环氧化酶2在大肠癌中的表达及其与大肠癌生物学特性的关系

[目的]通过观察环氧化酶2（Cyclooxygenase-2,COX-2）在大肠腺瘤、大肠癌中的表达及其与大肠癌生物学特性的关系,初步探讨其在大肠癌发生、发展过程中的作用机制。[方法]应用免疫组织化学染色法对78例大肠癌组织、21例大肠腺瘤组织和13例正常大肠黏膜组织进行免疫组化染色;应用它检验分析COX-2的表达情况及其与大肠癌临床病理特征的关系。[结果]大肠癌组织中COX-2阳性表达率为78．21％,明显高于大肠腺瘤的52．38％和正常大肠黏膜组织的7．69％（P〈0．05）;COX-2表达与大肠癌的Duke＇s分期、分化程度、淋巴结转移有相关性（P〈0．05）,而与大肠癌患者的性别、组织学类型无关（P〉0．05）。[结论]COX-2在大肠癌组织中表达率明显高于大肠腺瘤,而正常大肠黏膜中表达率极低或不表达;COX-2表达与大肠癌生物学特性有明显相关性。     

PDGF-D与MPO在大肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨血小板源性生长因子D(PDGF-D)与髓过氧化物酶(MPO)在大肠癌组织和大肠腺瘤组织中的表达及其临床意义。方法通过免疫组织化学染色法检测大肠癌组织及大肠腺瘤组织中PDGF-D与MPO的表达及其相关性。采用免疫组化染色方法检测88例大肠癌石蜡包埋组织、72例大肠腺瘤组织中PDGF-D与MPO的表达,并分析MPO和PDGF-D的表达与大肠癌临床病理特征的关系。结果大肠癌组织中PDGF-D与MPO阳性表达率分别为85.23%、63.64%,均显著高于大肠腺瘤组织(34.72%、27.78%),差异有统计学意义(P0.01)。PDGF-D与MPO在大肠癌组织中的表达呈正相关(r=0.29,P0.05)。结论 PDGF-D与MPO可能参与了大肠癌的启动及发生过程,在大肠癌的发生、发展和转移过程中起着重要作用。     

COX-2、EGFR和Ki67在大肠癌组织中的表达及其意义

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)、表皮生长因子受体(EGFR)和Ki67在大肠癌组织中的表达及其意义.方法 选取大肠癌70例、大肠腺瘤21例和正常大肠组织15例,采用免疫组织化学Envision方法检测COX-2、EGFR和Ki67的表达.结果 在正常大肠黏膜、大肠腺瘤和大肠癌组织中,COX-2的阳性表达率分别为33.3%、71.4%和80.0%,大肠癌和腺瘤组显著高于正常组(P均＜0.05);EGFR的阳性表达率依次为0、23.8%和65.7%,两两比较有统计学差异(P均＜0.05);Ki67的阳性表达率依次为40.0%、76.2%和82.8%,大肠癌和腺瘤组织中的表达均高于正常大肠组织(P均＜0.05).COX-2在有淋巴结转移的大肠癌组中的表达明显高于无淋巴结转移组(P＜0.05);EGFR在低分化、高分期和有淋巴结转移大肠癌中的表达明显增强(P均＜0.05),且COX-2与EG-FR、COX-2与Ki67、EGFR与Ki67之间均具有相关性(r=0.316,0.435,0.314,P均＜0.05).结论 COX-2、EGFR和Ki67对大肠癌的发生、发展有协同作用.     

真核细胞起始因子4E在大肠肿瘤中的表达意义

目的 研究真核细胞起始因子4E（eIF4E）在大肠良恶性肿瘤中的表达,探讨其在大肠癌发病过程中的作用及其与大肠癌生物学特性的关系.方法 采用免疫组化S-P法对62例大肠癌、43例大肠腺瘤及30例正常大肠组织中的eIF4E进行检测.结果 eIF4E在大肠癌中的阳性表达率显著高于大肠腺瘤,而正常大肠黏膜中未见eIF4E阳性表达.eIF4E阳性表达与肿瘤的部位、组织分化程度均无相关性,而与肿瘤浸润深度、淋巴结转移呈显著正相关.结论 eIF4E过度表达在大肠癌形成过程中起重要作用,且eIF4E过度表达可作为提示大肠癌预后不良的指标之一.     

凋亡相关基因caspase-9、Bcl-2在大肠腺瘤和大肠癌中的表达及意义

目的 探讨凋亡相关基因caspase-9和Bcl-2在大肠腺瘤、大肠癌中的表达及意义。方法 应用免疫组化S-P法检测56例大肠癌、48例大肠腺瘤及20例正常大肠黏膜中的caspase-9和Bcl-2蛋白的表达。用TUNEL法检测细胞调亡。结果 正常大肠黏膜、大肠腺瘤和大肠癌中caspase-9的阳性表达率分别为5.00％、33.33％、64.29％,其表达率在三者间有显著性差异(P<0.01)。Bcl-2在正常大肠黏膜、大肠腺瘤和大肠癌中的阳性表达率分别为15.00％、87.50％、60.71％,三者间亦有显著性差异(P<0.01)。caspase-9,Bcl-2的表达与肿瘤的分化程度有关(P<0.01),与Dukes分期无关(P>0.05)。正常大肠黏膜、腺瘤和大肠癌中凋亡指数有显著性差异(P<0.01),凋亡指数与肿瘤的分化程度有关(P<0.01),与Dukes分期无关(P>0.05)。caspase-9,Bel-2的表达与凋亡指数有密切联系(P<0.01)。结论 在大肠癌形成过程中,caspase-9,Bcl-2参与了肿瘤形成的共同通道;肿瘤早期阶段细胞凋亡的异常和增生过度,楞能是大肠癌的发病原因之一。     

CyclinD1和Cdk4在大肠癌组织中的表达及意义

应用免疫组化SP法对大肠癌、大肠腺瘤、正常大肠组织中周期蛋白D1(CyclinD1)和周期蛋白依赖激酶4(Cdk4)的表达进行检测.结果CyclinD1和Cdk4在大肠癌组织中的阳性表达率分别为55.5%(26/47),59.6%(28/47);在腺瘤组织中分别为38.1%(8/21),42.9%(9/21);在正常组织中分别为13.3%(2/15),6.7%(1/15).CyclinD1和Cdk4的表达在正常组织、腺瘤组织、大肠癌组织呈递增趋势(P<0.05).大肠癌中CyclinD1阳性表达与肿瘤分化程度、Dukes分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),而与癌胚抗原(CEA)水平无关(P>0.05);Cdk4阳性表达与肿瘤分化程度,Dukes分期有关(P<0.05),与淋巴结转移及CEA水平无关(P>0.05).CyclinD1与Cdk4的阳性表达呈正相关关系(r=0.393,P<0.05).认为CyclinD1和Cdk4在大肠癌中有较高的阳性表达率,且具有协同作用,提示可能与大肠癌的发生有密切关系.     

15-PGDH和COX-2在大肠腺癌中的表达

目的研究NAD+依赖性15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)和环氧合酶-2(Cycboxygenase-2,COX-2)在大肠腺癌组织、大肠腺瘤组织及正常大肠组织中的表达,探讨两者在大肠腺癌组织中的表达情况及其与大肠腺癌临床病理因素的关系。方法应用免疫组织化学(SABC)法检测40例大肠腺癌组织、20例大肠腺瘤组织和20例正常大肠组织中15-PGDH及COX-2的表达情况。结果15-PGDH在大肠腺癌(15%)和腺瘤组织中(20%)的阳性表达率显著低于正常大肠组织(100%)(P0.01),在大肠腺癌和腺瘤中15-PGDH的表达差异无统计学意义(P0.05)。15-PGDH蛋白表达与大肠腺癌患者的性别、年龄、分化程度及Dukes分期和有无淋巴结转移等临床病理参数均无关(P0.05)。COX-2在大肠癌组织(80%)和大肠腺瘤组织中(70%)的表达明显高于正常大肠组织(25%)(P0.01)。且其在大肠癌中的阳性表达率随大肠癌Dukes分期的升高、病理分化程度的降低及远处淋巴结的转移而逐渐增高(P0.05)。大肠癌组织中15-PGDH和COX-2的表达呈负相关(r=-0.544,P=0.000)。结论大肠腺癌组织中15-PGDH的表达缺失或减少可能发生在大肠腺癌发生、发展的早期,是大肠腺癌发生的抑制剂。大肠腺癌组织中COX-2的表达明显增高,其表达的增加可能促进了大肠癌的发生、发展。     

大肠肿瘤的基因表达及与细胞凋亡的抑制关系

目的探讨 bcl-2和 P53蛋白在大肠肿瘤中的表达及与细胞凋亡关系。方法用免疫组化方法观察了45例大肠腺瘤和61例大肠癌中 bcl-2和 P53蛋白的表达。结果正常大肠粘膜中 bcl-2和 p53均未见表达,而大肠腺瘤及大肠癌阳性率均较正常明显增加(P<0.01)。大肠腺瘤 p53表达随腺瘤大小增加而增加,其中≥20 mm 组阳性率(77.8%)显著高于<10 mm 组(35.0%,P<0.05)。P53蛋白阳性率也随不典型增生程度增加而增高。p53表达与大肠癌分化程度及 Duke 分期有关。大肠癌细胞凋亡指数与 bcl-2阳性表达呈负相关。大肠腺瘤中 bcl-2和 P53蛋白的表达也呈负相关。结论 bcl-2蛋白表达对大肠癌前病变.腺瘤的增殖有一定意义,p53在大肠腺瘤癌变和大肠癌进展中起重要作用,它们是参与细胞凋亡的良好指标。     

SFRP2和β-catenin在大肠癌中的表达及其临床意义

目的:探讨分泌型Frizzled相关蛋白2(Secreted Frizzled-related proteins 2,SFRP2)和β-连接素(β-catenin)在大肠癌发生、发展中的作用.方法:采用免疫组化SP法检测20例正常大肠黏膜、加例非腺瘤性息肉、36例大肠腺瘤和42例大肠癌组织中的SFRP2和β-catenin蛋白的表达情况,分析二者表达的差异及其与临床病理参数的关系.结果:大肠癌和大肠腺瘤组SFRP2的阳性表达率显著低于正常大肠黏膜和非腺瘤性息肉组(28.57% VS 100.0%,95.0%;36.11% VS 100.0%,95.0%,均P＜0.05);大肠癌中β-catenin膜表达缺失率显著高于正常大肠黏膜、非腺瘤性息肉及大肠腺瘤组(52.4% VS 0%,0%,11.1%,均P＜0.05);大肠癌和大肠腺瘤组β-catenin异位表达率显著高于正常大肠黏膜和非腺瘤性息肉组(64.3% VS 0%,0%;30.6% VS 0%,0%,均P＜0.05),大肠癌β-catenin异位表达率高于大肠腺瘤(P＜0.05);SFRP2表达、β-catenin膜表达缺失及异位表达与大肠癌患者的肿瘤部位、大体形态、肿瘤直径、淋巴转移和Dukes分期无明显关系,而与大肠癌的分化程度密切相关,其中SFRP2表达还与大肠癌的浸润深度密切相关:SFRP2表达与β-catenin膜表达缺失、异位表达均呈明显负相关(r=-0.452,P=0.003;r=-0.519,P=0.000),而β-catenin膜表达缺失与异位表达呈明显正相关(r=0.782,P=0.000).结论:SFRP2和β-catenin的表达与大肠癌的发生、发展密切相关,可能是大肠癌发生的早期事件,且SFRP2表达与β-catenin膜表达缺失、异位表达均呈负相关,前者起抑癌作用,后者起促癌作用.     

大肠腺瘤及癌组织HIF-1α的表达与凋亡增生的关系

目的:研究缺氧诱导因子1-α(HIF-1α)在大肠肿瘤中的表达及其与凋亡、增生的关系,探讨HIF-1α在大肠癌发生发展中的作用. 方法:运用免疫组化的方法检测HIF-1α,Bcl-2,Bax, PCNA在正常大肠组织13例,大肠腺瘤26例,大肠癌50例中的表达. 结果:正常大肠组织HIF-1α均为阴性表达,腺瘤及癌组织中HIF-1α阳性表达率为30.8%和64%,大肠癌HIF-1α表达率显著高于腺瘤(x2=8.546,P<0.01).大肠癌HIF-1α表达与浸润,淋巴结转移,Dukes分期相关(x2=6.339, P<0.05;x2=9.091,P<0.01;x2=10.72,P<0.05).HIF- 1α表达与肿瘤大小、分化程度无关(P>0.05).Bcl-2在3 组中阳性表达率为15.4%,50.0%和76.0%,三者间表达率差别有显著意义(P<0.05).Bax在3组中阳性表达率为76.9%,65.4%和58.0%,三者间表达率无显著性差异(P>0.05).Bcl-2,Bax表达与肿瘤大小,分化,Dukes 分期无关(P>0.05).正常大肠组织PCNA表达均为低增生活性,腺瘤及癌中PCNA高增生活性者26.9%和56.0%, 癌组织PCNA高增生活性表达显著高于腺瘤(x2=5.073, P<0.05).大肠癌增生程度与浸润及Dukes分期相关(x2=6336, P<0.05;x2=11.219,P<0.01).腺瘤及大肠癌HIF-1α表达与Bcl-2,PCNA增生程度呈正相关(r=0.5,r=0.535, P<0.05;r=0.457,r=0.426,P<0.01),与Bax表达无关. 结论:HIF-1α抑制大肠肿瘤凋亡,促进增生,与肿瘤浸润转移密切相关,在大肠癌发生发展中发挥重要作用.     

CAV-1在结直肠癌患者肠黏膜中的表达及其意义探讨

[目的]研究质膜微囊蛋白1（caveolin-1,CAV-1）在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）患者大肠黏膜中的表达,并初步探讨其临床意义.[方法]在肠镜室募集无器质性肠道疾病患者12例、结直肠癌患者16例,通过结肠镜分别在无器质性肠道疾病患者的乙状结肠处和结直肠癌患者的病变明显处取材,每例取3块.获取的标本经免疫组织化学染色,检测CAV-1在结肠黏膜中的表达.[结果]免疫组织化学法检测CAV-1在无器质性肠道疾病患者和结直肠癌结肠黏膜中的表达发现,CAV-1蛋白阳性染色主要位于胞浆,胞核少见或未见染色;在无器质性肠道疾病患者的结肠黏膜组织胞浆中仅有少量阳性染色点,而CAV-1在结直肠癌组织中的表达明显,染色呈现颗粒状.无器质性肠道疾病患者组CAV-1表达的阳性指数为（12.87±2.76）,结直肠癌组的表达明显增强,其阳性指数为（34.42±5.44）,较无器质性肠道疾病患者表达明显增强（P＜0.01）.[结论]CAV-1在直结肠癌黏膜中高表达,CAV-1是结直肠癌发病的促使因子.     

结直肠癌组织中AKT2的表达变化及意义

目的观察结直肠癌组织中AKT2蛋白的表达,探讨其在结直肠癌预后判断中的应用价值。方法采用免疫组化SP法检测75例结直肠癌组织和20例癌旁正常组织中的AKT2。结果AKT2阳性表达在正常组织中低于结直肠癌组织（P〈0．01）,并与淋巴结转移、Dukes分期、浸润深度、远处转移有关（P均〈0．05）;AKT2阳性者的生存时间明显短于阴性者（P=0．0007）。多因素分析结果显示,淋巴结转移、Dukes分期、远处转移和AKT2是独立的预后指标（P分别为0．013、0．018、0．001、0．038）。结论结直肠癌组织中AKT2表达上调;AKT2阳性表达与结直肠癌转移、侵袭性有关,可作为评价结直肠癌预后的指标之一。     

Syndecan-1在结直肠腺瘤和腺癌中的表达变化及其意义

Syndecan-1是一种由硫酸乙酰肝素链和硫酸软骨素链修饰的I型跨膜蛋白多糖，主要表达于上皮细胞表面，与肿瘤的多种生物学行为关系密切。目的：研究Syndecan-1在结直肠腺瘤和腺癌中的表达，探讨其与结直肠腺瘤和腺癌发生的关系。方法：分别采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组化染色检测56例结直肠腺瘤、42例腺癌和20例正常结肠组织中Syndecan．1mRNA和蛋白表达，并分析其与结直肠腺癌临床病理特征的关系。结果：RT-PCR和免疫组化染色结果显示Syndecan-1mRNA和蛋白在重度异型增生腺瘤和腺癌中的表达显著低于正常结肠组织和轻、中度异型增生腺瘤（P〈0．05），正常结肠组织与轻、中度异型增生腺瘤之间以及重度异型增生腺瘤与腺癌之间其表达无明显差异。Syndecan-1mRNA和蛋白表达与腺癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移以及TNM分期相关（P〈0．05），与性别、年龄以及是否合并结直肠腺瘤无关。结论：随着结直肠腺癌恶性程度的增加，Syndecan-1表达显著降低。Syndecan-1介导的细胞间黏附破坏在结直肠癌的致癌机制中可能起关键作用。     

Nup88在结直肠癌组织中的表达及意义

目的研究核孔蛋白复合体蛋白88（Nup88）蛋白和mRNA在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法免疫组化方法检测181例结直肠癌标本、18例淋巴结转移癌及84例匹配的癌旁无瘤黏膜组织中Nup88蛋白表达;RT-PCR法检测Nup88 mRNA在29例结直肠癌标本及配对的癌旁2 cm组织、切缘黏膜中的表达水平。结果结直肠癌组织和淋巴结转移癌中Nup88蛋白阳性率均高于癌旁无瘤黏膜组织（P〈0.01）;Nup88蛋白的表达与结直肠癌组织分化程度有关。Nup88 mRNA在肿瘤组织中的表达水平高于癌旁无瘤黏膜和切缘黏膜（P均〈0.01）。结论 Nup88蛋白及mRNA与结直肠癌的发生发展有关,其蛋白表达可作为评估结直肠癌生物学行为的指标之一。     

CXCL13及其受体CXCR5与结直肠癌转移及KRAS基因突变关系的探讨

目的观察趋化因子CXCL13及其受体CXCR5在结直肠癌转移灶中的表达变化,探讨其与结直肠癌转移及KRAS基因突变的关系。方法选择97例结直肠癌组织标本（观察A组）、51例淋巴结转移灶标本（观察B组）,同时选择52例正常结直肠标本（对照A组）和43例正常淋巴结标本（对照B组）。用免疫组织化学法检测CXCL13及CXCR5蛋白在上述组织中的表达,分析其与临床病理参数、患者生存时间之间的关系。用Real Time PCR法检测148例结直肠癌组织KRAS基因突变情况,并分析其与CXCL13及CXCR5蛋白表达的关系。结果CXCR5在上皮细胞的表达率较高,CXCL13在间质细胞的表达较高。CXCL13及其受体CXCR5蛋白在结直肠癌组织的表达高于正常组织（P〈0.05）,在转移淋巴结中的表达明显高于正常淋巴结（P〈0.05）。在结直肠癌原发灶和淋巴结转移灶中,CXCL13及其受体CXCR5蛋白的表达均具有明显的相关性（P〈0.05）。在CXCL13及其受体CXCR5表达的患者中,其中位生存时间明显短于其阴性表达者（P均〈0.05）。观察A组KRAS基因突变型36例（其中CXCL13表达阳性12例、CXCR5表达阳性17例）,野生型61例（其中CXCL13表达阳性23例、CXCR5表达阳性23例）,CXCL13及CXCR5蛋白表达与KRAS基因是否发生突变均有相关性（P均〈0.05）。观察B组KRAS基因突变型20例（其中CXCL13表达阳性16例、CXCR5表达阳性14例）,野生型31例（其中CXCL13表达阳性8例、CXCR5表达阳性11例）,CXCL13及CXCR5蛋白表达与KRAS基因是否发生突变均有相关性（P均〈0.05）。结论趋化因子CXCL13及其受体CXCR5蛋白在结直肠组织淋巴细胞的归巢及结直肠癌淋巴结的转移中发挥重要的作用,对预测结直肠癌的转移及评估预后有一定的价值。CXCL13及CXCR5蛋白表达与KRAS基因突变具有较高的一致性。     

大肠癌中转化生长因子βⅡ型受体及周期素D_1表达关系的研究

[目的]研究转化生长因子β（TGF-β）Ⅱ型受体（TGF-βRⅡ）及周期素D1（Cyclin D1）在大肠癌、大肠腺瘤中的表达,探讨其在大肠癌发病中的作用机制。[方法]应用免疫组织化学SABC法,即应用兔抗人TGF-βⅡ单抗和鼠抗人Cyclin D1单抗,对56例大肠癌、29例大肠腺瘤及56例相应癌旁正常组织进行免疫组织化学染色。[结果]TGF-βRⅡ表达主要位于细胞膜和细胞质中,其在大肠癌中的阳性表达率（44.64%）明显低于大肠腺瘤组织和正常组织（82.76%和96.43%）。Cyclin D1表达主要位于细胞核,其在大肠癌中的阳性表达率（89.29%）明显高于大肠腺瘤组织（41.38%）,而正常大肠黏膜未见Cyclin D1强阳性表达。Cyclin D1过表达可明显降低TGF-βRⅡ的表达,二者呈明显的负相关。[结论]TGF-βRⅡ表达下降及Cyclin D1过表达可能在大肠癌发生过程中起重要作用。     

HGF在大肠癌中的表达及其与淋巴管生成及转移的关系

目的探讨肝细胞生长因子（HGF）在大肠癌淋巴管生成及转移中的作用。方法应用免疫组织化学（SABC）法检测52例大肠癌、20例大肠息肉组织和20例正常对照组织中HGF的表达,并应用podoplanin标记淋巴管,检测各组织中的淋巴管密度,结合大肠癌患者的临床病理资料,分析其相关性。结果大肠癌组织中HGF被染成棕黄褐色,其阳性表达率和相对表达量均明显高于大肠息肉组织和正常大肠组织[75％、30％、15％;（0．36±0．07）、（0．24±0．06）、（O．23±0．06）,P〈0．01]。其微淋巴管密度（LMVD）也明显增多[（4．13±1．99）、（2．59±1．46）、（2．40±1．44）,P〈0．01]。大肠癌组织中HGF的相对表达量和LMVD两者间呈正相关。39例HGF表达阳性的大肠癌,其LMVD明显大于HGF蛋白表达阴性者[（4．25±2．13）w（2．73±1．54）,t=3．051,P=0．003]。HGF和LMVD的表达与大肠癌患者年龄、性别及肿瘤分化程度无关（P〉0．05）,但与Dukes分期（P=0．034,P=0．006）、淋巴管有无转移明显相关（P=0．015,P=0．001）。结论HGF与大肠癌的淋巴管生成及转移有一定的相关性,并可能通过直接或间接促进淋巴管增生,从而促进肿瘤细胞的淋巴转移。     

MS-HRM在遗传性非息肉性大肠癌筛查中的应用

目的探讨甲基化敏感性高分辨率熔解曲线分析(MS-HRM)在遗传性非息肉性大肠癌(HNPCC)筛查中的应用价值。方法采用实时荧光定量PCR技术检测miR-195在41例散发性大肠癌(SCRC)和9例HNPCC患者癌组织及对应癌旁正常组织(距离癌组织5 cm)中的表达水平,随后使用MS-HRM检测miR-195启动子区域CpG岛甲基化情况。结果 miR-195在HNPCC癌组织中的表达量为1.20±1.48,甲基化比例为55.56%(5/9);miR-195在SCRC组织中的表达量为0.76±1.06,甲基化比例为58.54%(24/41),差异无统计学意义(P0.05);miR-195在肠癌组织及癌旁正常组织中的平均表达水平分别为0.837±1.145和2.236±2.468,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 miR-195在SCRC和HNPCC癌组织中的表达有无差异尚待进一步研究。miR-195可能有助于抑制肠癌发展,并且因其甲基化而参于大肠癌的发病机制。