ENHANCED ANTITUMOR EFFECTS OF INTERLEUKIN-2 LIPOSOMES IN C57BL/6N MICE WITH B-16 MELANOMA PULMONARY METASTASES

为研究白细胞介素－２（ＩＬ－２）脂质体对小鼠Ｂ－１６黑色素瘤肺转移瘤的抑制效应和对荷瘤鼠脾淋巴细胞增殖的影响，应用改良超声－薄膜法制备ＩＬ－２脂质体；正常及免疫受抑Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ小鼠建立Ｂ－１６黑色素瘤肺转移瘤模型，腹腔注射游离ＩＬ－２（０．２×１０４～５×１０４ｕｋｇ－１ｄ－１×１０ｄ）或脂质体包封的ＩＬ－２（０．０４×１０４～１．０×１０４ｕｋｇ－１ｄ－１×１０ｄ）。结果表明：改良超声－薄膜法制备的ＩＬ－２脂质体为直径２００～２５００ｎｍ的大单层脂质体，包封率４８．２％，具有良好的稳定性。ＩＬ－２脂质体可使荷瘤鼠肺湿重下降０．４％～１３．１％，肺转移瘤结节降低２．７％～４３．５％，脾细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加１．０５～１．９０倍，其作用效应相当于５倍量的游离ＩＬ－２，且对免疫受抑荷瘤鼠的作用更强。提示ＩＬ－２经脂质体包封后，其抑瘤活性和促进淋巴细胞增殖的活性提高约５倍，是一种有希望应用于肿瘤生物治疗的新型制剂。     

中枢IL-2对脾脏免疫机能的调节

研究了大鼠第三脑室注射白细胞介素２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ２，ＩＬ－２）对脾淋巴细胞增殖功能的影响。结果显示，第三脑室注射ＩＬ－２可引起脾淋巴细胞对植物血凝素刺激引起的增殖作用的增强，同时还引起脾交感神经活动的抑制。ＩＬ－２的这些作用均可被阿片受体阻断剂纳洛酮阻断。实验还发现，电刺激脾神经可以引起脾淋巴细胞增殖功能的抑制。根据结果可以认为脑室注射ＩＬ－２可以通过阿片受体介导的途径抑制交感神经的活动，进而通过脾交感神经影响脾淋巴细胞增殖     

L7212白血病小鼠IL—2活性,IL—2 mRNA表达及复方中药清毒饮对？…

目的：探讨Ｌ７２１２白血病小鼠及其受体鼠－近交系６１５小鼠ＩＬ－２ ｍＲＮＡ的表达及复方中药清毒饮对其影响。方法：采用ＩＬ－２依赖株ＣＴＬＬ－２及细胞原位杂交的方法检测了由ＣｏｎＡ诱导的脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性及脾细胞ＩＬ－２ ｍＲＮＡ表达。结果：发现由ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２的白血上鼠脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性明显低于６１５小鼠,Ｐ〈０．０５;其脾细胞中ＩＬ－２ ｍＲＮＡ表达也明显低于６１     

L7212白血病小鼠IL-2活性、IL-2 mRNA表达及复方中药清毒饮对其影响的研究

目的：探讨Ｌ７２１２白血病小鼠及其受体鼠──近交系６１５小鼠ＩＬ－２活性和ＩＬ－２ｍＲＮＡ的表达及复方中药清毒饮对其影响。方法：采用ＩＬ－２依赖株ＣＴＬＬ－２及细胞原位杂交的方法检测了由ＣｏｎＡ诱导的脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性及脾细胞ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达。结果：发现由ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２的白血病小鼠脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性明显低于６１５小鼠,Ｐ＜０．０５;其脾细胞中ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达也明显低于６１５小鼠,Ｐ＜０．０１。清毒饮显著提高ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２白血病小鼠脾细胞培养上清中的ＩＬ－２活性,Ｐ＜０．００１,并能显著提高其ｍＲＮＡ表达水平,Ｐ＜０．００１。结论：清毒饮可以作为生物反应调节剂用于白血病的临床治疗。     

T-AK细胞和IL-2脂质体联合硒酸酯多糖抗白血病效应的研究

目的研究抗ＣＤ３单克隆抗体与ＩＬ－２共同诱导的Ｔ－ＡＫ细胞和ＩＬ－２脂质体（Ｌ－ＩＬ－２）联合硒酸酯多糖（ＫＳＣ）对Ｌ１２１０小鼠白血病的治疗作用。方法用ＤＢＡ／２小鼠建立Ｌ１２１０白血病模型，正常小鼠脾细胞诱生制备Ｔ－ＡＫ细胞，按设计方案转输Ｔ－ＡＫ细胞和ＩＬ－２脂质体，ＫＳＣ灌胃，检测ＮＫ细胞活性、脾淋巴细胞增殖活性和ＩＬ－２诱生水平，观察荷瘤小鼠生存期。结果Ｌ１２１０白血病小鼠的免疫功能急剧降低，生存期为１６．４３±１．９２天；转输Ｔ－ＡＫ细胞（５×１０６）和Ｌ－ＩＬ－２（１０４Ｕ／ｋｇ）能部分逆转白血病小鼠低下的细胞免疫功能，生存期延长（２４．７８±３．９４天），并有１４．３％小鼠长期存活；ＫＳＣ（４０ｍｇ／ｋｇ）对Ｔ－ＡＫ／Ｌ－ＩＬ－２的抗白血病作用有明显的增强效应，荷瘤小鼠细胞免疫功能进一步增强，生命延长率、长期存活率分别提高３６％和９９．９％。结论硒酸酯多糖具有生物反应调节剂（ＢＲＭ）样作用；以应用Ｔ－ＡＫ细胞和ＩＬ－２脂质体为主体，硒酸酯多糖为辅佐的生物治疗方案对白血病小鼠具有显著的免疫抑瘤作用     

中枢IL—2对脾脏免疫机理的调节

研究了大鼠第三脑室注射白细胞介素２对脾淋巴细胞增殖功能的影响。结果显示，第三脑室注射ＩＬ－２可引起脾淋巴细胞对植物血凝素刺激引起的增殖作用的增强，同时还引起脾交感神经活动的抑制。ＩＬ－２的这些作用均可被阿片受体阻断剂纳洛酮阻断。实验还发现，电刺激脾神经可以引起脾淋巴细胞增殖功能的抑制。根据结果可以认为脑室注射ＩＬ－２可以通过阿片受体介导的途径抑制交感神经的活动，进而通过脾交感神经影响脾淋巴细胞增殖     

脾切除后IL—2对兔血清tuftsin水平影响的实验研究

通过建立兔动物模型并注射白细胞介素－２（ＩＬ－２），采用放射免疫分析方法检测兔血清ｔｕｆｔｓｉｎ水平的变化。半脾切除、未手术组兔血清ｔｕｆｔｓｉｎ水平较注射前显著升高，其中未手术组升高更明显，全脾切除组与注射前比较无变化，提示ＩＬ－２对血清ｔｕｆｔｓｉｎ水平的影响依赖于脾淋巴细胞的生物学效应，全脾切除后此效应消失。     

高压氧抗移植排斥反应及其机制的研究

目的：探讨高压氧降低细胞免疫功能、抗移植排斥反应的机理。方法：供鼠ＢＡＬＢＣ（Ｈ－２ｄ）,受鼠Ｃ５７ＢＬ６（Ｈ－２ｂ）,皮肤移植后,分对照组、实验组,实验组小鼠用９９－２％氧气,０－２５ＭＰａ,作用１－５ｈ,每日一次,看高压氧对小鼠移植皮片存活时间的影响,分别于术后３ｄ、７ｄ、１４ｄ、２１ｄ检测小鼠脾Ｔｈｙ－２阳性细胞、Ｌ３Ｔ４阳性细胞、Ｌｙｔ－２阳性细胞百分率的变化及ＩＬ－２产生量、对ＩＬ－２Ｒ反应性,同时做ＴｈＴｓ比值变化的比较。另外,于术后１４ｄ,应用免疫组化法检测移植皮片局部ＣＤ＋…     

构建的人白细胞介素ⅡcDNA表达载体在肝癌细胞中的表达

为进一步开展人白细胞介素Ⅱ（ＩＬ－２）基因修饰的肿瘤疫苗的研究,在已构建的人白细胞介素ⅡｃＤＮＡ表达载体（ｐｃＤＮＡ１／ＩＬ）的基础上,利用脂 本,将其引入人肝癌细胞檄７７２１,通过Ｇ４１８抗性筛选获得阳性克隆,用活细胞计数法检测阳性克隆的细胞培养上清中的Ｌ１－２活性,结果表明ｐｃＤＮＡ３／ＩＬ－２转染的７７２１细胞氛发泌的ＩＬ－２水平明显高于阳性对照ｐＢｃ１２／ＨＩＶ／ＩＬ－２转染的７７２１细胞     

人胎儿脾胸腺细胞培养上清sIL－2R的分析

应用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法分析了不同胎龄脾、胸腺细胞培养上清和血清ｓＩＬ－２Ｒ的变化。结果显示：（１）胎儿脾、胸腺细胞体外在ｒＩＬ－２和抗ＣＤ３刺激下，上清中可产生高水平的ｓＩＬ－２Ｒ。并且随培养时间的延长显著增高（Ｐ＜０．０１）；（２）胎儿脾细胞培养上清ＳＩＬ－２Ｒ明显高于胸腺（Ｐ＜０．０１）；（３）胎儿血清ｓＩＬ－２Ｒ显著高于成人，并随胎龄的增大逐步下降．胎龄与ｓＩＬ－２Ｒ水平呈负相关。结果提示：ｓＩＬ－２Ｒ不仅是胎儿淋巴细胞活化的标志，还可能在淋巴细胞分化、成熟过程中发挥免疫调节作用。胎儿血清ｓＩＬ－２Ｒ增高并随胎龄成熟而下降，推测可能参与胚胎期免疫耐受。     

促甲状腺素释放激素对小鼠脾细胞产生细胞因子的影响

观察促甲状腺素释放激素在体内和体外对小鼠脾细胞产生ＩＮＦ和ＩＬ－２的影响。结果表明，正常小鼠每天腹腔注射ＴＲＨ０．２μＧ／只，共１０ｄ，其脾细胞受ＣｏｎＡ刺激产生的ＩＮＦ和Ｉ Ｌ－２产量无显著增高，对氢化可的松处理的免疫抑制小鼠，加用以上剂量，ＴＲＨ后，其脾细胞产生ＩＮＦ和ＩＬ－２的能力明显提高。     

胎盘转移因子对荷瘤小鼠脾脏IL－2诱生水平和外周血TNF活性的调节作用

应用ＣＴＬＬ２细胞短期培养３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和Ｌ９２９细胞结晶紫染色法，观察ＮＩＨ小鼠接种Ｓ１８０实体瘤细胞前后，分别注射ＨＰ－ＴＦ０．５ｍｌ／鼠连续２０天，其脾细胞ＩＬ－２诱生水平和外周血ＴＮＦ活性的变化。结果显示，预防组和治疗组小鼠脾细胞ＩＬ－２诱生水平（ｃｐｍ值）分别为２１２８．７２±１６４．４２、３２９５．９６±２３０．７１，较荷瘤对照组（１２６０．４３±１４５．５７）明显提高（Ｐ＜０．００１）；而外周血ＴＮＦ活性（％）分别为４５．００±５．１８．５２．２９±５．２１，与荷瘤对照组（２５．８３±５．５２）比较有非常显著性差异（ｐ＜０．００１）。两组的抑瘤率分别为６８．８８％和６５．８２％。提示ＨＰ－ＴＦ能显著提高荷瘤小鼠脾细胞ＩＬ－２诱生水平和外周血ＴＮＦ活性，且能明显抑制Ｓ１８０实体瘤细胞在小鼠体内的生长。木研究结果有助于对ＨＰ－ＴＦ提高荷瘤机体细胞免疫功能的机理的探讨，并为临床应用ＨＰ－ＴＦ治疗肿瘤患者提供了实验依据。     

IL—2基因直接转移促进CDR^＋缺损小鼠免疫功能的恢复

探讨ＩＬ－２基因直接转移治疗小鼠ＣＤ４缺陷的可能性。方法 ｐＣＩ－ｈＩＬ－２质粒ＤＮＡ直接注入ＣＤ４缺陷小鼠大腿肌肉内。用免疫组法检测ｈＩＬ－２蛋白的表达，同时测定小鼠的免疫功能。结果 ｐＣＩ－ＩＬ－２质粒ＤＮＡ可在注射部位肌纤维内表达ＩＬ－２蛋白。ＣＤ４缺陷小鼠脾细胞中ＣＤ＾＋４Ｔ细胞增多，脾细胞对有丝分裂素ＣｏｎＡ增殖反应明显增强。     

布洛芬对阻塞性黄疸大鼠淋巴细胞IL—2产生及Ts细胞活性的影响

本文研究了阻塞性黄疸大鼠脾细胞ＩＬ－２生成及Ｔｓ功能的改变，同时观察布洛芬的免疫调节作用。结果显示：胆管结扎大鼠脾细胞ＩＬ－２生成明显下降，Ｔｓ细胞活性增强，布洛芬可明提高阻塞性黄疸大鼠脾细胞ＩＬ－２产生及降低Ｔｓ细胞活性，有可能成为临床上调节阻塞性黄疸病人免疫功能有价值的药物。     

布洛芬对阻塞性黄疸大鼠淋巴细胞IL－2产生及Ts细胞活性的影响

本文研究了阻塞性黄疸大鼠脾细胞ＩＬ－２生成及Ｔｓ功能的改变，同时观察布洛芬的免疫调节作用。结果显示：胆管结扎大鼠脾细胞ＩＬ－２生成明显下降，Ｔｓ细胞活性增强，布洛芬可明显提高阻塞性黄疸大鼠脾细胞ＩＬ－２产生及降低Ｔｓ细胞活性，有可能成为临床上调节阻塞性黄疸病人免疫功能有价值的药物。     

人胎儿脾胸腺细胞培养上清sIL—2R的分析

应用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法分析了不同胎龄脾、胸腺细胞培养上清和血清ｓＩＬ－２Ｒ的变化。结果显示：（１）胎儿脾、胸腺细胞体外在ｒＩＬ－２和抗ＣＤ３刺激下，上清中可产生高水平的ｓＩＬ－２Ｒ．并且随培养时间的延长显著增高（Ｐ＜０．０１）；（２）胎儿腺细胞培养上清ｓｉｌ－２Ｒ水平呈负相关。结果提示：ｓＩＬ－２Ｒ不仅是胎儿淋巴细胞活化的标志，还可能在淋巴细胞分化，成熟过程中发挥免疫调节作用。胎儿血清ｓＩＬ－     

RU486逆转糖皮质激素对白细胞介素—2生成和基因表达的抑制作用

本文应用细胞培养、＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入、ＩＬ－２依赖细胞株ＣＴＬＬ－２、斑点杂交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析等方法，观察到糖皮质激素受体拮抗剂ＲＵ４８６能逆转糖皮质激素（地塞米松）对大鼠脾淋巴细胞增殖、ＩＬ－２产生和ＩＬ－２基因表达的抑制作用。本文证实，糖皮质激素对淋巴细胞增殖、ＩＬ－２生成和ＩＬ－２基因表达的抑制作用是通过淋巴细胞内的糖皮质激素受体来实现的。     

北芪对老龄机体细胞因子产生影响的实验研究

本文以１５月龄昆明鼠和６０～７２岁老龄人为对象，采用生物学活性检测法观察了北芪对老龄鼠脾细胞受ＣｏｎＡ刺激后产生ＩＬ－２，ＴＮＦ及ＩＦＮ－γ水平的影响，采用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法检测了老龄鼠脾细胞上清中ｓＩＬ－２Ｒ含量，实验结果证明老龄机体ＩＬ－２，ＴＮＦ和ＩＦＮ－γ分泌功能下降，ｓＩＬ－２Ｒ水平增高，服用北芪后明显地提高了老龄机体的ＩＬ－２，ＴＮＦ和ＩＦＮ－γ水平，降低了ｓＩＬ－２Ｒ水平，进而证     

IL—2,IL—4基因转染后肿瘤细胞表面ICAM—1分子的表达及其作用

为了进一步研究细胞因子基因转染后肿瘤细胞体内致瘤原性、免疫原性变化的分子机制，将ＩＬ－２、ＩＬ－４基因转染入Ｂ１６黑色素瘤细胞，观察了其体内接种后致瘤原性变化，通过ＦＡＣＳ法检测了其细胞表面粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的表达水平，分析了其细胞表面ＩＣＡＭ－１表达水平以及它们与肿瘤细胞对ＬＡＫ、ＣＴＬ等免疫效应细胞杀伤敏感性变化的关系。结果表明，ＩＬ－２、ＩＬ－４基因转染后Ｂ１６细胞体内致瘤原性明显     

内毒素性发热时大鼠脾细胞增殖反应及IL－1、IL－2活性测定

本实验用大鼠腹腔注射内毒素（ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ，ＥＴ）复制发热模型。动物注射ＥＴ后８０ｍｉｎ体温上升达高峰（０．９７±０．２１℃），立即处死动物，检测大鼠脾细胞增殖反应ＩＬ－１、ＩＬ－２活性。实验结果如下：（１）ＥＴ性发热时大鼠脾细胞在无丝裂原的作用下￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入的ｃｐｍ值明显高于对照组。（２）ＥＴ组大鼠脾细胞对刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎｃａｎａｖａｌｉｎＡ，ＣｏｎＡ）的反应性显著高于对照组。（３）ＥＴ组大鼠脾细胞产生ＩＬ－１，ＩＬ－２的能力显著高于对照组。