肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样分子1在食管癌中的表达及其作用机制研究

目的探讨肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样分子1(TIPE1)在食管癌中的表达及其作用机制。方法收集2018年1月—2019年1月陕西省安康市中医医院肿瘤外科手术切除食管癌10例,留取癌组织及癌旁正常组织备用。Westem-blot法检测TIPE1在食管癌组织及癌旁正常组织中的表达,利用脂质体将TIPE1空质粒及过表达载体转染到Eca109食管癌细胞,Western-blot法检测转染效果,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,Transwell法检测细胞侵袭能力,Westem-blot法检测细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、CyclinB1、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase 3)、cleaved-caspase 8、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9表达。结果 TIPE1在食管癌组织中的表达量(0.13±0.01)显著低于癌旁正常组织(0.34±0.02),差异有统计学意义(t/P=29.698/0.000)。TIPE1过表达组TIPE1表达量(1.02±0.10)高于空白质粒组(0.21±0.02),差异有统计学意义(t/P=13.757/0.000)。TIPE1过表达组细胞活力(0.38±0.03)低于空白质粒组(0.48±0.04),差异有统计学意义(t/P=3.464/0.026)。TIPE1过表达组细胞早期凋亡率(16.43±1.65)%及晚期凋亡率(23.51±2.35)%均高于空白质粒组(2.58±0.27)%、(3.36±0.35)%,差异有统计学意义(t/P=14.348/0.000,14.689/0.000),且细胞周期主要阻滞于G1期(P<0.05)。TIPE1过表达组细胞侵袭数目[(42.36±4.24)个]少于空白质粒组[(158.32±14.33)个](t/P=13.440/0.000)。TIPE1过表达组CyclinD1、CyclinB1、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 8、MMP-2、MMP-9表达量均低于空白质粒组(t=10.457、10.922、52.034、46.540、11.585、13.555,P均=0.000)。结论 TIPE1在食管癌组织中低表达,TIPE1过表达能显著抑制Eca109食管癌细胞增殖与侵袭,并诱导细胞凋亡。     

肿瘤坏死因子-α诱导的蛋白-8样分子2促进热损伤小鼠CD4阳性T细胞凋亡

目的探讨肿瘤坏死因子-α诱导的蛋白-8样分子2（TIPE2）对重度烫伤小鼠模型脾脏CD4+T淋巴细胞的凋亡的影响。方 法140只成年雄性BALB/C小鼠分为6组,应用小RNA干扰技术制作siTIPE2/过表达慢病毒,复制小鼠重度烫伤模型。分离 BALB/c小鼠脾脏CD4+T细胞,检测各组CD4+T淋巴细胞凋亡,Smad2/Smad3、磷酸（P）-Smad2/P-Smad3以及B淋巴细胞瘤-2 （Bcl-2）家族蛋白Bcl-2/Bim的表达。检测各组小鼠CD4+T内线粒体膜电位改变情况及细胞色素C的变化和各组小鼠CD4+T内 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（caspase-3)、（caspase-8)、（caspase-9)的活化情况。结果siTIPE2-burn组CD4+T淋巴细胞凋 亡率为12.33%,较sham组外其余组减少,P-smad2/P-Smad3蛋白表达（灰度值）显著降低（P<0.01）。siTIPE2-burn组Bcl-2的蛋 白表达较其余组升高（P<0.05）,Bim的表达则降低（P<0.05）。siTIPE2-burn组线粒体膜电位细胞色素C水平均较sham组外其 余组降低（P<0.05）,caspase-3 活性较TIPE2-burn 组降低（P<0.01）,caspase-8、caspase-9 活性较其余组降低（P<0.05）。TIPE2- burn组凋亡率最高,TIPE2-burn组Smad2/Smad3蛋白表达较sham组明显升高（P<0.05）,P-smad2/P-Smad3蛋白表达较其余组 显著升高（P<0.05）;CD4+T内线粒体膜电位较其余组降低（P<0.01）,细胞色素C水平升高,caspase-3、caspase-8、caspase-9活性 较其他组均升高（P<0.05）。结论TIPE2作为一种重要的负向调控分子,可通过促进转化生长因子β即TGF-β/Smads信号传导 通路、线粒体相关凋亡途径加速T淋巴细胞凋亡。     

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8对胃癌细胞转移能力的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白8(TNFAIP8)在患者胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的相关性,体外研究TNFAIP8对胃癌细胞株SGC7901转移能力的影响.方法 应用免疫组织化学染色SABC法检测30例胃癌及癌旁组织中TNFAIP8蛋白表达,分析其与临床病理特征相关性.体外培养人胃癌细胞株SGC7901,脂质体介导重组质粒pcDNA3.0-TIPE转染SGC7901,通过Transwell实验检测转染后胃癌细胞侵袭与迁移能力的差异.结果 癌旁组织中TNFAIP8的表达与胃癌组织具有明显差异(P ＜0.001),TNFAIP8蛋白的表达水平与性别、年龄、肿瘤大小无相关性(P＞0.05);TNFAIP8蛋白表达水平与肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况相关,差异有统计学意义(P＜0.05).转染pcDNA3.0-TIPE的SGC7901细胞较转染pcDNA3.0对照组细胞其迁移与侵袭能力具有明显差异(P＜0.001).结论 TNFAIP8在胃癌的发生发展、转移中可能发挥重要的作用,TNFAIP8有可能成为新的治疗靶点.     

肿瘤坏死因子α诱导蛋白2在过敏性鼻炎小鼠模型中的表达及与血管生成的关系

目的 观察过敏性鼻炎中肿瘤坏死因子α诱导蛋白2（tumor necrosis factor-α-inducible protein-2,TNFAIP2）的表达及与血管生成的关系.方法 建立卵清蛋白（ovalbumin,OVA）诱导的过敏性鼻炎小鼠模型,检测TNFAIP2和血管内皮细胞标记（CD31）的表达,并分析相关性.结果 成功建立OVA诱导的过敏性鼻炎小鼠模型,表现为小鼠挠鼻次数、血清OVA特异性IgE浓度、鼻黏膜局部嗜酸细胞和肥大细胞的聚集均显著高于正常对照.TNFAIP2 mRNA和蛋白及CD31mRNA在过敏性鼻炎小鼠鼻黏膜局部的表达均明显高于正常对照.TNFAIP2和CD31mRNA的表达存在正相关.结论 TNFAIP2参与了过敏性鼻炎的发生,且可能与血管生成有关.     

肿瘤坏死因子α诱导蛋白3在胶质瘤中的表达特性及其对胶质瘤细胞侵袭和迁移的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白3(TNFAIP3)在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞侵袭、迁移的影响。方法 采用实时荧光定量法(qRT-PCR)检测人星形胶质细胞NHA和胶质瘤细胞株U87、U251、SNB19、T98和LN229中TNFAIP3的表达,以U87和SNB19为实验对象。使用阳离子脂质体Lipofectamine 2000介导小干扰RNA(siRNA)转染U87和SNB19以下调TNFAIP3的表达;采用Transwell检测下调TNFAIP3对U87及SNB19侵袭的影响;运用划痕实验检测下调TNFAIP3对U87及SNB19迁移的影响。结果 和NHA(0.144±0.008)相比,TNFAIP3在U87(1.380±0.066)、U251(0.663±0.062)、SNB19(1.405±0.032)、T98(1.002±0.068)、LN229(0.667±0.027)中的表达均升高(均P<0.05)。si-TNFAIP3转染U87及SNB19可下调TNFAIP3的表达,继续培养24 h, U87及SNB19侵袭和迁移能力均下降(均P<0.05)。结论 ...     

siRNA沉默肿瘤坏死因子α诱导蛋白2表达对胶质瘤细胞侵袭及增殖的影响*

目的 探讨沉默肿瘤坏死因子α诱导蛋白2（TNFAIP2）表达对胶质瘤细胞侵袭及增殖的影响。方法 使用Lipofectamine 2000介导siRNA转染胶质瘤细胞U87和U251下调TNFAIP2 mRNA的表达;运用细胞划痕及Transwell实验检测沉默TNFAIP2表达对U87及U251细胞迁移、侵袭的影响;通过CCK-8实验检测沉默TNFAIP2表达对胶质瘤细胞U87及U251增殖的影响。结果 Lipofectamine 2000介导si-TNFAIP2转染U87及U251细胞可下调TNFAIP2 mRNA的表达;沉默TNFAIP2表达可降低胶质瘤细胞U87和U251迁移侵袭的能力;沉默TNFAIP2表达可抑制U87及U251细胞的增殖。结论 siRNA沉默TNFAIP2表达可抑制胶质瘤细胞的侵袭和增殖。     

白细胞介素8与肿瘤坏死因子α在宫颈炎症发病中的作用及其临床意义

目的 研究宫颈炎症患者阴道局部免疫状态与疾病发生的关系.方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测60例解脲支原体(UU)宫颈炎(UU组)、60例人型支原体(MH)宫颈炎(MH组)、60例沙眼衣原体(CT)宫颈炎(CT组)、30例淋病奈瑟菌(NG)宫颈炎(NG组)、60例宫颈糜烂患者(EC组)及与上述疾病相同例数的对照组(正常妇女)阴道灌洗液中自细胞介素(IL)-8和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平.结果 (1)阴道灌洗液中IL-8水平:MH组为(371±34)ng/L、CT组为(369±31)ng/L、NG组为(339±36)ng/L,3组的同期对照组分别为(341±32)ng/L、(338±33)ng/L、(316±34)ng/L,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.01);UU组、EC组与同期对照组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05).(2)阴道灌洗液中TNF-±水平:除EC组外,其余各组均显著高于同期对照组,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 在各种宫颈炎症的发病机制中,阴道局部免疫机制都发挥了重要作用;IL-8在MH、CT、NG引起的子宫颈特殊炎症的发病中可能具有更重要的作用.     

白细胞介素-8和肿瘤坏死因子α与嗜酸细胞相关性在哮喘发病中的意义

白细胞介素－８和肿瘤坏死因子α与嗜酸细胞相关性在哮喘发病中的意义邹大伟吴伟１（第一临床学院检验科，沈阳１１０００１）关键词白细胞介素－８；肿瘤坏死因子α；嗜酸性粒细胞；哮喘哮喘是一种以嗜酸细胞，肥大细胞浸润为主的慢性气道炎症性疾病。多种炎性细胞与迟发...     

肿瘤坏死因子α在儿童哮喘发病中的作用

检测儿童哮喘发作期 42例、缓解期 35例及正常对照组 2 0例血清TNF -α水平。结果表明 :哮喘急性发作期TNF-α值明显增高 ,至缓解期明显下降 ;使用激素组较未用激素组下降更显著 ,接近正常对照组水平。提示TNF -α参与哮喘发病 ,并在慢性气道炎症发生、发展过程中起重要作用     

人肿瘤坏死因子样蛋白全长cDNA的克隆及原核表达

目的分离、克隆编码人肿瘤坏死因子样蛋白(TNFLP)的全长cDNA,并对其功能进行初步研究。方法从本室构建的λZAP表达胎脑文库中分离到编码TNFLP的全长cDNA。应用多种软件对该基因及其编码蛋白进行分析,寻找其同源蛋白,分析其亲、疏水性及其存在的结构域和基序。以Northern印迹分析检测TNFLP的mRNA的组织分布,并用谷胱苷肽-S-转移酶(GST)原核表达系统分段表达TNFLP的N端和C端蛋白。结果TNFLP全长共2112bp,编码一208个氨基酸的蛋白。亲、疏水性分析显示,TNFLP有两个疏水区,且C端95个氨基酸与小鼠的TNF-α一致性为42%。基序分析显示,TNFLP的C端有一内质网膜定位信号-TYKRL,与TNF-α完全一致。人的TNFLP位于人的16号染色体上。Northern杂交显示,TNFLP在心、脑和胰腺中呈高表达,可见一个转录本。用GST原核表达系统,分段表达了TNFLP的N端和C端。结论初步分析了TNFLP的组织表达谱,并分段表达了其N端和C端,为进一步研究其功能提供了条件。     

肿瘤坏死因子-α及其基因多态性与哮喘的关系

哮喘是一种由多种炎性细胞及炎性递质参与的气道炎症性疾病。针对气道特定细胞因子和免疫递质的靶向治疗已成为目前哮喘研究的热点。肿瘤坏死因子-α（TNF-α）是一种重要的前致炎因子,是引起和维持哮喘气道炎症,导致哮喘加重和气道高反应性的重要因素,抗TNF-α治疗可能有助于某些难治性哮喘的控制。本文就TNF-α及其基因多态性与哮喘的关系做一综述。     

纤维蛋白原样蛋白2和肿瘤坏死因子-α在子痫前期发生发展中的作用研究进展

子痫前期是一种妊娠期特有疾病,其病因和发病机制尚未明确。近年来随着研究的深入发现,免疫炎症在子痫前期中发挥重要作用。学者们逐渐认识到纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)参与了免疫炎症过度激活导致的子痫前期。FGL2在子痫前期胎盘组织中发挥抗炎作用,通过抑制自身免疫及免疫排斥,保持免疫耐受。TNF-α通过促进滋养细胞凋亡、炎症反应激活及内皮细胞的损伤等机制,促进子痫前期的发生。本文就FGL2和TNF-α在子痫前期发生发展中的作用进行综述,为探讨其在子痫前期筛查和诊断中作为生物标志物的潜在用途提供新思路。     

难治性哮喘患者血清肿瘤坏死因子α水平及其临床意义

难治性哮喘(difficult-to-treat-asthma,DTA)约占哮喘总数的5%,其急诊就诊率和住院率分别为轻中度哮喘的15倍和20倍,消耗了约80%与哮喘相关的医疗资源.2006年全球哮喘防治倡议(globa linitiative for asthma,GINA)[1]首次提出将经过第4级治疗仍未达到控制的哮喘诊断为DTA.肿瘤坏死因子α(TNF-α)在启动哮喘气道炎症并使其持续存在中起重要作用,与DTA密切相关,抗TNF-α治疗有望为DTA治疗带来新的前景.     

肿瘤坏死因子α诱导蛋白3和乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂表达与鼻咽癌组织放疗敏感的相关性

目的 检测肿瘤坏死因子α诱导蛋白3(TNFAIP3)和乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂(Maspin)在放疗敏感及放疗抗拒鼻咽癌中的表达差异,探讨该表达差异与放疗抗拒发生发展的关系。方法 采用TNFAIP3和Maspin多点标记的DIG探针原位杂交方法检测TNFAIP3 mRNA和Maspin mRNA在放疗敏感及放疗抗拒鼻咽癌中的表达。结果 放疗敏感和放疗抗拒鼻咽癌中,TNFAIP3 mRNA中度和强阳性表达率分别为27.50%和48.33%(P=0.037),Maspin mRNA中度和强阳性表达率分别为67.50%和46.67%(P=0.040)。放疗抗拒鼻咽癌中,TNFAIP3 mRNA中度和强阳性表达率与TNM分期呈正相关(P=0.005),有远处转移者表达率显著高于无远处转移者(70.00%比37.50%,P=0.018);Maspin mRNA中度和强阳性表达率与TNM分期呈正相关(P=0.039),与T分期亦呈正相关(P=0.021),有远处转移者表达率显著高于无远处转移者(65.00%比37.50%,P=0.044)。结论 TNFAIP3可能参与放疗抗拒鼻咽癌的发生和发展,Maspin可能参与放疗抗拒鼻咽癌的侵袭与转移。     

肿瘤坏死因子αDNA疫苗的制备及其对肿瘤的治疗作用

目的观察pcTNFα真核表达质粒对小鼠Lewis肺癌瘤局部注射的治疗效果及相关免疫机理。方法用双酶切的方法由pBluescdpt／TNFα载体上切下TNFα基因片段，构建真核表达载体，转染COS及Hda细胞，并对小鼠Lewis瘤体内注射pcTNFα重组质粒，观察疗效。结果构建了携带TNFα的重整pcTNFα真核表达质粒，肿瘤局部注射pcTNFα组肿瘤生长缓慢，存活期比对照组明显延长。结论pcTNFα真核表达质粒对小鼠Lewis瘤局部注射，有一定的抗肿瘤效应。     

肿瘤坏死因子α和内皮素1对支气管哮喘发病的影响

目的观察支气管哮喘患者急性发作期与缓解期血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)和内皮素1(ET-1)的变化,探讨其与哮喘发病的关系.方法对哮喘急性发作组(A组)、缓解组(B组)、健康对照组(C组),采用放射免疫法测定血浆TNF-α、ET-1,同时检测血氧分压(PaO2).结果 A、B、C3组TNF-α分别为52.6±12.2pmol/L、31.8±9.0pmol/L、20.2±7.5pmol/L;ET-1分别为75.8±27.0ng/L、45.6±6.8ng/L、25.5±8.5ng/L.A组、B组TNF-α、ET-1较C组均有显著性差异(t=0.267和0.296,均P＜0.01).另外,TNF-α与ET-1呈正相关(r=0.36,P＜0.05);TNF-α与PaO2呈负相关(r=-0.82,P＜0.01);ET-1与PaO2亦呈负相关(r=-0.90,P＜0.01).结论 TNF-α、ET-1在哮喘发病中起重要作用,TNF-α可促进ET-1分泌,且TNF-α、ET-1的增加均与缺氧有关.     

哮喘患者血清肿瘤坏死因子α水平与肺功能的相关性研究

目的：探讨哮喘患者血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平变化对肺通气功能的影响。方法：正常人18例（A组）、哮喘患者急性发作期16例（B组）及缓解期16锄（C组）分别抽取其静脉血以酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清TNF-α水平，并测定其与肺功能指标的相关性，结果进行统计分析。结果：三组间血清TNF-α水平有极显著性差异（F为26.27，P〈0.001）。q检验结果：B组患者血清TNF吨水平显著高于A组和C组，有极显著性差异（q’为6.378，3．654；P〈0.001），A组与C组比较，有非常显著性差异（q为5.875，P〈0.01）。肺功能指标与血清TNF-α的相关性分析结果显示哮喘患者血清TNF-α水平与FEV1％、FEV1/FVC呈负性相关（r值分别为-0．83，-0．69；均P〈0．05），但其与Vmax25出和Vmax50则无相关关系（，值分别为-0.27，-0.31；P〉0.05）。结论：前炎性细胞因子TNF-α在哮喘急性发作期参与气道炎症的形成和肺通气功能的下降；在哮喘缓解期，其作用在于参与气道炎症的维持。     

人环指蛋白11与核因子κB调控蛋白肿瘤坏死因子α诱导蛋白3相互作用蛋白1相互作用的研究

目的泛素化是机体重要的蛋白质的修饰方式,人环指蛋白(ring finger protein,RNF)11是泛素连接酶家族成员之一,可能在肿瘤形成过程中发挥重要的作用。肿瘤坏死因子α诱导蛋白3相互作用蛋白1(tumor necrosis factorα-induced pro-tein 3-interacting protein 1,TNIP1)是重要的核因子κB(nuclear factor kB,NF-κB)调控蛋白,可通过多种途径调控NF-κB的表达及细胞凋亡。文中研究RNF11下游功能及其与TNIP1之间的相互作用,明确RNF11的亚细胞定位。方法用PCR等方法构建人NFκB调控蛋白TNIP1全长及缺失不同位点的突变体,并观测其在293T细胞中的表达。用免疫共沉淀(co-immunoprecipita-tion,co-IP)方法鉴定其与人RNF11的相互作用,并确定其结合位点,用共聚焦显微镜观测其亚细胞定位。结果成功构建了人TNIP1的全长及其缺失不同位点的突变体并使其在293T细胞中表达。证实RNF11与TNIP1存在相互作用并确定其相互结合位点位于TNIP1的第311至535位氨基酸,。确定RNF11的亚细胞定位于细胞质。结论人RNF11可与TNIP1在细胞内相互结合,其主要的结合位点位于311至535位氨基酸。RNF11主要定位于细胞质,可能参与细胞内蛋白的降解过程。     

肿瘤坏死因子α在慢性病毒性肝炎中的作用

目的　探讨TNF -α在慢性病毒性肝炎炎症活动及纤维化形成中的作用。方法　将 83例慢性病毒性肝炎及肝硬化患者肝穿取得的肝组织分别按炎症活动度分级和纤维化程度分期 ,应用ELISA方法检测患者血清TNF -α水平。并计算肝组织炎症活动度计分及纤维化程度计分。结果　血清TNF -α水平在肝组织炎症活动度G2 、G3及G4 级比正常对照组明显升高 (P <0 0 0 1) ,且随着肝组织炎症活动程度的加重而升高。血清TNF -α水平与肝组织炎症活动度计分呈低度正相关 (P <0 0 1)。血清TNF -α水平在肝纤维化S2 、S3及S4 期比正常对照组明显升高 (P <0 0 5) ,且随着肝纤维化程度的加重而不断升高。血清TNF -α水平与肝组织纤维化程度计分呈中度的正相关 (P <0 0 0 1)。结论　TNF -α在慢性病毒性肝炎中 ,既参与了肝组织炎症活动 ,也参与了肝纤维化的形成。