不同浓度淫羊藿浸泡种植体对骨结合影响的实验研究

目的 :通过比较种植体表面淫羊藿苷载药浓度对骨结合的影响,探究种植体植入时,淫羊藿苷加载的最适宜浓度。方法:将事先制备好的36枚种植体随机分成6组,分别浸泡于对照组及用无水乙醇配制的20、40、60、80、100 mg/L的淫羊藿苷溶液中,随机植入18只家兔股骨内。于第3周末进行荧光四环素(50 mg/Kg)肌肉注射,4周时处死实验动物。通过大体、硬组织切片及旋出扭矩测试,进行比较分析。结果:用60~80 mg/L淫羊藿苷溶液处理过的种植体,其成骨量及骨结合水平优于其他浓度组。结论:淫羊藿苷能促进成骨,在一定浓度内其成骨作用与药物浓度呈正相关。而高浓度的淫羊藿苷则能抑制成骨。     

传统中药淫羊藿苷促骨生成作用的研究进展

<正>因感染、创伤、骨肿瘤原因导致的大范围颌骨缺损,临床治疗颇具困难[1-2]。至目前为止,最理想的骨修复方式还是自体骨移植,但其供需骨丧失和二次手术等缺陷仍是难以逾越的障碍[3]。为了解决这一难题,骨组织工程应运而生,与此同时自体局部的多潜能细胞的移植被广泛地用在骨组织工程中[4]。BMPs(骨形成蛋白)虽然已经广泛地被应用于骨再     

淫羊藿苷对人牙周膜细胞增殖及骨向分化的影响

目的：探讨淫羊藿苷对人牙周膜细胞增殖及骨向分化的影响,为淫羊藿苷在治疗牙周病方面的应用提供一定依据。方法：体外培养人牙周膜细胞,矿化诱导条件下将第3代细胞与10～0.001mg/L,6个浓度的淫羊藿苷作用,通过噻唑蓝（MTT）比色法、ALP活性测定及BSP表达水平,反应其对人牙周膜细胞增殖及分化的影响。结果：作用24h,各药物浓度均能促进人牙周膜细胞增殖（P〈0.05）。作用48h,1～0.001mg/L组可促进人牙周膜细胞增殖（P〈0.05）。作用72h,0.1～0.001mg/L组可促进人牙周膜细胞增殖（P〈0.05）,10mg/L组抑制人牙周膜增殖（P〈0.05）;作用72h,1～0.001mg/L组可促进人牙周膜碱性磷酸酶（ALP）活性（P〈0.05）;作用72h,0.1～0.001mg/L组的BSP表达水平较对照组显著增加（P〈0.05）。结论：淫羊藿苷在一定浓度范围内可促进人牙周膜细胞增殖及骨向分化。     

淫羊藿苷、黄芩苷和大黄素联合作用对体外骨吸收的影响

目的研究淫羊藿苷、黄芩苷和大黄素单独及联合作用对体外骨吸收的影响。方法将从新生兔长骨分离的细胞与牙本质磨片共培养,建立体外骨吸收模型,并加入白细胞介素(IL)-1β及淫羊藿苷0.01μg/ml、黄芩苷0.01μg/ml、大黄素10μg/ml或其等比组合进行干预,动态观察并测量吸收陷窝的数量和面积。结果分离的细胞与牙本质片共同培养24 h后,牙本质片上出现少量吸收陷窝。体外共培养10 d,加入IL-1β的阴性对照组的陷窝数量和面积大于空白对照组(P<0.05)。同时加入提取物的各组陷窝数量和面积均小于阴性对照组(P<0.05)。其中,淫羊藿苷组、黄芩苷组和大黄素组3组之间无显著差异(P>0.05),而组合组陷窝数量和面积均小于上述3组(P<0.01)。结论淫羊藿苷0.01μg/ml、黄芩苷0.01μg/ml、大黄素10μg/ml等比组合可抑制IL-1β诱导的骨吸收。     

淫羊藿苷对人牙周膜细胞增殖和骨保护素mRNA表达的影响

目的：研究淫羊藿苷对人牙周膜细胞（periodontal ligament cells，PDLCs）增殖和骨保护素（osteoprotegerin，OPG）mRNA表达的影响。方法：体外培养人PDLCs，用MTT法检测不同浓度的淫羊藿苷（0．001、0．01、0、1μg／mL）、不同时间（24、48、72、96h）作用下人PDLCs的增殖水平；RT-PCR检测OPG mRNA的表达。结果：淫羊藿苷（0、001-0．1μg／mL）对人PDLCs增殖和OPG mRNA表达具有促进作用（P〈0．01），0．01μg／mL浓度作用最明显。结论：淫羊藿苷能够促进人PDLCs增殖和OPG mRNA表达。     

淫羊藿苷对小鼠骨髓腔中成骨和成脂分化作用的研究

目的 :通过建立小鼠骨质疏松模型,研究口服淫羊藿苷(Icariin,ICA)对小鼠骨髓腔中成骨分化和成脂分化中的作用。方法:将36只小鼠随机分为3组,分别为假手术组(SHAM组)、卵巢切除组(OVX组)和卵巢切除并灌服淫羊藿苷组(ICA组)。ICA组按每kg体质量25 mg的剂量给予淫羊藿苷每日灌服,SHAM组和OVX组每日给予等体积0.9%氯化钠溶液灌服,于术后9周收样。取左侧股骨和胫骨进行切片染色,提取右侧骨组织中mRNA和蛋白,分析成骨和成脂基因和蛋白的变化。结果:①术后5周,OVX组体重显著高于SHAM组和ICA组(P<0.05)。②HE染色显示,与OVX组相比,ICA组骨髓腔中骨小梁生成增加了50%,脂肪细胞生成减少了70%。③q-PCR和Western blot结果分析显示,与OVX组相比,ICA组骨组织中成骨相关的基因和蛋白表达量显著升高,而成脂相关的基因和蛋白表达量显著降低。结论:口服淫羊藿苷可以通过促进骨吸收并抑制骨髓腔中脂肪细胞的形成,从而对预防和治疗骨质疏松具有重要的意义。     

淫羊藿苷口服给药对骨质疏松牙周炎小鼠牙槽骨吸收的影响

目的:研究口服淫羊藿苷（ICA）对骨质疏松小鼠牙周炎引起的牙槽骨吸收的抑制作用。方法:3月龄、雌性、C57BL/6J小鼠随机分为3组,即正常组（SHAM组）、卵巢切除+口腔涂布牙龈卟啉单胞菌（Pg）+淫羊藿苷组（OVX+Pg+ICA）、卵巢切除+Pg口腔涂布组（OVX+Pg）。小鼠适应性喂养1周,第2周进行双侧卵巢切除术,诱导小鼠骨质疏松形成。从第4周开始,对小鼠牙周涂布Pg,1次/d,连续1周。第12周收集左侧下颌骨进行固定切片及染色,分析各组之间牙槽骨吸收高度的差异。收集右侧下颌骨进行亚甲蓝染色,分析各组间牙槽骨吸收面积的差异;收集双侧上颌骨牙周组织蛋白,分析成骨相关蛋白的表达差异。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析。结果:小鼠股骨及牙周组织切片染色显示,成功建立了小鼠骨质疏松牙周炎模型。对牙槽骨吸收距离和面积的测量分析显示,相比于OVX+Pg组,口服淫羊藿苷可显著减少釉-牙骨质界-牙槽嵴顶（CEJ-ABC）的距离及颊舌侧牙槽骨吸收面积（P<0.05）;Western免疫印迹显示,相比于OVX+Pg组,OVX+Pg+ICA组中Runx2、OSX、OCN及OPN蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。结论:口服淫羊藿苷在预防小鼠骨质疏松发生的同时,可有效减少牙周炎引起的牙槽骨吸收。     

淫羊藿与nHAC/PLA促进兔颌骨缺损修复的实验研究

目的 动态观察补肾中药淫羊藿与纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸(nHAC/PLA)以及两者共同作用在兔下颌骨缺损修复中的作用.方法 制备16只兔双侧下颌骨10mm×8mm贯穿性骨缺损模型,随机分为对照组与淫羊藿组,两组左侧缺损区不添加材料,右侧缺损处添加活性材料(nHAC/PLA),术后2、4、8、12周处死动物,分别从大体、影像学、扫描电镜、组织学方面进行观察.结果 影像学观察淫羊藿组双侧、对照组右侧2、4、8、12周缺损区密度均高于对照组左侧.电镜观察可见淫羊藿组右侧、对照组右侧各时间点骨缺损区边界新骨形成均优于左侧,淫羊藿组成骨量较对照组多.组织学观察可见淫羊藿组左侧、对照组右侧、淫羊藿组右侧各时间点骨缺损区新骨形成均优于对照组左侧,新生骨及新生血管的量增多,骨成熟度高.随着时间延长,淫羊藿组右侧、对照组右侧有大量骨样组织长入活性材料,残留材料逐渐被活跃生长的骨组织包围并替代.结论 淫羊藿在骨缺损修复期间有良好的成骨作用,nHAC/PLA复合材料在体内试验过程中,具有良好的生物相容性和骨传导性,作为框架材料可以引导再生骨向缺损内生长,两者复合有望应用于临床骨缺损修复.     

淫羊藿苷对MC3T3-E1增殖及成骨分化的影响研究

目的：研究传统中药淫羊藿的主要活性成分淫羊藿苷(icariin,ICA)对小鼠颅顶前成骨细胞(preosteoblasts in mice calvarium,MC3T3-E1)的细胞活性及成骨分化的影响。方法：筛选出ICA的最佳干预浓度,将MC3T3-E1细胞分为空白对照组及不同浓度的实验组,实验组以含10^-9、10^-8、10^-7、10^-6、10^-5 mol/L的ICA完全培养液分别处理MC3T3-E1细胞。分别于培养2、4、6 d后用CCK8试剂盒检测MC3T3-E1细胞增殖能力;于培养3、6、9 d后用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测其ALP活性;根据检测结果,分别用完全培养液、成骨诱导液、含10^-7 mol/L的ICA完全培养液处理MC3T3-E1细胞21 d后,再分别作茜素红染色。结果：与空白对照组相比,药物处理组明显抑制了MC3T3-E1细胞的增殖,但促进了MC3T3-E1细胞的ALP活性;而不同浓度的I...     

绝经后骨质疏松大鼠实验性牙周炎动物模型研究

目的:通过卵巢切除术及钢丝结扎法建立绝经后骨质疏松大鼠实验性牙周炎动物模型。方法:选用3~4月龄雌性SD大鼠16只,随机分为假手术组(SHAM)、卵巢切除组(OVX),每组8只,卵巢切除术1周后进行钢丝结扎,于实验第8周处死大鼠,通过体重、骨密度测量、血清生化检测及组织学观察对动物模型进行评价。结果:与SHAM组相比,OVX组大鼠术后体重明显增加,血清碱性磷酸酶水平显著增高,而雌二醇水平及全身骨密度值明显降低(P<0.01)。股骨骨小梁数量减少,较为稀疏不连续。钢丝结扎侧磨牙牙龈乳头炎症明显,上皮钉突增生,牙槽嵴顶高度降低,OVX组牙槽骨呈疏松性改变,骨吸收明显高于SHAM组。结论:采用卵巢切除术及钢丝结扎法可建立绝经后骨质疏松大鼠实验性牙周炎动物模型,为探讨绝经后骨质疏松与牙周炎的相互作用及其机制提供了有效的手段。     

Effect of Enamel Matrix Derivative on Periodontal Wound Healing and Regeneration in an Osteoporotic Model

Background : Despite the worldwide increased prevalence of osteoporosis, no data are available evaluating the effect of an enamel matrix derivative (EMD) on the healing of periodontal defects in patients with osteoporosis. This study aims to evaluate whether the regenerative potential of EMD may be suitable for osteoporosis‐related periodontal defects. Methods: Forty female Wistar rats (mean body weight: 200 g) were used for this study. An osteoporosis animal model was carried out by bilateral ovariectomy (OVX) in 20 animals. Ten weeks after OVX, bilateral fenestration defects were created at the buccal aspect of the first mandibular molar. Animals were randomly assigned to four groups of 10 animals per group: 1) control animals with unfilled periodontal defects; 2) control animals with EMD‐treated defects; 3) OVX animals with unfilled defects; and 4) OVX animals with EMD‐treated defects. The animals were euthanized 28 days later, and the percentage of defect fill and thickness of newly formed bone and cementum were assessed by histomorphometry and microcomputed tomography (micro‐CT) analysis. The number of osteoclasts was determined by tartrate‐resistant acid phosphatase (TRAP), and angiogenesis was assessed by analyzing formation of blood vessels. Results: OVX animals demonstrated significantly reduced bone volume in unfilled defects compared with control defects (18.9% for OVX animals versus 27.2% for control animals) as assessed by micro‐CT. The addition of EMD in both OVX and control animals resulted in significantly higher bone density (52.4% and 69.2%, respectively) and bone width (134 versus 165μm) compared with untreated defects; however, the healing in OVX animals treated with EMD was significantly lower than that in control animals treated with EMD. Animals treated with EMD also demonstrated significantly higher cementum formation in both control and OVX animals. The number of TRAP‐positive osteoclasts did not vary between untreated and EMD‐treated animals; however, a significant increase was observed in all OVX animals. The number of blood vessels and percentage of new vessel formation was significantly higher in EMD‐treated samples. Conclusions: The results from the present study suggest that: 1) an osteoporotic phenotype may decrease periodontal regeneration; and 2) EMD may support greater periodontal regeneration in patients suffering from the disease. Additional clinical studies are necessary to fully elucidate the possible beneficial effect of EMD for periodontal regeneration in patients suffering from osteoporosis.     

去势法兔骨质疏松模型中下颌牙槽骨的改变

目的：去势法建立兔骨质疏松模型并观察下颌骨的改变。方法：20只雌性新西兰兔平均随机分为两组,手术组摘除双侧卵巢,对照组行假手术。检测术前及术后3m、6m血清OC与TRAP水平、股骨与腰椎BMD。术后6m处死实验用兔,下颌骨脱矿后行组织学染色观察颏孔附近骨组织形态变化,测量下颌中切牙内侧骨层厚度及其下方内侧骨面积比。结果：手术组术后3m、6m的OC与TRAP水平均高于假手术组。股骨、腰椎BMD术后3m组无统计学差异,术后6m手术组低于假手术组。术后6m手术组松质骨内骨小梁变细,排列稀疏甚至消失。下颌中切牙内侧骨层厚度手术组为0.52mm±0.16mm,假手术组为0.85mm±0.14mm,两者差异显著（P〈0.01）;中切牙内下方骨面积比为51.7±11.6%,假手术组为82.6±9.2%,两者差异显著（P〈0.01）。结论：去势法兔骨质疏松模型成熟可靠,下颌牙槽骨表现出明显的骨质疏松样改变。     

XW630促进去势大鼠骨组织成骨作用的实验研究

目的:探讨抗骨质疏松新药XW630在去势大鼠骨组织成骨中的作用。方法:3月龄SD雌性大鼠36只,随机分为4组,即Sham组、OVX组、OVX加雌酚酮组和OVX加XW630组,每组3只。术后30、60、90 d各处死1组动物, 取两侧胫骨作HE和SEM组织学观察,取1侧股骨作三点弯曲力学强度测试。结果:HE和SEM观察发现,OVX组胫骨干骺端术后30 d即呈骨丢失状态,并持续至整个观察期。应用雌酚酮和XW630治疗后,干骺端骨小梁出现不同程度的骨修复现象,整个观察期内XW630组成骨活动明显较雌酚酮治疗组活跃。整个观察期内,OVX组股骨三点弯曲强度呈下降趋势,与Sham组存在显著性差异(P<0101),两个治疗组骨强度则呈上升趋势,与OVX组存在显著性差异(P<0105和P<0101)。结论:XW630能有效地促进去势大鼠骨组织的成骨和预防骨质疏松性骨折的发生。     

唑来膦酸系统治疗对骨质疏松时人工骨植骨愈合及种植体骨结合的影响

目的：研究唑来膦酸系统治疗对骨质疏松时人工骨植骨愈合及其内种植体骨结合的影响。方法：30只雌性SD大鼠随机分成3组：假手术组（A）、骨质疏松组（B）和唑来膦酸治疗组（C）。A组接受假手术,B、C组行双侧卵巢切除术。术后12周在大鼠右侧胫骨近中干骺端植入羟基磷灰石涂层种植体,并于种植体旁制备骨缺损,行Bio-oss骨粉同期植入术;C组给予唑来磷酸钠0.2mg/kg/3周肌注,A、B组注射生理盐水。种植术后第4周、12周分2批处死动物,标本制作不脱钙切片检测。结果：种植术后4周时,B组皮质骨厚度（TCB）、种植体骨结合率（IBCR）、新生骨量（NBV）、Bio-oss骨粉包被率（ERBP）均显著低于A组和C组（P〈0.01）;而C组除TCB外,其它参数则均显著高于A组（P〈0.01）。12周时,B组各项参数均显著低于A组和C组（P〈0.01）,C组除TCB略低于A组外（P〈0.05）,其它参数与A组相似（P〉0.05）。结论：实验性骨质疏松可延迟人工骨植骨愈合,降低种植体骨结合率;唑来膦酸系统应用则可拮抗骨质疏松的负面影响,促进植骨愈合,使种植体骨结合率增加。     

Early Healing of Hydroxyapatite‐Coated Implants in Grafted Bone of Zoledronic Acid–Treated Osteoporotic Rabbits

Background: Resorption of grafted bone and delayed osseointegration of implants are main problems associated with alveolar bone augmentation in dental implantology, especially for patients with osteoporosis. The aim of this study is to investigate the early healing response of implants to systemic treatment of zoledronic acid (ZA) in autogenous grafted iliac bone of osteoporotic rabbits. Methods: Ovariectomy (OVX) or sham operation was performed in 46 rabbits, and osteoporotic changes were verified in animals receiving OVX 3 months later. The remaining animals were divided into three groups (n = 12): sham, OVX, and OVX with ZA treatment (ZA group). Autogenous iliac bone grafting was performed in bilateral tibiae, and hydroxyapatite‐coated titanium implants were simultaneously placed into the grafted bone. The animals were sacrificed 2 and 8 weeks later for examination. Results: At both time points, systemic treatment of ZA efficiently promoted bone healing of implants in grafted bone, and all histologic and microcomputed tomography bone indices, including mineralized bone volume, implant–bone contact ratio, connectivity density, trabecular thickness, and trabecular number, were significantly increased in the ZA group compared with the OVX‐only group (P <0.01); implant–bone contact rates in the ZA group were even restored to levels similar to those of sham‐operated animals (P >0.05). Furthermore, biomechanical testing demonstrated that removal torque of implants was significantly increased in the ZA group compared with the OVX group (P <0.01). Conclusion: Systemic treatment with ZA could efficiently promote early bone healing of implants in autogenous grafted bone of osteoporotic rabbits by increasing early osseointegration and fixation of implants.     

XW630促进去势大鼠骨组织成骨作用的实验研究

目的 :探讨抗骨质疏松新药XW6 30在去势大鼠骨组织成骨中的作用。方法 :3月龄SD雌性大鼠 36只 ,随机分为 4组 ,即Sham组、OVX组、OVX加雌酚酮组和OVX加XW6 30组 ,每组 3只。术后 30、6 0、90d各处死 1组动物 ,取两侧胫骨作HE和SEM组织学观察 ,取 1侧股骨作三点弯曲力学强度测试。结果 :HE和SEM观察发现 ,OVX组胫骨干骺端术后 30d即呈骨丢失状态 ,并持续至整个观察期。应用雌酚酮和XW6 30治疗后 ,干骺端骨小梁出现不同程度的骨修复现象 ,整个观察期内XW6 30组成骨活动明显较雌酚酮治疗组活跃。整个观察期内 ,OVX组股骨三点弯曲强度呈下降趋势 ,与Sham组存在显著性差异 (P <0 0 1) ,两个治疗组骨强度则呈上升趋势 ,与OVX组存在显著性差异 (P <0 0 5和P <0 0 1)。结论 :XW6 30能有效地促进去势大鼠骨组织的成骨和预防骨质疏松性骨折的发生。     

神经系统对骨代谢的影响

骨代谢和骨的内稳态是由骨吸收和骨形成两个过程共同维持的。近年来,越来越多的研究发现,神经系统参与骨发育、骨代谢的调节,以及骨的修复与再生。神经系统对骨代谢的调控主要是通过其分泌的神经递质及其广泛的外周神经突触实现的。在此,我们针对神经系统如何调节骨发育和骨代谢这一问题加以综述。主要内容包括交感神经、感觉神经和中枢神经系统的作用;血清素、瘦素、P物质、降钙素基因相关肽、SEMA等神经递质的作用机制。     

二膦酸盐对骨质疏松大鼠下颌牙槽骨牙本质基质蛋白1表达的影响

目的 :观察二膦酸盐对去卵巢骨质疏松大鼠下颌牙槽骨内破骨细胞以及牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein1,DMP1)表达的影响。方法 :取6月龄SD大鼠30只,随机分为假手术组(Sham)、去卵巢模型组(OVX)和二膦酸盐药物治疗组(RIS),每组10只。Sham组大鼠仅术中暴露卵巢不切除,OVX组大鼠行"双侧卵巢切除术+生理盐水皮下注射",RIS组行"双侧卵巢切除术+利塞磷酸钠(2.4μg/kg)皮下注射"。术后3个月取各组大鼠下颌骨常规脱钙,甲苯胺兰染色观察下颌第一磨牙(M1)区域牙槽骨组织学结构,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察M1区域牙槽纵隔破骨细胞的骨吸收情况,免疫组化染色观察各组M1牙槽骨DMP1分布表达情况,并进行相关半定量图像分析。结果:与Sham组相比,OVX组TRAP阳性细胞数增加;而较OVX组而言,RIS组TRAP阳性细胞数显著减少(P<0.05)。免疫组化染色显示,各组DMP1不仅表达在牙槽骨骨细胞内,牙槽间隔的松质骨骨基质、牙周韧带中均可见其表达,OVX组M1牙槽骨DMP1表达较Sham组减少(P<0.05),而RIS组表达较OVX组有升高。结论:二膦酸盐能减少骨质疏松大鼠下颌牙槽骨破骨细胞数量,并上调DMP1表达,从而影响下颌牙槽骨矿化。     

雷奈酸锶对骨质疏松时种植体骨结合的影响

目的:研究雷奈酸锶治疗对骨质疏松时种植体骨结合的影响。方法:36只雌性SD大鼠随机分成骨质疏松组(A组,行双侧卵巢手术)、雷奈酸锶低剂量治疗组(B组,同A组手术)、 雷奈酸锶高剂量治疗组(C组,同A组手术)(n=12),骨质疏松模型造模成功后,在SD大鼠右侧胫骨近中干骺端植入羟基磷灰石涂层种植体,同时B组给予雷奈酸锶450 mg·kg^-1·d^-1口服,C组给予雷奈酸锶900 mg·kg^-1·d^-1口服,种植术后12周,处死动物,标本制作不脱钙硬组织标本,行形态学、显微CT观察及骨计量学检测。 结果:种植术后12周,B、C组种植体周骨密度、种植体骨结合率、新生骨量均显著高于A组(P<0.01),但C组与B组比较,各项指标差异不显著。结论:雷奈酸锶应用可拮抗骨质疏松的负面影响,促进种植体愈合,使种植体骨结合率增加。