细胞凋亡及相关基因联合检测对胃黏膜癌前病变的诊断及癌变预测的意义

目的 探讨细胞凋亡及相关基因的表达在胃黏膜癌变中的作用及对胃癌的预测和早期诊断的意义.方法 对胃镜活检确诊为胃癌(胃癌组)及不典型增生(分为轻、中、重度不典型增生组)的标本应用TUNEL法检测细胞凋亡,应用免疫组化法检测p16、bcl-2、ras、c-myc、p53基因的表达.结果 p16、bcl-2、ras、c-myc和p53基因表达率在轻、中、重度不典型增生组和胃癌组分别为69.23%,30.77%,38.46%,23.08%,7.69%;50.00%,37.50%,81.25%,43.75%,18.75%;36.36%,63.64%,81.82%,72.73%,45.45%;27.50%,67.50%,95.00%,90.00%,60.00%.轻度不典型增生组与胃癌组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);ras、c-myc和p53基因表达率轻度不典型增生组与重度不典型增生组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);p53与c-myc基因表达率中度不典型增生组与胃癌组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).p16、bcl-2、ras、c-myc和p53基因表达存在相关性.细胞凋亡指数胃癌组最低,轻、中度不典型增生组与胃癌组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).轻度不典型增生组与重度不典型增生组比较,差异也有统计学意义(P＜0.01).结论 细胞凋亡指数减少及ras、bcl-2、c-myc、p16、p53基因的异常表达在胃黏膜癌变过程中发挥重要作用.中、重度不典型增生为重要的癌前病变.     

细胞凋亡的相关基因调控

细胞凋亡(apoptosis),也称程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD),是指一连串连续性细胞变化最终导致细胞死亡,而不引起炎症反应(与细胞坏死不同),是调节细胞数目及生命活动的一个积极主动过程[1]。细胞凋亡的形态学特征     

苯中毒细胞凋亡相关基因研究进展

近年来,随着改革开放的不断深入,一些有害作业也随之转嫁国内,苯中毒病例报告剧增,事实上苯中毒已经成为我国当前严重的中毒性职业病之一.长期、过量接触苯可引起骨髓造血功能障碍,表现为单系或全血细胞减少、再生障碍性贫血（AA）、骨髓增生异常综合征（MDS）,甚至发生白血病。虽然国内外有关专家对苯中毒进行了多方面的研究和探讨,然而其发病机制尚不明确。     

BAG-1基因在乳腺癌癌前病变中的表达及其意义

目的:研究抗凋亡基因Bag-1在乳腺癌癌前病变组织中的表达及Bcl-2、Bax的表达情况,探讨Bag-1与Bcl-2、Bax的相互关系及其临床意义。方法:采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)免疫组化方法对15例乳腺平坦型上皮不典型增生(FEA)、20例乳腺导管内癌(DCIS)、20例乳腺浸润性导管癌(IDC)及20例乳腺正常组织中Bag-1、Bcl-2、Bax的表达进行检测并收集全部患者的临床病理资料进行统计学分析。结果:①Bag-1、Bcl-2、Bax在15例乳腺FEA、20例乳腺DCIS、20例乳腺IDC及20例乳腺正常组织中的阳性表达率分别为33.3%、33.3%、20.0%;70.0%、30.0%、50.0%;70.0%、50.0%、65.0%;25.0%、30.0%、10.0%。②Bag-1在乳腺FEA中的阳性表达率低于乳腺IDC和DCIS中的表达(P<0.05),Bag-1在乳腺正常组织中的阳性表达率低于乳腺IDC和DCIS中的表达(P<0.01);Bax在乳腺FEA中的阳性表达率低于乳腺IDC中的表达(P<0.01),Bax在乳腺正常组织中的阳性表达率低于乳腺IDC和DCIS中的表达(P<0.01)。③在乳腺FEA中Bag-1与Bcl-2的阳性表达呈正相关关系(P<0.01),在乳腺DCIS中Bag-1与Bax的阳性表达、Bcl-2与Bax的阳性表达呈正相关关系(P<0.01)。结论:检查结果说明在肿瘤发生发展的多基因调节中,Bag-1与Bcl-2在从FEA到癌变的过程中有相互促进作用。肿瘤的发生发展过程是受多基因调控的,多因素共同影响肿瘤的增殖。     

肿瘤特异性凋亡基因对人淋巴瘤细胞诱导作用

目的观察肿瘤特异性凋亡基因(Apoptin gene)对人淋巴瘤细胞U937的凋亡诱导作用。方法用含有肿瘤特异性凋亡(Apoptin)基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人淋巴瘤细胞U937；采用台盼蓝染色法、RT—PCR及DNA凝胶电泳等方法研究其在不同时间条件下对人淋巴瘤细胞U937诱导凋亡的作用。结果Apopin基因瞬间转染的人淋巴瘤细胞U937可出现明显的细胞凋亡：而且凋亡细胞的数量与Apoptin的转染时间有关。结论Apoptin基因具有诱导人淋巴瘤细胞U937凋亡的作用。     

壬基酚对大鼠前列腺细胞凋亡影响及机制

目的探讨壬基酚对大鼠前列腺组织细胞凋亡及caspase-3、caspase-8和caspase-9 mRNA表达影响。方法健康清洁级Wistar 雄性大鼠50 只,按体重随机分为5 组,分别为12.5、25、50、100 mg/kg壬基酚染毒组和对照组(橄榄油),每组10 只;皮下注射染毒(1 mL/kg),每天1 次,连续染毒30 d;Tunel法观察前列腺前叶组织细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法观察组织中caspase-3、caspase-8、caspase-9 mRNA表达。结果12.5、25、50、100 mg/kg 壬基酚染毒组大鼠前列腺细胞凋亡率分别为(3.07±1.31)%、(5.21±1.47)%、(6.31±1.29)%、(8.90±0.18)%,均低于对照组的(12.73±2.19)%(P<0.05);与对照组比较,12.5、25、50、100 mg/kg 壬基酚染毒组大鼠前列腺组织细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9 mRNA表达均降低(P<0.05)。结论壬基酚可致雄性大鼠前列腺细胞凋亡率下降,其机制可能与前列腺细胞caspase-3、caspase-8和caspase-9 mRNA表达降低有关。     

硒对氟所致细胞凋亡及p53基因的影响

目的 研究硒对慢性氟中毒大鼠肝肾细胞凋亡及相关基因的影响。方法 对饮高氟水(100mg／L)及高氟加不同浓度硒饲料(2．3mg／kg)大鼠饲喂4个月后，取其肝肾组织进行透射电镜形态学观察、DNA凝胶电泳及流式细胞术观察各组细胞凋亡情况，同时检测肝肾细胞凋亡的相关基因p53。结果 与对照组相比，高氟及氟加硒组．肝肾细胞凋亡率及p53显著增加，氟加硒组肝肾细胞凋亡率明显低于单纯加氟组。结论 高氟可诱导细胞凋亡，硒可拮抗氟引起的细胞凋亡，且p53参与了细胞凋亡的调控。     

脑膜瘤中细胞凋亡及凋亡相关基因蛋白表达的临床研究

目的　通过对脑膜瘤组织中凋亡程度以及脑膜瘤组织中凋亡相关基因的蛋白表达进行研究 ,探讨不同病理分级脑膜瘤中凋亡强弱程度以及凋亡相关蛋白表达的高低。方法　采用原位末端转移酶标记法 (TUNEL)检测脑膜瘤组织中的凋亡变化 ,采用免疫组化检测凋亡相关基因p5 3、Caspases - 3、bcl- 2蛋白表达。结果　经统计检验 ,凋亡在良性脑膜瘤与不典型性及恶性脑膜瘤间差别有显著意义 (P <0 .0 5 ) ,不典型性与恶性脑膜瘤间无显著差别(P >0 .0 5 )。Caspases - 3、p5 3蛋白表达随恶性度上升而上升 (P <0 .0 5 ) ,bcl- 2的蛋白表达与病理级别无关联 (P>0 .0 5 )。良性脑膜瘤各亚型间凋亡程度无差别 (P >0 .0 5 )并与性别无关 (P >0 .0 5 ) ,p5 3、Caspases- 3、bcl- 2在良性脑膜瘤各亚型间表达无差别。结论　脑膜瘤组织中存在凋亡 ,并且随肿瘤病理类型的恶化而加强 ,p5 3、Caspases- 3蛋白表达与凋亡程度相一致 ,bcl- 2蛋白表达则与凋亡无明显关系 ,良性脑膜瘤各亚型间凋亡无显著差别 ,凋亡表现也与性别无关 ,bcl- 2、p5 3、Caspases- 3的蛋白表达无明显关联     

浓缩铀诱发细胞凋亡的形态及基因调控

目的　研究浓缩铀诱发人白血病HL 6 0细胞凋亡的电镜形态特征 ,以及对相关基因bcl 2和bax的调控作用。方法　探讨受浓缩铀内照射不同时间 ,诱发HL 6 0细胞凋亡的电镜形态 ;运用免疫组织化学技术探讨浓缩铀对HL 6 0细胞bcl 2和bax蛋白的表达 ,运用RNA分子杂交技术探讨浓缩铀对HL 6 0细胞bcl 2mRNA的转录水平表达的影响。结果　人白血病HL 6 0细胞在浓缩铀辐照作用下 ,可呈现核断裂和核染质边聚。对照的HL 6 0细胞中bcl 2蛋白呈高度表达 ,为 (88± 7) % ,而受浓缩铀辐照下 ,可下调至(6 1± 5 ) %。bax在对照细胞中表达很低 ,在浓缩铀作用下 ,未见明显改变。经浓缩铀辐照后 ,可使HL 6 0细胞中的bcl 2mRNA表达呈明显下调。结论　浓缩铀内照射可诱发人白血病HL 6 0细胞凋亡发生 ,且其诱发HL 6 0细胞的凋亡作用与其下调凋亡相关基因bcl 2的表达相关联     

APC基因在胃癌、癌前病变及胃腺瘤中表达意义的研究

目的探讨APC基因在胃癌、癌前病变及胃腺瘤发生、发展中的重要作用及其在胃癌早期诊断中的意义。方法运用免疫组织化学技术检测APC基因在30例胃癌、30例不典型增生、30例肠上皮化生、10例胃腺瘤和20例正常胃黏膜组织中的表达。结果APC基因阳性表达率，胃腺瘤为50．0％，肠上皮化生为66．7％，不典型增生为53．3％及胃癌为53．3％，均比正常胃黏膜的90．0％低（P均〈0．05）。中重度不典型增生APC基因阳性表达率为47．1％，比轻度不典型增生（61．5％）低（P〈0．05）。APC基因阳性表达率与胃癌是否有淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论APC基因在胃癌的发生、发展中及胃腺瘤的发生中起重要作用。APC基因表达检测有助于早期胃癌的诊断。     

胃癌及癌前病变胃黏膜和胃腺瘤中APC基因表达及其意义

目的 探讨结肠腺瘤性息肉病（APC）基因在胃癌及胃腺瘤发生、发展中的重要作用以及其在胃癌早期诊断中的意义。方法 运用免疫组化技术检测APC基因蛋白在30例胃癌，30例不典型增生，30例肠上皮化生（肠化）和10例胃腺瘤，30例正常胃黏膜组织中的表达。结果 APC基因蛋白阳性表达率在胃腺瘤（50％），肠化（66．7％），不典型增生胃黏膜组织（53．3％）及胃癌（60％）中比正常胃黏膜（90％）明显降低（P〈0．05）。在中重度不典型增生胃黏膜组织中APC基因表达率（30．8％）比在轻度不典型增生中（70．6％）低（P〈0．05）。APC基因在中分化腺癌组表达率与低分化组比较差异有统计学意义（38．5％vs 83．3％，P=0．0287）。肠型胃癌中APC基因的表达率比在弥漫型胃癌低（47．6％vs 88．9％，P=0．0401）。结论 APC基因的失活在胃腺瘤的发生中起重要作用。APC基因的失活是胃癌发生的早期事件，APC基因蛋白表达产物的检测对早期胃癌的诊断可能是一项比较有价值的指标。     

p27在胃癌演化系列组织中的表达及其意义

目的　探讨p2 7蛋白表达在胃癌发生和发展中的作用以及与肿瘤生物学行为的关系。方法　应用免疫组织化学方法 ,检测p2 7蛋白在浅表性胃炎、萎缩性胃炎、肠化生、异型增生和胃癌组织中的表达 ,分析p2 7在不同病变组织中的表达状况以及与胃癌临床病理参数的关系。结果　p2 7在胃癌中的表达强度低于其他组织 (P <0 .0 1) ;p2 7表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期等临床病理参数相关 (P <0 .0 1) ,在有浆膜侵犯、淋巴结或远处转移、TNM分期晚的胃癌中p2 7表达强度显著下降。结论　p2 7表达异常是胃癌发生和发展的一个重要分子机制。分析p2 7蛋白表达状况有助于胃癌的早期诊断及恶性程度评估。     

上皮钙粘素和基质金属蛋白-2在胃癌组织的表达及意义

目的探讨上皮钙粘素和基质金属蛋白酶-2(MMP2)在胃癌组织浸润和转移中的表达和意义。方法采用SP免疫组化法检测胃癌组织及胃良性病变中E-cadherin和MMP2表达情况。计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 E-cadherin在胃癌中的表达低于胃部良性病变,在淋巴结转移组低于无淋巴结转移组(P<0.05),在浸润组的表达低于无浸润组的表达(P<0.05),在胃癌低分化组的表达低于高中分化组(P<0.05)。MMP2在胃癌中的表达高于胃部良性病变,在淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P<0.05),在浸润组的表达高于无浸润组的表达(P<0.05),在胃癌低分化组高于高中分化组(P<0.05)。同时,两者在胃癌中的表达存在相关性(P<0.05)。结论胃癌中存在E-cadherin下调和MMP2上调且两者具有相关性,两者的联合测定有助于判断胃癌患者的病期及预后。     

血清SCCAG在宫颈癌及癌前病变中的临床意义

目的:研究鳞状细胞癌抗原(SCCAg)在宫颈癌及癌前病变中的表达和意义。方法:分析宫颈上皮内瘤变(CIN)组368例、宫颈癌组84例的SCCAg值与患者不同临床分期、分化程度等病理参数之间的关系。结果:SCCAg在宫颈癌前病变及宫颈癌早期已有变化,与临床FIGO分期、分化程度、肿瘤体积的增大及淋巴结转移呈正相关。结论:SCCAg是宫颈癌的重要临床肿瘤标志物,较高的血清SCCAg值可能意味着肿瘤恶性程度越高,为患者的辅助诊断、病情估计提供全面的指导信息。     

荧光胃液分析胃癌癌前病变与胃液中幽门螺杆菌感染的关系

目的利用荧光胃液分析与胃液中Hp相关性的研究，评估对胃癌癌前病变的诊断价值。方法收集980例各种胃内病变患者的胃液，用荧光胃液分析仪进行荧光胃液分析，同时进行胃液Hp检测。结果以受试者工作特征（ROC）曲线为最佳截断点KJF≥0．85作为胃癌判断标准，诊断胃癌的灵敏度为83．3％；重度萎缩性胃炎伴肠上皮化生及不典型增生患者的KJF值接近胃癌患者；在胃癌患者中胃液Hp检出率为45．2％，重度萎缩性胃炎伴肠上皮化生及不典型增生患者Hp检出率为69．3％。结论荧光胃液分析对胃癌的诊断是一种安全、有效的方法，对胃癌癌前病变的诊断特异度较高，且胃癌患者的胃液中Hp感染率较低。     

宫颈癌Ki-67的表达与凋亡的关系研究

目的:探讨K i-67表达、细胞凋亡与宫颈癌发生、发展之间的关系。方法:应用免疫组化SP法检测K i-67表达及TUNEL法检测凋亡细胞标记指数(AI)。结果:从正常宫颈-C IN各级-宫颈癌,K i-67阳性细胞标记指数逐渐升高,而凋亡指数/K i-67阳性指数的比率呈逐渐下降趋势,且C IN各组与宫颈癌相比差异有显著性(P<0.01,P<0.05)。结论:K i-67的表达与宫颈癌的发生、发展有关,与凋亡标记结合应用,可用于判断宫颈病变的预后并指导临床治疗。     

气阴两虚型胃癌前病变凋亡相关基因的表达及中药的影响

目的探讨气阴两虚证型患者凋亡相关基因的表达,观察善胃Ⅲ号治疗气阴两虚型胃癌前病变的疗效,并从细胞凋亡和相关基因的表达方面探讨其作用机理。方法77例患者均经胃镜与病理检查证实为胃癌前病变,随机分成两组,光镜观察治疗前后胃黏膜的增生情况,并采用Tunel法检测细胞凋亡,免疫组化检测fas、fas—L、bcl-2、bax的表达。结果治疗组（善胃Ⅲ号,气阴两虚型）有效率79．31％（29例）,优于对照组（猴头菌片）29．17％（48例）。治疗组细胞凋亡率和fas—L、bax表达率分别从（15．46±11．91）％、46．67％、42．88％升高至（71．43±19．87）％、76．92％、68．42％;而bcl-2表达率从87．50％下降至20．00％。对照组猴头菌片对上述指标无明显作用。结论善胃Ⅲ号能有效治疗气阴两虚型胃癌前病变,明显诱导胃癌前病变胃黏膜细胞凋亡,增强fas—L、box表达而抑制bcl-2表达。     

环氧化酶-2、p53和Bcl-2在胃癌组织中的表达及其意义

目的检测环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）、p53和Bcl-2在胃癌组织中的表达,并探讨其意义。方法利用半定量RT—PCR法检测80例胃腺癌及对应的癌旁组织和正常胃组织中COX-2的表达情况;采用免疫组化技术检测80例胃腺癌及对应的癌旁组织和正常组织中p53、Bcl-2的表达情况。结果（1）COX-2阳性表达率分析,COX-2阳性表达率在胃癌组织明显高于相应的癌旁组织和正常组织（0．025〈P〈0．05）,COX-2在低分化的胃腺癌中的阳性表达率高于中高分化类型的胃腺癌（0．01〈P〈0．025）;（2）p53基因表达率在胃癌组织明显高于相应的癌旁组织和正常组织（P〈0．005）,p53基因在低分化胃癌中的阳性表达率明显高于高分化类型的胃腺癌（O．01〈P〈0．025）。（3）Bcl-2基因在胃癌组织的表达率明显高于相应的癌旁组织和正常组织（P〈0．005）,Bcl-2基因表达率在低分化类型的胃腺癌中的阳性表达率明显高于中高分化类型胃腺癌（P〈0．005）。结论COX-2、p53、Bcl-2与胃癌的发生相关,COX-2和Bcl-2在不同分化类型的胃癌组织中的表达差异均具有显著性统计学意义,p53在低分化与高分化腺癌组织中的表达差异有显著性意义,因此可以用来判断肿瘤的预后。