HTNV重组核蛋白及其单抗建立HFRS-MacELISA试剂研究

[目的]利用重组汉坦病毒核蛋白及其单克隆抗体的酶标记物建立IgM捕获ELISA诊断试剂.[方法]制备、纯化重组核蛋白抗原和抗核蛋白单抗并进行辣根过氧化物酶标记,在抗人μ链包被板中结合四甲基联苯胺一过氧化氢(TMB/H2O2)酶底物系统,从血清中检测肾综合征出血热早期特异性IgM抗体,并与免疫荧光抗体法(IFA)进行比较.[结果]检测用经典免疫荧光抗体法确认的42份阳性血清和42份阴性血清,结果2种试剂检测结果差异无统计学意义.[结论]用重组汉坦病毒核蛋白及其单克隆抗体的酶标记物建立IgN捕获ELISA诊断试剂可用于肾综合征出血热的早期IgM抗体检测.     

IgM捕捉ELISA检测肾综合征出血热试剂盒研制

目的 开发可靠、稳定、方便的肾综合征出血热诊断试剂。方法羊抗人μ链抗体包被聚苯乙烯酶标板，纯化抗汉坦病毒核蛋白单克隆抗体，并用辣根过氧化物酶标记后与纯化的汉坦病毒汉滩型（HTNV）核蛋白抗原一起使用作示踪剂，结合四甲基联苯胺-过氧化氢（TMB／H2O2）酶底物系统，制成检测肾综合征出血热早期特异性IgM抗体捕捉ELISA试剂盒。结果与间接ELISA试剂同步检测46份出血热病人血清和46份正常人血清进行对比，2种试剂检测结果完全相符，特异性、稳定性和重现性好。结论重组抗原IgM捕捉ELISA检测试剂盒敏感、可靠，方便基层医院和门诊使用，可用于肾综合征出血热的早期诊断及监测。     

抗体制备ELISA试剂诊断肾综合征出血热

目的研究汉坦病毒重组抗原及其单克隆抗体制备双抗夹心酶联免疫吸附（ELISA）试剂早期诊断肾综合征出血热（HFRS）.方法将汉坦病毒76118株S1.3kb基因克隆于pET28a质粒,诱导大肠埃希菌表达出48kd的汉坦病毒核蛋白抗原.以此抗原免疫Balb/c小白鼠,取其B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选阳性杂交瘤细胞株,小鼠腹腔接种,制备单克隆抗体.用重组抗原及其单克隆抗体,制备ELISA诊断试剂,并与美国产汉坦病毒重组抗原ELISA诊断试剂和间接免疫荧光法（IFA）比较.结果自产重组抗原及其单克隆抗体制备的双抗夹心ELISA试剂与美国产抗原ELISA试剂在87例HFRS和56例非HFRS诊断中完全吻合.结论自产ELISA试剂可用于早期诊断HFRS,且意义重大.     

双抗原夹心法ELISA在肾综合征出血热诊断中的应用

目的建立一种敏感、特异的检测肾综合征出血热(HFRS)血清总抗体的双抗原夹心法ELISA。方法应用重组汉坦病毒(HV)NP抗原e1.3S作为包被抗原和e6-119-HRP作为酶标抗原建立双抗原夹心法ELISA,检测血清总抗体,并与间接免疫荧光法(IFA)相比较。结果共检测188份人血清和378份鼠血清标本,2种方法的总符合率为97.70%。以IFA为参照标准,双抗原夹心法ELISA的敏感性为97.54%,特异性为97.87%。结论双抗原夹心法ELISA检测HFRS血清总抗体具有很高的敏感性和特异性,适用于大规模的流行病学调查。     

肾综合征出血热抗体快速诊断试剂盒的应用研究

[目的]评估所研制的肾综合征出血热(HFRS)抗体快速诊断试剂盒在临床诊断和血清流行病学调查中应用的可行性.[方法]在6个不同疫区省份应用HFRS快速诊断试剂盒(胶体金法)检测患者血清中IgM和IgG抗体.在福建省抽选有代表性的18个县市作为调查地区,用双抗原夹心ELISA法检测鼠血清中抗汉坦病毒(HV)抗体,分析鼠间HFRS流行情况.[结果]此试剂盒可同时检测HFRS患者血清中IgM和IgG抗体,已通过国内6省的临床应用评价.以间接免疫荧光试验(IFA)及ELISA为参照标准,其敏感性为98.1%,特异性为97.9%,总符合率为98.0%;福建省HFRS疫区主要以家鼠型为主,主要分布在闽北及东南沿海地区.[结论]HFRS抗体快速诊断试剂盒提供了早期快速检测的新方法,已成为商品化并向全国推广.双抗原夹心法ELISA可用于监测鼠间带病毒状况和人间疫情动态,为控制HFRS的流行提供依据.     

巨细胞病毒gp52蛋白表达与应用

目的 构建表达巨细胞病毒(CMV)gp52蛋白抗原的重组质粒及工程菌,获取纯化的gp52蛋白抗原.方法 采用PCR技术,克隆表达CMV gp52重组蛋白,利用产物建立IgM捕获ELISA方法鉴定其抗原性及实用性.结果 表达纯化的gp52蛋白纯度＞95%,经酶标记建立IgM捕获ELISA方法,检测35份抗巨细胞病毒IgM阳性血清和35份阴性血清,用酶标记gp52蛋白建立的捕获ELISA法阳性检出率97.1%,阴性检出率100%,与意大利SORIN公司试剂盒检测结果比较,差异无统计学意义(P＞0.05);其中1份CMV-IgM阳性血清1:16稀释后仍能与抗原反应,表明gp52蛋白抗原表位有较好的抗原特异性.结论 高效表达纯化的gp52蛋白抗原性强,利用其建立的IgM捕获ELISA方法,可用于检测巨细胞病毒抗体.     

广西肾综合征出血热宿主动物及其病毒感染状况

目的调查广西壮族自治区（广西区）肾综合征出血热（HFRS）宿主动物及其自然感染汉坦病毒状况。方法用夹夜法在室内及室外捕鼠,捕获鼠经分类鉴定后无菌取血清及肺组织,用ELISA法检测血清汉坦病毒抗体及肺组织抗原,对汉坦病毒抗原阳性的肺组织标本用RT-PCR检测汉坦病毒核酸及分型。结果 2006-2008年共捕获宿主动物17种1984只,以小型啮齿动物为主,宿主动物感染汉坦病毒总抗体阳性率为14.51%;褐家鼠肺组织汉坦病毒抗原阳性标本6份,经核酸检测和测序证实为汉城型病毒。结论广西区广泛存在以褐家鼠为主要宿主的HFRS家鼠型疫源地,并存在汉城型汉坦病毒的流行。     

登革病毒抗体检测方法的比较研究

[目的]针对目前实验室检测抗登革病毒IgG和IgM抗体的常规方法间接免疫荧光试验(IFA)操作烦琐,需要使用昂贵的荧光显微镜的缺点,研究1种简便、敏感、特异的检测登革病毒特异性IgG、IgM抗体的方法.[方法]分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫斑点试验(DIBA)、斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)检测44份可疑登革热患者血清抗登革病毒IgG抗体,与间接免疫荧光试验(IFA)作一致性检验,keppa统计量值分别为1.0938、1.1979、1.0557,表明实验结果重现性极好.分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、IgM抗体捕获酶联免疫吸附试验(MacELISA)、斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)检测44份可疑登革热患者血清抗登革病毒IgM抗体,与间接免疫荧光试验(IFA)作一致性检验,kappa统计量值分别为1.0537、1.0554、1.0552,表明实验结果重现性极好.     

重组抗原的IgM捕捉ELISA在肾综合征出血热诊断中的应用

用原核表达的汉坦病毒７６１１８株核蛋白为夹心抗原,组合抗人μ链多克隆抗体和酶标抗汉坦病毒单克隆抗体,建立了ＩｇＭ捕捉法ＥＬＩＳＡ,用以检测６１０份疑似患者血清,并与免疫荧光法（ＩＦＡ）相比较。结果本方法与ＩＦＡ的阳性符合率９４１０％、阴性符合率９２８３％、总符合率９３６１％,检出率在发病５日内明显高于ＩＦＡ,６至３０日无区别,３０天后开始下降,检出病例的月分布与发病规律相符。表明重组核蛋白抗原的ＩｇＭ捕捉ＥＬＩＳＡ能够准确早期诊断ＨＦＲＳ。     

巨细胞病毒gp52蛋白原核可溶性表达与应用

目的 生物工程方法在原核系统内可溶性表达巨细胞病毒gp52蛋白并进行纯化,获得可以用于检测巨细胞病毒特异性抗体的重组抗原. 方法 利用PCR扩增获得巨细胞病毒gp52核酸序列,然后克隆至pET-DsbC核融合表达载体中,在原核系统进行诱导表达并纯化,用Western blot和ELISA检测其抗原性及实用性. 结果 表达纯化的Ds-bC-gp52融合蛋白分别经酶标记建立IgM捕获ELISA方法,检测60份抗巨细胞病毒IgM阳性血清和60份阴性血清.其中用酶标记DsbC-gp52蛋白建立的捕获ELISA法阳性检出率达96.6％,阴性检出率100％. 结论 融合蛋白DsbC-gp52在大肠杆菌中主要以可溶性表达形式存在,获得的高纯度融合蛋白抗原性和特异性强,利用其建立的IgM捕获ELISA方法,可用于临床检测风疹病毒的早期感染.     

对医院护理管理队伍建设的几点思考

文章分析了当前医院护理管理队伍存在的主要问题：知识结构不合理；专业思想不纯正；接受继续教育不足：工作效能低下。提出了建设高素质护理管理人才队伍的思路：严格标准，搞好选才；加强思想教育和引导；加大培养力度；建立科学考评和激励机制；完善人才合理流动措施；合理编制，突出效率。     

医学科技成果信息资源网络开放利用的原则探析

医学科技成果信息资源网络开放利用，为资源的开放共享创造了良好条件，它使医学科技信息得到了高效传播和最大利用。网络开放利用医学科技成果信息资源，利用的主体和核心是其信息内容。信息内容是网络用户从中提取知识和所需资料的主要来源，同时也是信息破坏者发动攻击的主要目标之一，因而，信息内容的安全是信息安全的基本问题，主要包括信息内容的规范性、完整性与真实性、知识产权保护与利用的合理性等。要做好这些工作，应该遵循相应的原则和要求。     

政府公共财政支出分配公平性研究进展

政府公共财政支出是社会再分配的一种形式，其目的是促进社会公平。因此，政府的公共财政支出应该具有较强的目标针对性，应该向社会贫困人群倾斜，使其从中受益。本文通过查阅国内外政府公共财政支出分配公平性的相关文献资料。阐述了相关研究的进展情况，井着重探讨了政府公共财政支出分配公平性的内涵、研究范围、测算方法和研究意义。以及实际研究中存在的问题，最后提出我国政府公共财政支出分配公平性的研究方向和需要进一步完善的地方。     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。