南京地区100例呼吸道感染患儿博卡病毒感染状况初步研究

目的:了解人博卡病毒(human bocavirus,HBoV)在南京地区呼吸道感染患儿中的致病情况?方法:选取2009年11月~2010年6月因呼吸道感染住院的患儿鼻咽吸取物标本共100份,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测HBoV的NP1基因片段,并对阳性产物进行测序,利用多功能分析软件DNAstar进行同源性分析,MEGA软件绘制遗传进化树?分析感染患儿的临床资料?结果:在100例鼻咽吸取物标本中共检测到5例阳性,阳性率为5%?DNAStar分析发现5例阳性标本之间核苷酸同源性达99.7%~100.0%,与其他国家HBoV的株同源性为99.4%~100.0%?临床资料显示这5例患儿临床症状主要表现为咳嗽?喘息?发热等,临床诊断为肺炎2例?毛细支气管炎1例?支气管炎1例及喘息性支气管炎1例?患儿经常规治疗后均痊愈出院?结论:南京地区呼吸道感染患儿中有HBoV的流行?     

人博卡病毒的研究进展

人博卡病毒(HBoV)是一种新的呼吸道致病病毒,它主要引起儿童上、下呼吸道感染,可与其他病毒合并感染,也可单独感染而致病。目前检测HBoV的方法主要是通过普通聚合酶链反应技术。本文就HBoV的发现、基因组结构特征及其流行病学特征等方面进行综述。     

Taqman PCR检测人博卡病毒的阳性率

目的：建立核酸特异、快速、敏感的Taqman探针实时定量PCR检测方法筛选疑似人博卡病毒（HBoV）感染者鼻咽拭子临床样本中的阳性样本。方法：比对编码HBoV—sh9的基因序列,选取保守区序列设计引物和探针,建立Taqman PCR检测人博卡病毒的阳性率的方法,进行特异性实验,检测214例临床样本。结果：所建立的Taqman PCR方法可以用于检测人博卡病毒的阳性率,对所收集得到的214例急性上呼吸道感染者的咽拭子标本进行检测,结果显示,荧光定量PCR检测出8例阳性,其阳性率为3．74％。结论：建立了HBoV TaqMan探针实时定量PCR检测方法,可以快速灵敏的检测出阳性人博卡病毒,为临床治疗提供快速可靠的诊断依据。     

广州地区流感病毒和人博卡病毒感染的流行病学调查

【目的】 调查2010-2011年广州地区发热呼吸道感染病人的流感病毒(IFV)和人博卡病毒(HBoV)的流行状况和流行特点。【方法】 采集2010-2011年广州市5家哨点医院共3 460例符合条件的有发热伴呼吸道感染症状患者的咽拭子标本,同时进行相关临床信息的收集和分析,采用普通和巢式PCR方法检测IFV和HBoV的核苷酸,分析IFV和HBoV的流行情况和时间、人群分布特点,对IFV和HBoV均为阳性的样本进一步进行副流感病毒等5种常见呼吸道感染病毒的检测,以了解多重感染的状况。【结果】 3 460例病例中,IFV和HBoV的阳性检出率分别为21.13%和1.68%;731例IFV阳性标本中,甲、乙、丙型流感病毒(FluA、B、C)的比例为558∶172∶1,其中481例(66.75%)诊断为上呼吸道感染,58例HBoV阳性病例中44例诊断为下呼吸道感染(75.86%),IFV和HBoV病毒的检出均与年龄关联,检出率最高的年龄组分别为15 ~ 34岁和0.5 ~ 1岁,IFV和HBoV的发病高峰分别为7~8月和5~6月,5例检出HBoV与IFV的混合感染,混合感染率为0.64%,其中1例为IFV、HBoV和人冠状病毒(HCoV)的三重感染,HBoV阳性的成人患者的混合感染率为50%。【结论】 2010-2011年甲型流感病毒仍是广州地区发热呼吸道症候群的主要病原之一,青壮年检测率较高,夏季为流行高峰;人博卡病毒为全年散发,5-6月发病率较高,婴幼儿中发病率较高,成人病例中人博卡病毒与流感病毒的混合感染率较高。     

四川地区儿童呼吸道感染人博卡病毒的流行特征与基因变异分析

目的 分析四川地区儿童呼吸道感染人博卡病毒（HBoV）的流行概况和临床特征,探讨HBoV四川分离株衣壳蛋白基因（VP1）变异特征。方法 收集787例呼吸道感染儿童鼻咽分泌物标本,PCR方法检测HBoV,扩增VP1基因序列全长并测序,分析核苷酸和氨基酸变异特征。结果 HBoV的检出率为8.26%(65/787),50.77%(33/65)混合感染其它呼吸道病毒。全年均有检出,主要感染＜3岁的儿童,其中男童检出率高于女童。引起的呼吸道症状主要有咳嗽、发热及咳痰。系统进化树分析表明8株四川分离株均为HBoV1基因型。碱基变异以GA+AG转换为主,非同义突变大于同义突变。结论 HBoV是四川地区儿童呼吸道感染的重要病原之一;VP1基因核苷酸序列变异以碱基转换为主;氨基酸突变位点可能与免疫逃避有关。     

新发现的呼吸道感染病原——人博卡病毒

新近发现,在世界各地都有婴幼儿因博卡病毒感染引起呼吸道炎症,甚至引起严重的呼吸道疾病。这是一种无包膜的单链DNA,属细小病毒亚科,多数细小病毒主要感染家畜并致病。导致人类感染还鲜为人知,由于人博卡病毒发现时间短,因此,对于该病毒的生物学特征、临床检测方法、感染者临床表现等诸多方面的研究报道资料还很零散。本文对人博卡病毒生物学分类、分子生物学研究、系统发育树分析、流行特征及诊断等方面等资料进行综述,希望引起同行们的关注。     

博卡病毒的研究进展

人类博卡病毒是一种无包膜的单链DNA病毒。2005年,Allander首次从患呼吸道感染的婴幼儿中分离得到该病毒。生物分类、分子生物学、系统发育树分析和流行病学等多方面综合研究表明,HBoV具有细小病毒病毒的基本特征,并与细小病毒的博卡病毒属成员结构特征相类似,从而证实HBoV为博卡病毒属的新成员。HBoV往往导致婴幼儿上、下呼吸道感染,甚至可以引起严重的呼吸道疾病。在世界各地都有博卡病毒感染的报道,但对于该病毒还知之甚少。本文从病毒生物学性状、流行特征及其诊断等方面对博卡病毒进行综述,以期引起对该病毒的关注。     

人巨细胞病毒DNA检测在小儿人巨细胞病毒感染诊断中的应用

目的 探讨小儿血液、尿液及其母亲母乳的人巨细胞病毒DNA检测结果在人巨细胞病毒感染的诊断价值。 方法 选取2017年—2018年期间在浙江大学丽水医院就诊的疑似人巨细胞病毒感染的患儿328例为研究对象。收集患儿血液、尿液和对应母乳标本,进行实时荧光定量PCR,检测人巨细胞病毒DNA载量;再将患儿血清用化学发光法检测HCMV-IgM,比较不同标本不同检测方法的阳性率。针对阳性患儿,对不同临床症状分布构成进行分析。 结果 328例患儿检测总阳性率为71.04%,男性患儿和女性患儿阳性率分别为71.02%和69.74%,差异无统计学意义(χ2=0.065,P=0.799)。血液、尿液和乳汁的人巨细胞病毒阳性率分别为49.09%、70.43%和58.23%,尿液阳性率最高,差异有统计学意义(χ2=31.147,P<0.001)。新生儿组的乳汁阳性率最高,为72.41%,28 d到1岁之间和1岁以上患儿尿液阳性率最高,各年龄组之间阳性率差异有统计学意义(P<0.05);血人巨细胞病毒DNA和血清HCMV-IgM阳性率检出率分别为49.09%(161/328)和16.16%(53/328),2种方法联合检测的阳性检出率为49.69%,对比单一血DNA检测方法,两者差异无统计学意义(P>0.05)。临床症状小于1岁患儿主要以黄疸,腹泻为主,大于1岁的患儿主要以肝损害和肺炎为主。 结论 在小儿血液、尿液及其母亲母乳HCMV-DNA的检测中,尿液HCMV-DNA对诊断患儿人巨细胞病毒有更好的临床应用价值。且尿标本留取方便、无创,易为家长和小儿接受,所以采用FQ-PCR方法对小儿尿标本进行检测能起到快速、简洁、灵敏的作用,对提高HCMV感染的诊断率有实际的临床意义,对于小月龄患儿临床应推广尿液HCMV-DNA检测。      

人博卡病毒HBoV在儿童急性肺炎患者中的检测与病情分析

【目的】 通过我们前期建立的人博卡病毒 (human bocavirus,HBoV) 感染新型检测体系,分析HBoV在银川地区儿童急性肺炎患者中的流行情况,探讨HBoV感染在儿童急性肺炎的临床意义,为临床防治提供理论依据。 【方法】 采用我们自己研发的检测策略:首先对患儿呼吸道分泌物加入裂解液直接煮沸裂解,然后以裂解产物直接作为模板进行半巢式–聚合酶链反应(hemi-nested Polymerase Chain Reaction,hemi-nested PCR)进行扩增检测。收集2012年11月至2013年10月宁夏医科大学总医院儿科病房和儿科重症室179例因急性下呼吸道感染(临床诊断为肺炎)的住院患儿童的下呼吸道分泌物,采用上述检测策略进行检测,并通过测序进行验证。针对HBoV感染的阳性病例进行流行病学(感染年龄、季节、性别)及临床特点(肺炎类型、临床表现、X线检查)分析。 【结果】 179例因急性肺炎住院儿童的下呼吸道分泌物的检测,共检出48例HBoV感染病例,阳性率为26.81% (48/179);HBoV感染的高峰主要集中于11、12、1月份。HBoV阳性病例中,年龄分布主要以2岁以下年龄段为主,阳性比例占总阳性样本的85.42%(41/48);感染的男女性别分布上分别为25.17%,20.33%,无统计学意义(P>0.05)。HBoV感染与疾病的关系上,支气管肺炎最高,33例,占HBoV阳性病例68.75%。其次,肺炎7例,占14.58%;重症肺炎5例,占10.4%。HBoV感染患儿中.主要临床表现及实验室检查为:咳嗽(91.66%),喘息(83.33%),发热(77.08%),腹泻(33.33%),肺部啰音(89.58%),胸片异常(91.66%)。HBoV存在与呼吸道细菌的共感染现象,合并细菌感染率为42.22%(19/45),其中主要以铜绿假单胞杆菌、鲍曼不动杆菌、肺炎链球菌三种最为常见。 【结论】 利用我们开发的检测体系,在179例因急性肺炎住院儿童的的检测中, HBoV的阳性检出率为26.81% (48/179),HBoV感染主要分布在冬春季节。HBoV感染阳性率在男女间无差异,2岁以内是HBoV感染的高发阶段。HBoV感染的临床病例中以支气管肺炎最为常见,HBoV与细菌存在混合感染。     

昆明地区5岁以下儿童博卡病毒和偏肺病毒感染的临床流行病学调查

目的 了解昆明地区5岁以下急性呼吸道感染患儿中人类博卡病毒(HBoV)和人类偏肺病毒(hMPV)的流行状况、混合感染情况以及主要的临床表现特点.方法 按照病例纳入标准,采集2009年9月至2010年9月在昆明地区6所不同区域医院就诊患儿的鼻咽拭子标本550份,应用多重PCR技术,检测HBoV和hMPV及其它常见引起儿童呼吸道感染的21种病原体.同时收集所有患儿的临床资料以供分析研究.采用Epidata软件创建数据库和管理数据,利用SPSS软件进行数据分析.结果 550份呼吸道感染患儿的鼻咽拭子标本检出HBoV阳性标本18份,检出率为3.3％;检出hMPV阳性标本29份,检出率为5.3％.在18例HBoV阳性的标本中,与其它病原体混合感染的有17例,占阳性标本的94.4％; 29例hMPV阳性标本中与其它病原体混合感染率为58.6％;与HBoV和hMPV混合感染的常见病原体依次有呼吸道合胞病毒、鼻病毒、甲型流感病毒和流感嗜血杆菌;HBoV及hMPV感染无性别差异;HBoV以0～1岁患儿感染率最高;hMPV感染没有明显的年龄组差异.HBoV和hMPV的检出率高峰均为秋冬季.2种病毒感染的主要临床表现均为咳嗽、发热和喘息.结论 HBoV和hMPV是昆明地区儿童急性呼吸道感染的重要病原;在昆明地区的流行季节主要为秋冬季;临床上以咳嗽、喘息和发热为主要表现.     

急性呼吸道感染患儿人类博卡病毒检测与分析

目的 探讨人类博卡病毒（HBoV）与儿童急性呼吸道感染（ARTI）的关系。方法 RT-PCR检测2006年11月-2008年4月连续2个冬春季儿科418例呼吸道感染鼻咽分泌物标本的HBoV。结果 HBoV阳性率为5．0％（21／418）。阳性者年龄在4月～5岁。下呼吸道感染HBoV阳性率11．1％（17／153）显著高于上呼吸道感染的1．5％（4／265）（χ^2=18．741,P〈0．001）。结论 HBoV是本地区冬春季儿童呼吸道感染、尤其是下呼吸道感染的的重要病原之一。     

Human Bocavirus in Iranian children with acute gastroenteritis

Background

Human Bocavirus (HBoV) infection is of worldwide distribution. There is increasing evidencethat HBoV is pathogenic for the human gastroenteric tract. However, less data are available on the role of HBoVin gastroenteritis. The present study was aimed to determine the prevalence of HBoV in children with gastroenteritis.

Methods

Real-time PCR TaqMan was used to screen 200 stool specimens that had been referred to the virologylaboratory for HBoV evaluation. All of samples were collected on viral transport media. Results:Of the 200 stool samples analyzed, 16 (8%) were positive for HBoV. Human Bocavirus positive samplesfrom patients aged between 1 to 5 years with acute gastroenteritis infection suggest a minor role of HBoVin gastroenteritis (p=0.0001).

Conclusion

The study showed a high prevalence of human Bocavirus in young children with acute gastroenteritisdiseases in Iran, suggesting that HBoV play a role in the pathogenesis of gastroenteritis.     

Detection of Human Bocavirus in Children with Acute Respiratory Tract Infections in Lanzhou and Nanjing,China

Objective The aim of this study was to explore the prevalent characteristics of HBoV1 and its co-infection.Methods PCR was used to detect HBoV1-DNA（HBoV1） and other viruses.A multivariate logistic regression model was used to explore possibility of co-detected for related viruses.Results The positivity rates in Nanjing and Lanzhou were 9.38%（74/789） and 11.62%（161/1386）,respectively（P〉0.05）.The HBoV1 positive group was younger than negative group（P〈0.05）.Seasonal differences were noted,with a higher frequency of infection in December and July.HBoV1-positive children [72.34%（169/235）] were co-infected with other respiratory viruses.Multifactorial analysis showed no correlations between HBoV1 and the clinical classification,region,gender,age,or treatment as an outpatient or in a hospital.Correlations were identified between HBoV1 infections with ADV（OR=1.53,95% CI 1.03-2.28）,RSV（OR=0.71,95% CI 0.52-0.98）,and IFVA（OR=1.77,95% CI 1.00-3.13）.Conclusions Presence of HBoV1 in nasopharyngeal aspirates did not correlate with region or gender,although the prevalence of HBoV1 was higher in younger children.There were no correlations between HBoV1 and other variables,except for the season and ADV,RSV,or IFVA infections.     

人细小病毒B19实验诊断技术研究

目的建立一种快速、准确、特异和定量检测人细小病毒B19的实验检测方法。方法以B19病毒NS1基因为靶序列,设计并合成引物和Taqman探针,优化引物与探针比例,调整镁离子浓度,建立对细小病毒B19进行荧光定量检测的实验方法。同时利用荧光定量PCR技术检测本院收集的490例孕妇血清。结果引物与Taqman探针比例为1∶4,镁离子浓度为2.5mmol/L时,反应的本底最低,荧光信号最强。该方法的灵敏度为1.0×101拷贝,有较好的特异性和重复性。检测的490例临床孕妇血清标本,人细小病毒B19DNA阳性为44例,感染率为8.9%(44/490)。结论使用Taqman探针技术的荧光定量聚合酶链反应,能够准确快速定量检测血清中的人细小病毒B19。     

氧氟沙星和环丙沙星治疗下呼吸道感染的对照研究

为评价和比较静脉用氧氟沙星和环丙沙星治疗下呼吸道感染的疗效和安全性，我们以开放随机对照方法，对75例（氧氟沙星组48例，环丙沙星组27例）下呼吸道感染病人进行研究。结果显示氧氟沙星和环丙沙星的临床有效率分别为81．3％和77．8％（P＞0．05），痰细菌清除率分别为84．1％和78．3％（P＞0．05）。氧氟沙星组和环丙沙星组分别有6例和3例病者出现不良反应，主要包括胃肠道症状、血清谷丙转氨酶轻度增高及白细胞减少等，无病者因副作用而中止治疗。     

急性下呼吸道感染儿童人偏肺病毒检测及临床研究

目的 了解潍坊地区6岁以下因急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract infection,ALRTI)住院患儿人偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)感染情况及其临床特征.方法 收集2008年10月～2009年10月因ALRTI住院患儿的鼻咽部分泌物标本245例,应用直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒(ASV)、流感病毒A和B(IVA,IVB)、副流感病毒Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ型(PIVⅠ,Ⅱ和Ⅲ)及腺病毒(ADV)常见的7种呼吸道病毒;用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测 hMPV,分析hMPV感染的临床特点及流行病学特征.结果 245例标本病毒检测阳性率为48.16%,其中hMPV阳性13例(5.31%),主要集中在冬春季;单纯hMPV感染7例,混合感染6例.性别之间的阳性率差异无显著性;hMPV检出率以0～1岁年龄组最高(9.2%),但年龄组间差异无显著性.在临床诊断中,以毛细支气管炎检出率最高(8.14%);hMPV单独感染与hMPV混合感染临床特征无明显特异性.结论 hMPV是潍坊地区6岁以下儿童ALRTI的重要病毒病原之一,可与其他呼吸道病毒合并感染.hMPV感染的临床特征无特异性.     

优立新与西力欣序贯疗法治疗下呼吸道感染的对照研究

本试验旨在评价优立新序贯疗法治疗下呼吸道感染的临床疗效和安全性。西力欣作为对照。入选病例６１例,其中试验组（优立新）３１例,对照组（西力欣）３０例。给药方法采用静脉注射随后口服给药的序贯疗法：静脉注射优立新３～１２ｇ／天,连续 ３～７天,继之口服舒他西林３７５ｍｇ～７５０ｍｇ,每天２次,连续５～７天;静脉注射西力欣３～６ｇ／天,继之口服新菌灵２５０ｇ～５００ｇ,每天 ２次,疗程相同。结果试验组和对照组的临床有效率分别为８０．６％（２５／３１）和９０％（２７／３０）。６１例患者共分离出致病菌４１株。治疗结束后两组的细菌清除率分别为 ８２．１４％（２３／２８）和 ６９．２３％（９／１３）,毒副作用反应发生率分别为 ６．４５％和３． ３３％。上述结果经统计学处理无显著性差异。无病者因毒副作用而退出试验。     

氨溴特罗口服液改善下呼吸道感染患儿呼吸道症状疗效分析

目的评估氨溴特罗口服液在临床上用于改善下呼吸道感染患儿的咳嗽、咳痰、喘息、气促、紫绀、肺部哮鸣音、肺部湿啰音等临床表现的疗效及安全性。方法对126例3个月～8岁患下呼吸道感染的患儿，随机分为氨溴特罗治疗组和对照组，观察2组疗效。结果2组在咳嗽、咳痰、喘息、肺部哮鸣音、肺部湿啰音等临床表现方面差异有统计学意义（P〈0．05），治疗组明显优于对照组。结论氨溴特罗口服液在临床上用于改善下呼吸道感染患儿的呼吸道症状安全、有效。     

下呼吸道感染细菌谱及耐药性变化趋势分析

目的：了解我院近年来下呼吸道感染细菌谱及耐药性变化趋势。方法：对我院2003年-2006年下呼吸道痰标本细菌培养和药敏实验结果进行统计分析。结果：2003-2004年下呼吸道感染病原菌前六位是克雷伯菌30.8％、假单胞菌20．5％、大肠埃希菌12．8％、阴沟肠杆菌10．3％、不动杆菌6．8％和金黄色葡萄球菌6．0％。2005-2006年,位于前六位是假单胞菌30．0％、克雷伯菌18．8％、念珠菌12．5％、不动杆菌11．3％、表皮葡萄球菌10．0％和大肠埃希菌10．0％。产ESBLs菌从9．0％上升至15．6％。大多数病原菌对临床常用抗生素的耐药率增加了10％～20％。结论：在下呼吸道感染细菌中,引起医源性感染的机会性细菌增多,对临床常用抗生素耐药率有明显增加趋势。