IL-2及其临床应用

1976年,Morgan首先报道一种由PHA激活的单核细胞产生的T细胞生长因子,其在淋巴细胞转化试验的培养上清液中具有维持正常T细胞体外长期生长的作用,1979年命名为IL-2人IL-2是含有133个氨基酸分子的糖蛋白,其基因定位于4q26-28,不同来源的IL-2糖基不同,重组的IL-2(rIL-2)缺乏糖基,但与天然IL-2功能无差异。IL-2对机体免疫系统有多种调节功能:(1)促进辅助T细胞(TH)、抑制T细胞(TS)及自然杀伤细胞(NK)的增殖;(2)增强NK细胞和细胞介导的细胞毒T细胞(CTL)的溶细胞活性;(3)诱导产生IFN-α,β,γ等细胞因子;(4)产生淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK),从而可溶解抗NK细胞的新鲜肿瘤细胞;(5)活化B淋巴细胞受IL-2作用,发生一定程度的增殖反应,促进B细胞成为抗体分泌细胞。IL-2的临床应用     

多巴胺D1样受体在介导调节CD4~+T淋巴细胞功能中的作用

目的:从分子水平揭示CD4+T淋巴细胞表达D1受体和D5受体mRNA的现象,探讨这些受体在调节CD4+T淋巴细胞功能中的作用。方法:采用免疫磁珠分离和纯化小鼠淋巴结CD4+T淋巴细胞。用抗CD3/CD28抗体刺激活化CD4+T淋巴细胞,并用D1样受体激动剂SKF38393、拮抗剂SCH23390分别作用于CD4+T淋巴细胞,然后采用real-time PCR法检测CD4+T淋巴细胞上D1受体和D5受体mRNA的表达,Th1细胞特异性转录因子(T-box expressed in T cells,T-bet)和细胞因子干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的表达,Th2细胞特异性转录因子GATA binding protein 3(GATA 3)和细胞因子白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)的表达,Th17细胞特异性转录因子(retinoid acid-related orphan receptor gammat,RoRγt)和细胞因子IL-17、IL-22的表达。结果 :D1样受体激动剂SKF38393(10-8和10-7mol/L)作用于CD4+T淋巴细胞后,CD4+T淋巴细胞表达D1样受体mRNA增高,IFN-γ的表达降低,GATA 3、IL-4的表达增高,但T-bet、RoRγt、IL-17和IL-22的表达没有变化,SCH23390(10-7mol/L)能阻断SKF38393的这些作用。结论:CD4+T淋巴细胞能表达多巴胺D1样受体,CD4+T淋巴细胞上D1样受体的激活可促进CD4+T淋巴细胞向Th2细胞分化、抑制Th1细胞功能及增强Th2细胞功能。     

分泌IL-17淋巴细胞在慢性阻塞性肺疾病发病机制中的作用研究进展

细胞因子激活T细胞受体后,引起原始T细胞分化各种CD4~+T细胞亚群,包括:Th1、Th2、Th17、Th22、卵泡辅助T细胞(Tfh)和调节性辅助T细胞(Treg),它们能产生不同细胞因子和转录因子。虽然Th17细胞最近已经被确定是一个独立的T细胞谱系,但以往研究IL-17与人类疾病的联系只局限于Th17细胞。研究发现除了Th17细胞分泌IL-17外,CD8~+T细胞、γδT细胞,自然杀伤细胞NKT-17、淋巴组织诱导(LTi)-17和固有淋巴细胞(ILC)-17以及其他一些潜在的细胞均可以分泌IL-17。研究还发现T淋巴细胞产生的IL-17在上皮细胞、内皮细胞和成纤维细胞炎性反应形成中有重要的作用。IL-17是固有免疫和特异性免疫相互联系的桥梁,既能产生有益作用,又有危害作用。文章对分泌IL-17淋巴细胞在COPD慢性炎性反应中的作用作一综述。     

Th17应答在哮喘发病机制中作用的研究进展

支气管哮喘是一种T淋巴细胞相关的慢性呼吸系统非特异性炎症性疾病。自从Mosmann等[1]发现以分泌白细胞介素(interleukin,IL)-2、干扰素γ(interferonγ,IFN-γ)为特征的辅助性T淋巴细胞(helper T lymphocyte,Th)1和以分泌IL-4、IL-5、IL-13为特征的Th2细胞以来,Th1/Th2应答失衡一直     

哮喘患者红、白细胞免疫粘附功能及与T细胞激活的关系

采用红、白细胞免疫粘附混合花环法对53例哮喘患者测定其红、白细胞免疫粘附功能并对部分患者用间接免疫荧光法测定T细胞亚群及膜IL-2R~ (膜白介素2受体阳性)T细胞及自然杀伤细胞(Nkcell)。结果表明,哮喘患者红、白细胞补体受体活性均增高,缓解期降至正常。T细胞亚群分布与对照组无明显差异,而IL-2R~ T细胞及NK细胞增高;且IL-2R~ T细胞与淋巴细胞红细胞玫瑰花结呈正相关。说明患者红、白细胞免疫粘附功能增强,防止免疫复合物沉积;T细胞激活为哮喘特征,而其又与红细胞及淋巴细胞间粘附有关。     

体外培养淋巴母细胞检测IL—2方法探讨

白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)能促进T,B细胞的活化增殖,是免疫应答中的重要体液调节因子。检测T细胞产生IL-2的水平对基础和临床研究均有重要意义。目前检测IL-2的方法多用PHA体外诱导淋巴细胞产生IL-2,再用依赖IL-2的细胞株     

蒜汁对大鼠免疫功能的影响研究

目的 探讨大蒜对大鼠免疫功能的影响。方法 以生、熟大蒜汁分别喂养大鼠8周，检测其脾内NK细胞活性、T淋巴细胞功能和IL-2活性。结果 生、熟食组NK细胞活性、T淋巴细胞功能和IL-2活性均高于对照组(P＜0．01)；但生食组与熟食组比较，除IL-2活性前者高于后者外(P＜0．05)，NK细胞活性和T淋巴细胞功能则无差异性。结论 大蒜的抗菌、消炎作用与其可提高免疫功能有关。     

白介素-9产生细胞在不同淋巴细胞亚群中的比例

目的:应用流式细胞术测定胞内细胞因子,检测不同T淋巴细胞亚群和其他淋巴细胞亚群中白介素-9(IL-9)产生细胞的比例。方法:23名健康成年人外周抗凝血加等量1640培养液后,加佛波酯、离子霉素及莫能霉素培养6 h。收集细胞后,先用不同荧光素标记的抗人CD3、抗人CD8和抗人T细胞抗原受体γδ(TCRγδ)单抗,或抗人CD19和抗CD56单抗作细胞表面染色,再经过溶血,固定和透膜处理后,加抗胞内细胞因子的抗IL-9和IL-17的荧光抗体作胞内染色,用流式细胞仪检测和分析IL-9产生细胞在不同T淋巴细胞亚群和其他淋巴细胞亚群中的分布频率。结果:IL-9产生细胞在总T细胞(CD3+T)、CD4+T细胞、CD8+T细胞和γδT细胞中的百分比分别为0.35±0.31、0.22±0.13、0.31±0.29和1.07±1.05。γδT细胞中的IL-9产生细胞明显高于其他淋巴细胞亚群(P<0.01)。同时也发现自然杀伤细胞(NK细胞)中也有少量IL-9产生细胞。另外还发现,共表达IL-9和IL-17的细胞在CD3+T及其亚群CD4+T和CD8+T细胞中的比例很低(0.03%~0.06%),但在γδT细胞中的比例可达(0.28±0.34)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:用流式细胞术测定单细胞水平胞内细胞因子的技术发现,不仅CD4+T细胞中,而且CD8+T细胞和γδT细胞以及NK细胞中均存在产生IL-9的细胞。     

白细胞介素-2 mRNA产生的诱导和调节

在调节休止期淋巴细胞扩增和成熟,从而在免疫反应中表达其特殊功能中,T细胞在抗原刺激下产生的生长和分化因子十分重要。其中,白细胞介素2(IL-2)在调节T细胞生长中占有中心的位置。T细胞的增殖依赖于细胞表面IL-2受体的表达,以及与T细胞分泌的IL-2相互作用。已经知道,IL-2受体的表达和IL-2的分泌,系T细胞抗原受体在抗原/Ia刺激下,或单克隆抗体对T细胞抗原受体Ti/T_3复合物的刺激,或T细胞在促丝裂原刺激下而诱导的。     

激素补充治疗对绝经妇女Th1/Th2平衡的影响

目的研究激素补充治疗对绝经妇女辅助性T细胞1(Th1)和辅助性T细胞2(Th2)之间平衡的影响。方法生育年龄组、绝经组各20例,绝经组予以激素补充治疗1年,分离、培养生育年龄组、绝经组治疗前和治疗后外周血T淋巴细胞,ELISA法测培养液上清液白介素-4(IL-4)、干扰素-(IFN-)质量浓度,并计算IFN-/IL-4(Th1/Th2)比值。结果绝经组治疗前IFN-水平明显高于生育年龄组(<0.01),IL-4水平明显低于与生育年龄组(<0.01),IFN-/IL-4比值明显高于生育年龄组(<0.01)。绝经组治疗后IFN-水平与生育年龄组的差异无统计学意义(>0.05),IL-4水平仍明显低于生育年龄组(<0.01),IFN-/IL-4比值高于生育年龄组(<0.05);但IFN-水平明显低于治疗前(<0.01),IL-4水平明显高于治疗前(<0.01),IFN-/IL-4比值明显低于治疗前(<0.01)。结论绝经后发生Th1/Th2平衡变化,出现向Th1漂移现象,而激素补充治疗能改善Th1/Th2平衡的偏移。     

鼻咽癌细胞培养上清对正常人淋巴细胞钙调蛋白、白细胞介素-2、白细胞介素-2受体活性及T淋巴细胞增殖的影响

观察鼻咽癌低分化细胞株(CNE-2)培养上清(CNE-2S)对正常人外周血淋巴细胞(PBL)的作用,结果表明:CNE-2S可明显抑制正常人T淋巴细胞的增殖,白细胞介素-2(IL-2)的产生及钙调蛋白(CaM)的活性。但对IL-2受体活性无明显影响。提示CNE-2S有可能是通过抑制淋巴细胞内CaM的活性,使细胞代谢改变,而阻碍T淋巴细胞增殖。     

用抗IL-2受体单克隆抗体抑制移植免疫反应

用于脏器移植后的免疫抑制剂硫唑嘌吟和类固醇激素等可降低正常免疫反应,常出现感染等合并症。有一定选择性的环孢素A(CYA)也不能降低感染的发生率,仅能选择性地抑制移植免疫反应,故只有寄希望于免疫学方法。移植免疫反应首先是T细胞活化。白介素-2受体(IL-2R)主要存在于活化的T细胞,即杀伤T细胞(TK)的前期细胞膜上。TK前期细胞通过IL-2增殖分化,与活化TK在同种移植排斥反应中起主要作用。静止T细胞和记忆T细胞无IL-2R,故认为抗IL-2R单克隆抗体(McAb)能阻止受抗原剂激的T细胞活化,选择性地抑制移植免疫反应。用细胞融合法和纯株培养法,在鼠和人制成具有种族特异性的抗IL-2RMcAb,可阻止IL-2与IL-2R结合,抑制T细胞增生。     

骨髓间充质干细胞体外诱导免疫调节机制的探讨

目的:观察骨髓间充质干细胞(BM MSCs)对体外活化T细胞的免疫调节作用。方法:提取Wistar大鼠BM MSCs及新鲜脾淋巴细胞做共培养。实验分3组,3个时间点:分别为0、24、48 h脾淋巴细胞/BM MSCs+刀豆蛋白A(ConA)(实验组),脾淋巴细胞+ConA(对照组),单纯淋巴细胞组(空白组)。MTT检测T淋巴细胞活性,ELISA检测细胞因子TNF-α、IL-10及TGF-β水平,流式检测Foxp3+调节性T细胞表达率。结果:(1)与对照组相比,实验组24、48 h在2个时间点T淋巴细胞活性均显著降低(P<0.05);(2)与对照组相比,实验组TNF-α在2个时间点有显著降低(P<0.05),实验组IL-10、TGF-β表达水平有显著升高(P<0.05);(3)实验组Foxp3+T调节细胞表达率高于对照组;(4)随着时间延长,空白组及对照组T淋巴细胞活性均显著降低(P<0.05),实验组T淋巴细胞活性随时间延长差异无统计学意义。结论:BM MSCs可以抑制T淋巴细胞活化,并通过减少炎症因子TNF-α的释放抑制免疫应答。另外,BM MSCs可通过自分泌及诱导T调节细胞产生并分泌免疫抑制因子IL-10、TGF-β下调免疫反应,产生免疫耐受。     

慢性乙型肝炎患者外周血IL-7与细胞免疫的关系

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血IL-7含量与T淋巴细胞亚群、调节性T细胞百分比的关系,探究IL-7对慢性乙型肝炎细胞免疫作用的影响。方法慢性乙型肝炎患者组、慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带组、健康对照组,采用ELISA法检测受试者外周血IL-7含量,流式细胞仪技术检测外周血T淋巴细胞亚群和CD4+CD25+调节性T细胞百分比。结果 CHB组、HBV携带组、健康对照组外周血IL-7含量分别为(1.68±0.58)ng/mL、(3.83±0.62)ng/mL和(6.25±0.32)ng/mL,3组间存在显著性差异(P0.05);CHB组、HBV携带组、健康对照组外周血T细胞亚群CD4+T淋巴细胞分别为(31.3±3.3)%、(38.1±6.8)%、(43.2±9.4)%,CD8+T淋巴细胞分别为(24.8±5.2)%、(28.1±3.4)%、(30.5±8.6)%;CD4+CD25+调节性T细胞分别为(10.9±1.3)%、(7.4±1.0)%、(4.2±1.1)%。CHB组外周血IL-7明显低于HBV携带组及健康对照组,且与CD4+T细胞百分比呈负相关(r1=-0.58,P0.05),与CD8+T细胞百分比呈正相关(r2=0.63,P0.05),与CD4+CD25+调节性T细胞百分比呈负相关(r3=-0.43,P0.05)。结论 CHB患者外周血IL-7负调控调节性T细胞,对CD8+T细胞的细胞免疫有促进作用。     

特发性血小板减少性紫癜T淋巴细胞功能异常的研究

目的研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者T淋巴细胞功能变化,探讨T细胞在ITP发病机制中的作用.方法采用FACS分析CD+3T细胞表面CD28的表达;ELISA法检测血清IL-2水平.结果ITP患者CD+3T细胞表面CD28的表达率和血清IL-2水平均显著高于正常对照组,两者呈正相关.结论ITP患者T淋巴细胞异常活化,细胞因子分泌失调,破坏自身免疫耐受.     

特发性血小板减少性紫癜T淋巴细胞功能异常的研究

目的 研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者T淋巴细胞功能变化，探讨T细胞在ITP发病机制中的作用。方法 采用FACS分析CD3^ T细胞表面CD28的表达；ELISA法检测血清IL-2水平。结果 ITP患者CD3^ T细胞表面CD28的表达率和血清IL-2水平均显著高于正常对照组，两者呈正相关。结论 ITP患者T淋巴细胞异常活化，细胞因子分泌失调，破坏自身免疫耐受。     

肺癌患者外周血CD4~+T淋巴细胞Th1/Th2分化情况检测与分析

目的观察肺癌患者外周血CD4+T淋巴细胞中Th1/Th2分化情况与反应状态,为肺癌的诊断和免疫治疗研究提供依据。方法以干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)代表Th1和Th2细胞功能,应用细胞因子诱生技术和流式细胞仪,检测25例肺癌患者及25例健康志愿者外周血CD4+T淋巴细胞诱生的IFN-γ和IL-4水平。结果肺癌患者外周血CD4+T淋巴细胞诱生的IFN-γ水平与健康对照组比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),IL-4水平在2组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺癌患者外周血CD4+T淋巴细胞向Th1细胞的分化明显减少,向Th2细胞的分化无明显变化,Th1向Th2方向的漂移可能是肺癌细胞生长和免疫逃避的机制之一。     

冬虫夏草提取物对混合淋巴细胞培养体系Treg/Th17轴的影响

目的观察冬虫夏草提取物对混合淋巴细胞(MLC)培养体系Treg/Th17轴的影响,探讨冬虫夏草提取物的免疫调节机制。方法体外建立单向混合淋巴细胞培养体系,用冬虫夏草提取物干预培养体系,在不同的时间点收集细胞,采用流式细胞术检测细胞中辅助性T细胞17(Th17细胞)和CD4+CD25+T调节性T淋巴细胞(Treg细胞)的比例,并计算出Th17细胞与Treg细胞的比值;采用酶联免疫吸附试验法分别检测培养液白细胞介素(IL)-17、IL-23、IL-2和IL-6的浓度。结果冬虫夏草提取物干预组12、24、36h三个时间点T细胞中Treg细胞比例分别为(13.17±1.25)%、(12.3±1.31)%、(11.89±1.46)%,同时间点对照组T细胞Treg细胞比例分别为(11.04±1.32)%、(10.16±1.15)%、(8.91±0.97)%,差异均有统计学意义(P0.05);干预组T细胞中Th17细胞比例分别为(2.81±0.13)%、(4.02±0.38)%、(4.95±0.49)%,同时间点的对照组T细胞中Th17细胞比例分别为(4.65±0.31)%、(6.63±0.63)%、(8.03±0.76)%,差异均有统计学意义(P0.05)。冬虫夏草提取物干预组12、24、36h三个时间点T细胞中Th17细胞与Treg细胞的比例均显著低于同时间点的对照组(P0.05)。冬虫夏草提取物干预组12、24、36h三个时间点培养液IL-2水平明显高于同时间点对照组(P0.05),而干预组培养液IL-6、IL-17、IL-23水平低于同时间点的对照组(P0.05)。结论冬虫夏草提取物能够明显促进MLC体系细胞中Treg细胞增殖,抑制Thl7细胞增殖,降低Th17/Treg细胞比值,改变Th17/Treg轴的平衡,同时增加IL-2分泌、减少IL-6、IL-17、IL-23分泌,有利于诱导免疫耐受。     

Th17和Tc17细胞在免疫性血小板减少症发病机制中的作用及激素治疗中的意义

目的探讨辅助性T细胞17(Th17)、细胞毒性T细胞17(Tc17)在免疫性血小板减少症发病过程中的作用机制及激素治疗中的意义。方法应用流式细胞术检测40例免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者与40名正常人外周血中Th17淋巴细胞、Tc17淋巴细胞占CD3+T淋巴细胞比例,并对比其在ITP患者激素治疗前后的水平变化。结果与正常对照组比较,ITP患者治疗前外周血Th17淋巴细胞和Tc17淋巴细胞比例均明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。ITP患者在激素治疗后Th17淋巴细胞和Tc17淋巴细胞比例均较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 ITP患者Th17和Tc17细胞表达升高,经激素治疗后明显降低。Th17和Tc17细胞可能参与了ITP的发病并在激素治疗过程中发挥着重要作用。     

白细胞介素15的研究进展

细胞因子在调节免疫反应中发挥着重要作用,白细胞介素(IL)2常作为免疫佐剂来增强免疫反应。IL-15是一种新近发现的细胞因子,具有与IL-2类似的作用,如激活T细胞、B细胞和自然杀伤细胞,并可介导这些细胞的增殖和存活。IL-15具备IL-2所不具备的优势,如IL-15能激活、维持和扩增CD8+记忆性T细胞,不激活调节性T淋巴细胞(Tregs),并解除Tregs对T细胞的抑制作用,而Tregs对免疫的各个方面都有负调节作用,显示了IL-15在免疫调节中的优势。