姜黄素调控子宫内膜癌细胞糖酵解过程的机制

目的：探究姜黄素靶向子宫内膜癌细胞糖酵解过程的调控机制,探索常规化疗药物联合姜黄素靶向杀伤子宫内膜癌细胞的作用效果。方法：培养子宫内膜癌Ishikawa细胞,利用能量代谢检测Seahorse、乳酸及丙酮酸水平,验证子宫内膜癌细胞糖酵解及氧化磷酸化水平;通过qPCR检测了糖酵解相关基因在姜黄素处理后子宫内膜癌细胞及正常子宫内膜癌细胞中表达情况,筛选姜黄素潜在的靶向调控位点;为了验证姜黄素通过丙酮酸脱氢酶激酶2（PDK2）调控子宫内膜癌细胞能量代谢过程,利用Seahorse及丙酮酸水平检测试实验,检测PDK2敲除后子宫内膜癌细胞能量代谢过程变化;小鼠体内皮下成瘤实验,探究姜黄素联合5-FU杀伤子宫内膜癌细胞的治疗效果。结果：姜黄素作用于子宫内膜癌细胞可显著抑制子宫内膜癌细胞糖酵解途径,而氧化磷酸化水平并未发生显著改变;姜黄素可显著下调PDK2的表达,调控子宫内膜癌糖酵解过程,而在子宫内膜癌细胞中敲除PDK2的表达,可显著抑制子宫内膜癌细胞的糖酵解途径,诱导子宫内膜细胞增殖抑制,因此姜黄素作用于PDK2调控子宫内膜癌糖酵解过程,从而达到杀伤肿瘤细胞的目的;5-FU联合姜黄素联合用药,可显著提高5-FU杀伤肿瘤细胞能力,抑制肿瘤细胞生长,5-FU联合姜黄素可显著提高子宫内膜癌细胞对化疗药物的敏感性。结论：姜黄素通过PDK2调控子宫内膜癌细胞糖酵解过程,从而抑制子宫内膜癌细胞增殖过程,增加子宫内膜癌细胞对5-FU的敏感性。     

子宫内膜癌保育治疗孕激素耐药分子机制的相关研究进展

 大剂量高效孕激素是年轻有生育需求的早期子宫内膜癌患者保留生育功能的标准治疗方案,但相当一部分患者存在原发或继发性孕激素治疗不敏感,造成治疗时间延长,不良反应增加,甚至疾病进展,严重影响保留生育功能效果。因此,解析探讨子宫内膜癌孕激素治疗不敏感/耐药的分子机制对于临床治疗有重大指导意义。孕激素受体介导的信号通路是孕激素发挥抗肿瘤作用的主要途径,包括孕激素受体、相关共作用信号分子、转录因子以及肿瘤-代谢-免疫微环境等可协同干扰孕激素受体信号通路。本文就目前孕激素治疗不敏感/耐药的分子机制的研究进展作一综述,系统阐述孕激素受体相关信号通路中影响子宫内膜癌孕激素敏感性的关键因素,以期为进一步解析子宫内膜癌孕激素不敏感/耐药的可能机制,为子宫内膜癌合理、安全、有效地保育治疗提供理论依据,为孕激素治疗不敏感的子宫内膜癌患者寻求新的治疗方法奠定基础。     

子宫内膜癌相关基因的研究进展

子宫内膜癌是一种常见的妇科恶性肿瘤,其发病受基因与环境因素共同影响。基因改变是子宫内膜癌发病的重要因素,原癌基因、抑癌基因、雌激素代谢相关基因及雌、孕激素受体基因的突变和多态性均会增加子宫内膜癌的发病风险。探讨相关基因对子宫内膜癌的影响,有助于对子宫内膜癌的发病进行预测,计对女性进行相关的健康指导。目前,已有数个基因被发现与子宫内膜癌发病有关,该文就子宫内膜癌相关基因的研究进展进行综述。     

PRA、PRB在子宫内膜癌孕激素治疗耐药机制中发生的分布及活性状态变化研究

目的：探究子宫内膜癌组织中的孕激素受体PRA（孕激素受体亚型A）、PRB（孕激素受体亚型B）的分布以及表达情况,并分析其意义。方法选取2011－01～2015－01间于我院接受治疗80例子宫内膜癌患者,作为观察组。另选取同期来我院体检的80例正常人作为对照组。观察两组患者子宫内膜癌组织中孕激素受体PRA、PRB受体的表达情况。另应用免疫细胞化学法观察耐药细胞与母代Ishikawa细胞的PR表达情况。结果观察子宫内膜癌患者PRA、PRB表达情况与临床病理资料的关系,结果发现PRA的表达与子宫内膜癌分化程度有关,PRB的表达与子宫内膜癌分化程度、淋巴结转移以及FIGO分期有关。观察组患者PRA蛋白、PRB蛋白、PRmRNA（孕激素受体信使RNA）均显著小于对照组,差异有统计学意义,P＜0.05。 PRA／PRB、PRBmR-NA（孕激素受体亚型B mRNA）无明显差异;耐药细胞PRB阳性表达率显著低于母代Ishikawa细胞,差异有统计学意义,P＜0.05。而PR 阳性表达率则无明显改变。结论 PRB表达的下降以及TGFɑ－EGFR（转化生长因子α－表皮生长因子受体）信号通路活性的增强可能参与了子宫内膜癌孕激素耐药的发生。     

雌、孕激素和米非司酮对子宫内膜癌细胞的作用

目的:了解雌、孕激素和米非司酮对子宫内膜癌细胞生长的影响.方法:体外培养高分化子宫内膜癌细胞Ishikawa和中分化子宫内膜癌细胞Hec-1B,分为对照组、雌激素组、雌孕激素联合组、雌孕激素和米非司酮联合组,在24,48,72,96 h测定各组细胞生长趋势的变化.结果:雌激素作用72 h Ishikawa细胞生长显著高于对照组,Hec-1B细胞较对照组有升高趋势,但差异无统计学意义.孕激素作用72 h对Ishikawa细胞有显著抑制作用,96 h后对Hec-1B细胞有显著抑制作用.在雌、孕激素基础上加入米非司酮96 h后Ishikawa细胞明显增生,48 h后Hec-1B细胞明显增生.结论:雌激素可以刺激子宫内膜癌细胞的生长.孕激素在雌激素基础上抑制内膜癌细胞的生长.米非司酮有拮抗孕激素的抑制子宫内膜癌细胞生长的作用.     

姜黄素通过调控Notch1通路对人子宫内膜癌ISH细胞株孕激素治疗敏感性的影响

目的 探讨姜黄素是否能通过调控Notch1信号通路逆转人子宫内膜癌ISH细胞株孕激素治疗耐药性。方法 醋酸甲羟孕酮（MPA）浓度递增及长期持续作用,建立人子宫内膜癌孕激素耐药细胞株ISH/MPA,MTS法检测细胞耐药指数,绘制ISH/MPA细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间。不同浓度姜黄素（0、7.5、15、30、60 μmol/L）处理ISH/MPA细胞,MTT法检测细胞存活率。ISH/MPA细胞分为ISH/MPA组、姜黄素组、激动剂组、激动剂+姜黄素组,姜黄素组加入30 μmol/L姜黄素、激动剂组加入2 μmol/L NSC 22423、激动剂+姜黄素组加入30 μmol/L姜黄素和2 μmol/L NSC 22423,ISH/MPA组细胞不做处理,培养48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白印迹法检测Notch1、Jagged1、Hes-1蛋白表达。结果 ISH/MPA细胞耐药指数随MPA浓度增加而升高,且MPA浓度为10 μmol/L时,ISH和ISH/MPA细胞群体倍增时间无统计学差异,两者生长曲线基本一致。不同浓度姜黄素均降低ISH/MPA细胞存活率,且随姜黄素浓度增加而升高（P＜0.05）。与ISH/MPA组比较,姜黄素组细胞凋亡率升高,Notch1、Jagged1和Hes-1蛋白表达降低,激动剂组细胞凋亡率降低,Notch1、Jagged1和Hes-1蛋白表达升高（P＜0.05）;与姜黄素组比较,激动剂+姜黄素组细胞凋亡率降低,Notch1、Jagged1和Hes-1蛋白表达升高（P＜0.05）;与激动剂组比较,激动剂+姜黄素组细胞凋亡率升高,Notch1、Jagged1和Hes-1蛋白表达降低（P＜0.05）。结论 姜黄素提高ISH细胞对MPA的敏感性,其可能是通过抑制Notch1/Jagged1/Hes-1信号通路发挥作用。     

孕激素受体与子宫内膜癌关系的研究进展

孕激素受体与子宫内膜癌关系密切,其在子宫癌组织中的表达水平可以综合反映病程、病变性质,同时可作为预测预后的指标。癌变的子宫内膜中,孕激素受体含量显著低于正常子宫内膜,且随子宫内膜增生的程度呈下降趋势。孕激素对内膜细胞和内膜癌细胞的作用是多环节的,但具体机制不明。在此旨在更深入地了解孕激素受体与子宫内膜癌的关系,以及应用孕激素治疗子宫内膜癌的可能机制。     

孕激素受体B亚型在子宫内膜癌细胞中的功能

目的:通过反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,AS-ODN)技术特异性下调子宫内膜癌细胞系中孕激素受体亚型B(progestrone receptor isoform B, PR-B),在此基础上观察激素对转染前后细胞作用的改变,了解子宫内膜癌细胞中孕激素受体亚型功能的不同.方法:体外培养高分化子宫内膜癌细胞Ishikawa和中分化子宫内膜癌细胞Hec-1B, 转染PR-B的反义寡核苷酸和正义寡核苷酸及错义寡核苷酸后,提取细胞蛋白,采用Western blot 方法测定各个条件下内膜癌细胞中两种孕激素受体亚型的表达;并在转染PR-B的反义寡核苷酸和正义寡核苷酸及错义寡核苷酸后,用MTT法测定转染前后各种激素对细胞生长作用的改变.结果:转染孕激素受体亚型PR-B的反义寡核苷酸后, 两种细胞系PR-B的表达较非转染组显著下调,孕激素受体亚型A(progesterone receptor isoform A,PR-A)的表达无明显变化.雌激素(17β-estradiol,E2)作用后72 h Ishikawa细胞生长显著高于对照组,Hec-1B细胞较对照组有升高趋势,但差异无统计学意义.孕激素(R5020)作用72 h后对Ishikawa细胞有显著抑制作用,96 h后对Hec-1B细胞有显著抑制作用.在雌、孕激素作用基础上加入米非司酮(mifepristone,RU486),96 h后Ishikawa细胞明显增生,而仅48 h后HEC-1B细胞明显增生.转染PR-B的反义寡核苷酸后,雌激素对内膜癌细胞生长的刺激作用较转染前增强 ,孕激素对细胞的生长抑制作用减弱甚至消失,米非司酮拮抗孕激素的作用较转染前显著降低. 结论:(1)向子宫内膜癌细胞系中转染PR-B的反义寡核苷酸可以下调PR-B的表达,使细胞优势表达PR-A;(2)雌激素可以刺激内膜癌细胞的生长,PR-B可能参与下调雌激素对内膜癌细胞的促生长作用;(3)孕激素在雌激素基础上抑制内膜癌细胞的生长,主要可能通过PR-B起抗内膜癌细胞增生作用;(4)米非司酮有拮抗孕激素抑制子宫内膜癌细胞生长的作用.PR-B可能参与介导了米非司酮拮抗孕激素的作用.     

环氧化酶-2与雌、孕激素受体在子宫内膜癌中的表达及相关性研究

目的探讨环氧化酶-2（COX-2）与雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）在子宫内膜癌的表达及相关性。方法应用免疫组化法对我院收治的58例子宫内膜癌患者进行COX-2、雌激素受体、孕激素受体检测,探讨检测结果与子宫内膜癌病理相关性。结果COX-2表达与子宫内膜癌病理分级呈正相关,与淋巴结转移无相关性,雌激素受体、孕激素受体表达与子宫内膜癌病理分级、淋巴结呈负相关。结论COX-2、雌激素受体、孕激素受体在子宫内膜癌中均高度表达,与子宫内膜癌预后有一定的相关性。     

多药耐药与子宫内膜癌化疗现状

子宫内膜癌是常见的、发病率逐年上升的妇科恶性肿瘤 ,2 0 0 2年美国约产生 3 93 0 0新病例 ,约 660 0人死于此病 [1 ] 。目前手术仍为子宫内膜癌首选的治疗方式 ,约75 %的早期子宫内膜癌可以通过手术和放疗治愈 ,但对晚期及复发性患者 ,平均生存期不足 1年 ,孕激素治疗缓解率约为 1 0 %～ 2 0 % [2 ] ,须进行包括化疗的综合治疗。多药耐药 ( MDR)是子宫内膜癌化疗失败的主要原因之一 ,近年来对于 MDR产生机制的揭示 ,逆转肿瘤耐药新策略的开发以及基因免疫治疗研究的日益深入 ,为子宫内膜癌化疗带来了一线曙光。1　子宫内膜癌 MDR1 .1…     

子宫内膜样腺癌不同激素受体差异基因表达谱分析

目的：探讨子宫内膜样腺癌（内膜癌）雌、孕激素受体不同表达状态的基因表达谱的差异。方法：采用14785条人cDNA表达谱芯片,筛选雌、孕激素受体均阳性,雌、孕激素受体均阴性,雌激素受体阳性、孕激素受体阴性子宫内膜癌的特异性差异基因表达谱。结果：雌、孕激素受体阳性内膜癌差异表达基因571条,其中上调399条、下调172条;雌、孕激素受体阴性内膜癌差异表达基因645条,上调443条、下调202条;雌激素受体阳性、孕激素受体阴性内膜癌则为1125条,上调608条、下调517条。结论：不同激素受体状态有不同的基因表达谱特征,各型受体特异性表达基因可望成为高效的治疗靶点。     

MicroRNA在子宫内膜癌发生、发展及临床诊治中的研究

microRNA是一种内源性的大小在20nt左右的一类非编码RNAs,其通过下调靶基因的表达或翻译而参与调节细胞的发育、增殖、分化、凋亡。近期研究发现microRNA具有癌基因和抑癌基因的作用,已发现miR-21,miR-200c,miR-205,MiR-125b,miR-194等与子宫内膜癌的发生、发展、侵袭及转移相关,miRNA-200家族则参与子宫内膜癌的耐药机制。对其相应的调控机制和靶基因PTEN,TP53INPI,BMI-1,AP-2d等的研究也已有了一些进展,为子宫内膜癌的研究开辟了一条新途径。本文就子宫内膜癌相关MicroRNA的研究进展予以综述。     

子宫内膜癌多药耐药基因和相关蛋白基因的表达及其意义

目的探讨子宫内膜癌组织中多药耐药基因（ＭＤＲ１）和多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因的表达及其意义。②方法利用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），对３７例初治子宫内膜癌及１０例正常子宫内膜组织ＭＤＲ１和ＭＲＰ基因的表达进行检测。③结果３７例子宫内膜癌和１０例正常子宫内膜组织均有ＭＤＲ１和ＭＲＰ基因的表达，两种基因在这两种组织中的表达水平无显著性差异（ｔ＝１．１７，１．５１，Ｐ＞０．０５）。有７例子宫内膜癌ＭＲＰ基因呈高水平表达（１．６８±０．１７），明显高于其他３０例病人（０．８３±０．１１），差异有极显著性（ｔ＝１６．５５，Ｐ＜０．００１）。④结论子宫内膜癌对化疗的耐药可能是由于固有性多药耐药所致，与ＭＤＲ１和ＭＲＰ基因的表达有关，ＭＲＰ基因的过度表达有可能作为判断子宫内膜癌病人预后的一个指标     

子宫内膜癌多药耐药基因1产物表达及其临床意义

目的;探讨子宫内膜癌多药耐药基因１产物Ｐ－糖蛋白表达与子宫内膜癌ＭＤＲ的关系。方法：用ＳＰ免疫组化法测定４０例子宫内膜癌,１０例子宫内膜增殖症和１０例正常子宫内膜组织Ｐ－ｇｐ表达,并与ＰＲ受体,细胞分级和临床分期等预后因素进行相关分析。结果：（１）上述所所组织均有Ｐ－ｇｐ表达,其中子宫内膜癌Ｐ－ｇｐ强阳性表达率较正常子宫内膜组织高,差异有显性;与子宫内膜增殖症比较,二差异无显性。（２）Ｐ－ｇ     

子宫内膜癌患者孕激素受体B基因甲基化状态分析

通过临床研究我们发现孕激素受体B基因甲基化可能与子宫内膜癌发生发展密切相关.     

am68基因对子宫内膜癌细胞增殖的影响

目的 探讨Sam68基因对人子宫内膜癌细胞增殖的影响。方法建立Sam68 稳定干扰和过表达子宫内膜癌细胞株，Real-time PCR和Western blot验证干扰和过表达效率，MTT法、平板克隆法、软琼脂克隆形成实验、BrdU法检测沉默及过表达Sam68基因对子宫内膜癌细胞增殖活力的影响。结果利用逆转录病毒载体成功构建了 Sam68 RNAi/HEC-1A、Sam68 RNAi /RL952以及Sam68 pc DNA-3 /Ishikawa子宫内膜癌细胞模型。沉默Sam68基因可降低子宫内膜癌细胞增殖,抑制细胞的集落形成能力，而过表达则效果相反。结论利用RNAi靶向沉默Sam68基因可有效抑制人子宫内膜癌细胞的增殖，过表达则可促进增殖。Sam68在子宫内膜癌的发生发展中可能起到癌基因的作用。     

清热解毒经验方对子宫内膜癌移植瘤的作用及TAMs表达的影响

目的探讨清热解毒经验方对子宫内膜癌移植瘤的作用及对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)表达的影响。方法对子宫内膜癌细胞进行传代培养,建立裸鼠子宫内膜癌移植瘤模型,采用免疫组织化学染色的方法研究子宫内膜癌裸鼠移植瘤组织中TAMs的表达。结果孕激素组及成瘤前中药组、成瘤后中药组肿瘤生长速度均明显低于空白对照组(P0.05),孕激素组及成瘤前中药组、成瘤后中药组肿瘤生长速度比较,差异无统计学意义(P0.05)。TAMs在肿瘤组织中的表达,孕激素组、成瘤前中药组、成瘤后中药组与空白对照组比较明显降低(P0.05);孕激素组与成瘤前中药组、成瘤后中药组比较明显降低。(P0.05)。结论清热解毒经验方具有抑制肿瘤生长的作用,其可能是通过抑制TAMs在肿瘤组织中的表达而发挥抑制肿瘤生长的作用。     

子宫内膜增生症的孕激素治疗

子宫内膜增生症是临床常见的一组病变,为子宫内膜癌的前体。异常阴道出血为子宫内膜增生症的主要症状。基于子宫内膜结构复杂性和细胞异型性的不同程度分为四种类型。在多种治疗方案中孕激素治疗应用最为广泛,且治疗效果明确。针对个体状况的不同,孕激素治疗方案的选择不同。在应用孕激素治疗后,子宫内膜可发生相应的细胞学和组织学的改变。在子宫内膜增生症的病情进展和子宫内膜对孕激素治疗的反应中,多种基因和蛋白质的表达起很重要的作用。     

子宫内膜癌细胞中同源盒B13基因过量表达与肿瘤浸润的关系

目的：探讨正常子宫内膜组织细胞和子宫内膜癌组织细胞中39种同源盒（HOX）基因的表达情况。方法：采用实时聚合酶链反应（RT-PCR）的方法测定目前已知的39种HOX基因在正常的子宫内膜和子宫内膜癌组织中的表达情况;通过转染技术将反义HOXB13基因片段转染到子宫体癌瘤株AN3CA中;应用Matrigel浸润试验比较转染前后细胞浸润能力的变化。结果：与正常子宫内膜细胞相比,子宫内膜癌细胞中HOXB13基因是过量表达的,转染后的AN3CA细胞的浸润能力下降了90%（P〈0.01）。结论：HOXB13基因的过量表达可能与子宫内膜癌的浸润转移相关。     

脆性组氨酸三联基因蛋白在子宫内膜癌中的表达

目的研究脆性组氨酸三联基因(FHIT)蛋白在子宫内膜癌中的表达及其与预后相关因素分析。方法应用免疫组织化学S-P法检测FHIT蛋白在14例正常子宫内膜及38例子宫内膜癌石蜡标本中的表达,分析FHIT蛋白表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系。结果FHIT蛋白定位于正常子宫内膜腺体细胞的细胞浆。7例增生期和7例分泌期正常子宫内膜腺体细胞均为强阳性染色,间质及肌层组织染色阴性。FHIT蛋白亦定位于子宫内膜癌细胞胞浆,有47.37％(18／38)PHIT蛋白表达阴性。FHIT蛋白表达异常与子宫内膜癌的深肌层浸润、淋巴结转移、晚期肿瘤、低分化癌及肿瘤家族史明显相关(P<0.05),而与肿瘤的病理类型无关(P>0.05)。结论FHIT基因失活可能在子宫内膜癌发生中起重要作用;FHIT蛋白表达异常可能与子宫内膜癌的预后相关。