改良TRAP法检测胃粘膜标本端粒酶活性

为探讨端粒酶活性与胃癌发生的关系。本文以改良TRAP法对43例胃粘膜活检标本的端粒酶活性进行检测。结果发现：胃癌的端粒酶阳性率为87%（20/23），萎缩性胃炎的端粒酶阳性率为28.6%(2/7)，而中度胃炎与浅表性胃炎无一例阳性，它提示端粒酶活性的检测对于胃癌的诊断可能具有重要意义。     

p53基因在胃癌、胃炎和正常组织中的表达

目的从基因角度探讨胃癌、胃炎的发病机理的差别.方法用免疫组化Sp法检测35例进展期胃癌、8例早期胃癌、17例萎缩性胃炎、15例浅表性胃炎及14例正常组织标本中抑癌基因p53蛋白的表达.结果p53基因的表达在进展期胃癌标本中最高,其次是早期胃癌和萎缩性胃炎,而浅表性胃炎和正常组织标本中,p53均无表达.高分化腺癌中p53的表达要低于低分化腺癌和中分化腺癌,有统计学差异(P＝0.02和P＝0.02),p53基因表达在有淋巴结转移组和无淋巴结转移组之间无统计学差异(P＝0.57).结论p53基因异常与胃粘膜细胞癌变过程密切相关,可用于高危个体筛查或癌前病变危险的预测,从而在基因水平对胃癌的早期诊断及治疗提供帮助.     

端粒酶活性检测在肾细胞癌中的临床意义

目的：探讨端粒酶活性与肾细胞癌的关系。方法：应用PCR—ELISA法检测35例肾细胞癌肿瘤组织及肿瘤旁正常组织的端粒酶活性，并分析端粒酶活性与肾细胞癌的关系。结果：肾细胞癌肿瘤组织中端粒酶活性阳性率为68．6％。肿瘤旁正常组织端粒酶活性为阴性，两者比较有显著的统计学差异（P〈0．01）。结论：肾细胞癌肿瘤组织中端粒酶活性阳性率明显高于正常组织。端粒酶活性的检测可作为肾细胞癌诊断的标志物。     

乳腺癌端粒酶活性与PCNA表达关系

目的探讨端粒酶活性与增殖细胞核抗原（PCNA）表达之间的关系及联合检测对乳腺癌术后治疗方案制定和预测预后的意义。方法采用端粒重复序列扩增聚合酶链反应-酶联免疫吸附测定法（TRAP-PCR-ELISA）和免疫组织化学链霉素生物蛋白过氧化物酶（S-P）法对80例乳腺癌组织、36例乳腺癌相应癌旁组织和10例乳腺良性病变的端粒酶活性及增殖细胞核抗原进行检测。结果（1）80例乳腺癌患者癌组织标本、36例乳腺癌相应癌旁组织标本中端粒酶表达阳性率分别为65．0％和8．3％。差异有统计学意义（P〈0．01）；10例乳腺良性病变组织标本中未检测出端粒酶活性；腋窝淋巴结有无转移与端粒酶阳性表达率差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）80例乳腺癌组织中PCNA的阳性表达率为63．75％；乳腺癌有淋巴结转移组PCNA阳性表达率显著高于无淋巴结转移组（P〈0．01），且呈正相关（P〈0．01），即淋巴结转移程度越低。PCNA阳性表达率亦越低。（3）端粒酶活性与PCNA表达具有一致性（P〈0．01）。且呈正相关（P〈0．01），一致率为86．25％。结论端粒酶活性与PCNA表达具有一致性，端粒酶活性与PCNA联合检测，可为乳腺癌术后治疗方案的制定和预测预后提供辅助依据。     

腹腔灌洗液中端粒酶活性和CA125水平的测定在诊断胃癌腹膜转移中的应用

目的比较胃癌患者腹腔灌洗液中端粒酶活性与CA125水平在诊断胃癌腹膜转移中的灵敏度。方法应用端粒酶重复序列扩增程序（TRAP）-酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测46例胃癌腹腔灌洗液中的端粒酶活性，同时对其行腹腔灌洗液CA125水平检测。结果46例胃癌患者腹腔灌洗液中端粒酶活性检测阳性率为47．8％，PT1—2、PT3和PT4胃癌分别为0、55．6％和92．3％；浆膜未受累、受累面积〈10cm^2、10—20cm^2和〉20cm^2患者，分别为5．3％、25．0％、76．9％和100．0％；无肉眼可见腹膜转移（P0）患者为42．9％；肉眼可见腹膜转移（P1—3）患者为100．0％。而46例胃癌患者腹腔灌洗液中CA125阳性率为34．8％，PT1—2、PT3、PT4胃癌分别为20．0％、33．3％、53．8％；浆膜未受累、受累面积〈10cm^2、10—20cm^2和〉20cm^2患者，分别为10．5％、25．0％、38．5％和80．0％；P0患者为28．6％，P1-3患者为100．0％。腹腔灌洗液中端粒酶活性检测的阳性率较CA125有显著提高（P〈0．05）。结论腹腔灌洗液中端粒酶活性与胃癌腹膜转移呈正相关，其活性测定可用于胃癌腹膜转移的早期诊断。     

用PCR技术检测胃粘膜活检标本幽门螺杆菌DNA

本文利用聚合酶链反应（PCR）技术检测32例胃癌、48例慢性浅表性胃炎、37例胃溃疡、12例疣状胃炎、十二指肠球部溃疡24例及15例正常对照胃粘膜及胃液标本HP－DNA、并与HP染色（Warthin－Starry法）进行了比较，以探讨HP感染与胃癌的关系。结果表明：（1）各组患者HP－DNA－PCR阳性检出率均较Warthin－Starry染色阳性率有高度显著性差异（P＜0．01），且特异性均为100％；（2）胃癌患者胃粘膜及胃液标本的HP－DNA－PCR阳性率达90．7％（29/32），略高于疣状胃炎及胃溃疡病人，与慢性浅表性胃炎患者有显著性差异（P＜0．05），而与正常对照组相比有高度显著性差异（P＜0．01）；（3）在胃癌病人，病灶中央部位的NP—DNA—PCR阳性率与其周围组织及胃液标本相比有高度显著性差异（P＜0．01）。研究提示，PCR技术是检测胃粘膜标本及胃液标本HP最敏感、特异性最高的方法，但要注意防止污染并且要联合检测；HP感染与胃癌的发生发展密切相关。     

胃炎和胃癌患者胃组织中幽门螺杆菌的分离及分子生物学研究

目的对慢性浅表性胃炎和胃癌患者胃镜活体组织中分离幽门螺杆菌（Hp）临床菌株并进行分子生物学研究。方法胃镜下钳取标本，37℃微需氧条件下分离培养，然后用聚合酶链反应扩增螺杆菌16SrRNA、特异基因及相关功能基因CagA。结果8例胃癌标本和22例慢性浅表性胃炎标本中各分离出3株幽门螺杆菌，阳性率分别为37．5％和13．7％，16S和Hp特异基因扩增均为阳性，胃癌标本2例CagA阳性，慢性浅表性胃炎标本中1例CagA阳性。结论胃癌和慢性浅表性胃炎病人胃黏膜标本中均分离到Hp，胃癌病人阳性率较高，且经PCR证实为Hp。     

126例慢性胃炎胃镜下表现与病理诊断对照

目的研究慢性胃炎胃镜下表现与病理诊断的符合率并提出相应措施。方法确诊的慢性胃炎病倒共计126例进行回顾性分析。所有患者均进行了胃镜和病理学检查。结果26例胃镜诊断为慢性浅表性胃炎的患者病理诊断为慢性萎缩性胃炎,胃镜诊断为特殊类型胃炎的患者病理诊断均为慢性浅表性胃炎。以病理学最终诊断结果为准,慢性浅表性胃炎肠化的患者占17．9％,慢性萎缩性胃炎肠化的患者占43．8％。差异具有统计学意义（P〈0．05）。从Hp的检出率来看,慢性浅表性胃炎肠化的患者占34．6％,慢性萎缩性胃炎腑化的患者占41．7％。差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论对慢性胃炎患者在胃镜检查的基础上须进行病理学检查以明确诊断。     

68例女性尖锐湿疣组织学损伤程度与端粒酶活性的研究

[目的]了解女性CA皮损中组织学损伤程度与端粒酶活性的关系,研究探讨HPV感染CA不同程度组织损伤及病变性质与癌变的关系。[方法]对不同病变程度女性生殖道CA病例,采用核酸原位杂交法检测CA皮损中端粒酶的活性。[结果]2例无明显上皮细胞增生CA病例端粒酶活性表达率为0.0%;36例CA上皮细胞轻度增生病例端粒酶活性表达率为8.33%;18例上皮细胞轻度非典型性增生病例中端粒酶活性表达率为16.6%;10例上皮细胞中度非典型性增生病例中端粒酶活性表达率为40.0%;2例上皮细胞重度非典型性增生病例中端粒酶活性表达率为50.0%。女性生殖道CA是否癌变与皮损后修复性增生性质及端粒酶活性有关,随细胞异型性增生加重,端粒酶活性增高,癌变率有所增加。[结论]为防止女性CA癌变,应及早作病理检验诊断,早期发现及时治疗皮损异型性增生。     

胃癌及癌前病变c-erbB-2、p53和ki-67表达及意义

目的探讨C-erbB-2、p53和ki-67基因蛋白在胃癌及癌前病变中的表达和意义。方法采用免疫组织化学染色对96例胃癌组织标本、10例正常胃粘膜、22例萎缩性胃炎、6例慢性胃溃疡伴肠上皮化生标本进行基因蛋白表达。结果自萎缩性胃炎、肠上皮化生、胃粘膜异型增生到不同病理类型的胃癌，C-erbB-2、p53和ki-67基因表达不同。在整个胃癌的演变过程中，基因表达是逐渐增强的。在不同阶段，基因表达高低也不一样，C-erbB-2在异型增生和胃癌表达最强，高于萎缩性胃炎和肠上皮化生，两者之间有显著性差异（P〈0．05）。p53在低分化腺癌和高分化腺癌表达率分别是69．2％和32．3％，有显著差异（P〈0．05）。ki-67在整个胃癌演变过程中的表达是逐渐增强的，而且在未分化癌中的表达高于C-erbB-2和p53。结论癌前病变和不同病理类型的胃癌C-erbB-2、p53和ki-67基因蛋白表达不同。说明胃癌的发生发展是多基因、多分子水平变化的多个阶段进行性过程。多项基因蛋白检测对胃癌的早期诊断及预后的判断更有意义。     

PTEN基因在胃癌组织中的表达及临床意义

目的研究正常胃粘膜、慢性萎缩性胃炎（伴肠化）、胃癌组织中抑癌基因PTEN的ⅢRNA和蛋白的表达情况,探讨其在在胃癌发生、发展中的作用及临床意义。方法（1）收集2011年11月--2012年11月期间内蒙古医学院第三附属医院病理和内窥镜结合确诊的正常胃组织30例、慢性萎缩性胃炎（伴肠化）30例．手术切除的45例胃癌标本并经病理确诊。（2）所有患者术前均未接受放、化疗和其他针对性抗肿瘤治疗,无其它肿瘤病史。（3）通过实时荧光定量PCR及Western印迹技术检测PTENmRNA及其蛋白在胃粘膜不同组织中的相对表达,所有数据采用SPSSl3．0统计软件包进行处理,统计学方法采用单因素方差分析及t检验,以P〈O．05为差异有统计学意义。结果（1）PTENmRNA在正常胃粘膜、慢性萎缩性胃炎（伴肠化）、胃癌中表达量分别为（1．902±0．981、1．158±0．241、0．740±0．221）,三组相比差异有统计学意义（F=3．292,P=O．041）。胃癌组织中PTENmRNA表达量分别与正常胃粘膜组织、慢性萎缩性胃炎（伴肠化）组相比,差别均有统计学意义（t=4．451,P=O．001;t=3．007,P=O．041）;（2）PTEN蛋白在正常胃粘膜、慢性萎缩性胃炎（伴肠化）、胃癌中表达量分别为（2．001i0．67I、1．141±0．326、0．599±0．220）,三组相比差异有统计学意义（F=4．122,P=O．030）。胃癌组织中PTEN蛋白的表达量与正常胃粘膜、慢性萎缩性胃炎（伴肠化）组相比,差别均有统计学意义（t=4．301,P=O．001;t=3．123,p-0．040）。结论PTEN基因在胃癌组织中表达降低和缺失与胃癌的发生密切相关,提示PTEN基因的表达可能为临床早期诊断胃癌提供新的指标。     

EB病毒潜伏膜蛋白1在慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生胃黏膜中的表达及意义

目的检测EB病毒（EBV）．潜伏膜蛋白1（LMPl）在作为癌前病变的慢性萎缩性胃炎（CAG）伴肠上皮化生胃黏膜中的表达,探讨其在胃癌发生、发展过程中的作用。方法应用免疫组织化学sP法检测经病理确诊的45例慢性浅表性胃炎（CSG）组织、63例CAG伴肠上皮化生组织、36例胃癌组织中EBV—LMP1的表达。结果45例CSG和36例胃癌组织中未见EBV-LMP1的表达,63例CAG伴肠上皮化生胃黏膜组织有23例阳性,阳性率为36．5％（23／63）,主要定位于细胞核,明显高于CSG及胃癌中的表达,差异有统计学意义（尸值均为0．000）。结论CAG伴肠上皮化生组织中存在EBV-LMP1表达,明显高于CSG及胃癌组织,提示EBV感染可能在胃癌发生的早期阶段起重要作用。     

慢性胃炎与胃癌组织中微血管密度和黏附分子表达的对比研究

目的 探讨慢性胃炎与胃癌组织中微血管密度、黏附分子的表达及对比意义.方法 选取56例慢性浅表性胃炎患者(慢性浅表性胃炎组)、55例胃癌无淋巴结转移患者(胃癌无淋巴结转移组),57例胃癌有淋巴结转移患者(胃癌有淋巴结转移组)的病理组织蜡块,用免疫组织化学Envision法显示微血管密度CD34和细胞黏附分子Syndecan-1的表达情况,112例胃癌患者中高、中分化47例,低分化65例.结果 CD14表达以微血管密度计算:慢性浅表性胃炎组为(13 ± 10)个/高倍镜视野(HP),胃癌无淋巴结转移组为(27 ± 11)个/HP;胃癌有淋巴结转移组为(28 ±10)个/HP.慢性浅表性胃炎组与胃癌无淋巴结转移组及胃癌有淋巴结转移组比较差异有统计学意义(t=7.044、7.908,P＜0.05),胃癌无淋巴结转移组与胃癌有淋巴结转移组比较差异无统计学意义(t=0.506,P＞0.05.慢性浅表性胃炎组、胃癌无淋巴结转移组、胃癌有淋巴结转移组Syndecan-1阳性表达率分别为96.43%(54/56)、45.45%(25/55)、24.56%(14/57),慢性浅表性胃炎组与胃癌无淋巴结转移组及胃癌有淋巴结转移组比较差异有统计学意义(X2=163.560、17.197,P＜0.01).胃癌无淋巴结转移组与胃癌有淋巴结转移组比较差异有统计学意义(x2=5.340,P＜0.05).结论 微血管密度增加与胃癌的发生有关;细胞黏附分子syndecan-1表达下调与胃癌的发生、发展有关,并可能进一步促进胃癌转移,检测微血管密度CD34及细胞黏附分子Syndecan-1的表达变化情况有助于胃癌的诊断及预后判断.

Abstract：

Objective To investigate the clinical significance of the expression of microvessel density and adhesion molecules in the tissue of chronic gastritis and gastric cancer. Methods Fifty-six patients with chronic superficial gastritis (chronic superficial gastritis group), 55 cases of gastric cancer without lymph node metastasis (gastric cancer without lymph node metastasis group) and 57 patients with gastric cancer and lymph node metastasis (gastric cancer with lymph node metastasis group) were included in this study. Gastric pathology paraffin blocks was studied using immunohistochemical Envision method. Microvessel density CD34 and cell adhesion molecule Syndecan-1 expression was examined. In 112 gastric cancer patients, 47 patients were highly differentiated, and 65 patients were poorly differentiated. Results Microvessel density CD34 results:in chronic superficial gastritis group was (13 ± 10)/HP,in gastric cancer without lymph node metastasis group was (27 ± 11 VHP, in gastric cancer with lymph node metastasis group was (28 ± 10)/HP. There were significant differences between chronic superficial gastritis group and gastric cancer without lymph node metastasis group,and between chronic superficial gastritis group and gastric cancer with lymph node metastasis group (t = 7.044,7.908, P ＜0.05), but there was no significant difference between gastric cancer without lymph node metastasis group and gastric cancer with lymph node metastasis group (t = 0.506,P ＞ 0.05). In chronic superficial gastritis group, gastric cancer without lymph node metastasis group and gastric cancer with lymph node metastasis group, Syndecan-1 positive expression ratewas 96.43%(54/56),45.45%(25/55),24.56%(14/57),and there was significant difference between chronic superficial gastritis group and gastric cancer without lymph node metastasis group,and between chronic superficial gastritis group and gastric cancer with lymph node metastasis group (x2 = 163.560,17.197,P＜ 0.01). There was significant difference between gastric cancer without lymph node metastasis group and gastric cancer with lymph node metastasis group (x2 = 5.340, P ＜ 0.05). Conclusions Microvessel density is related with the occurrence of gastric cancer;adhesion molecule Syndecan-1 expression reduces the incidence of gastric cancer development, and might further promote the metastasis of gastric cancer. Detecting the expression changes of microvessel density CD34 and cell adhesion molecule Syndecan-1 facilitates the diagnosis and prognosis of gastric cancer.     

胃蛋白酶原在健康检查胃部疾病筛查中的价值

目的 检测胃蛋白酶原Ⅰ (PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)对胃部疾病检出的价值.探讨血清胃蛋白酶原检测在健康检查中筛查胃部疾病的应用价值.方法 采用PGⅠ、PGⅡ时间分辨荧光试剂盒,对718例胃部疾病患者及2 532例健康检查人群血清测定PGⅠ、PGⅡ含量和PG Ⅰ/PGⅡ比值.结果 胃蛋白酶原对慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃癌、胃溃疡的阳性率分别为56.1％、73.8％、40.7％、41.7％.在体检人群中约13％的人血清PG Ⅰ或PGⅡ异常.结论 血清胃蛋白酶原是胃病疾病的良好指标,在体检应用方面有较好的价值.     

胃癌与癌前病变中生物标志物表达的变化和临床意义

目的研究胃癌、胃黏膜不典型增生、肠化生、慢性胃炎和正常胃黏膜组织中C—myc和p21^WAF1蛋白的表达,以探讨C—myc和p21蛋白在胃癌发生、发展过程中的作用。方法采用免疫组化S-P法检测109例胃癌组织、30例不典型增生、33例肠化生、22例胃炎组织和35例正常胃黏膜组织中C～myc和p21蛋白的表达水平,并分析其临床意义。结果C—myc蛋白在正常胃黏膜、慢性胃炎、肠化生、胃黏膜不典型增生和胃癌组织中的表达呈逐渐增加趋势。p21蛋白在不典型增生组织中表达最高,而在胃癌组织中的表达却较不典型增生组织降低。Cmyc的表达与胃癌病理类型、肿瘤大小、侵袭深度和临床分期密切相关（P〈0．05）,而p21表达水平则只与肿瘤侵袭深度相关（P〈0．05）。结论C—myc和p21蛋白参与了胃癌的发生和发展过程,且C—myc可作为判断胃癌进展程度的生物学标志物。     

蛋白芯片技术检测幽门螺杆菌抗体在胃十二指肠疾病中的分布研究

目的通过对胃十二指肠疾病患者幽门螺杆菌（H．pylori）多种抗体的蛋白芯片检测,评价H．pylori的尿素酶（Ure）、细胞毒素相关蛋白（CagA）、空泡毒素（VacA）、热休克蛋白60（Hsp60）与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌的相关性,并了解H．pylori的硝基还原酶（RdxA）表达与甲硝唑耐药的相关性。方法经胃镜检查确诊的300例慢性胃十二指肠疾病患者,抽静脉血3ml离心取血清,用蛋白芯片技术检测H．pylori的Ure、CagA、VacA、Hsp60、RdxA五种抗体。结果慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌中H．pylori感染率为34．0％、58．0％、34．O％（P〈0．01）;在H．pylori感染的慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌中CagA抗体阳性率分别为54．9％、75．9％、64．7％（P=0．070）;VacA抗体在三种疾病中阳性率分别为31．4％、22．4％、17．6％（P=0．412）;HspS0抗体阳性率分别为56．9％、48．3％、41．2％（P：0．466）;RdxA抗体总阳性率为4．O％（5／126）。结论消化性溃疡与H．pylori感染及毒力因子CagA的作用密切相关（r=0．221,P=0．021）;而VacA、Hsp60与三种胃十二指肠疾病间未显示明确相关性（r=0．118、-0．110,P=0．187、0．220）;RdxA抗体水平不能完全代表甲硝唑耐药水平。     

SYBR Green染色法检测肺癌及癌旁组织端粒酶活性

目的 研究TRAP－SYBR Green染色法定性检测端粒酶活性的方法及端粒酶活性在肺癌及癌旁组织中的表达，并探讨端粒酶的表达与P53之间可能的关系。方法 采用TRAP－SYBR Green染色法检测36例肺癌、36例癌旁组织、8例肺部良性病变组织和A549肺腺癌细胞株端粒酶活性的表达，并利用免疫组化技术检测肺癌组织P53蛋白表达水平。结果 TRAP－SYBR Green染色法可检测出5个A549肺腺癌细胞所表达端粒酶活性。83．3％（30／36）的肺癌组织，3／8肺部良性病变组织，19．4％（7／36）的癌旁组织表达端粒酶活性。端粒酶活性的表达与肺癌组织的病理类型、肿瘤大小、临床分期无相关性。在30例表达端粒酶活性的肺癌组织中P53呈现过度表达的占80％（24／30），端粒酶活性与P53蛋白表达水平之间具有相关关系。结论 TRAP－SYBR Green染色法是一种较为灵敏、快速、简便的定性检测端粒酶活性的方法；端粒酶活性的定性检测可作为肺部恶性肿瘤诊断的辅助指标之一；端粒酶P53之间的关系有待进一步阐明。     

端粒酶与p53、C—myc,K—ras在肺癌组织中的表达

目的研究端粒酶活性在肺癌及癌旁组织中的表达,并探讨端粒酶的表达与p53、C-myc、K-ras之间可能存在的关系.方法采用TRAP-SYBRGreen染色法检测36例肺癌和36例癌旁组织,20例肺部良性病变组织和20例正常肺组织及A549肺腺癌细胞株端粒酶活性的表达,并利用免疫组化技术检测肺癌组织p53、C-myc、K-ras表达水平.结果83.3%的肺癌组织25.0%的癌旁组织、15.0%肺部良性病变级织表达端粒酶活性,正常肺组织未检测到端粒酶活性.端粒酶活性的表达与肺癌组织的病理类型、肿瘤大小、临床分期无相关.在30例端粒酶活性阳性的肺癌组织中有24例(80%)表达p53蛋白,18例(60%)表达C-myc蛋白,22例(73%)表达K-ras蛋白.利用Spearman分析方法分析端粒酶活性与p53、C-myc、K-ras蛋白表达水平之间的相关关系,相关系数分别为r=0.60,P＜0.01r=0.335,P＜0.01;r=0.427,P＜0.01.结论端粒酶活性的定性检测可作为肺部恶性肿瘤诊断的辅助指标之一;肺癌组织的端粒酶活性与p53、C-myc、K-ras蛋白表达水平之间存在正相关关系.     

Livin在萎缩性胃炎及消化道肿瘤中的研究进展

Livin是最近发现的凋亡抑制蛋白家族新成员,在大多数正常成人组织低表达或不表达（除胎盘）,而在一些恶性肿瘤中特异性高表达,与肿瘤的发生、发展及复发密切相关。其在慢性萎缩性胃炎及消化道肿瘤（如食管癌、胃癌）中的特征性变化具有一定的临床应用价值。本研究就近年来Livin对抗细胞凋亡机制,在慢性萎缩性胃炎及消化道肿瘤中的表达,在抗肿瘤治疗的成果及展望等方面的研究进展作一综述。