2008～2013年福建省一线和二线抗结核药物敏感试验熟练度测试结果分析

目的评估福建省一线和二线抗结核药物敏感性试验的测试能力。方法采用比例法,对30株质控菌株进行一线抗结核药(INH、RFP、SM和EMB)和二线抗结核药(Km、Am、Cm、Ofx)敏感性测定,结果给国家结核病参比实验室,由国家参比实验室将结果与标准结果比对。结果各轮测试中省参比实验室的平均符合率分别为:INH 96.60%,RFP 97.78%,SM 96.61%,EMB 92.72%;Km 96.57%,Am 98.62%,Cm 96.62%,Ofx 99.30%。第一轮室间质量评估一线药物的平均符合率分别为INH 96.67%,RFP 100.00%,EMB 95.84%,SM 96.67%,二线药物的平均符合率分别为Km 95.84%,Am 97.50%,Cm 86.67%,Ofx 100.00%。第二轮评估中符合率分别为INH 100.00%,RFP 98.34%,EMB 99.17%,SM 95.84%。第二轮中4种二线药物的符合率均为100.00%。结论福建省疾病预防控制中心结核病参比实验室对一线和二线抗结核药药敏检测水平已经达到设定的要求,对INH、RFP、SM和Km、Am、Ofx的药敏检测稳定性高。     

结核分枝杆菌耐多药性基因芯片联合检测

目的利用基因芯片技术检测结核分枝杆菌(MTB)对链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)、利福平(RFP)和异烟肼(INH)等4种抗生素的耐药性。方法应用基因芯片法联合检测300株MTB临床分离株的SM、EMB、RFP和INH耐药性,并与BACTEC960法检测结果进行比较,将结果不相符的菌株进行测序,并比较结果。结果基因芯片法测定300株MTB临床分离株,SM敏感188株、耐药112株,以rpsL43、88位aag突变为agg为主;EMB敏感251株,耐药49株,以embB 306位atg突变为gtg为主;RFP敏感211株,耐药89株,以ropB 516位aag突变为gag为主;INH敏感210株,90株,以KatG 315位gtg突变为gag为主;基因芯片法检测SM、EMB、RFP和INH耐药的敏感性、特异性分别为81.1%,99%;60.0%,100%;72.0%,98%;75.0%,99%;2种测定方法结果不相符菌株中,基因测序结果显示,基因芯片法检测点突变具有高度特异性。结论基因芯片法联合检测MTB对SM、EMB、RFP和INH的耐药性,快速且特异性高,可作为MTB临床检测耐药性的快速筛选方法。     

线性探针耐药技术对两种方法培养的结核分枝杆菌药敏结果差异评价

目的比较BACTEC MGIT 960液体培养法和比例法培养出的结核分枝杆菌(MTB)对利福平(RFP)和异烟肼(INH)药敏结果的符合性,探讨不同方法下药敏结果不一致的原因和线性探针耐药技术对临床诊断的价值。方法从378例临床分离结核分枝杆菌中筛选出29株两种方法药敏结果不一致菌株,再用线性探针耐药检测技术检测MTB对RFP和INH耐药相关的rpoB、katG和inhA基因8个位点的基因突变判断其耐药性,比较三者结果的符合率。结果 BACTEC MGIT 960液体法和比例法药物敏感性试验检测MTB对RFP、INH耐药性符合率分别为89.1%和88.9%;线性探针耐药法和BACTEC MGIT 960液体法对RFP、INH耐药性符合率分别为100.00%和94.44%;线性探针耐药法和比例法和对RFP、INH耐药性符合率分别为87.5%和82.35%;线性探针耐药法分析29株MTB中发现有12株可能存在异质性耐药。结论线性探针耐药法和BACTEC MGIT 960液体法对RFP、INH耐药性符合率明显高于线性探针耐药法和比例法;线性探针耐药检测技术比表型耐药更具精确、快速、敏感性高的特点,对结核分枝杆菌的耐药监测和早期治疗方案的确立具有重要意义。     

云南省结核分枝杆菌地方菌株耐药监测

目的了解云南省结核分枝杆菌地方菌株耐药情况。方法采用比例法对所分离的142株菌株进行异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)及乙胺丁醇(EMB)4种的耐药检测。结果结核分枝杆菌对四种药物的耐药率在10.57%~19.02%之间,初始耐药率为4.06%~13.52%,INH的初始耐药率最高;获得性耐药为21.87%~34.38%,INH、RFP的获得性耐药率最高。结论云南省结核分枝杆菌地方菌株对4种抗结核药物的耐药率由高到低分别为INH、SM、RFP和EMB,其中INH、SM和RFP3种药物的耐药率与全国基本一致(P>0.05),而EMB的耐药性远高于全国水平。     

北仑区229株结核分枝杆菌的耐药性分析

目的分析结核病患者的耐药性和患者特征为临床治疗提供依据。方法回顾分析宁波市北仑区人民医院2017年7月1日-2018年6月30日送检的984例疑似结核病患者的痰液样本,进行MGIT320结核分枝杆菌液体培养,并对结核分枝杆菌分离培养阳性者采用结核液体药敏试验,对4种抗结核药物:链霉素(SM)、异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)进行药物敏感性试验,分析其耐药性,为临床合理选用抗结核药物提供依据。结果全部敏感为183株,占79.9%;单耐药为23株,占10.0%;耐多药率为17株,占7.4%;耐INH为31株,占13.5%;耐RFP为17株,占7.4%;耐SM为38株,占16.6%;耐EMB为15株,占6.5%。结论结核病的耐药率相对较低,INH和SM是结核病一线药物中耐药性较高的药物。     

Gene-Xpert MTB/RiF与熔解曲线法检测结核分枝杆菌利福平耐药分析

目的评价Gene-Xpert MTB/RiF法与熔解曲线法检测结核分枝杆菌利福平耐药的不同应用价值。方法入选235例涂阳结核病患者痰标本分别做传统比例法药敏试验、Gene-Xpert MTB/RiF和熔解曲线法检测结核分枝杆菌的利福平耐药,以传统药敏试验作为金标准进行比较。结果 235例标本中比例法药敏试验利福平耐药12例(5.1%)、Gene-Xpert MTB/RiF利福平耐药例15例(6.4%)、熔解曲线法利福平耐药19例(8.1%),Gene-Xpert MTB/RiF和熔解曲线法敏感度分别为91.7%和100.0%;特异度分别为98.2%和96.7%。结论Gene-Xpert MTB/RiF和熔解曲线法两者均可应用于结核分枝杆菌利福平耐药性的快速检测,Gene-Xpert MTB/RiF法在我国开展结核菌耐多药筛查具更有较强的实用性,有更广的应用前景。     

结核分枝杆菌临床分离株耐药性分析

[目的]了解肺结核分枝杆菌耐药性特点,为临床用药提供参考。[方法]收集2003年9月～2006年5月门诊痰菌阳性标本,获取培养阳性标本136份,采用绝对浓度间接法试验对全部培养阳性标本进行4种抗结核药物(RFP、INH、SM、EMB)的耐药性测定。[结果]总耐药率62.5%(85),初始耐药率47.1%(40),初始耐多药率31.8%(27),获得性耐药率88.2%(45),获得性耐多药率58.8%(30)。耐药顺序为RFP﹥INH﹥SM﹥EMB,耐药率分别为:51.5%,48.5%,26.5%,19.9%。[结论]本地结核菌耐药率远远高于全国平均耐药率(46%),因此应加强抗结核药物的耐药性监测,根据药敏结果选择有效化疗方案,彻底治疗结核病人。     

两种快速方法联合检测结核分枝杆菌耐药性

目的建立联合检测结核分枝杆菌耐药性试验方法,以提高耐药检测方法的灵敏度和特异度。方法对126株已知耐药浓度的结核分枝杆菌耐药株和敏感株分别采用硝酸盐还原试验(Nitrate Reductase Assay,NRA)和反向斑点杂交试验(reverse-dot blot hybridization,RBH),检测其对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)和乙胺丁醇(EMB)的耐药性,并将结果与绝对浓度法结果相比较。结果硝酸盐还原试验和反向斑点杂交试验联合检测与绝对浓度法比较具有高度的一致性(P﹥0.05),异烟肼灵敏度95.5%,特异度100%;利福平灵敏度100%,特异度98.1%;链霉素灵敏度93.2%,特异度92.7%;乙胺丁醇灵敏度94.1%,特异度94.6%。结论硝酸盐还原试验和反向斑点杂交试验联合检测可作为快速结核分枝杆菌耐药性试验方法。     

134例耐多药肺结核耐药情况分析

目的了解2013年-2016年衢州地区耐多药肺结核的耐药情况,为衢州地区耐多药肺结核的治疗与控制提供科学依据。方法对2013年-2016年衢州市各结核定点医院上送的结核菌株采用BACTEC MGIT 320系统进行一线抗结核药物异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)和二线药物卡那霉素(KM)、氧氟沙星(OFX)的耐药性检测。结果 2 328株结核分枝杆菌中分离出耐多药结核菌株134株,耐多药率为5.76%;耐多药结核菌株对SM的耐药率为75.37%,EMB耐药率为18.66%,OFX耐药率为53.73%,KM为11.94%;134株耐多药菌株中,耐药组合以INH+RFP+SM+OFX最为常见,其次是INH+RFP+SM和INH+RFP,初治肺结核的耐药组合排前3位的是INH+RFP+SM+OFX、INH+RFP、INH+RFP+SM,复治肺结核的耐药组合排前3位的是INH+RFP+SM+OFX、INH+RFP+SM、INH+RFP。结论衢州市MDR-TB对一线、二线药物的耐药性相当严重,开展耐多药结核病的免费筛查工作,早期发现耐多药结核病患者,开展耐多药结核病的免费治疗,降低耐多药结核病的产生和流行。     

吉林省初治肺结核患者分离株耐一线抗结核药物结果分析

目的了解吉林省初治肺结核患者分离株耐药情况,为吉林省结核病防控及治疗策略制定提供重要的研究内容。方法收集来自吉林省初治患者痰标本中分离的700株结核分枝杆菌。采用比例法检测对4种一线抗结核药物[异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)及乙胺丁醇(EMB)]的耐药性。结果 700株结核分枝杆菌对一线药物总耐药率为37.7%,对INH、EBM、RFP、SM的任一耐药率分别为16.9%、9.0%、14.6%、25.7%,耐多药率为8.0%,多耐药率为9.0%。结论吉林省初治肺结核患者对一线药物耐药情况较为严重,应加强初治患者耐药性监测,以控制复治及耐多药的增长。     

郑州市菌阳肺结核患者耐药特征及影响因素

目的了解郑州市菌阳肺结核患者耐药情况及耐药影响因素。方法收集2014年3月-2015年6月在郑州市区所有登记的初治与复治痰结核分枝杆菌涂片阳性肺结核患者痰标本,共培养分离出142株结核分枝杆菌,并对结核分枝杆菌进行INH(异烟肼)、SM(硫酸链霉素)、RFP(利福平)、EMB(乙胺丁醇)、Ofx(氧氟沙星)、Cm(硫酸卷曲霉素)、Km(硫酸卡那霉素)、Amk(硫酸阿米卡星)等8种抗结核药物的耐药性检测。结果 142株结核分枝杆菌中,INH、SM、RFP、EMB等4种抗结核药物药物耐药率最高,且初治患者与复治患者耐药率差异无统计学意义(P0.05);耐多药由低到高的组合顺序为:H+R+E(0.70%)、H+R+S(2.11%)、H+R(2.82%);结核分枝杆菌对一种及以上药物耐药总耐药率为31.69%,初治耐药率(23.73%)低于获得性耐药率(37.35%),差异有统计学意义(χ2=4.372,P0.05);耐多药的总耐药率为9.64%。初始耐多药率(3.39%)与获得性耐多药率(7.23%)差异无统计学意义(χ2=3.207,P0.05)。结论郑州市肺结核患者对8种抗结核药物均有一定耐药性,其中INH、SM、RFP、EMB等四种抗结核药物耐药率较高。     

应用Xpert MTB/RIF技术快速筛查耐多药肺结核

目的评估Xpert MTB/RIF技术(简称Xpert法)快速筛查耐多药结核(MDR-TB)的可行性。方法采用Xpert法和结核液体药敏试验分别对197株痰培养检出结核分枝杆菌菌株做利福平耐药检测,比较两者诊断利福平耐药的一致性;收集温州市2 417例肺结核患者一线液体药敏试验结果,分析利福平耐药作为MDR-TB诊断指标的可行性;并依上述两项结果评估用Xpert法快速筛查耐多药结核的可能性。结果以液体药敏法为金标准,197株菌株中Xpert法检测利福平耐药的灵敏度为100.00%,特异度为98.45%,阳性预测值为97.14%,阴性预测值为100.00%,与液体药敏法检测结果具有较高的一致性(Kappa值=0.978)。对2 417例结核患者液体药敏结果进行分析,与同时对异烟肼和利福平耐药作为MDR-TB的诊断标准比较,利福平耐药作为MTB-TB筛查指标的灵敏度为100.00%,特异度为99.13%,阳性预测值为92.52%,阴性预测值为100.00%,两者Kappa值为0.957。结论 Xpert法可快速、准确检测利福平耐药性,至少在温州市可考虑将该法用于MDR-TB的快速筛查。     

Xpert MTB/RIF技术在结核病诊断及耐药检测中的应用

目的评估Xpert MTB/RIF技术在结核病诊断及耐药检测中的应用价值。方法对369例门诊初诊者的痰液进行荧光染色镜检、固体培养、传统比例法药敏实验和Xpert MTB/RIF检测,分析Xpert MTB/RIF技术对痰标本中结核分枝杆菌(MTB)及利福平(RIF)耐药性检测的灵敏度、特异性及一致性。结果以固体培养为金标准,Xpert MTB/RIF检测MTB的灵敏度为99.03%,特异度为83.76%,符合率为88.43%。以传统比例法药敏为金标准,Xpert MTB/RIF检测RIF耐药情况的灵敏度为100.00%,特异度为98.97%,一致性为99.01%。结论 Xpert MTB/RIF技术操作简便快速、结果判读简便,检测MTB和RIF耐药性均具有较高的灵敏度和特异度,适合在基层结核病诊疗机构推广。     

绵阳市结核分支杆菌耐药性分析

目的了解绵阳市结核分支杆菌耐药情况,为耐药结核病的预防控制提供依据。方法采用比例法对79株结核分支杆菌进行一线抗结核药物:异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)耐药性检测。结果共检测出耐药菌17株,总耐药率为21.52%,多耐药率为12.66%,耐多药率为6.33%。初治耐药率为18.64%,获得性耐药率为30.00%。单耐药顺序为:INH>SM>RFP>EMB,耐药率分别为15.19%,12.66%,7.59%和7.14%。耐药在性别和年龄组方面无统计学意义。结论绵阳市结核分支杆菌耐药率低于全国平均水平,应进一步加强耐药菌监测以指导临床合理用药。     

单链探针反向杂交试验快速检测结核分支杆菌5种耐药基因

目的:建立可同时检测结核分支杆菌rpoB、katG、rpsL、rrs、embB基因突变的单链探针反向杂交试验技术(PCR-LiPA),评价该技术检测结核分支杆菌利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇耐药性的应用价值。方法:采集临床标本,按照实验规程培养、鉴定结核分支杆菌,并对分离到的结核分支杆菌进行药敏试验;PCR扩增结核分支杆菌rpoB、katG、rpsL、rrs、embB耐药基因,单链探针反向杂交试验技术检测耐药基因。将PCR-LiPA结果与DNA测序比较验证方法的准确性,将PCR-LiPA结果与药敏结果比较,了解结核分支杆菌耐药性表型与耐药基因突变的相关性。结果:50株结核分支杆菌传统药物敏感性试验结果显示,12株耐INH,7株耐RFP,15株耐SM,2株耐EMB。PCR-LiPA方法分析结果:耐RFP菌株中4株rpoB基因突变;耐INH菌株中5株KatG基因突变;耐SM菌株中7株、SM敏感株1株rpsl基因突变;耐EMB菌株1株、EMB敏感株1株embB基因突变。与DNA测序结果的符合率为100%。结论:用PCR-LiPA可简便、快速、灵敏、特异地检测出一部分结核分支杆菌耐药株的rpoB、katG、rpsL、rrs、embB基因突变,可用于临床结核分支杆菌耐药性的辅助诊断手段。     

应用噬菌体法检测结核分枝杆菌药敏的效果评价

世界卫生组织2008年发布的全球耐多药结核病流行状况报告指出,世界每年新增的约9000万例结核病中,近5%是耐多药结核病[1]。我们应用噬菌体生物扩增法(PhaB)检测结核分枝杆菌对利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇等4种一线抗结核药物的耐药性,并与世界卫生组织推荐的比例法药敏结果进行比较,以评价PhaB法用于药敏试验的效果,现报道如下。材料与方法1材料噬菌体检测试剂由上海市肺科医院结核病重点实验室提供,为其自制试剂,具体见文献[2]。比例法药敏培养基为本室参考《结核病诊断实验室检验规程》自制,所需利福平(RFP)、异烟肼(INH)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)药粉由结核病国家参比实验室提供,试验用药物浓度分别为RFP:40mg/L;INH:0.2mg/L;SM:4mg/L;EMB:2mg/L。67株结核分枝杆菌临床分离株均为浙江省结核病参比实验室分枝杆菌菌株库保存菌株。2方法2.1噬菌体法在对照管和试验管中分别加入1:5000稀释的待检菌液0.5mL,分别在试验管中加入0.5mL的利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇,对照管加0.5mL液体培养基,混匀37℃作用48h;各管加0.1mL噬菌体,37℃温育1h...     

深圳市结核分枝杆菌耐药性与基因突变分析

[目的]了解我市结核分枝杆菌耐药性与基因突变情况,分析耐药表型与基因突变的相关性. [方法]从临床标本中分离培养、鉴定结核分支杆菌;应用药敏试验、单链探针反向杂交试验技术(LiPA)和基因测序分析结核分支杆菌耐药性与基因突变情况. [结果]50株结核分支杆菌中,12株耐INH,7株耐RFP,15株耐SM,2株耐EMB.LiPA检测耐RFP阳菌株,4株rpoB基因531位TCG→TTG突变;耐INH菌株中5株KatG基因315位AGC→ACC突变;酎SM菌株中6株、SM敏感株1株rpsl基因43位AAG→AGG突变,1株耐SM菌株rpsl基因88位AAG→AGG突变;rrs基因未检测到突变;1株耐EMB菌株与1株EMB敏感株的embB基因306位发生ATG→GTG突变. [结论]我市结核分枝杆菌的耐药性增加趋势显著,加强监测与综合干预非常必要.     

Xpert MTB/RIF检测技术在骨关节结核诊断中的应用价值

目的采用核酸扩增检测法(Xpert MTB/RIF)检测骨关节结核患者脓液标本,评价该方法在骨关节结核病诊断中的应用价值。方法收集2014年8月—2015年3月杭州市红十字会医院住院治疗的骨关节结核患者67例及非结核性骨关节患者30例的脓液标本进行Xpert MTB/RIF检测、抗酸染色法和结核分枝杆菌液体培养(TB培养)。以临床(含病理)诊断为金标准,根据3种检测方法的灵敏度和特异度,绘制受试者工作特征曲线(ROC)进行比较分析。结果 67例骨关节结核患者脓液标本,Xpert MTB/RIF、抗酸染色、TB培养3种方法的灵敏度分别为82.09%、8.96%和23.88%,特异度分别为96.67%、100.00%和100.00%;ROC曲线下的面积分别为0.89、0.54和0.62(均P0.01)。结论 Xpert MTB/RIF比抗酸染色和TB培养的特异度和灵敏度高,且检测耗时短。     

2011年南阳市结核病一线抗结核药物的耐药监测结果分析

目的:了解2011年南阳市结核分枝杆菌对四种一线抗结核药物的耐药情况,为南阳市结核病的防治提供科学依据。方法:依据耐药结核病规划管理指南(WHO),将2011年南阳市结核病防治所痰培养阳性的肺结核患者做为研究对象,对分离的结核分枝杆菌进行INH、RFP、SM、EMB四种一线抗结核药物敏感性测试。结果:共测定322株结核分枝杆菌的耐药性,其中196株有不同类型的耐药,对4种抗结核药物的耐药率由高到低依次为:RFP 41.3%,SM 36.6%I,NH 34.8%,EMB 23.3%,MDR-TB率为27.6%。结论:南阳市结核分枝杆菌耐药程度比较严重,必须采取有效措施控制耐药和耐多药结核病。     

1699例结核分枝杆菌对利福平和异烟肼药物耐药性分析

目的分析结核分枝杆菌对利福平(RFP)和异烟肼(INH)的耐药情况,为结核病的防治、管理、制定控制策略提供科学的依据。方法采用WHO推荐的结核病耐药性监测的抗结核药物敏感试验比例法,对1 699例临床分离株进行耐药性测定。结果 1 699例结核分枝杆菌分离株中,耐RFP菌株112例,耐INH 165例,RFP的耐药率为6.6%,INH的耐药率为9.7%。在112例耐RFP中,INH同时耐药者83例,占RFP耐药株总数的74.1%;在165例耐INH中,RFP同时耐药者83例,占INH耐药株总数的50.3%。结论耐多药肺结核的诊断还是遵循同时进行抗结核药物RFP和INH药敏试验稳妥。