益气化瘀解毒方对脂多糖诱导的急性呼吸窘迫综合征模型大鼠Cav-1/IL-12/IL-13表达的影响

目的 观察益气化瘀解毒方对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)模型大鼠的保护作用及对窖蛋白-1(caveolin-1, Cav-1)、白细胞介素-12(interleukin-12, IL-12)、白细胞介素-13(interleukin-13, IL-13)表达水平的影响并探讨其作用机制。方法 18只SD大鼠随机分为对照组、模型组及中药复方组3组,每组6只。中药复方组予益气化瘀解毒方12.2 g/(kg·d)预防性灌胃给药,其余组等量蒸馏水灌胃。尾静脉注射LPS建立ARDS模型,造模后16小时处死大鼠收集标本,光镜下观察肺组织病理学改变,采用酶联免疫法检测肺泡灌洗液、肺匀浆Cav-1及血清IL-12、IL-13表达水平,采用免疫印迹法检测肺匀浆Cav-1蛋白表达水平。结果 益气化瘀解毒方可减少ARDS模型大鼠肺泡结构破坏、肺水肿及炎性细胞浸润,且与模型组相比,中药复方组Cav-1蛋白表达显著上调(P<0.05),促炎因子IL-12表达显著减少(P&l...     

基于TLR4/NF-κB通路的解毒化瘀通腑方干预内毒素性肝损伤的作用机制

目的研究解毒化瘀通腑方通过TLR4/NF-κB通路干预内毒素性肝损伤的作用机制。方法 SPF级雄性SD大鼠共160只,随机分为模型组,中药高、中、低剂量组,TLR4单克隆抗体组各30只,并设置空白组。造模各组给予D-GalN (300mg/kg)+LPS(30μg/kg)腹腔注射制备内毒素肝损伤模型。分别在24h、48h、72h三个时间点处死8只大鼠,观察大鼠肝功能(ALT、AST)、内毒素、TNF-α、IL-1β、IL-6水平变化;RT-PCR法检测肝组织中TLR4、NF-κB mRNA表达;Western-Blot法检测肝组织中CD14、TLR4、MyD88、IKK、NF-κB蛋白表达;HE染色观察肝组织病理变化。结果造模后大鼠肝损害明显,内毒素及炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著升高,肝组织中TLR4、NF-κB mRNA表达及CD14、TLR4、MyD88、IKK、NF-κB的蛋白表达同步升高,24h达到高峰,之后逐渐下降,同一时间点以模型组大鼠肝脏损害最为严重,中药组损害程度较模型组相对较轻,其中以中药高剂量对肝脏的保护作用最为明显,在24h、48h时间点中药高剂量组ALT及AST与模型组比较有显著性差异(P0.05);内毒素水平及炎性因子TNF-a、IL-1β、IL-6水平在同一时间点与模型组比较有显著性差异(P0.05);在同一时间点,中药高剂量组大鼠肝组织TLR4、NF-κB mRNA表达及CD14、TLR4、MyD88、IKK、NF-κB的蛋白表达与模型组比较有显著性差异(P0.05),和TLR4抗体组表现相近,两者比较差异无统计学意义(P0.05)。肝组织病理损害以模型组最重,在同一时间点中药中、高剂量组肝组织病理损害表现较模型组轻。结论解毒化瘀通腑方能够降低内毒素肝损伤大鼠血清内毒素水平,影响TLR4/NF-κB通路炎性级联信号的传导,抑制NF-κB的激活,减少炎性递质及细胞因子的释放,从而减轻内毒素对机体的损害,起到肝细胞保护作用。     

扶正解毒化瘀方对脂多糖诱导大鼠肺巨噬细胞的调控作用

目的:观察扶正解毒化瘀方对脂多糖诱导的大鼠肺巨噬细胞中NLRP3炎性体通路及相关炎性反应递质的作用。方法:将大鼠NR8383细胞分为空白组、模型组、扶正解毒化瘀方组、哌拉西林他唑巴坦(TZP)组以及中药+TZP组。用制备扶正解毒化瘀方中药原液作用于脂多糖诱导的大鼠NR8383细胞,采用qPCR和Western blotting分别检测NLRP3炎性体通路的mRNA表达和蛋白水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测干预前后炎性反应递质的水平。结果:扶正解毒化瘀方组和TZP组均能明显降低NLRP3、Caspase-1和ASC的mRNA表达,2组NLRP3和ASC的蛋白水平明显下降,Caspase-1和IL-1β蛋白水平也有下降趋势。扶正解毒化瘀方组和TZP组均能明显降低IL-18和IL-1β炎性反应递质水平,联合用药有增效作用。结论:扶正解毒化瘀方对NLRP3炎性体作用明确,可能通过NLRP3炎性体通路延缓机体免疫炎性损伤。     

益气化瘀解毒方对急性呼吸窘迫综合征大鼠NF-κB/p38MAPK通路的影响

目的观察益气化瘀解毒方对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致大鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的保护作用并探讨其作用机制。方法 30只SD大鼠随机分为空白组、模型组及益气化瘀解毒方低、中、高剂量组5组,每组6只。尾静脉注射LPS建立ARDS模型。治疗组益气化瘀解毒方灌胃,造模后16小时处死大鼠收集标本,测定大鼠肺系数、肺通透指数、核转录因子-κB p50、IκBα、p38的蛋白表达及光镜下观察肺组织病理学改变。结果益气化瘀解毒方减少肺损伤大鼠肺泡结构破坏、肺水肿及炎性细胞浸润,降低肺系数(P0.05)与肺通透指数(P0.01),并在一定程度减少核转录因子-κB p50、丝裂原活化蛋白激酶p38,增加抑制因子IκBα的蛋白表达。结论益气化瘀解毒方对LPS诱导的ARDS有一定的保护作用,其机制与抑制NF-κB/p38MAPK炎性反应信号通路有关。     

中药黄龙汤对CPL大鼠回肠组织中TLR4/NF-κB信号通路调控的实验研究

目的:通过检测中药黄龙汤干预后CPL模型大鼠中血清中IL-1β、TNF-α含量,回肠组织TLR4、Myd88、NF-κB表达水平,探讨中药黄龙汤通过调控TLR4/NF-κB通路途径的抗炎作用机制。方法:SD大鼠70只,采用盲肠结扎穿孔术复制CPL大鼠模型,并经口给予中药黄龙汤干预,连续干预3 d。末次给药后1 h,采集全血,分离血清,同时取回肠组织冻存。采用ELISA法检测各组大鼠血清中IL-1β、TNF-α含量;Western-blot法检测回肠组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达水平。结果:与假手术组比较,模型对照组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量显著升高,回肠组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达水平显著上调;与模型对照组比较,西药组和黄龙汤联合西药组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量显著降低,回肠组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达水平显著下调;与西药组比较,黄龙汤联合西药组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量及回肠组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达水平显著下调,差异有统计学意义。结论:黄龙汤联合西药美罗培南对CPL模型大鼠具有抗炎作用,能够显著抑制血清IL-1β、TNF-α的表达,该作用可能是通过调控回肠组织中TLR4/NF-κB信号通路活化实现的。     

解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭大鼠TOLL样受体表达与炎性细胞因子关系的研究

目的:探讨解毒化瘀颗粒对D-氨基半乳糖(D-Gal N)联合脂多糖(LPS)诱导的急性肝衰竭大鼠肝组织Toll样受体表达与炎性细胞因子的关系,并探讨其相关作用机制。方法:将120只雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、解毒化瘀颗粒组和阳性(内毒素拮抗剂E5531)组,各30只。除空白组,其余各组均采用一次性腹内联合注射D-Gal N和LPS诱导肝衰竭模型。造模完成后观察各组存活率,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),内毒素的含量,实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测肝组织Toll样受体2(TLR2),TLR4和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western-blot)法检测肝组织白细胞介素-2(IL-2),IL-6,IL-10的蛋白含量,并用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠肝组织病理情况。结果:(1)与模型组比较,解毒化瘀颗粒组及E5531组均能提高肝衰竭大鼠48 h存活率(均P0.01);(2)模型组大鼠血清AST,ALT及内毒素水平均高于空白组(均P0.01),解毒化瘀颗粒组和E5531组AST,ALT及内毒素水平均较模型组显著降低(均P0.01);(3)解毒化瘀颗粒组和E5531组TLR2,TLR4,TNF-αmRNA表达较模型组明显降低(均P0.01);(4)与模型组比较,解毒化瘀颗粒组和E5531组IL-2,IL-6的表达降低(均P0.01),但两组间比较差异无统计学意义,模型组IL-10表达减少(P0.01),但不受E5531和中药的影响;(5)Spearman’s相关分析提示肝组织TLR2和TLR4 mRNA表达水平与TNF-αmRNA,IL2,IL-6水平呈正相关(均P0.05);而与IL-10的水平均无相关性;(6)与模型组比较,解毒化瘀颗粒可以显著改善肝组织坏死和炎性细胞浸润,更优于E5531。结论:TLR2,TLR4可能通过启动下游的炎性因子基因表达及细胞因子释放而参与了D-Gal N联合LPS诱导的急性肝衰竭,而调控TLR2及TLR4表达可能是肝衰竭治疗的新方向以及解毒化瘀颗粒拮抗肝衰竭的机制。     

益气化瘀解毒方、超低频电磁场处理水对ARDS大鼠血清IL-4、IL-10水平的影响

目的观察益气化瘀解毒方、超低频电磁场处理水(简称频谱水)对大肠杆菌脂多糖(LPS)诱导的ARDS大鼠的保护作用及对抑炎因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平的影响并探讨作用机制。方法 36只雄性SD大鼠随机等分为6组(n=6),空白对照组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、频谱水组,分别给予相应的预防治疗措施。以尾静脉注射LPS方法制备全身炎症反应所致的ARDS大鼠模型,观察各实验条件组大鼠肺大体情况、光镜观察肺组织病理变化、采用酶联免疫法检测血清抑炎因子IL-4、IL-10表达水平。结果肺大体:与空白对照组比较,模型组肺脏肿胀,表面色泽暗红、散在出血点,各治疗组均有不同程度好转。肺组织病理:与空白对照组比较,模型组大鼠肺泡内出血、肺间质水肿、肺泡壁塌陷程度显著,肺组织内大量炎性细胞浸润,各治疗组较模型组减轻,出血、水肿程度改善,炎性细胞渗出减少。抑炎因子表达水平:与空白对照组比较,大鼠血清中IL-4表达水平在模型组中显著降低(P 0.01);各治疗组大鼠血清IL-4表达水平均显著高于模型组(P 0.01),中药各组中中药中剂量组IL-4表达水平最高,频谱水组与中药中剂量组升高水平相近,差异无统计学意义(P 0.05)。与空白对照组相比,大鼠血清IL-10在模型组表达水平升高(P 0.01);大鼠血清IL-10在中药中剂量、中药高剂量、频谱水组的表达水平较模型组显著升高(P 0.01),中药中剂量组较其他治疗组升高幅度最为显著。结论益气化瘀解毒方对LPS诱导的ARDS大鼠具有保护作用,可能与通过升高血清中抑炎因子IL-4、IL-10表达水平有关;超低频电磁场处理水治疗有升高抑炎因子表达水平、减轻肺组织损伤的作用。     

解毒化瘀方对溃疡性结肠炎大鼠TLR4、NF-κB的影响

目的通过观察解毒化瘀方对溃疡性结肠大鼠结肠组织中TLR4、NF-κB表达的影响,探讨其治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法采用TNBS/乙醇复制溃疡性结肠炎大鼠模型,随机分为空白组、模型组、西药组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。治疗两周后,免疫组化法测定大鼠结肠组织中的TLR4、NF-κB的表达。结果与空白组比较,模型组中的LR4、NF-κB表达升高(P 0. 01);与模型组比较,各治疗组均能降低LR4、NF-κB的表达,其中西药治疗组与中药高剂量组作用最明显(P 0. 05)。结论解毒化瘀方可能通过降低TLR4、NF-κB的表达发挥抗炎作用。     

益气化瘀解毒方对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺损伤及中性粒细胞粘附分子的作用研究

目的 观察益气化瘀解毒方及拆方对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)模型大鼠的保护作用及中性粒细胞粘附分子的影响。方法 将36只SD大鼠随机分为对照组、模型组、益气清热组、益气化瘀组、益气逐饮组及中药全方组,每组6只。益气清热组、益气化瘀组、益气逐饮组、中药全方组给予对应中药浸膏12.2 g/(kg·d)连续灌胃7天,其余组均以等量蒸馏水灌胃。尾静脉注射LPS建立ARDS大鼠模型,造模后16小时麻醉处死各组动物进行取材。苏木精—伊红染色观察肺组织病理变化,采用酶联免疫吸附法法检测肺匀浆及肺泡灌洗液中Rap1b、淋巴细胞功能相关抗原1(leukocyte function-associated antigen-1,LFA-1)、巨噬细胞表面抗原-1(macrophage surface antigen-1,MAC-1)的表达水平,蛋白免疫印迹法检测肺组织Rap1b的表达水平。结果 与对照组相比,模型组大鼠Rap1b、LFA-1及MAC-1蛋白表达均有所上调。与...     

泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠TLR2/IκB-α/IL-1β信号通路的影响

目的:观察泄浊解毒方对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠TLR2/IκB-α/IL-1β信号通路的影响。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组、泄浊解毒方小剂量组、泄浊解毒方大剂量组,除正常组外其余各组小鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇混合溶液灌肠复制溃疡性结肠炎大鼠模型,观察经药物处理后各组大鼠结肠组织TLR2、IκB-α和血清IL-1β的表达。结果:泄浊解毒方可明显减少UC模型大鼠结肠组织TLR2、IκB-α和血清IL-1β的表达。结论:泄浊解毒方对大鼠溃疡性结肠炎有良好的治疗作用,其作用机制可能与调节TLR2/IκB-α/IL-1β信号通路有关。     

养阴清热化瘀方对急性放射性肺炎大鼠TLR-4/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨养阴清热化瘀方对大鼠急性放射性肺炎的防护作用及可能机制。方法:采用随机数字表法将48只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组(NC)、模型组(MD)、养阴清热化瘀方提前干预组(YHF-EI)及养阴清热化瘀方组(YHF-ST),分别于照射后4周时采集血清及取出右肺。观察大鼠的一般情况,应用HE染色观察肺组织病理改变,ELISA法检测血清中含量, RT-PCR和Western-blotting法分别检测肺组织内TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白的水平。结果:养阴清热化瘀方能显著减轻大鼠放射性肺炎的炎症表现; 与空白对照组比较,血清中TNF-α、IL-6、TGF-β的含量升高,TLR4和NF-κB p65 mRNA转录活性增强,肺组织中TLR4和NF-κB p65的蛋白表达水平升高; 与模型组比较,两组养阴清热化瘀方组血清中TNF-α、IL-6、TGF-β的含量降低,TLR4和NF-κB p65 mRNA转录活性下降,肺组织中TLR4和NF-κB p65的蛋白表达水平降低。结论:养阴清热化瘀方可能通过抑制“TLR4/NF-κB”信号通路,从而抑制TNF-α、IL-6、TGF-β的产生,起到抵抗放射性肺炎的发生,从而发挥放射防护作用。     

热毒宁注射液对LPS诱导ALI/ARDS小鼠TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响

目的 探讨热毒宁注射液对LPS诱导急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)小鼠肺损伤的保护作用及对TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响。方法 将小鼠随机分为对照组、模型组、热毒宁注射液组、地塞米松(阳性药)组，每组6只，气管注射LPS溶液制备ALI/ARDS模型，造模后3 h给予各组相应药物，连续干预7 d后，检测小鼠肺湿/干重比、肺组织MPO活性及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)水平，HE染色观察肺组织病理改变，Western blot法检测肺组织TLR4、MyD88、IKKα、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达。结果 与对照组比较，模型组小鼠肺湿/干重比、肺组织MPO活性、血清炎性因子水平和肺组织TLR4、MyD88、IKKα、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01),肺泡腔增大，肺泡壁增厚，肺部有大量的炎性细胞浸润；与模型组比较，热毒宁注射液组和地塞米松组小鼠肺湿/干重比、肺组织MPO活性、血清炎性因子水平和肺组织TLR4、MyD88、I...     

基于TLR4/NF-κB信号通路研究甘草泻心汤治疗溃疡性结肠炎大鼠的机制

目的通过研究甘草泻心汤干预溃疡性结肠炎(UC)急性炎症过程和对TLR4/NF-κB信号通路的调节作用,探讨甘草泻心汤治疗UC的可能机制。方法 42只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、西药组、甘草泻心汤高、中、低剂量组,每组各7只。以二硝基氯苯-醋酸复合法建立溃疡性结肠炎大鼠模型,各组予相应药液灌胃。14 d后取材,镜下检测结肠组织黏膜,运用ELISA检测大鼠血清IL-6、IL-8、IL-10的表达,免疫组化分析结肠组织的TLR4、NF-κBp 65的阳性细胞率。结果中药组和西药组与模型组相比,结肠组织黏膜病理形态都有不同程度的好转。甘草泻心汤高剂量组可明显降低UC大鼠结肠组织中的TLR4、NF-κB p65阳性表达,降低促炎性因子IL-6、IL-8水平,上调抗炎细胞因子IL-10的水平。结论甘草泻心汤对UC大鼠有较好疗效,其机制可能是通过调节TLR4/NF-κB为核心的炎症信号通路,参与免疫调节而实现。     

解毒化瘀Ⅱ方对急性肝衰竭大鼠肝组织TLR4蛋白及TBIL的影响

目的:探讨解毒化瘀Ⅱ方对急性肝衰竭大鼠肝组织Toll样受体4(TLR4)蛋白及总胆红素(TBIL)的影响。方法:将96只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、模型对照组、解毒化瘀Ⅱ方组,采用D-GalN+LPS联合制备大鼠急性肝衰竭模型,Western blot检测肝组织TLR4蛋白表达,并对TBIL含量进行测定。结果:急性肝衰竭大鼠肝组织TLR4与血清中TBIL表达显著增强,解毒化瘀Ⅱ方能明显降低肝衰竭大鼠肝组织TLR4蛋白及血清TBIL的表达,与模型对照组比较差异显著(P<0.05或P<0.01)。结论:解毒化瘀Ⅱ方能降低急性肝衰竭大鼠肝组织TLR4蛋白表达及血清中TBIL水平,对肝细胞有一定的保护作用。     

“化瘀方”对脓毒症大鼠TLR4介导的炎症反应和心肌损伤的保护作用及机制研究

目的研究不同剂量"化瘀方"对内毒素(LPS)诱导脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法 6周龄SPF级雄性Wistar大鼠80只,随机分为正常组、模型组、中药(丹参30g,大黄15g)高[8g/(kg·d)]、中[4g/(kg·d)]、低[2g/(kg·d)]剂量预处理组,每组又分为注射LPS后3h和6h两个时间点。透射电镜观察大鼠心肌超微结构;ELISA法检测大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6等炎性因子水平的变化;荧光定量聚合酶链式反应法和免疫印迹法检测心肌组织TNF-α、NF-κB和TLR4的基因表达。结果超微结构显示,各中药治疗剂量组心肌细胞均有不同程度损伤,但损伤程度明显轻于模型组。与模型组同时间点比较,中药各剂量组大鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平明显降低(P0.01),高剂量组下降尤为显著(P0.05 vs.低剂量)。与正常组比较,模型组和"化瘀方"各治疗组心肌组织中TNF-α、NF-κB和TLR4的mRNA转录和蛋白质翻译水平明显升高,模型6h组蛋白水平更高;而与模型组比较,中药治疗组相关基因转录和翻译水平则明显下降,其中高剂量组下降尤为显著。结论 "化瘀方"可以明显改善脓毒症大鼠的心肌损伤,并且证实该保护作用是通过抑制TLR4介导的炎症反应实现的。     

益气化瘀解毒方治疗内毒素致ARDS大鼠的炎症作用研究

目的 探讨益气化瘀解毒方(以下简称“复方”)对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱发大鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的保护作用及对炎症因子的影响。方法 50只雄性健康SD大鼠随机等分为5组,每组10只。5组大鼠按动物饲养标准进行适应性喂养1周。中药低、中、高剂量组,分别给予复方低、中、高剂量灌胃,每天1次,模型组及空白对照组每天予蒸馏水灌胃,每天灌胃量为1 m L/100 g,除空白对照组外其余4组7天后尾静脉注射LPS(2 mg/kg)造模,空白对照组及造模4组16小时麻醉下处死。取肺组织及腹主动脉血,进行大鼠肺大体病理、病理组织光镜观察,并检测血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin 1beta,IL-1β)、IL-6及肺组织中p65蛋白含量。结果 与空白对照组比较,模型组TNF-α升高(P0.05)。与模型组比较,低剂量组大鼠血清中TNF-α无明显降低(P0.05),中药中、高剂量TNF-α水平显著降低(P0.05),但高、中剂量组之间无明显差距(P0.05)。与空白对照组比较,模型组IL-1β升高(P0.05);与模型组比较,低剂量组IL-1β降低(P0.05),中与高剂量组IL-1β水平明显降低(P0.05)。与空白对照组比较,模型组IL-6升高(P0.05);与模型组比较,低剂量组IL-6明显降低(P0.05),中剂量组IL-6水平显著降低(P0.05),高剂量组IL-6水平明显降低(P0.05)。与空白对照组比较,模型组p65升高(P0.05);与模型组比较,低剂量组p65明显降低(P0.05),中剂量组p65水平显著降低(P0.05),中药高剂量组p65水平降低(P0.05)。结论 益气化瘀解毒复方能够减轻内毒素致ARDS大鼠肺组织损伤,具有一定的预防保护作用,可能与降低大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平,抑制NF-κB通路激活,减轻炎症反应有关。在一定范围内,提高复方的给药剂量,可以增强作用效果。     

从TLR2/4正负免疫通路探讨益气清湿化瘀法调节PID反复发作患者免疫稳态的影响

目的从TLR2/4通路入手探讨益气清湿化瘀法对盆腔炎性疾病(PID)反复发作气虚血瘀夹湿证患者免疫机制的影响。方法随机选择PID反复发作患者,采用益气清湿化瘀综合方案治疗3个月。检测治疗前后外周血白细胞中TLR2/4蛋白及血清TLR2/4 mRNA,MyD88、Gas6、INF-α、IL-6表达水平。健康者作为对照组不做任何干预。结果①疗前治疗组外周血白细胞中TLR2/4蛋白阳性比率、TLR2/4mRNA、MyD88、Gas6、TNF-α、IL-6表达水平均高于健康对照组;②治疗前后自身对照比较,治疗后外周血单核细胞中TLR2/4蛋白及血清TLR2/4 mRNA、MyD88、Gas6、TNF-α、IL-6表达水平均降低(P0.05)。③相关性分析:治疗组TLR2/4蛋白比率及TLR2/4mRNA的表达变化均呈正相关,血清MyD88与TNF-α、IL-6表达呈正相关,Gas6与TLR2 mRNA的表达变化呈负相关,相关系数-0.327,而Gas6与TLR2/4蛋白、TLR4 mRNA变化无明显的相关性。结论推测益气清湿化瘀综合方案对PID反复发作患者的免疫调节作用机制可能是通过下调MyD88/Gas6介导的TLR2/4正负免疫通路相关因子表达及抑制下游炎性因子释放,维持患者机体的免疫稳态有关。     

通塞颗粒对AECOPD痰热证大鼠肺组织TLR4信号通路的影响

目的观察慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)痰热证大鼠肺组织TLR4信号通路,探讨通塞颗粒治疗AECOPD痰热证的作用机制。方法制备AECOPD和AECOPD痰热证模型,将50只Wistar大鼠分为空白对照组、AECOPD组、AECOPD痰热证组、阳性对照组及通塞颗粒组。肺组织TLR4、NF-κB、IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白表达采用免疫组化法测定,肺组织IL-1βmRNA的表达采用RT-PCR法测定。结果与空白对照组相比,AECOPD组、AECOPD痰热证组肺组织TLR4、NF-κB及其下游炎症因子(IL-1β、TNF-α、IL-6)表达均显著增强(P0.05,P0.01),其中,AECOPD痰热证组上述指标表达水平较AECOPD组增强明显(均P0.05);与AECOPD痰热证组比较,阳性对照组、通塞颗粒组上述指标表达均显著减弱(P0.05,P0.01),其中,通塞颗粒组IL-6较阳性对照组降低更明显(均P0.05)。结论TLR4通路活化参与了AECOPD痰热证的发生发展。通塞颗粒治疗AECOPD痰热证的机制可能与其抑制TLR4信号转导通路,从而减轻该通路引发的炎症损伤有关。     

欣胃颗粒对胃癌前病变大鼠Wnt信号通路作用机制的研究

目的:研究欣胃颗粒及其拆方对胃癌前病变大鼠Wnt-1及β-catenin的影响。方法:实验分成空白组、模型对照组、胃复春组,益气组、养阴组、化瘀组、解毒组、益气养阴组、益气化瘀组、益气解毒组、养阴化瘀组、养阴解毒组、化瘀解毒组、益气养阴化瘀组、益气养阴解毒组、益气化瘀解毒组、养阴化瘀解毒组、益气养阴化瘀解毒(即欣胃颗粒)组。采用以MNNG为主的四因素联合造模法建立胃癌前病变的大鼠模型,空白对照组、模型对照组给予等量生理盐水灌胃,而其它16组同时给予相应药物灌胃,在16周造模结束后处死大鼠并取材,观察各组大鼠胃粘膜病理改变;采用Real Time PCR技术,检测胃黏膜Wnt信号通路关键因子Wnt-1、β-catenin的基因表达情况。结果:与空白组比较,模型组Wnt-1及β-catenin的基因表达水平明显增高,其差异具有显著性(P0.05);中药各组与模型组比较,Wnt-1及β-catenin的表达水平下调,具有统计学意义(P0.05)。结论:四法组的干预作用优于三法、两法、及单法组,表明各法之间具有协同增效作用;欣胃颗粒可改善胃癌前病变大鼠胃黏膜病理状况,下调Wnt-1及β-catenin的基因表达水平。     

蛭丹化瘀组方对LPS诱导急性肺损伤大鼠炎性反应的影响

目的:研究蛭丹化瘀组方对脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺损伤的影响。方法:SD大鼠72只,随机分成对照组、模型组、蛭丹化瘀组方33、16.5、8.25 g/kg组、地塞米松阳性药组。气管滴注LPS制备急性肺损伤模型;HE染色,光镜下观察肺组织病理学变化并进行肺病理损伤评分;酶联免疫法检测各组大鼠肺组织炎性因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:模型组大鼠肺组织病理损伤评分增高,肺组织炎性因子TNF-α、IL-1β及IL-6含量较正常组明显增加(P0.01或P0.05);蛭丹化瘀组方33 g/kg及地塞米松组大鼠肺组织病理损伤评分较模型组大鼠明显降低(P0.05),蛭丹化瘀组方(33、16.5、8.25 g/kg)及地塞米松可明显降低肺组织TNF-α、IL-6含量,蛭丹化瘀组方16.5 g/kg还可明显降低肺组织IL-1β含量,差异较模型组明显(P0.01或P0.05)。结论:蛭丹化瘀组方能够减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤,其机制可能与降低肺组织中炎性反应因子TNF-α、IL-6和IL-1β含量有关。