吸烟诱导肺气肿大鼠血清AECA的表达及甲基波尼松龙的干预影响

目的 探讨吸烟诱导肺气肿大鼠血清抗血管内皮细胞抗体(AECA)的表达,分析甲基波尼松龙对其干预影响.方法 将39只大鼠随机分为对照组、吸烟大鼠肺气肿模型组(模型组)、甲基波尼松龙干预组(干预组).模型组及干预组进行烟雾暴露被动吸烟1个月时,对干预组腹腔注射甲基波尼松龙(每天1次,每周6 d).烟雾暴露90 d后,比较各组大鼠血清AECA、支气管肺泡灌洗液(BACF)中白细胞介素-8(IL-8)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及肺组织中肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)的差异.结果 模型组血清AECA比对照组、干预组升高(P＜0.05);模型组BALF中IL-8、TNF-α、MMP-9水平较对照组、干预组均升高(P＜0.05).结论 AECA参与吸烟诱导肺气肿大鼠形成,甲基波尼松龙可降低AECA及细胞炎症因子水平,并影响肺气肿的形成.     

终止香烟烟雾暴露后大鼠Th1/Tc1介导气道炎症及调节性T细胞的变化

目的 观察香烟烟雾暴露和终止香烟烟雾暴露后大鼠Th1/Tc1介导气道炎症及支气管肺泡灌洗液(BALF)中调节性T细胞(Treg)的变化.方法 将50只健康清洁级雄性Wistar大鼠随机分为5组:12周正常对照组(简称12周对照组)、24周正常对照组(简称24周对照组)、12周香烟烟雾暴露组(简称12周暴露组)、24周香烟烟雾暴露组(简称24周暴露组)、终止香烟烟雾暴露组(简称终止暴露组).烟熏法复制大鼠气道炎症的动物模型.12周后,12周对照组、12周暴露组处置取材,24周暴露组继续烟熏12周,终止暴露组终止烟雾暴露12周,将后2组及24周对照组处置取材.HE染色观察小气道病理改变,进行气道评分;收集BALF进行细胞学计数和分类计数;酶联免疫吸附法(ELISA)法测BALF中4种细胞因子:Th1/Th2型细胞因子干扰素(IFN)γ、白细胞介素(IL)4及促炎因子IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)α的浓度;流式细胞术检测各组大鼠BALF中Treg细胞的比例,RT-PCR检测各组大鼠BALF中Foxp3 mRNA的表达.结果 (1)12周暴露组、24周暴露组、终止暴露组气道炎症评分较12周对照组、24周对照组明显高(均P＜0.01).24周暴露组、终止暴露组气道炎症评分均较12周暴露组高(均P＜0.01).(2)与12周对照组、24周对照组相比,12周暴露组、24周暴露组、终止暴露组BALF中IFN-γ、TNF-α和IL-8高,IL-4低(均P＜0.01).与12周暴露组相比,终止暴露组IFN-γ、IL-4、TNF-α差异均无统计学意义(均P＞0.05),IL-8较高(P＜0.01),24周暴露组IFN-γ、TNF-α和IL-8明显高(均P＜0.01).(3)BALF中Treg细胞比例,12周暴露组(7.4%±0.8%)、24周暴露组(7.8%±1.7%)、终止暴露组(7.0%±1.4%)较12周对照组(4.8%±1.2%)、24周对照组(4.7%±1.2%)高(均P＜0.01),前3组之间BALF中Treg细胞比例差异均无统计学意义(均P＞0.05).(4)12周暴露组(0.22±0.02)、24周暴露组(0.23±0.03)、终止暴露组(0.20±0.04)BALF中Foxp3 mRNA表达较12周暴露组(0.13±0.01)、24周暴露组(0.11±0.02)高(均P＜0.01).前3者之间BALF中Foxp3 mRNA表达差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 香烟暴露致大鼠气道Th1/Tc1介导炎症伴Treg细胞表达增高,终止香烟烟雾暴露后其炎症及Treg细胞高表达仍持续存在,提示该免疫失衡可能是导致终止香烟暴露后Th1/Tc1气道炎症仍持续进展的原因之一.     

军用密闭舱室烟雾吸入致雄性大鼠心、肺、肝、肾损伤的观察

目的 探讨军用密闭舱室非金属材料燃烧释放的有毒烟雾对雄性大鼠心、肺、肝、肾损伤的特点.方法 建立密闭舱室内动物烟雾吸入模型,将36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组及烟雾吸入后1、6、24、72 h和7d组,对照组动物于染毒箱内自由呼吸新鲜空气10 min,染毒组动物于染毒箱内连续吸入烟雾10 min,观察烟雾吸入后动物的中毒症状、血压、心率、血气、血清生化等指标.结果 烟雾吸入后,动物立刻出现呼吸节律改变、呼吸困难等CO中毒表现;烟雾吸入后1h大鼠心率显著下降(P＜0.05),pCO2显著升高(P＜0.05),pO2显著降低(P＜0.05);烟雾吸入后1～72 h组动物谷丙转氨酶(ALT)均显著升高(P＜0.05),其中6h时达峰值(P＜0.01);烟雾吸入后各组AST、LDH、α-HBDH、CK及CK-MB等心肌酶谱指标均持续升高,其中1h组各指标与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 密闭舱室火灾烟雾吸入首先对大鼠的肺脏造成原发性损伤,心、肝、肾产生继发性的功能损害,且上述功能损害主要发生在烟雾吸入后“24h”窗口期内,其后由于机体代偿可逐渐恢复至正常.     

中药814对地鼠肺气肿防治作用的病理观察

目的观察中药８１４对弹力酶诱导的金黄地鼠肺气肿的防治效果。方法随机设正常组、模型组、８１４防治组。模型组应用气管内注入弹力蛋白酶制造金黄地鼠肺气肿;防治组于注酶前两周以８１４灌胃。于实验开始后１月、２月、３月,分别测定三组动物的肺动脉压、血气、心脏指数、肺干湿质量比（ＤＷ／ＷＷ）;肺组织石蜡切片中ＭＬＩ、ＭＡＮ、ＰＡ／ＴＡ以显微微机图象处理系统测量。结果应用８１４后可使肺气肿组增加的肺干湿比恢复到与正常组无统计学差异;８１４防治组比单纯肺气肿组平均肺泡间隔（ＭＬＩ）减少,平均肺泡数（ＭＡＮ）、肺实质与总面积比（ＰＡ／ＴＡ）增加,皆有显著意义（Ｐ＜０．００１或Ｐ＜０．０５）。结论中药制剂８１４可减缓弹力酶引起的地鼠肺气肿病变的发生、发展。     

肺气肿发生过程中胆红素对纤维黏连蛋白的影响

目的:探讨肺气肿发生过程中胆红素对纤维黏连蛋白(Fn)的影响。方法:将健康Wistar大鼠随机分为模型、干预、对照3组。模型组:被动吸烟6月。干预组:吸烟同模型组,熏烟前予间接胆红素灌胃。6月末处死动物,取材观察组织学结构;支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清中纤维黏连蛋白(Fn)、丙二醛(MDA)与谷光甘肽(GSH)含量;间接免疫荧光法测定肺泡隔Fn表达。结果:组织学结构观察:模型组符合肺气肿病理表现,模型复制成功。干预组大鼠的肺泡隔断裂和肺泡腔扩大情况较模型组减轻;模型组BALF及血清中Fn、MDA含量明显高于对照组(P均<0.05);干预组BALF中Fn、MDA含量低于模型组(P均<0.05);模型组BALF及血清中GSH含量明显低于对照组(P均<0.05);干预组BALF中GSH含量高于模型组(P<0.05);相关分析显示BALF中的MDA与GSH含量呈负相关;肺泡隔Fn免疫荧光表达在模型组强于对照组(P<0.05),干预组弱于模型组(P<0.05)。结论:肺气肿形成过程中伴随着错综复杂的Fn的变化,胆红素干预可使其变化趋于正常;胆红素具有抗氧化作用,对机体氧化抗氧化平衡的维持有重要作用。     

血管内皮细胞生长因子和肿瘤坏死因子α在大鼠肺气肿中的作用

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在大鼠肺气肿中的作用。方法 48只大鼠随机分为正常对照组、肺气肿组、rhTNFR:Fc干预组和假干预组。肺气肿组、干预组和假干预组予以香烟熏吸。烟雾暴露达1个月时,干预组予以TNF-α拮抗剂重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)皮下注射,假干预组给予空白对照制剂。熏烟80d后处死大鼠。大鼠肺组织切片行HE染色观察形态学改变。ELISA法测定血清、BALF中TNF-α浓度及BALF中VEGF浓度。结果与正常对照组比较,肺气肿组肺平均内衬间隔(MLI)升高,平均肺泡数(MAN)降低,BALF中VEGF水平降低,血清、BALF中TNF-α浓度升高,差异均有统计学意义(P0.05)。与肺气肿组比较,rhTNFR:Fc干预组MLI无显著差异(P0.05),MAN增高(P0.05);BALF中TNF-α、VEGF浓度无显著差异(P0.05),血清中TNF-α浓度降低(P0.05)。肺气肿组BALF中VEGF水平与TNF-α浓度无相关性(P0.05)。结论 VEGF表达降低和TNF-α表达增加与吸烟大鼠的肺气肿形成有关。VEGF与TNF-α可能各自独立促进肺气肿的发生发展。     

香烟烟雾暴露对大鼠支气管肺泡灌洗液及外周血4-HNE和γ-GCS表达的影响

目的 研究香烟烟雾暴露对大鼠支气管肺泡灌洗液( BALF)及外周血4-羟基壬稀醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(gamma-Glutamylcysteine synthetase,γ-GCS)表达的影响,探讨4-HNE及γ-GCS在COPD氧化/抗氧化失衡发病机制中的作用.方法 30只雄性Wistar大鼠随机分为不吸烟组、吸烟6周组和吸烟12周组;采用双抗体夹心酶联免疫吸附( ABC-ELISA)法分别检测各组大鼠BALF及外周血4-HNE和γ-GCS的含量.结果 (1)与不吸烟组(15.917±1.584;12.305±1.822)比较,吸烟6周组(21.376±2.80;18.333±2.585)和吸烟12周组(28.634±2.999;22.754±3.882)大鼠BALF和外周血中4-HNE含量明显增加,差异均有统计学意义(P均＜0.01);吸烟12周组与吸烟6周组比较有所增加,差异也有统计学意义(P＜0.01).(2)与不吸烟组(13.525±2.311;11.847±1.171)比较,吸烟6周组(15.802±1.647;16.221±1.577)大鼠BALF和外周血中γ-GCS的表达明显增加,差异均有统计学意义(P ＜0.05;P＜0.01);与不吸烟组比较,吸烟12周组( 11.527±1.606;9.015±1.569)的表达明显减少,差异也有统计学意义(P ＜0.05;P＜0.01).(3)吸烟6周组BALF及外周血4-HNE和γ-GCS的表达呈正相关(r=0.764,r =0.674),吸烟12周组BALF中4-HNE和γ-GCS表达呈负相关(r=-0.777),差异均有统计学意义(P均＜0.05),而外周血中二者表达无显著相关性.结论 香烟烟雾暴露可使大鼠体液4-HNE及γ-GCS的表达水平增高,随着吸烟时间延长,γ-GCS逐渐降低,提示二者在COPD氧化/抗氧化失衡中发挥一定的作用.     

重组腺病毒Ad-HGF对烟熏大鼠肺气肿肺组织细胞凋亡的抑制作用

目的通过构建大鼠肺气肿模型,观察携带肝细胞生长因子基因的重组腺病毒（Ad-HGF）对肺组织细胞凋亡的抑制作用。方法40只Wistar大鼠随机分为4组：正常对照组（A组）、肺气肿组（B组）、肺气肿＋Ad～HGF组（C组）和肺气肿＋Ad—GFP组（1）组）;采用烟熏法建立大鼠肺气肿模型。造模成功后,A组正常饲养,B组给予0．5ml生理盐水灌注治疗,C组给予1×10^9 pfu Ad-HGF,D组给予1×10^9 pfuAd-GFP：干预14天后处死各组动物,取D组大鼠部分肺组织作常规冰冻切片,荧光显微镜下观察目的基因的表达;取A、B、C5-组大鼠肺组织制作病理切片,观察并计算平均肺泡面积（MAA）、平均内衬间隔（MLI）、平均肺泡数（MAN）;采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术对大鼠肺实质凋亡细胞的阳性细胞率（AI）进行检测。结果与A组相比,B组、C组大鼠的肺组织都存在不同程度的肺气肿病理改变;Ad—HGF治疗纽MAA和MLI均小于模型组、MAN大于模型组,差异有统计学意义（P〈O．05）;Ad—HGF治疗组肺组织细胞凋亡指数（AI）低于模型组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论重组腺病毒Ad—HGF对烟熏大鼠肺气肿肺组织细胞凋亡有抑制作用。     

芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道炎症的影响

目的 观察芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠血清、支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平的影响.方法 采用香烟烟熏加气管内注入脂多糖的复合因素造模法建立COPD大鼠模型,于造模第15天,空白组、模型组给予等体积中剂量颗粒辅料溶液灌胃4周,其他各药物干预组给予芪蛭皱肺颗粒小剂量、中剂量、大剂量和阳性药物（固本咳喘片）溶液灌胃4周,末次用药后取肺组织HE染色,取血清和BALF采用放免法检测IL-8和TNF-α的含量.结果 采用香烟烟熏加气管内注入脂多糖的方法成功复制了COPD大鼠模型,病理观察显示大鼠支气管及肺血管壁炎细胞浸润,分泌物明显增多,肺泡扩张.与空白组比较,模型组血清IL-8与TNF-α含量均升高（P＜0.01或＜0.05）;BALF IL-8与TNF-α含量亦均升高（P＜0.05或＜0.01）;与模型组比较,芪蛭皱肺颗粒各剂量组及固本咳喘片组血清及BALF中IL-8和TNF-α含量均降低（P＜0.05）,以芪蛭皱肺颗粒大剂量组降低更明显（P＜0.01）.结论 芪蛭皱肺颗粒有可能是通过减少炎症因子的生成和释放,从而有效调节肺炎症损伤时IL-8和TNF-α水平的升高,对大鼠模型气道炎症具有一定的干预作用.     

烟草烟雾暴露对哮喘小鼠肺组织NF-κB p65表达的影响

目的 探讨烟草烟雾暴露对支气管哮喘小鼠气道炎性细胞浸润及肺组织核转录因子-κB p65（NF-κB p65）表达的影响。方法 将雌性无特定病原体级（specific pathogen free, SPF）级BALB/c纯系小白鼠40只随机分为4组,即正常对照组、哮喘组、烟草烟雾暴露组和烟草烟雾暴露+哮喘组,每组各10只。正常对照组给予雾化吸入生理盐水,哮喘组给予雾化吸入卵蛋白（OVA）致敏从而复制模型,烟草烟雾暴露组则在正常对照组基础上予以烟草烟雾暴露1 h,而烟草烟雾暴露+哮喘模型组则在哮喘模型组的基础上给予同样的烟草烟雾暴露1 h。28 d后采集支气管肺泡灌洗液（BALF）,测定BALF中白细胞(WBC)、嗜酸性粒细胞（EOS）及中性粒细胞（NEU)计数。用蛋白质免疫印迹法（Western-blot）检测肺组织NF-κB p65蛋白表达水平。结果 哮喘组、烟草烟雾暴露+哮喘组小鼠BALF中白细胞总数、嗜酸粒细胞、中性粒细胞均高于对照组及烟草烟雾暴露组,烟草烟雾暴露+哮喘组BALF中白细胞总数和中性粒细胞计数高于哮喘组,嗜酸粒细胞计数低于哮喘组（P<0.05);哮喘组、烟草烟雾暴露+哮喘组小鼠肺组织NF-κB p65蛋白表达均上升,但烟草烟雾暴露+哮喘组小鼠升高更明显,与哮喘组相比差异有统计学意义（P<0.05)。烟草烟雾暴露+哮喘组白细胞计数与肺组织NF-κB p65表达水平呈正相关（r=0.781,P=0.008）。结论 烟草烟雾暴露可能通过上调NF-κB p65蛋白表达,促进支气管哮喘气道炎性细胞浸润。     

连花清瘟胶囊对慢性阻塞性肺病治疗作用的研究

 目的 研究连花清瘟胶囊对慢性阻塞性肺病（Chronic Obstructive Pulmonary disease，COPD）大鼠模型气道炎症的影响。方法 香烟熏吸法复制COPD大鼠模型。采用随机平行对照的实验方法,将30只清洁级Wistar大鼠随机分为对照组、COPD模型组和连花清瘟胶囊治疗组,每组各10只。肺组织切片行苏木精-伊红染色，测定各组大鼠血清、肺组织匀浆及支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中白介素8 (IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果 模型组大鼠血清、肺组织匀浆及BALF中IL-8和TNF-α含量较对照组明显升高(P < 0.01)。与模型组相比较, 连花清瘟胶囊治疗组血清、肺组织及BALF中IL-8和TNF-α含量显著降低(P < 0.01)。结论 连花清瘟胶囊具有抑制COPD气道炎症的作用。     

HO-1对肺气肿大鼠ICAM-1、MIP-2表达的影响

目的 观察HO-1对肺气肿大鼠模型肺组织ICAM-1和MIP-2表达的影响.方法 复制肺气肿大鼠模型,并用Hemin干预,收集BALF行细胞计数并分类检查;采用免疫组织化法检测大鼠支气管肺组织HO-1、ICAM-1表达,ELISA方法检测肺组织匀浆中MIP-2的含量.结果 与模型组比较,干预组肺组织中HO-1表达显著增加（P＜0.05）.肺气肿组大鼠模型中不仅ICAM-1在支气管肺组织的表达较干预组显著增加（P＜0.05）,而且BALF中的白细胞计数和中性粒细胞计数均与ICAM-1表达呈显著正相关（r=0.85、0.84,P均＜0.01）;模型组肺组织匀浆中MIP-2含量较干预组明显增加,而且BALF中的白细胞计数和中性粒细胞计数均与MIP-2含量呈显著正相关（r=0.89、0.89,P均＜0.01）.结论 ICAM-1和MIP-2在肺气肿中明显增加,HO-1可降低ICAM-1、MIP-2的表达,这可能是HO-1在肺气肿中抗炎反应的作用机制之一.     

辛伐他汀对大鼠烟雾吸入性肺损伤中炎症反应的抑制作用

目的 研究辛伐他汀对大鼠烟雾吸手性肺损伤中炎症反应的抑制作用.方法 将18只SD大鼠(雌雄不限)随机分为正常组、盐水组、辛伐他汀组,建立烟雾吸手性肺损伤模型,模型建立后30 min及12 h,辛伐他汀组给予辛伐他汀溶液50 mg/kg灌胃,盐水组大鼠给予等量生理盐水灌胃,正常组大鼠正常饲养.于致伤后24 h取右上肺肺组织行病理检查并行病理学评分.经腹主动脉取全血离心留取上层血清,并行左侧支气管肺泡灌洗留取肺泡灌洗液(BALF),采用ELISA法检测血清及BALF中白介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量.取右下肺部分肺组织以Western blot法检测蛋白提取物中IL-6、TNF-α及胞质中NF-κB p65的蛋白表达情况.结果 光镜下观察正常组肺泡结构正常,盐水组肺泡间隔水肿,肺泡腔内可见大量的中性粒细胞浸润,而与盐水组相比,辛伐他汀组上述症状减轻且肺组织病理学评分降低(P＜0.05).盐水组、辛伐他汀组血清和BALF中IL-6、TNF-α的含量以及肺组织蛋白提取物中IL-6、TNF-α和NF-κB的表达均较正常组明显升高(P＜0.05).而与盐水组相比,辛伐他汀组大鼠血清和BALF中IL-6、TNF-α的含量以及肺组织蛋白提取物中IL-6、TNF-α及NF-κB p65的表达均降低(P＜0.05).结论 辛伐他汀通过抑制炎症介质的产生及炎症细胞的浸润,减轻吸手性肺损伤的炎症反应,对肺组织起到了一定的保护作用.     

Effects of pentoxifylline on Wnt/β-catenin signaling in mice chronically exposed to cigarette smoke

Background Previous discovery that long-term administration of pentoxifylline （PTX） to mice chronically exposed to smoke led to the development of pulmonary fibrosis rather than emphysema initiated our curiosity on whether the Wnt/β-catenin pathway, a set of signaling proteins essential to organ development and lung morphogenesis in particular were activated in the pathogenesis of pulmonary fibrosis. Methods Male BALB/c mice were randomized into four study groups： Group Sm, smoke exposure and taken regular forage; Group PTX, no smoke but taken PTX-rich forage; Group Sm＋PTX, smoke exposure and taken PrX-rich forage; Group control： shamed smoke exposure and taken regular forage. Animals were sacrificed at day 120. Morphometry of the lung sections and the expressions of TGF-β1, hydroxyproline, β-catenin, cyclin D1, T cell factor 1 （Tcf-1） and lymphoid enhancer factor 1 （Lef-1） mRNA, etc, in the lung homogenate or in situ were qualitatively or quantitatively analyzed. Results As expected, smoke exposure along with PTX administration for 120 days, lungs of the mice progressed to be a fibrosis-like phenotype, with elevated fibrosis score （3.9±1.1 vs. 1.7±0.6 in Group Sm, P 〈0.05）. TGF-β1（pg/g） （1452.4±465.7 VS. 818.9±2.02.8 in Group Sm, P 〈0.05） and hydroxyproline （mg/g） （5.6±0.6, vs. 2.4±0.1 in Group Sm, P 〈0.05） were also consistently increased. The upregulation of β-catenin measured either by counting the cell with positive staining in microscopic field （17.4±7.9 vs. 9.9±2.9 in Group Sm, P 〈0.05） or by estimation of the proportion of blue-stained area by Masson＇s trichrome （11.8±5.6 vs. 4.7±4 in Group Sm） in Group SM＋PTX was much more noticeable as than those in Group Sm. The expression of β-catenin measured by positive cell counts was correlated to TGF-β1 concentration in lung tissue （r=0.758, P 〈0.001）. PTX per se caused neither fibrosis nor emphysema though expression of β-catenin and downstream gene cyclin D1 may also be altered by this medication. Conclusions PTX mediated transformation of pulmonary emphysema into pulmonary fibrosis under chronic cigarette smoke exposure is associated with upregulation of β-catenin and elevation of TGF-β1, implying that activation of Wnt/β-catenin signaling may be involved in the pathogenesis of pulmonary fibrosis.     

炎症相关趋化因子/细胞因子在香烟暴露和戒烟小鼠肺组织中的表达

目的 观察香烟暴露及戒烟后小鼠肺组织炎症以及炎症相关趋化因子及细胞因子表达的情况。方法 将18只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、香烟暴露组及戒烟组3组,每组6只。测量小鼠气道阻力,HE和Masson染色观察肺部形态及炎症情况,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞总数及细胞分类数,采用实时PCR方法及免疫组织化学法检测各组小鼠肺组织中CXCL9、CXCL10、CXCL11、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、MMP12及转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA及蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附法测量BALF上清中CXCL9、CXCL10、CXCL11、白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、TGF-β1水平。结果 香烟暴露组小鼠气道阻力(Rn)显著高于正常对照组(P＜0.01),戒烟组Rn亦显著高于正常组(P＜0.05)。与正常对照组比较,香烟暴露组与戒烟组肺组织病理总评分均显著增高(P＜0.001)。香烟暴露组和戒烟组的炎症细胞总数显著高于正常对照组(P＜0.001)。香烟暴露组和戒烟组CXCL9、CXCL10、MMP9和MMP12的 mRNA水平均显著高于正常对照组(P均＜0.05)。香烟暴露组和戒烟组CXCL9、CXCL10、CXCL11、MMP2、MMP9、MMP12及TGF-β1的蛋白表达水平均显著高于正常对照组(P均＜0.05)。与正常对照组比较,香烟暴露组和戒烟组BALF上清中的CXCL9、CXCL10、CXCL11、IL-8及TGF-β1浓度显著增加(P均＜0.05),香烟暴露组IL-6和TNF-α浓度亦显著升高(P均＜0.05)。结论 香烟暴露引起炎症细胞在肺组织中聚集及炎症细胞因子升高,戒烟后炎症细胞及炎症细胞因子尽管有所下降,但仍高于正常对照。戒烟后肺部炎症持续存在,趋化因子受体CXCR3的配体可能在其中发挥关键作用。     

烧伤、冲击伤及烧冲复合伤后大鼠早期血清中性粒细胞弹性蛋白酶的变化及意义

目的 探讨中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)在大鼠烧伤、冲击伤与烧冲复合伤后早期血清中浓度的变化及意义.方法 选择雄性SD大鼠176只,随机分为对照(C)组、烫伤(BU)组、冲击伤(BL)组与烧冲复合伤(BB)组.C组不致伤;BU组背部脱毛置人94 ℃水中12 s,致25%体表面积(TBSA)Ⅲ°烫伤;BL组以5 g 8701压缩炸药柱为爆炸源,以左侧胸壁距爆炸源75 cm距离进行爆炸,致中度冲击伤;BB组同BL、BU组伤情先致冲击伤后立即烫伤.伤后24 h内,BU、BB组按照50 ml/kg,腹腔注射乳酸钠林格注射液抗休克治疗,1次/12 h.致伤组分为伤后3 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、7 d共7个时相点.测定各时相点支气管肺泡灌洗液(BALF)总蛋白浓度(BCA法)、肺组织含水率(称重法)及血清NE浓度(ELISA法).结果 各致伤组SD大鼠的BALF总蛋白浓度、肺组织含水率及血清NE浓度伤后各时相点均高于C组(P＜0.01或P＜0.05),其伤后峰值均出现在2 d以内,尤其是伤后2 d,BU组、BL组及BB组血清NE浓度分别为(319.85±19.50)ng/ml,(467.43±31.64)ng/ml,(626.00±26.38)ng/ml;C组(78.53±25.10)ng/ml.组间比较,总体伤情水平BB组＞BU组及BL组(P＜0.01或P＜0.05).相关分析表明,伤后3d内,BU组血清NE浓度与BALF总蛋白浓度、肺组织含水率均存在显著正相关(r=0.7910,0.8078,P＜0.05),BB组血清NE浓度与BALF总蛋白浓度存在显著正相关(r=0.8672,P＜0.05).结论 NE可能在烧伤、冲击伤,尤其是烧冲复合伤的早期肺损伤中起到了重要作用.     

单核细胞趋化蛋白-1与COPD大鼠气道炎症的研究

目的　探讨单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP- 1)在慢性阻塞性肺疾病 (COPD)发病机制中的作用。方法　采用单纯熏香烟法建立 COPD模型 ,支气管肺泡灌洗计数支气管肺泡灌洗液 (BAL F)中细胞总数与肺泡巨噬细胞(AM)计数 ,以酶联免疫吸附法 (EL ISA )测定 BAL F和血清中的 MCP- 1及肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)水平。采用图像分析系统测定肺平均内衬间隔 (ML I)、平均肺泡数 (MAN )和肺泡腔面积与总面积比 (PAA )。结果　 COPD组ML I、PAA比正常对照组增高 ,而 MAN低于对照组 ,差异均有统计学意义 (P<0 .0 1)。 COPD模型组 BAL F中MCP- 1、TNF-α水平、细胞总数和 AM计数均高于正常对照组 (P<0 .0 1)。模型组血清中 MCP- 1〔(32 .75± 10 .91)pg/ ml〕与对照组〔(2 4 .13± 6 .92 ) pg/ ml〕相比无统计学差异 (P>0 .0 5 )。模型组 BAL F中 MCP- 1水平与 AM数目和 TNF-α水平 (r=0 .86 1,P<0 .0 1;r=0 .86 8,P<0 .0 1) ,以及 TNF-α水平与 AM数目 (r=0 .84 ,P<0 .0 1)均呈密切正相关 ,但血清中 MCP- 1水平、TNF-α水平与 BAL F中的 AM数目均无相关性 (r=0 .4 88,P>0 .0 5 ;r=0 .132 ,P>0 .0 5 )。结论　 MCP- 1与 COPD的气道炎症密切相关     

Dynamic Expression of Tumor Necrosis Factor-α and Vascular Endothelial Growth Factor in Rat Model of Pulmonary Emphysema Induced by Smoke Exposure

In order to explore the roles of tumor necrosis factor-α(TNF-α) and vascular endothelial growth factor(VEGF) in the pathogenesis of pulmonary emphysema,male Wistar rats were randomized into group A1,group A2.5 and group A4,each with smoke exposure for 1 month,2.5 months or 4 months,respectively.Group B1,group B2.5 and group B4 were used as non smoking controls at corresponding time points.TNF-α in bronchoalveolar lavage fluid(BALF) and expression of VEGF in lung tissue was determined by ELISA or by SABC immunohistochemistry assay either.Lung slices were stained with hematoxylin and eosin(HE).Results showed that in animal with smoke exposure the mean linear interceptor(Lm),an index of pulmonary emphysema and the content of TNF-α in BALF increased gradually,on contrary,the expression of VEGF in lung tissue decreased(P<0.05).This phenomenon was not obvious in animals without smoke exposure.Lm was negatively correlated to the VEGF expression(γ=-0.81,P<0.01) and positively correlated to TNF-α concentration(γ = 0.52,P<0.004),which implies that smoke exposure decreased the expression of VEGF and increased the expression of TNF-α.It is plausible to speculate that the imbalance of TNF-α and VEGF may play an important role in the pathogenesis of smoke-induced pulmonary emphysema.     

低剂量低分子肝素对内毒素诱发的急性肺损伤的影响

目的 探讨低剂量低分子肝素(LMWH)对内毒素(LPS)诱发的急性肺损伤(ALI)的影响.方法 选取36只雄性SD大鼠分为3组:正常对照组(A组),LPS组(B组)和LPS+ LMWH组(C组),每组12只.B、C组腹腔注射6 mg/kg LPS诱发ALI.C组腹腔注射低分子肝素100 U/kg,B组腹腔注入同等容积的生理盐水.6h后处死动物,光镜下观察各组大鼠肺组织病理改变,行动脉血气分析、检测肺湿质量/干质量(W/D)比值和支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白浓度;测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)水平;ELISA法测定血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及白细胞介素6(IL-6)水平.结果 B、C组PaO2、pH值低于A组,C组与B组相比明显升高(P＜0.05).B、C组大鼠肺W/D、BALF总蛋白及肺组织MDA、MPO水平明显高于A组(P＜0.01);C组与B组相比,肺W/D、BALF中蛋白及肺组织MDA、MPO水平明显下降(P＜0.05).B、C组大鼠血浆中TNF-α、IL-1β及IL-6水平较A组明显升高(P＜0.01),而C组较B组明显降低(P＜0.01).结论 LMWH处理能够减轻LPS诱发的急性肺损伤.     

GBE 对COPD 大鼠血清和肺泡灌洗液中IL-1、IL-8 含量的影响

目的 探讨银杏叶提取物（GBE）对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠血清和肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素1（IL-1）、白细胞介素8（IL-8）含量的影响。方法 将90 只清洁级Wistar 大鼠称重后,随机分为A、B、C、D、E、F 组,每组15 只。B、C、D、E、F 5 组采用烟雾吸入等复合因素复制COPD 大鼠模型;C、D 组分别在1 ～ 14 d 和29 ～ 42 d 用GBE 干预;E、F 组分别在1 ～ 14 d 和29 ～ 42 d 用红霉素干预,实验结束取各组大鼠肺动脉血和BALF,检测各组血清和BALF 中IL-1、IL-8 的含量。结果 A、C、D、E、F 组与B 组相比,血清中IL-1、IL-8 含量及BALF 中IL-1 含量低于B 组（P <0.05）。在降低血清IL-1 水平方面,早期GBE 干预优于晚期;在降低大鼠血清和BALF 中IL-1、IL-8 水平方面,GBE 与红霉素比较差异无统计学意义（P >0.05）。结论 GBE 具有抑制COPD 气道及全身炎症反应的作用。