大鼠实验性脾虚证十二指肠粘膜内分泌细胞的免疫组织化学研究

用正常成年雄性Wistar大鼠46只,分为正常对照组,实验性脾虚组,自然恢复组和四君子汤治疗组.取十二指肠,Bouin液固定,制石蜡切片,进行了以下染色.(1)H.E染色(2)按免疫组织化学PAP法显示粘膜的胃泌素(G)细胞、生长抑素(D)细胞和5-HT细胞.在光镜下按照半定量法将细胞分为强阳性、中等阳性和弱阳性.观察并记录每组动物切片中各级活性细胞数和计算各级细胞的百分比.(3)从正常对照组,脾虚组各随机选择5例动物,对D细胞和5-HT细胞进行显微分光光度计的定量测定.结果表明(1)脾虚组粘膜未见明显的组织学变化.(2)内分泌细胞:与对照组相比,脾虚组G细胞、5-HT细胞内反应物含量减少,表明分泌功能增强.D细胞内反应物含量增多,表明分泌功能减弱.统计学分析表明以上结果有显著性差异(P值<0.01).与自然恢复比较,治疗组接近对照组.本文结果提示,脾虚证的发病与消化道内分泌细胞变化有密切关系;四君子汤对脾虚证有较好的治疗作用.     

实验性脾虚证大鼠肝细胞组织化学变化的研究

用成年雄性大鼠Ｗｉｓｔａｒ大鼠４２只,分为正常对照组（对照组）实验性脾虚组（脾虚组）自然恢复组和中药治疗组（治疗组）四组动物同时麻醉处死,取肝右叶小块组织,制石蜡和恒冷箱切片,进行核糖核酸,糖原,琥珀酸脱氢酶乳酸脱氢酶,葡萄糖６－磷酸酶,酸性磷酸酶和非特异性酶组织化学反应,光镜观察,并对琥珀酸脱氢酶和葡萄糖－６－磷酸酶作了显微分光光度计定量测定。结果证明,脾虚组琥珀酸脱氢酸氢酶,和葡萄糖－６－磷酸     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛PP细胞的免疫组织化学研究

目的 探讨胰多肽在大鼠胃溃疡自愈期间的可能作用及意义.方法 应用免疫组织化学PAP法、形态计量和图像分析法,研究大鼠胃溃疡自愈期间胰岛PP细胞的形态学、细胞的面数密度(NA)及平均灰度变化.结果 与正常组和盐水组比较,胃溃疡组大鼠胰岛PP细胞NA于溃疡第6d明显下降,平均灰度值升高(P＜0.05);溃疡第10～28d,PP细胞NA升高、平均灰度值下降(P＜0.05);尤以第10d最明显.胰岛PP细胞免疫组织化学的形态观察结果与同期图像分析结果基本一致.结论 胰岛PP细胞在实验性胃溃疡自愈期间,其细胞NA和平均灰度均发生改变.提示PP细胞参与了胃溃疡自愈的调节过程.     

大鼠实验性胃溃疡期间胰岛A、B细胞免疫组织化学研究

本实验用成年雄性大鼠40只,分为溃疡实验组、盐水对照组和空白对照组3组。动物在相同条件下饲养。在手术后6、10、14及21 d,分4批取材,进行免疫组织化学染色。用Sternberger PAP法,分别显示胰高血糖素细胞(A细胞)和胰岛素细胞(B细胞),观察大鼠实验性胃溃疡期间胰岛A、B细胞的变化,并进行细胞计数,分别计算A、B细胞所占百分数。正常大鼠A细胞所占比例为23.31±1.91%(X±SD),B细胞为73.15±4.01%;而溃疡组术后10 d,A细胞比例增高达42.67±5.59%,B细胞则为57.59±4.55%。经统计学处理,A细胞比例的增高与盐水和空白对照组相比,均有高度显著性差异(P<0.01);手术后6、14 d,A细胞比例有所增加,但无显著性差异(P>0.05);21 d则基本恢复。本文结果提示,在大鼠实验性胃溃疡期间,胰岛A、B细胞共同参与了机体自然抗疾患的代谢活动,A细胞更为显著。     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛胃泌素和生长抑素细胞的免疫组织化学研究

目的　探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间 ,胰岛胃泌素免疫反应细胞 (gastrin ,G)和生长抑素细胞(somatostatin ,SSorD)的变化。　方法　免疫组织化学ABC技术。　结果　大部分G细胞免疫反应深浅不一 ;溃疡术后 4、10d ,胰岛G细胞面数密度增高 ,与正常或盐水组相比P <0 0 5。D细胞面数密度于 4d增加 ,P <0 0 5。　结论　成年大鼠胰岛细胞呈胃泌素免疫反应阳性 ;胰岛G细胞和D细胞可能以内分泌或旁分泌调节的途径间接或直接参与大鼠实验性胃溃疡修复的过程。     

大鼠实验性胃溃疡期间胰岛A、B细胞酶组织化学研究

用成年雄性Wistar大鼠65只,分溃疡实验组、盐水对照组和空白对照组。在无菌条件下,将0.01 ml冰醋酸注入动物胃粘膜下层,造成实验性胃溃疡;盐水组模拟手术,注入0.01ml生理盐水;空白组为未经任何处理的正常大鼠。3组动物在相同条件下饲养,在手术后2～28d,分7批取材,取出胰尾进行酶组织化学观察。盐水组:A细胞在手术后2～4 d,AlP活性减弱,5～Nase活性增强,10 d恢复;B细胞在手术后2～4 d,AcP及5-Nase活性增强,ATPase活性减弱,10 d基本恢复。溃疡组:A细胞在手术后2～4d酶活性变化与盐水组相同。手术后6d,AlP、ATPase、SDH、LDH、G-6-PD及α-GPD活性均显示出不同程度增强,至手术后28 d恢复;B细胞在手术后21 d的变化与盐水组基本一致,但手术后4 d,AcP、5-Nase、SDH及LDH活性均减低,21 d恢复。本文实验结果提示,在大鼠实验性胃溃疡期间,胰岛A、B细胞共同参与了机体自然抗病过程。     

大鼠实验性脾虚证胃粘膜生长抑素mRNA原位杂交研究

为探讨脾虚证时生长抑素分泌失常的机理，用Ｗｉｔａｒ雄性大鼠２４只，分为正常对照组，实验性脾虚组，自然恢复组和中药治疗组。４组动物同时片死，取胃制成恒冷箱切片，以地高辛标记的生长抑素ｃＲＮＡ为探针，用原位杂交法显著胃粘膜Ｄ细胞中的生长抑素ｍＲＮＡ，并对细胞内杂交信号进行了是微分光光度计测定。     

肝部分切除后再生期间胰岛细胞的免疫组织化学研究

成年雌性大鼠50只,分为肝部分切除组、假手术组和正常对照组。手术后d 1、2、3、6、14分批取胰尾。石蜡切片用免疫组织化学PAP法,分别显示含胰岛素的B细胞、含C肽的B细胞、含高糖素的A细胞和含生长抑素的D细胞,观察肝再生期间胰岛B、A和D细胞激素分泌活动的变化。根据胰岛细胞内免疫反应物含量不等,将胰岛细胞分泌活动分成3级:+、++和+++,分别计算各级胰岛细胞所占的百分比,作为判断胰岛细胞激素分泌活动的指标。结果发现,肝部分切除后1～3 d B细胞释放胰岛素活动增强,术后3～6 d转为胰岛素的合成和/或贮存加强。术后1～3d,A细胞逐次增强高糖素的释放。此时,D细胞的释放活动却减弱。至术后d 6,A细胞分泌活动已趋正常,但D细胞增强生长抑素的释放。至术后d 14,胰岛细胞的激素分泌活动均恢复到正常水平。胰岛B细胞和A细胞激素分泌活动的变化,与肝再生过程呈现密切而平行的关系。D细胞的变化则可能反映出对B细胞和A细胞内分泌活动的调控作用。     

脑损伤后大鼠胰岛B、D细胞和血糖含量的变化

脑损伤后高血糖现象愈来愈受到人们的重视。Sarrat提出海马与胰岛之间存在密切的关系。但脑损伤后大鼠胰岛B、D细胞的变化尚未见报道。本实验通过脑损伤大鼠模型，观察脑损伤后大鼠胰岛B、D细胞的变化，旨在探讨脑损伤对胰岛B、D细胞分泌的影响。     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间胃窦粘膜G、D细胞变化的免疫组织化学研究

本实验用成年雄性Wistar大鼠53只,分为溃疡组、盐水对照组和正常对照组。在手术后4、10,14、21及28天分批取材。用Sternberger PAP法进行免疫组织化学染色,分别显示胃窦粘膜胃泌素细胞(G细胞)和生长抑素细胞(D细胞),观察大鼠实验性胃溃疡自愈期间,G和D细胞的形态变化,并进行了细胞计数和统计学分析。本文结果表示,溃疡组G细胞数量在术后10至14天明显增多(P<0.01),21、28天趋于减少,但仍高于对照组。有些G细胞排列成群,密集呈明显带状。正常时G细胞分布在幽门腺的中、下1/3处,而溃疡组可见有些G细胞分布在腺的上部。D细胞数量仅在术后10天增多(P<0.01),与正常对照组相比差异显著。用免疫组织化学双重染色法,可见G细胞和D细胞之间存在着形态上的接触。溃疡自愈期间,G/D细胞比值未见明显改变。本实验结果提示,胃窦粘膜局部G、D细胞的变化和大鼠实验性胃溃疡自愈修复之间有着一定的联系。     

大鼠实验性腹膜炎自愈过程中垂体远侧部ACTH细胞和TSH细胞变化的定量研究

用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠３６只，分为实验组和对照组，对照组动物不做任何处理，实验组动物腹腔注射无菌松节油造成急性非特异性腹膜炎。用免疫组织化学、图像分析和形态计量方法研究了大鼠实验性腹膜炎自愈过程中垂体远侧部ＡＣＴＨ细胞和ＴＳＨ细胞的变化。结果表明，注射后第１ｄ和第３ｄ，ＡＣＴＨ免疫反应细胞的面数密度增大，免疫反应增强（Ｐ＜０．０１）；ＴＳＨ免疫反应细胞面数密度无变化，但在注射后的第３ｄ，ＴＳＨ细胞免疫反应减弱（Ｐ＜０．０５）。第５ｄ，ＡＣＴＨ细胞免疫反应稍有增强、面数密度稍有增大，但同对照组相比无显著性差异（Ｐ＜０．０５）。注射后第７ｄ，ＴＳＨ细胞免疫反应增强（Ｐ＜０．０５）。注射后第１０ｄ，ＡＣＴＨ细胞和ＴＳＨ细胞的面数密度和免疫反应均恢复正常。本研究结果提示实验性腹膜炎自愈过程中，ＡＣＴＨ细胞功能增强而ＴＳＨ细胞功能被抑制并参与了炎症自愈的调节。     

脾虚胃溃疡大鼠分裂原激活的蛋白激酶信号传递分子的研究

目的探讨脾虚证时分裂原激活的蛋白激酶（MAPK）信号传导通路中信号分子表皮生长因子（EGF）、胞外信号调节激酶（ERK）的变化及加味四君子汤治疗脾虚证的机理.方法HE染色、免疫组织化学反应、免疫印迹法.结果脾虚胃溃疡大鼠下颌下腺颗粒曲管细胞内EGF阳性反应产物的含量增加,胃黏膜磷酸化的ERK减少,胃溃疡愈合延迟;经过加味四君子汤治疗后,上述异常变化得到纠正. 结论EGF信号传递分子表达的变化可能是脾虚胃溃疡的发病机理之一,加味四君子汤能通过纠正这些变化而发挥治疗作用.     

大鼠实验性胃溃疡自愈过程中胃窦粘膜5－HT免疫反应细胞变化的定量研究

用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠１０２只，分为实验性胃溃疡组、盐水对照组和正常对照组。在溃疡４、６、１０、１４、２１及２８ｄ分批处死取材，用免疫组织化学ＰＡＰ法显示胃窦粘膜的５－ＨＴ细胞。在光镜下观察胃溃疡自愈过程中，５－ＨＴ阳性细胞的形态和数量变化。结果表明，溃疡组５－ＨＴ细胞数密度在溃疡４～２８ｄ时明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；盐水组在第４ｄ时亦出现增高趋势（Ｐ＜０．０ｌ），但第６ｄ后基本恢复正常。与盐水组比较，溃疡组５－ＨＴ细胞的数密度在各时间点明显高于盐水组（Ｐ＜０．０ｌ）。因而提示：胃窦粘膜５－ＨＴ细胞参于了大鼠实验性胃溃疡自愈过程中的调节作用。