海人藻酸致大鼠脊髓损伤模型的光镜和电镜研究

用成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠７０只，雌雄不拘，通过向腰髓内注射海人藻酸（５μｌ，０．００１ｍｏｌ／Ｌ）建立了脊髓内注射神经毒导致大鼠脊髓损伤的动物模型；一部分向脊髓内注射盐水做为对照．动物按注射后存活２ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、３ｄ、６ｄ和１４ｄ分组．Ｎｉｓｓｌ染色，电镜观察。注射后２４ｈ内，脊髓腹角神经元出现进行性细胞肿胀，尼氏作皱缩深染，形成许多微细的空泡，胞核浓缩。电镜下观察到内质网、线粒体和高尔基氏体的肿胀和胞质内的空泡和树突的膨胀．注射后３～６ｄ，神经细胞发生明显的退变，细胞质浓缩，尼氏体分解，早期病变的小空泡形成较大的空洞，核偏移。６ｄ后大部分细胞死亡，尚存的脊髓运动神经元明显肿胀，细胞核的边界不清，尼氏体完全消失，电镜下显示细胞器完全被破坏，胞质内的空洞进一步融合形成几个大空洞，细胞核继续浓缩。１４ｄ后注射部位的运动神经元几乎完全消失，胶质细胞明显增生。作为谷氨酸受体激动剂的海人藻酸导致脊髓运动神经元的急性溃变，可作为除撞击、压迫、缺血或横断所致脊髓损伤以外的又一种动物模型，其损伤的病理变化以神经元退变为主，而脊髓的完整性不受破坏，类似于脊髓灰质炎的病变，适用于神经细胞移植的研究。     

庆大霉素对前庭器损伤电镜观察

<正> 硫酸庆大霉素(100mg/kg)肌注造成豚鼠内耳中毒,其前庭器损伤的表现为椭圆囊、球囊斑耳石减少,耳石脱钙疏松及变形。两个斑及三个壶腹嵴的感觉毛细胞破坏消失和融合成巨     

脊髓半横断损伤后trkB基因表达的变化

脊髓损伤后期trkB的变化及作用仍不清楚,本实验建立脊髓半横断损伤模型（hSCI）,术后14天取损伤脊髓用定量PCR测定trkB表达水平。结果显示,与假手术组比较,损伤脊髓trkB mRNA水平明显下调。推测trkB减少可能是不利于修复的因素之一,值得重视。     

脊髓半横断损伤后皮层脊髓神经元细胞骨架蛋白基因表达的变化

为了解中枢神经系统神经元对轴突损伤的应答特点,进一步探讨神经损伤修复的细胞分子机制,我们在脊髓半横断动物模型上观察了皮层感觉运动区脊髓皮层神经元中α-Tub、NF-L、NF-M和NF-HmRNA的表达变化。损伤后1天皮质脊髓神经元中α-管蛋白mRNA明显降低,至损伤后2个月仍处于较低水平。管蛋白mRNA表达的下调与坐骨神经、面神经损伤后外周神经元的变化结果截然相反。因此,神经损伤后管蛋白的上调与有效再生关系密切。损伤后3天～2月皮层脊髓神经元内NF-L、-M和-HmRNA的含量明显降低。虽然外周和中枢神经系统轴突损伤后均引起神经丝m…     

大鼠脊髓神经干细胞的鉴定及光镜和电镜观察

本研究应用无血清培养技术对分离的大鼠胚胎脊髓神经干细胞进行体外培养,在倒置显微镜和电镜下观察细胞形态,应用BrdU标记、免疫荧光染色检测细胞增殖、分化情况。免疫荧光显示nestin、MAP2、GFAP以及BrdU/nestin、BrdU/MAP2、Br-dU/GFAP均有阳性表达,说明从大鼠胚胎脊髓可成功分离出神经干细胞,它们分化后可以表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原。脊髓神经干细胞具有自我更新能力,能分化为神经元和星型胶质细胞。     

脊髓半横断损伤后p53基因表达的变化

脊髓损伤亚急性期p53的表达变化仍不清楚,本实验建立脊髓半横断损伤（hSCI）大鼠模型,用定量PCR探讨脊髓p53基因水平变化,结果发现,术后14天,损伤脊髓p53基因表达明显下调。提示p53参与了hSCI损伤修复过程,值得重视。     

大鼠脊髓半横断损伤对脊髓versican、 CD44表达的影响

目的:观察大鼠脊髓半横断损伤(HSCI)对硫酸软骨素蛋白多糖versican及CD44在脊髓中表达的影响,为进一步探索脊髓损伤后的再生修复机制提供实验依据.方法:成年SD大鼠随机分为假手术对照组和HSCI 3、 7和14d组.建立成年大鼠HSCI(胸9～10)模型.取损伤位点头尾段胸9、胸10节段制作冷冻切片,用免疫组织化学ABC法和图像分析技术检测脊髓内versican和CD44的表达.结果:Versican阳性产物主要分布于细胞外基质中,腹角神经元和胶质细胞的胞质中也有分布;CD44阳性产物主要分布于细胞外基质及腹角神经元和胶质细胞的胞质中.损伤后脊髓内versican表达较对照组明显增加,CD44表达也较对照组明显增加.结论:HSCI后versican与CD44表达都增加,两者可能相互作用共同参与损伤后轴突生长被抑制这一过程.     

皮质脊髓束半横断损伤模型大鼠皮质脊髓束的超微结构改变

背景：有关皮质脊髓束受损后损伤附近及远处超微结构的整体变化的报道甚少。 目的：观察大鼠皮质脊髓束半横断损伤后皮质脊髓束超微结构的变化。 方法：选择性切割SD大鼠延髓左侧锥体,建立皮质脊髓束半横断损伤模型,于造模后4,14,28 d取受损皮质脊髓束,制备电镜标本。 结果与结论：透射电镜观察发现受损皮质脊髓束髓鞘和轴索发生肿胀,形态不规则。随着时间的延长,溃变进行性加重,受损皮质脊髓束主要表现为髓鞘破坏、溶解及轴索脱髓鞘病变、胞浆浓缩、细胞器增多及空泡样变性。脊髓颈、胸、腰段受损皮质脊髓束的溃变比损伤部位严重。     

电镜观察培养脊髓神经元溶酶体的形态及影响因素

目的　探讨初代培养脊髓神经元中线状溶酶体 (NLY)与圆形溶酶体 (SLY)的超微结构及其影响因素。方法　应用电镜酸性磷酸酶 (ACPase)细胞化学方法和透射电镜观察初代培养脊髓神经元中NLY与SLY的超微结构。结果　培养脊髓神经元中存在ACPase阳性的NLY与SLY。诺考达唑处理后NLY明显减少 ,SLY明显增多 ,主要分布在核周。佛波醇酯 (PMA)处理后可见NLY明显增多 ,靠近质膜处比靠近核膜处多 ,在突起中NLY沿着长轴分布 ,SLY明显减少。结论　初代培养脊髓神经元中溶酶体的形态受微管解聚剂诺考达唑及微管聚合剂PMA的调控     

大鼠脊髓半横断损伤后脊髓神经细胞凋亡与caspase-3的表达

为研究损伤脊髓神经细胞凋亡和相联系的caspase-3的表达,用原位末端标记法(TUNEL)检测了成年大鼠胸脊髓(T9)半横断损伤(hSCI)后脊髓神经细胞的凋亡变化,并用免疫组织化学染色方法观察了caspase-3的表达。结果显示:hSCI后6h损伤侧脊髓腹角即出现较多的TUNEL阳性神经细胞,并持续至5周。损伤脊髓的吻侧段于手术后4d达高峰,尾侧段脊髓于伤后1d达高峰。与假手术组相比,在所有观察的时间点TUNEL阳性神经细胞的数量在损伤侧均有明显增加。caspase-3免疫组化染色显示,与假手术组相比,伤后6h损伤侧脊髓腹角caspase-3表达也明显增加,并持续至5周。以上结果提示hSCI后,脊髓可出现神经细胞凋亡,且此凋亡的发生可能与caspase-3的表达有关。     

针刺对猫部分去传入脊髓Ⅱ板层可塑性的影响──电镜定量研究

既往研究已经表明针刺能促进脊髓的可塑性变化。本研究的目的是探讨针刺引起可塑性变化的最小疗程以及是否对非针刺侧也有影响。１０只猫切断一侧Ｌ１～Ｌ５、Ｌ７～Ｓ２背根及背根节，保留Ｌ６。术后电针刺激手术侧后肢Ｌ６神经支配范围的足三里和悬钟，伏兔和三阴交穴位。用电镜定量方法计数针刺一疗程（５只）和二疗程（５只）对脊髓Ⅱ板层不同突触性终末数的影响。结果表明：两组动物对照侧两类突触性终末数与非针刺动物比无明显变化，实验侧背根来源的复合终末数分别为对照侧的４５％与８８％，二疗程组比一疗程组和非针刺动物都明显增加。非背根来源的简单终末数在二疗程组虽有增加，但增加幅度与非针刺动物一致。表明针刺促进备用根纤维可塑性变化在二疗程时才明显，而对非针刺侧却无明显影响。     

横断猫脊髓后脑和脊髓诱发电位的改变

我们曾用从头皮记录的累加脑诱发电位为指标,探索对脊髓损伤引起的截瘫病人的新的诊断手段,以便在决定是否需要手术探查以及预测能否恢复和恢复难易等方面提供了一种比较客观的估计方法。该项研究已在人体上得到了肯定的结果。由于脊髓损伤造成截瘫的病人,至今仍然缺少比较客观的诊断技术,作为一项新的临床诊断技术,除了人体结果以外,必须在脊髓横断的动物上得到进一步的确证。为此进行了本研究。自Gasser等刺激背根从放置在猫脊髓背面的电极记录了诱发电位以来,曾有许多学者     

脊髓及脊髓损伤的生物力学

脊髓及脊髓损伤的生物力学研究有助于我们认识损伤机制，理解损伤的临床病理结果，进一步指导预防、治疗。作者重点对脊髓(包括灰白质、脑脊液、齿状韧带、软膜、硬脊膜)的力学特性及脊髓损伤力学研究中的动物模型(包括撞击损伤模型、压迫损伤模型)和有限元模型进行了综述，并对近年脊髓损伤在细胞水平的生物力学研究作了简要介绍。     

部分去传入猫脊髓背核突触性终末的可塑性变化——电镜定量研究

本实验用猫单侧后肢背根备用模型(切断L_1-L_5、L_7-S_2背根,保留L_6背根),应用光镜体视学计量分析背核和背核神经毡的横切面积;电镜定量研究背核神经毡内三种突触性终末的数量变化。结果显示:实验侧L_3背核及背核神经毡的横切面积未因去传入而发生皱缩;实验侧单位面积内突触性终末总数和活性带数量保持不变,其中来源于背根的巨大终末数还保留对照侧的75%,而来源于L_4以下脊髓中间神经元的小扣型终末数增加了70%;上述两类含圆形小泡的终末总数保持不变;来源于背核边缘细胞的扁平小泡终末数与列照侧无显著性差异。上述结果表明去大部分后肢背根后,在背核内引起了备用背根(L_6)的同型出芽和其它来源轴突的异型出芽,并重建了突触联系。因而从数量上完全代偿了丢失的终末。     

电镜硝酸镧示踪技术用于脏器早期损伤的观察

电镜硝酸镧示踪技术用于脏器早期损伤的观察陆江阳，梁延杰，李玲，张桂香，杨建法我们利用大鼠腹腔注射酵母多糖制成多器官衰竭模型￣［１，２］，运用电镜组化技术——硝酸镧示踪标记观察多器官衰竭发生前各主要脏器实质细胞生物膜及细胞连接的损伤情况。一、材料与方法...     

胚胎脊髓移植在成鼠损伤脊髓神经通路重建中的作用——电镜CB—HRP示踪

目的：探讨胎鼠脊髓在成鼠损伤脊髓神经通路修复中的作用。方法：将Ｅ１４大鼠胚胎脊髓植入成鼠损伤脊髓后３０、５０、７０天时，通过坐骨神经和红核引入ＣＢ－ＨＲＰ，取移植部位脊髓做冰冻切片，经ＴＭＢ组化显色后，再分步制成电镜标本，然后在电镜下观察移植物和宿主脊髓的纤维联系。结果：术后３０天时，来自背根的轴突再生进入移植物，附近运动神经元和中间神经元的突起此时向移植物内发送新支。术后５０天时，来自背根有的轴     

猫部分去传入脊髓Ⅱ板层内突触性终末的可塑性变化—电镜定量研究

应用电镜定量方法观测猫单侧腰骶背切除术后１５天和３０天骨髓Ｌ５Ⅱ板层内两类突触性终末数量，大小变化。因两组动物手术侧Ⅱ板层面积，Ⅱ板层神经毯面积分数，胞体和血管的面积分数末发生改变，两组动物非手术Ⅱ板层两类突触性终末数量无明显差异。