小干扰RNA特异性沉默泛素特异肽酶22基因对膀胱癌细胞增殖的抑制作用

目的:研究小RNA干扰泛素特异肽酶22(ubiquitin specific peptidase22,USP22)基因表达对膀胱癌EJ细胞增殖的影响。方法:设计并合成针对USP22基因的3条特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)及阴性siRNA,并同时设立空白对照,然后用脂质体Translipid转染EJ细胞。通过实时荧光定量RT-PCR和Western印迹法分别检测转染前后EJ细胞中USP22mRNA和蛋白表达水平,MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖率,FCM法检测细胞周期分布。结果:3条针对USP22基因的特异性siRNA均能抑制USP22mRNA和蛋白的表达,其中USP22-siRNA-1的沉默效率最高。转染USP22-siRNA-148h后,EJ细胞中USP22mRNA和蛋白表达水平分别下调65%和80%,而且细胞增殖明显受到抑制,细胞周期被阻滞于G1期。结论:USP22特异性siRNA能够有效沉默USP22基因表达,并显著抑制膀胱癌EJ细胞增殖。推测USP22基因可能成为治疗膀胱癌的一个新靶点。     

siRNA沉默PIM1基因表达对人胃癌MKN-45细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨PIM1 基因沉默对人胃癌 MKN-45 细胞增殖和凋亡的影响。方法:设计2条针对PIM1 mRNA靶序列的干扰RNA正义链和反义链及阴性对照序列,构建重组pSIREN-retroQ质粒载体,并转染胃癌 MKN-45 细胞。应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测 PIM1在 mRNA水平及蛋白水平的表达。CCK-8 法检测胃癌 MKN-45 细胞的增殖,流式细胞分析胃癌细胞的凋亡,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Caspase 3和Caspase 9的表达。结果:重组克隆通过 PCR 扩增及测序,证明干扰序列插入正确。与正常对照组和阴性对照组相比,两个RNA干扰组胃癌 MKN-45 细胞PIM1在 mRNA及蛋白水平的表达量都显著降低（P<0.05）,细胞增殖能力下降（P<0.05）。此外,干扰组细胞凋亡明显增多（P<0.01）,Caspase 3和Caspase 9蛋白表达上调（P<0.01）。 结论: PIM1 siRNA能有效下调靶基因表达,产生特异性基因沉默效应;PIM1基因沉默显著抑制胃癌MKN-45 细胞的增殖并促进其凋亡。     

慢病毒介导的USP9X基因RNA干扰对人胰腺癌细胞株裸鼠移植瘤生长的影响

目的研究慢病毒介导的连锁的泛素特异肽酶9(USP9X)基因RNA干扰对人胰腺癌细胞系裸鼠皮下移植瘤的影响。方法将靶向USP9X基因的干扰小RNA(siRNA)慢病毒(LV-siRNA-USP9X)和阴性对照慢病毒(LV-siRNA-NC)转染至SW1990细胞,并分别作为siUSP9X组和siNC组,未转染细胞作为对照组,分别将3组细胞系接种至裸鼠皮下,比较3组裸鼠接种第30天的移植瘤生长情况和瘤体重量。蛋白质印记(Western blot)法和免疫组织化染色检测3组裸鼠皮下移植瘤中survivin蛋白的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡指数(AI)。结果siUSP9X组USP9X蛋白的相对表达量均明显低于siNC组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.01),干扰效率约为90%。siUSP9X组裸鼠的肿瘤体积明显小于siNC组和对照组裸鼠,且随着接种时间的延长,差异越来越明显。在接种第30天时,siUSP9X组裸鼠瘤体重量均小于siNC组和对照组裸鼠,抑瘤率为52%。siUSP9X组survivin蛋白的相对表达量和阳性表达率均低于siNC组和对照组,AI均高于siNC组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论慢病毒介导的USP9X基因沉默可明显抑制人胰腺癌细胞系裸鼠皮下移植瘤的生长,该现象可能与其下调survivin蛋白的表达并促进细胞凋亡有关,USP9X有可能成为胰腺癌基因治疗的一个新靶点。     

鼻咽癌组织中Gli1的表达及其对5-8F细胞增殖和迁移的影响

目的:研究神经胶质瘤相关癌基因1(Gli1)在鼻咽癌组织中的表达及其对鼻咽癌细胞5-8F增殖和迁移的影响。方法:采用荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测40例鼻咽癌组织和12例正常鼻咽组织中Gli1的表达;设计并合成针对Gli1基因的RNAi片段,将其感染5-8F细胞,蛋白质印迹法检测Gli1蛋白表达;MTT实验、平板克隆形成实验、细胞划痕实验和Boyden实验分别研究Gli1基因沉默后对5-8F细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:Gli1在鼻咽癌组织中的表达明显高于正常鼻咽组织,将siRNA-Gli1-01和siRNA-Gli1-02转染入5-8F细胞后,5-8F细胞中Gli1蛋白表达水平明显降低,细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显减弱。结论:Gli1基因的表达异常与鼻咽癌的发生发展相关,有望成为鼻咽癌早期诊断和预测预后的生物分子标志物。     

抑制NFBD1基因的表达对鼻咽癌CNE-1细胞放射敏感性的影响

目的:通过短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰NFBD1(nuclear factor with BRCT domains protein 1)基因的表达,并探讨其对鼻咽癌CNE-1细胞放射敏感性的影响。方法:以慢病毒感染的方法将特异性针对NFBD 1基因的shRNA转入CNE-1细胞,并用嘌呤霉素筛选稳定表达的细胞;分别采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)及蛋白质印迹法检测NFBD1 mRNA和蛋白的表达;以克隆形成和FCM法检测沉默NFBD 1基因对CNE-1细胞放射敏感性的影响。结果:NFBD1-shRNA慢病毒载体感染后,CNE-1细胞中NFBD1 mRNA和蛋白表达水平明显降低。各组细胞经6 MeV电子线照射后,NFBD1-shRNA组细胞的凋亡率和G2/M期细胞所占的比例均较阴性对照组[negative control-shRNA(NC-shRNA)]明显增加(P<0.05),细胞存活分数较NC-shRNA组明显降低(P<0.05)。结论:采用慢病毒感染的方法靶向NFBD 1基因的RNA干扰可稳定沉默NFBD1的表达,从而增加鼻咽癌细胞对放射治疗的敏感性。     

靶向HOXA9基因RNAi慢病毒载体增加人急性单核细胞白血病U937细胞的药物敏感性

目的:探讨慢病毒载体介导的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)沉默同源盒A9(homeobox A9,HOXA9)基因对人急性单核细胞白血病U937细胞药物敏感性的影响。方法:应用蛋白质印迹法从4条针对HOXA9基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体中筛选出1条敲减效率最高的包装成慢病毒HOXA9/GV118RNAi-LV#2。实验分成未感染对照组(control,CON)、阴性对照组(negative control,NC)及敲减组(knock down,KD)。HOXA9/GV118RNAi-LV#2感染U937细胞后,应用实时荧光定量PCR法检测HOXA9 mRNA的沉默效率,蛋白质印迹法检测HOXA9蛋白的表达,MTT法和FCM检测病毒感染前后U937细胞对长春新碱(vincristine,VCR)和柔红霉素(daunorubicin,DNR)的敏感性及细胞凋亡率变化,RT-PCR法检测DNR作用后各组细胞中MDR-1mRNA的表达。结果:KD组细胞中HOXA9mRNA的沉默效率在55%以上,HOXA9蛋白的表达量明显减少。VCR及DNR作用KD组细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值明显降低(P<0.01),药物敏感性明显增强;VCR和DNR作用后,KD组细胞的凋亡率明显增加(P<0.01);DNR作用后,KD组U937细胞中MDR-1mRNA的表达水平明显下调(P<0.01)。结论:靶向HOXA9基因的RNAi慢病毒可稳定沉默HOXA9基因的表达,在一定程度上提高U937细胞对化疗药物的敏感性。     

USP18在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨泛素特异性蛋白酶18(ubiquitin specific peptidase 18,USP18)在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及意义,分析USP18的表达水平与宫颈癌临床病例特征的关系.方法:实时荧光定量PCR法检测USP18在30例新鲜宫颈癌组织及癌旁宫颈组织中mRNA的表达情况,蛋白免疫印迹法检测USP1...     

LNX1通过调控TIAM1/ERK信号通路抑制肾透明细胞癌细胞的增殖、侵袭和迁移

目的：探讨泛素链接酶LNX1(ligand of numb-protein X 1)对肾透明细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其可能的分子作用机制。方法：利用基因表达谱交互分析（Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA）数据库分析LNX1 m RNA在肾透明细胞癌组织中的表达水平,及其与肾透明细胞癌患者预后的相关性。采用慢病毒感染的方法将携带特异性针对LNX1基因的shRNA(shLNX1)转入肾透明细胞癌细胞786-O和ACHN中;采用瞬时转染的方法将重组质粒flag-LNX1转入786-O和ACHN细胞中。分别采用CCK-8实验和细胞集落形成实验检测沉默或过表达LNX1对786-O和ACHN细胞增殖能力的影响,Transwell小室实验检测沉默或过表达LNX1对786-O和ACHN细胞侵袭和迁移能力的影响。采用生物信息学分析法筛选LNX1的下游靶基因,采用蛋白质印迹法检测沉默或过表达LNX1对T淋巴瘤侵袭和转移诱导蛋白1(T-lymphoma invasion and metastasis-inducing prote...     

泛素特异性肽酶22在胃癌细胞系中的表达和定位

目的:研究泛素特异性肽酶22(USP22)蛋白和信使核糖核酸(mRNA)在人胃癌细胞中的表达和定位.方法:分别用蛋白印迹法、实时荧光定量聚合酶链反应检测USP22在人胃癌细胞系中蛋白和基因的表达,激光共聚焦扫描显微镜检测内源USP22在SGC7901胃癌细胞中的定位.结果:USP22在人胃癌细胞系SGC7901中蛋白和基因表达水平增高,激光共聚焦扫描显微镜观察发现USP22主要定位于SGC7901细胞核中.结论:USP22在人胃癌细胞系SGC7901中高表达,主要定位于胃癌细胞核内,可能参与人胃癌发生发展的进程.     

RSUME和HIF-1α/VEGF通路与垂体腺瘤侵袭之间的关系

目的 :探讨RSUME(RWD containing sumoylation enhancer)和缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)通路与垂体腺瘤侵袭之间的关系。方法:应用实时荧光定量PCR法检测垂体腺瘤组织中RSUME、HIF-1α和VEGF-A mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测垂体腺瘤组织中小泛素相关修饰因子-1(small ubiquitin-related modifi ers-1,SUMO-1)、HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达水平。将靶向RSUME基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染至小鼠垂体腺瘤AtT-20细胞后,实时荧光定量PCR法检测细胞中RSUME、HIF-1α和VEGF-A mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测细胞中SUMO-1、HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达水平,Transwell法检测细胞侵袭能力的改变。结果:侵袭性垂体腺瘤组织中RSUME、HIF-1α、VEGF-A mRNA的表达水平和SUMO-1、HIF-1α、VEGF-A蛋白的表达水平明显高于非侵袭性垂体腺瘤组织和正常垂体组织(P均<0.05)。并且,侵袭性垂体腺瘤组织中SUMO-1与HIF-1α的表达呈正相关(r=0.687,P<0.05),HIF-1α与VEGF-A的表达呈正相关(r=0.773,P<0.05)。RSUME siRNA转染组AtT-20细胞中RSUME和VEGF-A mRNA以及SUMO-1、HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达水平均明显低于转染阴性对照siRNA组和未转染的空白对照组(P均<0.05)。RSUME siRNA转染组AtT-20细胞的侵袭能力被明显抑制(P<0.05)。结论:RSUME可能通过增强HIF-1α/VEGF通路的作用而促进垂体腺瘤的侵袭。沉默RSUME基因可抑制垂体腺瘤细胞的侵袭。     

VEGF和Smac/DIABLO对胶质瘤细胞凋亡及化疗敏感性的影响

目的:旨在研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和第二线粒体衍生的caspase激活剂(second mitochondrial activator of caspase,Smac)/低等电点凋亡抑制蛋白直接结合蛋白(direct IAP binding protein with low PI,DIABLO)在胶质瘤发生和发展中的作用。方法:采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默VEGF基因在胶质瘤细胞U251中的表达;分别采用实时荧光定量PCR(real-time?uorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测VEGF和Smac/DIABLO mRNA及蛋白在U251细胞中的表达水平;采用蛋白质印迹法检测磷酸化细胞外蛋白调节激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)的表达;FCM检测VEGF沉默对细胞周期的影响;MTT法检测VEGF沉默对U251细胞化疗敏感性的影响。结果:VEGF基因沉默可导致VEGF和Smac/DIABLO mRNA及蛋白表达水平的下调,并抑制磷酸化ERK的表达,提示VEGF是Smac/DIABLO的上游调节因子,通过激活ERK的信号通路调节Smac/DIABLO的表达水平。VEGF基因沉默导致U251细胞中处于S期的细胞比例增多,并增强顺铂对U251细胞的凋亡诱导作用。结论:VEGF可影响胶质瘤细胞周期的分布以及对顺铂的化疗敏感性。Smac/DIABLO参与了VEGF信号通路。     

BRAFV600E突变基因沉默可抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖

目的 :通过RNA干扰技术使v-raf鼠类肉瘤滤过性病毒致癌基因同源体B1(v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1,BRAF)的突变基因BRAFV600E表达沉默,探讨该基因沉默在甲状腺乳头状癌细胞体外增殖中的作用。方法:将携带靶向BRAFV600E基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)的质粒载体(命名为BRAFV600E-sh RNA)转染甲状腺乳头状癌CGTHW3细胞株,然后采用半定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测BRAFV600E-sh RNA转染对BRAFV600E突变基因表达的抑制作用,以及丝裂原细胞外激酶/细胞外信号调节激酶(mitogen extracellular kinase/extracellular signal-regulated kinase,MEK/ERK)信号通路相关蛋白表达水平的变化;采用MTT法检测BRAFV600E突变基因沉默后甲状腺乳头状癌细胞体外增殖能力的变化;采用FCM法检测细胞周期分布的变化。结果 :特异性BRAFV600E-sh RNA转染可明显抑制甲状腺乳头状癌细胞中BRAFV600E突变基因的m RNA和蛋白表达,且使MEK/ERK信号通路中Ras、磷酸化MEK(phospho-MEK,p-MEK)和p-ERK蛋白的表达量明显减少(P值均<0.05)。与未转染的空白对照组相比,BRAFV600E-sh RNA转染后72 h时CGTHW3细胞的增殖活性明显降低(P<0.05);转染组中G0/G1期细胞所占比例明显高于空白对照组,而S期细胞所占比例明显降低(P值均<0.05)。结论 :BRAFV600E突变基因沉默可能通过阻断MEK/ERK信号通路,有效抑制甲状腺乳头状癌细胞的体外增殖。     

RNA干扰survivin对口腔表皮样癌细胞株 KB生长的抑制作用

 摘要：目的探讨RNA干扰技术沉默survivin基因对口腔表皮样癌细胞株KB增殖和凋亡的影响。方法化学合 成靶向survivin基因的小干扰RNA片段（siRNA）,脂质体法转染KB细胞。通过RT-PCR、蛋白印迹法分别检 测survivin mRNA和蛋白表达变化,流式细胞仪检测细胞生长周期和凋亡,MTT法检测转染后KB细胞增殖情 况。结果siRNA可以有效地降低KB细胞survivin mRNA和蛋白的表达;转染后KB细胞阻滞于G2/M期,凋亡增 加,增殖受抑制。结论应用RNA干扰技术沉默survivin 在KB细胞中的表达可以有效抑制该细胞增殖、促进 癌细胞凋亡,将survivin作为口腔癌基因治疗的靶点,通过RNA干扰技术对口腔癌进行基因治疗具有一定 的可行性。     

RNA干扰Semaphorin 4D表达对乳腺癌细胞增殖、周期及迁移的影响

目的 :研究Semaphorin 4D(Sema 4D)表达沉默对乳腺癌细胞增殖、周期及迁移的影响,初步探讨该蛋白在乳腺癌发生和发展中的作用。方法 :实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测Sema 4D在不同转移潜能的乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7中的表达水平。采用短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)慢病毒感染法,建立Sema 4D稳定低表达的MDA-MB-231细胞系,然后采用CCK-8法、FCM法、划痕愈合实验及Transwell迁移实验检测细胞增殖、周期分布及迁移能力的变化。结果 :Sema 4D在MDA-MB-231细胞中表达水平明显高于MCF-7细胞(P<0.05);sh RNA慢病毒感染可明显下调MDA-MB-231细胞中Sema4D的表达;与空白对照组比较,Sema 4D干扰组的MDA-MB-231细胞增殖明显被抑制(P<0.05),G0/G1期细胞所占比例明显增高(P<0.05),而细胞迁移能力明显降低(P<0.05)。结论:Sema 4D在高转移潜能的乳腺癌MDA-MB-231细胞中高表达,sh RNA干扰Sema 4D表达可抑制该细胞的增殖和迁移,并阻滞细胞周期于G1期。     

长链非编码RNA GATA6-AS1通过调控GATA6抑制胃癌5-氟尿嘧啶耐药细胞SGC7901/5-FU的增殖、凋亡及转移

目的：研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,Lnc RNA)GATA6反义RNA1(GATA6 antisense RNA 1,GATA6-AS1）调控GATA6表达对胃癌（gastric cancer,GC)5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）耐药细胞SGC7901/5-FU增殖、凋亡及转移的影响,并探讨可能的作用机制。方法：以亲本SGC7901细胞和SGC7901/5-FU细胞作为对照组,采用Lipofectamine 2000将空载体pc DNA3.1、重组载体pc DNA3.1-GATA6-AS1、sh NC和sh GATA6-AS1分别转入SGC7901/5-F U细胞,使GATA6-AS1过表达或沉默表达。采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中GATA6-AS1和GATA6 m RNA的表达情况。各组细胞经5-F U处理后,分别采用CCK-8法检测细胞增殖的能力,细胞划痕愈合实验检测细胞的迁移能力,Transwell实验检测细胞的侵袭能力,FCM法检测细胞的凋亡能力。随后采用蛋白质印迹法检测各组细胞中Bax、Bcl-2、Caspas...     

miR-214通过PTEN调控AKT信号通路抑制鼻咽癌细胞凋亡CSCD

目的探讨miR-214通过PTEN调控下游AKT信号通路激活对鼻咽癌细胞凋亡的影响。方法miR-214抑制剂转染鼻咽癌5-8F和6-10B细胞。MTT法评估细胞增殖情况。Annexin-V/PI染色法检测两种鼻咽癌细胞凋亡情况。Western blot和real-time PCR检测miR-214抑制剂对PTEN基因转录和蛋白表达以及对AKT信号通路和凋亡相关蛋白表达水平的影响。检测shRNA沉默PTEN基因转录和蛋白表达后,miR-214抑制剂对鼻咽癌细胞凋亡影响。结果miR-214抑制剂可抑制鼻咽癌细胞生长,诱导5-8F和6-10B细胞凋亡。miR-214通过靶向3'-UTR区域调控PTEN基因转录和蛋白表达。抑制miR-214可促进PTEN的表达,抑制AKT信号通路激活,进而调控下游细胞周期和凋亡相关蛋白表达。沉默PTEN基因转录和蛋白表达可逆转miR-214抑制剂对鼻咽癌细胞AKT信号通路活性和凋亡的影响。结论miR-214可通过直接靶向PTEN基因转录促进AKT信号通路激活抑制鼻咽癌细胞凋亡。     

HNF4G对胆囊癌细胞增殖和迁移的影响及可能的作用机制

目的：探讨肝细胞核因子4γ(hepatocyte nuclear factor 4 gamma,HNF4G)对于胆囊癌细胞增殖、迁移、细胞周期和凋亡等的影响及相关作用机制。方法：分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测胆囊癌GBC-SD、NOZ和ZJU-0430细胞中HNF4G mRNA和蛋白的表达水平。采用慢病毒感染的方法在GBC-SD、NOZ和ZJU-0430细胞中构建HNF4G基因沉默或过表达的稳转细胞株。随后,分别采用CCK-8法和平板克隆形成实验检测HNF4G基因沉默或过表达对胆囊癌细胞增殖能力的影响,Transwell小室实验检测对胆囊癌细胞迁移能力的影响,FCM法检测对细胞周期和细胞凋亡的影响。最后,再用蛋白质印迹法检测改变HNF4G基因表达水平对细胞周期相关蛋白Cyclin A2和Cyclin B1、凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2、上皮-间充质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail和Slug,以及ErbB2/PI3K/AKT信号通路中ErbB2和磷酸化AKT蛋白表达水平的影响。结果：实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测...     

shRNA沉默Sp1对胶质瘤细胞放射敏感性的影响北大核心CSCD

目的探讨下调Sp1基因表达对胶质瘤细胞放射敏感性的影响。方法设计并合成编码shRNA的寡核苷酸序列,克隆入LV3(H1/GFP&Puro)载体中构建重组体。然后重组慢病毒分别感染U251和U87细胞,嘌呤霉素筛选得到稳定转染细胞株。荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测细胞中Sp1 mRNA和蛋白表达水平;克隆存活法检测细胞存活;流式法检测细胞周期;免疫荧光法检测DNA损伤程度。结果两株胶质瘤细胞在感染72 h后荧光显微镜观察Sp1慢病毒载体均高表达,RT-PCR和蛋白质印迹法结果显示转染后shRNA-U87和shRNA-U251细胞Sp1 mRMA和蛋白表达量均明显降低(P<0.01),Sp1敲除率达90%以上。shRNA-U251和shRNA-U87细胞在10%细胞存活水平下的放射增敏比(SER)分别为1.39和1.18;两株Sp1敲除组细胞经辐照后G2/M期比率及γ-H2AX foci数目与对照组相比均极显著增大。结论shRNA沉默Sp1增大了X线诱导的G2/M期阻滞,加重了DNA双链断裂程度,提高了胶质瘤细胞的放射敏感性。     

去泛素化酶USP9X在结肠癌组织中的表达及意义

目的:探讨去泛素化酶USP9X在结肠癌组织中的表达特点及对结肠癌细胞增殖的影响。方法:收集解放军中部战区总医院病理科存档的结肠癌组织标本和癌旁正常结肠组织标本76例,免疫组化法检测USP9X在不同性别、年龄患者的结肠癌组织、癌旁正常结肠组织中的表达情况。siRNA抑制人结肠癌HCT116细胞株USP9X的表达,MTT法检测HCT116细胞增殖能力。结果:76例结肠癌患者中,USP9X阳性表达53例,占69.7%。癌旁正常大肠组织中,USP9X阳性表达率19.7%。USP9X的表达与结肠癌淋巴结转移和浸润深度相关。siRNA抑制结肠癌HCT116细胞USP9X表达后,与空白对照组和阴性对照组比较,干扰组细胞增殖能力显著下降。结论:去泛素化酶USP9X在结肠癌组织中的表达高于癌旁正常结肠组织,并与肿瘤侵袭转移相关。特异性抑制USP9X基因的表达可抑制结肠癌细胞的增殖能力。