＲＤＳ患者肺组织Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达及细胞凋亡的变化。结果：ＡＲＤＳ早期患者肺组织细胞凋亡率较对照组明显增加,且主要表现为肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加;Ｆａｓ抗原、ＦａｓＬ在ＡＲＤＳ早期患者肺组织表达明显上调,并且Ｆａｓ、ＦａｓＬ表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系。结论：肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加和Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统活化可能参与临床ＡＲＤＳ早期的发病。