CXCR7在动脉粥样硬化模型ApoE-/-小鼠的表达及阿托伐他汀的干预作用

 目的: 研究CXC趋化因子受体7(CXC chemokine receptor 7,CXCR7)在动脉粥样硬化模型载脂蛋白E基因敲除(ApoE^-/-)小鼠中的表达并探究阿托伐他汀的干预作用。方法: 8周龄ApoE^-/-雄性小鼠,随机分为正常对照组、高脂组与高脂+阿托伐他汀组,实验干预12周建立动脉粥样硬化模型;油红O及HE染色观察动脉粥样硬化病变,Western blot及免疫组化法检测动脉CXCR7的表达,Western blot检测动脉eNOS和Akt的表达。结果: (1)动脉油红O及HE染色示高脂组可见有明显粥样核心及纤维帽的显著斑块,高脂+阿托伐他汀组也可见斑块,但斑块负荷较模型组减轻,正常对照组未见明显斑块形成;(2)免疫组化示高脂组动脉细胞着色浅,CXCR7表达量少,高脂+阿托伐他汀组与高脂组比较,细胞着色增加,CXCR7表达量增加,正常对照组颗粒呈深棕黄色,示CXCR7大量表达;(3)Western blot结果示高脂组CXCR7、eNOS和Akt的表达较正常对照组降低,给予阿托伐他汀干预后CXCR7、eNOS和Akt的表达较高脂组增加,较正常对照组相比CXCR7、eNOS和Akt的表达下降,但磷酸化eNOS的水平未见差异。结论: 高脂血症可损伤血管内皮,促进动脉粥样硬化的发展,下调动脉CXCR7、eNOS和Akt的表达;阿托伐他汀可改善动脉粥样硬化,缓解ApoE^-/-小鼠动脉CXCR7、eNOS和Akt蛋白表达的下调。     

miR-148a-5p参与了高蛋氨酸饮食诱导ApoE-/-小鼠的肝细胞凋亡

文题释义：凋亡：是一种程序性细胞死亡,其特征是进行性的核和细胞质收缩、染色质浓缩和凋亡小体脱落。凋亡由称为半胱天冬酶的特定类型的半胱氨酸蛋白酶执行,一旦激活,就可以裂解细胞底物并导致细胞死亡。最常见的凋亡指标为抑制凋亡基因Bcl-2和促进凋亡基因Bax,Bcl-2增高,细胞凋亡减少;Bax增高,细胞凋亡增加。微小RNA(miRNA)：是一组内源性非编码小RNA,在动物、植物、病毒和其他生物中普遍存在,可调节将近60%的基因表达,这些基因负责细胞的增殖、分化、凋亡和其他生理过程。miRNA可以在多种疾病中异常表达,并对这些疾病的诊断和预后评估起重要作用。背景：高蛋氨酸饮食可以导致ApoE^-/-小鼠发生肝损伤,微小RNA(miRNA)参与细胞存活、分化和细胞凋亡等各种细胞过程,具有重要意义。 目的：探讨miR-148a-5p在高蛋氨酸饮食诱导ApoE^-/-小鼠肝细胞凋亡中的作用。方法：12只ApoE^-/-小鼠随机分为2组,每组6只,ApoE^-/-对照组为普通饮食,ApoE^-/-高蛋氨酸组为高蛋氨酸饮食。苏木精-伊红染色观察2组肝组织形态学变化;TUNEL染色观察肝细胞的凋亡情况;Western blot测定Bax、Bcl-2的表达改变;荧光定量PCR检测miR-148a-5p的表达;运用Target Scan靶基因预测软件预测miR-148a-5p的靶基因;双荧光素酶活性实验明确其靶向关系。结果与结论：①与对照组相比,ApoE-/-高蛋氨酸组肝脏组织肝小叶结构发生明显紊乱,部分细胞呈胞浆疏松化变性,肝细胞凋亡增加,Bax的表达明显上升且Bcl-2的表达显著下降(P < 0.01);②荧光定量PCR结果显示,ApoE-/-高蛋氨酸组miR-148a-5p的表达增加(P < 0.05);③靶基因预测软件提示,Bcl-2为miR-148a-5p的潜在靶基因;④双荧光素酶活性实验确定了miR-148a-5p与Bcl-2的靶向关系(P < 0.05);⑤肝细胞中过表达miR-148a-5p后Bax的表达显著上升且Bcl-2的表达明显下降(P < 0.01);⑥提示在高蛋氨酸饮食诱导的ApoE-/-小鼠肝细胞中,miR-148a-5p通过负调控Bcl-2促进肝细胞凋亡,这可能是造成肝损伤的机制之一。 ORCID: 0000-0003-1524-1117(马芳) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

Piezo1在不同周龄ApoE-/-小鼠中的表达水平及对血管内皮功能的作用

目的：探明ApoE^-/-小鼠中机械敏感性离子通道Piezo1的表达变化及Piezo1在动脉粥样硬化血管内皮功能中的作用。方法：选用24只SPF级8周龄雄性ApoE^-/-小鼠为模型组，24只SPF级8周龄雄性C57BL/6J小鼠为正常对照组，高脂饲料喂饲，于高脂饲料干预的第12、14、16和18周，每组各处死6只小鼠，检测小鼠主动脉病理情况、血脂水平、血管内皮功能及Piezo1的表达。进一步选用SPF级8周龄Piezo1^flox/flox Cdh5-Cre⁺/ApoE^-/-(以下简称Cre+)小鼠与Piezo1^flox/flox Cdh5-Cre^-/ApoE^-/-(以下简称Cre-)小鼠各10只，采用高脂饲料喂养12周，从小鼠病理染色、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、内皮素1(endothelin-1,ET-1)、前列环素I₂...     

铁死亡参与高蛋氨酸饮食诱导ApoE^(-/-)小鼠肝损伤的发病过程北大核心

背景:高同型半胱氨酸可以通过氧化应激、炎症反应和内质网应激等机制促进肝损伤的发生。高蛋氨酸饮食诱导的E型载脂蛋白基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠可以引起肝损伤以及体内同型半胱氨酸水平升高,铁死亡是一种依赖于细胞内的铁并引起脂质过氧化物过量蓄积的细胞调节性死亡途径。然而,它是否参与了高蛋氨酸饮食诱导肝损害的形成需进一步研究和探讨。目的:探讨铁死亡在ApoE^(-/-)小鼠高同型半胱氨酸致肝损伤中的作用。方法:12只6-8周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠,体质量20-25 g,随机分为对照组和高蛋氨酸组,每组6只,分别采用普通饲料和高蛋氨酸饲料喂养13.5周。喂养结束后通过病理学观察以及肝组织中天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶活性检测评估小鼠肝损伤情况;组织铁检测试剂盒测定小鼠肝组织中的铁离子含量;通过肝组织中丙二醛含量和荧光强度评估小鼠肝组织中脂质过氧化程度;实时荧光定量PCR与Western blotting方法分别检测两组小鼠肝组织中P53和谷胱甘肽过氧化物酶4的mRNA和蛋白表达水平。结果与结论:①与对照组相比,高蛋氨酸组发现大量肝细胞排列紊乱,间隙增大,胞浆疏松的典型肝损伤组织病理学改变;天冬氨酸转氨酶以及丙氨酸转氨酶活性升高(P<0.01);肝组织中铁离子含量增加(P<0.01),丙二醛含量(P<0.01)及荧光强度均增加;②实时荧光定量PCR与Western blotting检测发现,高蛋氨酸组小鼠肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶4的表达水平降低(P<0.01),P53的表达水平升高(P<0.05);③提示铁死亡参与高蛋氨酸饮食诱导ApoE^(-/-)小鼠肝损伤的发病过程。     

螺旋藻对大鼠高同型半胱氨酸血症的影响

目的：研究螺旋藻(SP)对大鼠高同型半胱氨酸血症(hyper homocysteinemia,HHcy)的影响。方法：用高蛋氨酸饮食复制HHcy大鼠模型,给予叶酸或SP干预12周。以高压液相色谱法测定血浆Hcy浓度,硫代巴比妥酸反应比色法测定血浆丙二醛(MDA)浓度,黄嘌呤氧化酶法测定血浆超氧化物歧化酶(SOD),并采用链霉亲和素-过氧化物酶(S-P)免疫组化染色法检测动脉平滑肌增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PC- NA)的表达。结果：HHcy模型组血浆Hcy浓度、MDA水平、SOD活力及平滑肌PCNA阳性细胞率明显高于正常对照组,经叶酸及SP干预后,上述指标都比模型组降低。结论：螺旋藻在体内可减低血浆Hcy和MDA浓度,有效消除氧化自由基,降低动脉平滑肌增殖指数,保护HHcy血症损伤的内皮细胞。     

泽泻提取物对高同型半胱氨酸血症兔氧化及抗氧化因子的影响

目的:探讨泽泻提取物对高同型半胱氨酸(HHcy)血症家兔血液中部分氧化及抗氧化因子的影响。方法:乙醇回流提取泽泻浸膏。将健康雄性家兔24只随机分为正常对照组、模型组和泽泻组。蛋氨酸皮下注射法建立HHcy血症动物模型,泽泻组灌喂泽泻提取物。8周后检测血浆总同型半胱氨酸(tHcy),血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、诱导型一氧化氮(iNO)和一氧化氮合酶(NOS)水平。结果:(1)模型组和泽泻组实验后血浆tHcy明显高于正常对照组,差别有显著性意义(P<0.01);(2)泽泻组血清MDA水平明显低于模型组(P<0.01),泽泻组血清SOD水平明显高于模型组(P<0.05);(3)泽泻组血清NOS和iNO均明显低于模型组(P<0.01)。结论:泽泻可能通过降低iNO活性,抑制过氧化,防止动脉粥样硬化的产生。     

血浆同型半胱氨酸水平升高促进小鼠动脉粥样硬化的研究

目的本研究通过喂饲高蛋氨酸合并高脂饲料使小鼠血浆Hcy水平升高,同时诱发动脉粥样硬化病变,观察血浆同型半胱氨酸水平升高对动脉粥样硬化发生的促进作用。方法载脂蛋白E基因敲除(apo E-/-)小鼠随机分为对照组、高脂饮食组及高脂合并高蛋氨酸饮食组。高脂饮食组及高脂合并高蛋氨酸饮食组小鼠从第8周开始连续喂食相应的饲料10周,对照组喂饲普通饲料。实验结束时静脉取血离心后,取血浆检测同型半胱氨酸水平;同时取心脏上半部分连同主动脉根部5 mm,OCT冰冻切片包埋胶包埋后,切取主动脉瓣膜的冰冻切片并进行油红染色、正置显微镜连接数码相机照相后,采用Image Plus软件定量分析斑块的面积。将胸、腹主动脉(主动脉根部至肾动脉分叉处)分离干净、剪下并沿长轴剪开,进行苏丹Ⅵ染色、照相后,体视显微镜连接数码相机照相后,采用Image Plus软件定量分析斑块的面积、整个血管面积及病变所占比例。结果高脂合并高蛋氨酸饮食组血浆同型半胱氨酸水平显著高于对照组和高脂饮食组。高脂饮食组及高脂合并高蛋氨酸饮食组主动脉瓣膜及胸腹主动脉斑块面积均显著高于对照组,且高脂合并高蛋氨酸饮食组斑块面积显著高于高脂饮食组,表明该组动脉粥样硬化程度较更高脂饮食组更严重。结论高脂饮食可诱发动脉粥样硬化。高蛋氨酸饮食可导致血浆同型半胱氨酸水平升高,并进一步促进动脉粥样硬化的发生。     

α-玉米赤霉醇改善去卵巢高同型半胱氨酸血症大鼠的血管功能

目的 探讨植物雌激素α-玉米赤霉醇（α-ZAL）对去卵巢高同型半胱氨酸血症(HHcy)大鼠血管功能的保护作用。方法 用高蛋氨酸(Met)饮食复制HHcy大鼠模型。40只雌性Wistar大鼠随机分为5组：(1)对照组（Con）；(2)2.5%蛋氨酸组（Met）；(3)卵巢切除+2.5%蛋氨酸组（OVX+Met）；(4)卵巢切除+2.5%蛋氨酸+α-ZAL组（OVX+Met+α-ZAL）；(5)卵巢切除+2.5%蛋氨酸+17β-E2组（OVX+Met+17β-E2）。12周后，测定血浆雌二醇（E2）及同型半胱氨酸（Hcy）的含量；离体胸主动脉环灌流，观察胸主动脉环对不同浓度苯肾上腺素（PE）、乙酰胆碱（ACh）和硝普钠（SNP）的反应。结果 高蛋氨酸饮食可明显增高血浆Hcy水平，其中OVX+Met组大鼠Hcy水平升高最显著。与其他组相比， OVX+Met组大鼠胸主动脉环对PE的收缩反应明显减弱，对ACh的舒张反应明显增强。各组大鼠胸主动脉环对SNP的舒张反应无明显差异。结论 α-ZAL可抑制去卵巢HHcy大鼠血浆Hcy水平的升高，减轻血管内皮细胞的损伤，明显改善大鼠的血管功能，其作用与17β-E2相似。     

Pim1调控巨噬细胞M1型极化介导血管内皮细胞炎症在ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化中的作用

目的：探讨Pim1在巨噬细胞M1型极化中的作用及M1型巨噬细胞对内皮细胞黏附分子表达的影响,并观察其在ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)形成中的作用。方法：采用脂多糖(LPS)刺激小鼠Raw264.7细胞建立M1型巨噬细胞模型,用Pim1特异性抑制剂SMI-4a和转染Pim1小干扰RNA(siPim1)进行干预,分为对照组、LPS组、LPS+SMI-4a组、LPS+siNC组和LPS+siPim1组。收集以上各组Raw264.7细胞上清作为条件培养液(CM)孵育原代培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为CM^M0、CM^M1、CM^SMI-4a、CM^siNC和CM^siPim1组。动物采用颈动脉部分结扎术建立颈动脉AS模型,用6周龄ApoE^-/-雄性小鼠18只建模后,随机分为模型组及SMI-4a干预组,每组各9只。采用油红O染色法观察颈动脉脂质蓄积变化。免疫荧光法和Western blot法检测M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶...     

高同型半胱氨酸血症对实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠的影响

目的:观察高同型半胱氨酸血症(HHcy)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)小鼠的影响,探讨HHcy在多发性硬化(MS)中的意义。方法:饮水中添加4%蛋氨酸使C57BL/6鼠具有HHcy,以MOG35-55肽段免疫C57BL/6鼠制备EAE模型,分别产生四组观察对象:普通喂养的正常鼠和EAE鼠(HC组和EAE组),添加蛋氨酸辅食的小鼠和EAE鼠(HC+Hcy组和EAE+Hcy组)。制模后3周内的不同时间段,评估各组小鼠症状,测定血清Hcy水平;3周后比较各EAE组小鼠细胞TNF-α、IFN-γ和IL-17因子水平。结果:EAE和HC组小鼠血清Hcy浓度无显著统计学差异(P>0.05);EAE+Hcy组小鼠临床症状评分和体重减轻均较EAE组严重(P<0.05);EAE+Hcy组小鼠TNF-α和IFN-γ水平显著高于EAE组(P<0.05),而IL-17水平在两组中无显著统计学差异(P>0.05)。结论:EAE疾病过程中Hcy水平无明显升高,但HHcy可加重EAE的临床症状,其机理同Hcy促进TNF-α和IFN-γ细胞因子产生有关,而与IL-17无关。     

叶酸降低高同型半胱氨酸血症大鼠主动脉单核细胞趋化蛋白-1的表达

目的： 探讨补充叶酸对高蛋氨酸(Met)喂养所致的高同型半胱氨酸（Hcy）血症大鼠主动脉单核细胞趋化蛋白（MCP-1）表达的影响。方法: SD大鼠30只随机分3组:即正常对照组(control)、高蛋氨酸组(Met)、蛋氨酸＋叶酸组(Met＋folate)，每组10只，分别给予普通饲料、普通饲料加1.7%蛋氨酸、普通饲料加1.7%蛋氨酸和0.006%的叶酸，饲养45 d，测定血浆总同型半胱氨酸浓度(thcy)，用免疫组织化学染色法及蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测大鼠的主动脉单核细胞趋化蛋白MCP-1表达。结果: 高Met组血浆总同型半胱氨酸浓度明显高于control组(P<0.01)，Met＋folate组血浆总同型半胱氨酸浓度明显低于Hhcy组(P<0.01)； 高Met组大鼠主动脉表达的MCP-1明显多于control组(46.41±4.23 vs 15.73±2.74； P<0.05)，而Met＋folate组能抑制高同型半胱氨酸血症所致的主动脉MCP-1的表达(23.12±4.40 vs 46.41±4.23; P<0.05)。结论: 大鼠喂以高Met饲料45 d，可充分诱导高Hcy血症。而叶酸补充治疗，在显著降低血浆tHcy水平的同时，也降低了高同型半胱氨酸大鼠主动脉单核细胞趋化蛋白MCP-1的表达。     

脂肪因子chemerin在饮食和运动调控小鼠骨骼肌脂质沉积中的作用

目的:探讨维甲酸受体应答基因2(retinoic acid receptor responder 2, Rarres2)编码的脂肪因子chemerin在饮食和运动调控小鼠骨骼肌脂质沉积中的作用。方法:将8周龄野生型(wild-type, WT)小鼠、脂肪特异性Rarres2基因敲除(adipose-specific Rarres2 gene knockout, adipo-Rarres2^-/-)小鼠和全身性Rarres2基因敲除(global Rarres2 gene knockout, Rarres2^-/-)小鼠随机分为普通饮食(normal diet, ND)组和高脂饮食(high-fat diet,HFD)组,即ND+WT组、ND+adipo-Rarres2^-/-组、ND+Rarres2^-/-组、HFD+WT组、HFD+adipo-Rarres2^-/-组和HFD+Rarres2^-/-组,共6组,每组6只。此外,让HFD组的3种小鼠完成6周的中等强度跑...     

高同型半胱氨酸血症与胱硫醚-β-合酶敲除小鼠紫癜性肾炎加重的相关性

目的 研究高同型半胱氨酸血症（HHcy）与胱硫醚-β-合酶（CBS）敲除（KO）小鼠紫癜性肾炎（HSPN）加重的相关性。方法 选择CBS-野生型（WT）雄性C57BL/6J小鼠、雄性CBS-KO小鼠（C57BL/6J背景）各40只，鼠龄8～10周，体质量18～20 g。CBS-WT小鼠和CBS-KO小鼠均采用印度墨水尾静脉注射联合麦醇溶蛋白灌胃建立HSPN模型，造模过程中给予常规饮食或高蛋氨酸饮食，给予对照溶剂、内质网应激（ERS）激动剂或拮抗剂腹腔注射。检测血清同型半胱氨酸（Hcy）含量、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、24 h尿蛋白、肾脏病理改变及肾小球内细胞凋亡率、C/EBP同源蛋白（CHOP）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（caspase）-12、caspase-3表达水平。结果 常规饮食CBS-WT+HSPN组、高蛋氨酸饮食CBS-WT+HSPN组均出现肾脏病理改变，SCr、BUN、24 h尿蛋白水平高于常规饮食CBS-WT组（P <0.05），且常规饮食CBS-WT+HSPN组与高蛋氨酸饮食CBS-WT+HSPN组肾脏病理改变及SCr、BUN、24 h尿蛋白水平...     

游泳运动与饮食控制改善高脂饮食APOE-/-小鼠下丘脑病变的机制

背景:游泳运动和饮食控制是目前公认的改善代谢异常的重要干预方式,下丘脑去乙酰化酶3、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α蛋白是调控能量代谢的重要因子,但游泳运动和饮食控制对高脂饮食载脂蛋白E基因敲除(APOE^-/-)小鼠下丘脑病变的影响及其与PGC-1α-SIRT3通路的相关性,目前尚不清楚。目的:探讨游泳运动与饮食控制调节高脂饮食APOE^-/-小鼠下丘脑病变的可能机制。方法:50只20周龄的SPF级雄性APOE^-/-小鼠随机分为对照组(正常饮食)、高脂饮食组、饮食控制组、游泳组、饮食控制+游泳组,每组10只。除对照组(普通饲料)外,其余各组均进行8周的高脂饲料(21%脂肪,0.15%胆固醇)饲养。饲养8周后,饮食控制组和饮食控制+游泳组改为普通饲料喂养,其余各组喂养方式不变;游泳组和饮食控制+游泳组进行无负重的游泳运动,共持续8周。每周的同一时间测量各组小鼠的体质量,MRI波谱检测下丘脑代谢物质N-乙酰天门冬氨酸、胆碱复合物、肌酸、肌醇的表达变化;电镜检测小鼠下丘脑的线粒体和髓鞘形态变化;蛋白质免疫印迹法检测下丘...     

Asp基因对急性心肌梗死小鼠心功能及Erk1/2表达的影响

目的 探讨促酰化蛋白(Asp)基因对急性心肌梗死(MI)模型小鼠心功能的影响。方法 将C57BL/6野生型小鼠及Asp^-/-小鼠各10只分为C57、Asp^-/-、C57+MI和Asp^-/-+MI组。结扎冠状动脉前降支24 h后行心脏B超检测心脏功能，留取心脏标本前测量小鼠空腹血糖及体质量。伊文思蓝-TTC染色观察存活心肌、缺血心肌和心梗心肌的面积。ELISA法测定白介素8(IL-8)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及血脂谱的表达。Western blot测定细胞外信号调节蛋白激酶1/2(Erk1/2)和磷酸化p-Erk1/2蛋白的表达。结果 Asp^-/-及Asp^-/-+MI组的空腹血糖及体质量均分别高于野生型组(P<0.05)。MI后Asp^-/-组小鼠的射血分数(EF)及短轴缩短率(FS)较野生型MI组小鼠降低，左心室舒张末内径(LVEDd)及左心室收缩末内径(LVESd)增加(P<0.05)。Asp^-/-+MI组缺血区面...     

狼疮性肾炎肾小球中nestin和活化型Caspase 3的表达及意义

目的探讨狼疮鼠肾小球中nestin和足细胞中活化型Caspase 3的表达变化及其与小鼠蛋白尿的关系。方法选取30周龄雌性MRL/MPJ小鼠和MRL/faslpr小鼠为研究对象,分别设为对照组和狼疮性肾炎模型组。血、尿生化检测小鼠肾功能改变;采用免疫组化和Western blot技术检测小鼠肾小球中活化型Caspase 3蛋白的表达;免疫组化法检测小鼠肾小球中nestin蛋白的表达;免疫荧光双染技术检测肾小球中活化型Caspase 3与nestin共表达。结果 (1)与正常对照组相比,狼疮组小鼠24 h尿蛋白(Upro)明显升高(P0.05),而尿素氮(BUN)和血清肌酐(Scr)在两组之间差异无显著性。(2)透射电镜结构显示,狼疮性肾炎模型组小鼠肾小球上皮细胞出现足突融合,基膜出现明显的不规则增厚。(3)与正常对照组相比,活化型Caspase 3在狼疮性肾炎模型组小鼠肾小球中表达增高;(4)免疫组化结果显示,nestin阳性信号主要定位于细胞质和细胞核,定量分析结果显示,与正常对照组相比,狼疮性肾炎模型组肾小球中nestin蛋白表达上调。(5)免疫荧光双染检测结果显示,正常对照组中仅见nestin蛋白表达,未见明显的nestin和Caspase 3共定位表达,在狼疮性肾炎模型组小鼠肾小球中出现了nestin蛋白和Caspase 3蛋白明显共定位。(6)相关性分析:狼疮性肾炎模型组小鼠肾小球中活化型Caspase 3蛋白的表达量与24 h Upro呈明显正相关(r=0.827,P=0.006)。结论足细胞骨架结构的改变和(或)足细胞凋亡可能在狼疮性肾炎发病过程中发挥重要的作用。     

高同型半胱氨酸诱导血管内皮功能障碍促进微循环障碍和微血栓形成

目的：采用蛋氨酸灌胃复制高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia,HHcy)致内皮功能障碍,在此基础上，联合脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）和角叉菜胶（carrageenan，Ca）造成大鼠体内广泛微血栓形成，观察血管内皮损伤和功能障碍对大鼠体内微血栓形成的促进作用。方法: ①内皮损伤模型的建立。SD大鼠随机分为对照组（control）、内皮功能障碍组（HHcy）。HHcy组采用蛋氨酸灌胃4周复制HHcy致内皮功能障碍模型，对照组以等量纯净水灌胃。4 周后检测血浆同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）水平，并取大鼠胸主动脉段进行血管舒张功能检测，同时检测血浆一氧化氮（NO）和血管性假血友病因子（von Willebrand factor，vWF）水平，以评价血管内皮功能状况。②Ca/LPS诱导微血栓形成。SD大鼠随机分为对照组（control）、微血栓组（Ca/LPS）、内皮功能障碍加微血栓组（HHcy＋Ca/LPS）。Ca/LPS组大鼠腹腔注射Ca，16 h再腹腔注射LPS。注射LPS 20 h后心脏采血检测凝血功能和血小板计数，镜下观测肠系膜微循环，24 h大鼠颈动脉采血结束实验，检测血浆NO和vWF值。对照组腹腔注射等量生理盐水，检测指标同模型组。HHcy＋Ca/LPS组大鼠经蛋氨酸灌胃持续4周后，再按照上述方法注射Ca/LPS，观察内皮功能障碍对大鼠微循环障碍和微血栓形成的影响。结果： ①蛋氨酸灌胃4周导致HHcy,血浆vWF水平显著升高，NO水平降低，内皮依赖性血管舒张功能显著降低，提示血管内皮功能受损，大鼠内皮功能障碍模型复制成功。②Ca/LPS组肠系膜微循环可见广泛微血栓形成，注射LPS后20 h ，通过检测凝血指标可见血液处于高凝状态。而与之比较，HHcy＋Ca/LPS组微循环障碍进一步加强，血小板计数减少，血浆NO值降低，vWF升高；注射LPS 20 h后可见血液处于继高凝状态之后的消耗性低凝状态。结论： 蛋氨酸灌胃4周导致HHcy,诱导血管内皮功能障碍。联合Ca/ LPS 造模可建立微循环障碍和微血栓形成的动物模型，而内皮功能障碍能加速加重微循环障碍和微血栓形成。     

基于倾向性评分匹配法探讨同型半胱氨酸和老年人早期肾损伤的关系

目的 探讨健康老年人群中高同型半胱氨酸血症(HHcy)与肾损伤之间的关系,为预防老年人群早期肾损伤提供思路.方法 在我院2018年体检人群中,随机选取60岁以上健康者共428例.根据同型半胱氨酸水平分为HHcy组和对照组.利用倾向评分匹配法均衡两组间的协变量,减少组间混杂因素对结果的影响,评估匹配前后HHcy组与对照组发生早期肾损伤的风险.结果 HHcy组与对照组各有99例匹配成功,倾向评分匹配前两组估算的肾小球过滤率(eGFR)、早期肾损伤患病率比较差异有统计学意义(P<0.001);经倾向评分匹配后,组间协变量均达到均衡可比,HHcy组早期肾损伤患病率仍高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.001).结论 血清同型半胱氨酸(Hcy)升高与健康老年人群eGFR降低显著相关,增加了老年人群发生早期肾损伤的风险,经倾向评分匹配后,HHcy人群发生早期肾损伤的概率仍高于Hcy正常人群.     

CPZ介导急性脱髓鞘小鼠海马中nestin的表达

目的:探讨双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)介导急性脱髓鞘小鼠海马中nestin的表达。方法:用掺入0.2%CPZ的普通饲料饲养C57BL/6小鼠6周,制备脱髓鞘模型,然后使用免疫荧光染色、q RT-PCR、Western Blot方法,检测小鼠脑内髓鞘脱失后海马中nestin的表达变化。结果:(1)体重称量结果显示:CPZ组体重明显低于对照组(P0.01);(2)免疫荧光结果显示:CPZ组海马CA区和DG区颗粒细胞层中nestin阳性细胞明显低于对照组分别为:P0.05,P0.01;(3)Western Blot和q RT-PCR实验结果显示:CPZ组海马中nestin蛋白和m RNA含量均明显低于对照组(P0.05)。结论:CPZ介导小鼠急性脱髓鞘后海马内nestin表达降低,提示髓鞘脱失可能会抑制nestin表达。     

壳寡糖上调SRBI核心岩藻糖基化修饰水平减弱小鼠动脉粥样硬化斑块形成

目的 从蛋白糖基化修饰角度探讨壳寡糖(COS)减弱动脉粥样硬化(AS)斑块形成的机制。方法 将40只ApoE^-/-小鼠随机分为对照组和COS组。对照组饲给予高脂饲料12周,COS组给予高脂饲料+COS(每天灌胃,500 mg/kg)12周。全自动生化分析仪检测两组小鼠的血脂水平并对主动脉斑块切片进行HE和油红O染色。凝集素芯片、液相色谱-串联质谱、酶联免疫吸附试验检测血清中糖蛋白变化。胆固醇酯流出实验和游离胆固醇酯测定实验评价清道夫受体B类成员1(SRBI)糖基化修饰位点改变对巨噬细胞胆固醇流出量的影响。结果 COS显著降低小鼠TC和LDL-C水平(P<0.05),但对TG、HDL-C、ApoA1和ApoB100无影响。与对照组相比,COS组主动脉内膜厚度和斑块大小明显变薄、变小(P<0.05)。两组小鼠血清中变化最明显的小扁豆凝集素(LCA)结合蛋白分子量为80～90 ku,清道夫受体B类成员1为其中之一。COS促进了细胞内胆固醇的流出,抑制了游离胆固醇酯的积累(P<0.05)。SRBI敲低或N108糖基化位点突变可抑制COS引起的胆固醇流出,...