柯萨奇病毒A组16型

柯萨奇病毒A组16型（Coxsackievirus A Group 16 Strain,CVA16）是手足口病（Hand,Footand Mouth Disease,HFMD）的主要致病原之一,对其生物学特征、致病机理、临床表现、实验室诊断、流行病学和分子流行病学的认识,有助于提高HFMD及其它相关疾病的防治水平。研发CVA16的诊断方法和疫苗,建立健全CVA16的流行病学和实验室监测网络,可以对CVA16引起的HFMD的流行进行预测和预警,对预防CVA16引起的HFMD有重要的意义。     

柯萨奇病毒A组16型研究进展

柯萨奇病毒A组16型（Coxsackievirus A Group 16 Strain,CA16）是手足口病（Hand,Foot and Mouth Disease,HFMD）主要致病原之一。自1948年从脊髓灰质炎患儿的粪便中分离出该病毒以来,已在全世界引起多次爆发或流行,累及地域广、人口多,受到人们的广泛关注。本研究对CA16病毒生物学特征、分子流行病学、实验室诊断等方面的研究进展作一概述。     

柯萨奇病毒A组16型手足口病疫苗研究现况

手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)严重影响着婴幼儿健康。肠道病毒A组71型(enterovirus A71,EV71)及柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)是引起手足口病的主要病原体,曾在全球多个国家或地区暴发,接种疫苗是预防手足口病的有效途径,EV71疫苗已上市,但是CA16疫苗相关研发进展较缓慢,目前仍无相关疫苗上市。本文对CA16型灭活疫苗、减毒活疫苗、病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗、DNA疫苗、重组嵌合病毒疫苗及亚单位疫苗的相关研究进展做一综述。     

广东省2012-2016年柯萨奇病毒A组16型感染手足口病病例流行特征分析

目的 了解2012－2016年广东省柯萨奇病毒A组16型（Cox A16）感染手足口病病例流行特征。方法 在广东省8个城市共选取8家哨点医院开展手足口病普通病例Cox A16感染监测,结合手足口病个案及暴发数据,估算Cox A16感染手足口病发病情况并分析人群和时间分布特征。结果 ①广东省Cox A16感染手足口病估算发病率以2014年（113.0/10万）最高,其次为2016年（86.4/10万）、2012年（79.1/10万）;2015年（29.0/10万）和2013年（28.8/10万）较低。②暴发以Cox A16感染（54.6%,89/163）为主,高流行年份年均暴发数（28起）是低流行年份（2.5起）的11.2倍。③估算发病率随年龄升高呈下降趋势（趋势χ²=853 905.63,P<0.01）,高发年龄组依次为1～（1 449.2/10万）、3～（1 097.0/10万）、2～（1 083.5/10万）、4～（687.8/10万）和0～岁（604.9/10万）;随月龄增加呈上升趋势（趋势χ²=5 541.77,P<0.01）,高发月龄依次是11～（2 105.1/10万）、10～（1 448.6/10万）、9～（938.3/10万）、8～（703.3/10万）和6～月龄（664.6/10万）。④高发月份是5月（143.9/10万）和6月（131.5/10万）。结论 2012－2016年广东省Cox A16感染手足口病在各年份流行强度不同;Cox A16感染水平高时,暴发疫情增多,主要发生在托幼机构,5－6月常见,0～4岁儿童是Cox A16感染手足口病高危人群,6～11月龄为高发月龄。     

肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型细胞受体的研究进展

近几年手足口病在亚太地区的流行大幅上升并伴随严重的中枢神经系统并发症,而针对其主要致病原肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型现在还缺乏有效的预防疫苗和抗病毒制剂.确定它们的特异性细胞受体对于进一步阐明病毒与宿主细胞早期互相作用的分子机制及其致病机制至关重要.过去一年中,P-选择素糖蛋白配体-1、B类清道夫受体Ⅱ和唾液酸化...     

北京市儿童手足口病与肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型感染有关

目的了解2007年5-6月北京市儿童中流行的手足口病的病原。方法于2007年5、6月间采集来首都儿科研究所附属儿童医院门诊就诊的手足口病患儿咽拭子标本6份和1份病情危重的手足口病并发神经系统症状而急诊收住院患儿（编号F4243，年龄9岁8个月，女性）的经气管插管呼吸道抽吸液、脑脊液及血清标本。将咽拭子和气管插管抽吸液标本接种Hep-2、MDCK和Vero细胞进行病毒分离。同时设计位于肠道病毒5^＋非编码区（UTR）的通用引物2对（巢式PCR）、肠道病毒71型（EV71）VPl基因不同位置的特异性引物2对半（PCR和半巢式PCR）和柯萨奇病毒A组16型（CAl6）的特异性引物1对检测标本中的病毒核酸。首先用随机引物将标本中的RNA逆转录成cDNA，然后分别用上述引物进行PCR扩增肠道病毒5^＋UTR和EV71／CAl6的VPl基因片段；对EV71阳性的标本还扩增了VPl全基因，扩增产物直接进行序列测定和分析。结果6例门诊就诊的普通手足口病患儿和F4243的呼吸道标本中均扩增到肠道病毒5^＋UTR基因片段，有2例门诊患儿和F4243的标本中还扩增到EV71的VPl基因片段，提示该组手足口病患儿均为肠道病毒感染，其中3例为EV71感染。序列测定和分析表明有1例普通手足口病患儿（F4211）和F4243标本确定为EV71。所有标本接种Hep-2和MDCK细胞均未出现病变，说明常见的呼吸道病毒为阴性。除1份咽拭子标本（F4283）外，其余6份接种Vero细胞的标本均出现细胞病变。用肠道病毒通用引物和EV71特异性引物对分离到的病毒株核酸的扩增结果显示这6株病毒均为肠道病毒，其中F4211和F4243为EV71，与直接从呼吸道标本中扩增的结果相符；其余4株为CAl6。结论北京市儿童中流行的手足口病与肠道病毒EV71和CAl6感染有关；EV71可以在5岁以上儿童中引起严重的神经系统并发症，应引起注意。     

肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型实验室检测研究进展

肠道病毒71型（Enterovirus,EV71）和柯萨奇病毒A组16型（Coxsackievirus,CoxA 16）是引起手足口病的主要病原体,因此,快速准确地检测这2种病原体对于手足口病治疗和控制有着至关重要的作用。该文介绍了这2种病原体实验室检测技术的研究进展,主要包括病毒分离培养、血清学检测、分子生物学方法包括RT—PCR法、实时荧光RT—PCR法等。     

肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型细胞受体的研究进展

近几年手足口病在亚太地区的流行大幅上升并伴随严重的中枢神经系统并发症,而针对其主要致病原肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型现在还缺乏有效的预防疫苗和抗病毒制剂.确定它们的特异性细胞受体对于进一步阐明病毒与宿主细胞早期互相作用的分子机制及其致病机制至关重要.过去一年中,P-选择素糖蛋白配体-1、B类清道夫受体Ⅱ和唾液酸化多聚糖类被分别发现和确定为肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型的功能性细胞受体.此文讨论了相关的实验结果并展望了未来值得探索和应用的方向.     

北京地区柯萨奇病毒A组6型、肠道病毒EV71型和柯萨奇病毒A组16型手足口病流行特征及临床特点比较

目的 了解柯萨奇病毒A组6型、肠道病毒71型和柯萨奇A组16型手足口病流行特征、临床特点,为指导临床诊断,调整手足口病防控策略提供科学依据.方法 采用前瞻性调查的方法,采集2013年8月至2015年9月在北京市儿童医院诊断的手足口病临床确诊病例的咽拭子,将手足口病原核酸检测阳性的病例分为CA6、EV71、CA16 3组,分析比较3组的临床特点、流行特征、预后及影响因素.结果 共采集HFMD临床诊断病例574例患儿咽拭子,CA6入组122例,EV71入组107例,CA16入组124例.①3组年龄、性别分布一致,差异无统计学意义.②不同年份流行主要毒株不同,但3种病原体引起的手足口病高峰均在夏季.③CA6组发热比例高达78.69％,明显高于EV71组(35.51％)和CA16组(37.90％) (P ＜0.001),平均体温约为38.78℃.CA6组表现大疱疹(9.01％)、结痂(8.20％)、皮疹部位疼痛(29.51％)、恢复期脱皮(38.52％)、脱甲(35.25％)、色素沉着(11.47％)比例高于EV71组、CA16(P ＜0.001).④3组在卫生学指标方面差异无统计学意义.结论 CA6、EV71和CA16感染所致的HFMD发病高峰季节一致;与EV71、CA16感染相比,CA6感染引起的高热比例较高,部分病例可表现为大疱疹,疼痛、脱皮、脱甲、色素沉着、结痂发生率高,预后较好.     

实时荧光RT-PCR及RT-PCR快速检测肠道病毒71型和柯萨奇A16病毒

肠道病毒71型(Enterovirus 71,简称EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,简称CA16)是引起手足口病的两种主要的病原体,常相伴造成手足口病的暴发流行,每次流行中两种病毒中所占的比例有所不同[1].EV71感染引起HFMD常有严重的神经系统并发症发生,CA16感染引起自限性的手足口病,极少发生严重并发症和死亡[2～6].2008年安徽、广东(包括深圳市)、浙江等28个省市出现手足口病暴发流行,因此,亟须一种特异性强,灵敏度高的方法对这两种病毒进行快速区分检测.     

南京市20 1 0年柯萨奇病毒A组1 6型VPl区基因特征分析

柯萨奇病毒A组16型(CAl6)是引起手足El病的常见病原之一，与另一种手足口病的致病原--人肠道病毒7l型(EV71)相比，CAl6所致手足口病症状相对较轻?。近几年研究发现，CAl6感染可能引起严重并发症、21，偶尔引起新生儿死亡。本研究对20lo年从南京地区分离的CAl6进行VPl区序列测定和分析，以了解CAl6的流行情况及分子生物学特征。     

多重荧光逆转录PCR同时检测肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型

目的建立多重荧光逆转录PCR（RT-PCR）同时检测肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型的方法。方法在肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型VP1基因的保守区序列分别设计特异性引物和Taqman探针,建立优化多重荧光RT-PCR反应体系,评价所建多重荧光RT-PCR反应体系的特异性、敏感性和稳定性,并应用于临床样品检测。结果该方法对肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型检测具有高度特异性,检出限分别为0.1 TCID50和1 TCID50,具有较好的稳定性,可直接应用于临床样品的检测。结论本研究建立的多重荧光RT-PCR可以同时准确检测肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型,灵敏度高,稳定性好,是一种快速检测肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型的新方法。     

中国大陆柯萨奇病毒A组16型全基因参照序列的初步建立和分析

目的 建立中国大陆柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)流行株的全基因参照序列.方法 从GenBank中获得CoxA16中国大陆分离株的所有全基因序列和氨基酸序列,用DNAstar/MegAlign软件对所得序列进行多序列比对和进化分析,按照参照序列标准拟定CoxA16的全基因参照序列和氨基酸序列,并与参考序列进行比对分析.结果 中国大陆分离的CoxA16毒株全基因序列共8株,分离于2005-2009年,其中2008年5株,广东省5株;通过序列比对获得了大陆CoxA 16全基因和氨基酸参照序列;参考毒株间核苷酸序列同源性介于79.0％～98.8％,氨基酸序列同源性为94.3％～99.9％,与参照序列的核苷酸同源性为79.7％～97.0％,氨基酸同源性介于95.1％～99.5％之间,同源性最低的为2008年安徽阜阳的FY18株.结论 比对分析了中国大陆CoxA16毒株全序列,成功建立了中国大陆CoxA16全基因和氨基酸参照序列.     

2008年柯萨奇病毒A组16型昆明分离株KMM08全基因组序列分析

目的 分析柯萨奇病毒A组16型(CA16)昆明分离株KMM08全基因序列,了解其遗传特性.方法 设计针对CA16引物,提取病毒RNA,RT-PCR扩增和产物直接测序获得序列.利用Mega 4.1,RDP3和SimPlot 3.5.1等软件分析全基因序列.结果 获得KMM08全基因组核苷酸序列长度为7409bp,编码含2193个氨基酸残基的多聚蛋白;与其他CA16参考株核苷酸和氨基酸同源性分别为79.0％～ 98.2％和94.5％ ～ 99.3％,其中SZ-HK08-3与国际标准株G10核苷酸和氨基酸同源性分别79.1％和94.8％;而与肠道病毒71型(EV71)标准株BrCr同源性分别为78.7％和89.0％.在各个区段上,KMM08与SZ-HK08-3的核苷酸和氨基酸同源性分别为97.0％～99.0％和98.0％～100.0％,同源性最高;与G10的核苷酸和氨基酸同源性分别为74.2％ ～ 86.9％和90.9％ ～97.0％;与EV71 BrCr核苷酸和氨基酸同源性分别在65.0％ ～ 84.9％和71.0％～95.2％.进化分析发现KMM08属于B基因型的一个分支.RDP3和SimPlot 3.5.1软件分析发现Tainan-5079-98序列发现重组信号,而KMM08未发现.结论 KMM08分离株为B基因型;CA16与EV71在非结构区发生重组.     

北京市入托体检健康儿童肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型感染状况及就诊行为调查

目的 了解北京市入托儿童肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)感染状况及其相关的就诊率,为估算手足口病疾病负担参考。方法 2013年8月20－31日对北京市东城区、朝阳区和怀柔区进行入托体检的健康儿童开展血清学调查,采用ELISA方法检测血清中EV71和Cox A16的IgG和IgM抗体。结果 共调查813名儿童,平均年龄为(3.5±1.0)岁。Cox A16 IgG阳性率为61.9%,IgM阳性率为4.4%;EV71 IgG阳性率为9.3%,IgM阳性率为1.1%;各种抗体阳性率在不同性别中的分布差异无统计学意义(P>0.05),在不同年龄组中的分布差异有统计学意义(P<0.05)。Cox A16抗体阳性者中7.8%有皮疹,EV71抗体阳性者中10.7%有皮疹。Cox A16或EV71抗体阳性者中,仅7.1%在父母陪伴下到医院就诊,而有皮疹的抗体阳性病例中,80.5%去医院就诊。结论 北京市健康入托儿童中,既往感染Cox A16的比例较大,EV71抗体阳性率明显低于Cox A16,提示托幼儿童对EV71普遍易感,应是手足口病防控重点人群。     

肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型抗体筛查在手足口病中的应用及相关性

目的 探讨肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CA16)抗体筛查在手足口病中的应用及相关性.方法 采用酶联免疫吸附法对确诊的281例手足口病患儿进行血清EV71-IgM抗体和CA16-IgM抗体检测.结果 EV71-IgM抗体阳性144例(51.2％,144/281),CA16-IgM抗体阳性90例(32.0％,90/281),EV71-IgM和CA16-IgM双阳性17例(6.0％,17/281),即抗体阳性确切例数为217例,抗体阳性率为77.2％(217/281).EV71-IgM抗体阳性率与CA16-IgM抗体阳性率比较差异有统计学意义(x2=21.35,P＜0.01),总体男性与女性抗体阳性率[95.1％(135/142)比71.2％(99/139)]比较差异有统计学意义(x2=8.22,P＜0.01).结论 早期进行EV71-IgM和CA16-IgM抗体联合检测,对临床诊断手足口病及监控治疗具有重要意义.     

六个县母婴肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型中和抗体水平调查

目的了解新生儿和新生儿母亲的肠道病毒71型(Enterovirus Type71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus Group AType16,CVAl6)中和抗体(Neutralizing Antibody,NA)水平。方法选取广西壮族自治区和江苏省的3个手足口病(Hand,Footand Mouth Disease;HFMD)高发县和3个低发县作为研究现场,在每个县选取一个HFMD高发乡和一个低发乡,每个乡选择10对新生儿及新生儿母亲,对所有调查对象采集静脉血,并对新生儿母亲进行问卷调查。结果母亲EV71和CVA16的NA阳性率和几何平均滴度(Geometric Mean Titer,GMT)分别为83.5%、33.1%和1∶26.61、1∶6.1l,新生儿EV7l和CVA16的NA阳性率和GMT分别为75.2%、35.5%和1∶22.05、1∶6.97,母婴EV71、CVA16的NA阳性率及GMT差异均无统计学意义(2EV71=2.52,P=0.1124;2CVA16=0.1650,P=0.6846;tEV7l=1.05,P=0.2953;tCVA16=1.30,P=0.1946)。EV71、CVA16的NA阳性率和GMT在HFMD高、低发县差异亦无统计学意义(2EV71=1.45,P=0.2288;2CVA16=1.28,P=0.2583;tEV7l=1.86,P=0.0643;tCVA16=0.2,P=0.8399)。母婴EV71和CVA16的NAGMT均存在相关性(rEV71=0.69,P<0.0001;rCVA16=0.4769,P<0.0001)。结论母亲EV71和CVA16的NA阳性率和GMT高,新生儿EV71和CVA16的NA相应也高,可为新生儿提供有效保护。     

2008年柯萨奇病毒A组1 6型北京地区分离株全基因组序列分析

中国近年的手足口病(HFMD)流行中呈柯萨奇病毒16(CA16)和肠道病毒EV71交替或共同流行的趋势,目前GenBank数据库中CA16全基因组序列较少,本研究对北京地区2008年的1株CA16全基因组序列进行测定.