基于TLR4/NF-κB信号通路探讨银杏二萜内酯对糖尿病大鼠视网膜病变的影响

[目的]研究银杏二萜内酯（GDL）对糖尿病大鼠视网膜病变的影响,并基于Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路探索其可能的作用机制。[方法]采用高糖高脂饮食加腹腔注射30 mg/kg链脲佐菌素（STZ）的方法构建糖尿病视网膜病变大鼠模型,设模型组、GDL(2.3 mg/kg)组、TAK242(TLR4抑制剂,3 mg/kg)组、GDL+TAK242(2.3 mg/kg+3 mg/kg)组;另设正常对照组。各组分别每日1次腹腔注射给药治疗14 d后,测定空腹血糖（FBG）水平、视网膜厚度和视网膜血管通透性,通过苏木精-伊红（HE）染色、TUNEL染色观察视网膜病理改变和细胞凋亡,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测视网膜炎症因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]含量,Western blot法检测视网膜TLR4、NF-κB、p-NF-κB、NF-κB抑制因子（IκBα）、p-IκBα、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达。[结果]与模型组相比,GD...     

天麻素对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠TLR4/NF-κB信号通路影响的研究

目的:探讨天麻素对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠的脑保护作用及其作用机制。方法:72只大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、天麻素组、Toll样受体4 (TLR4)激活剂脂多糖(LPS)组、天麻素+LPS组,每组12只。采用腹腔注射毛果芸香碱建立癫痫大鼠模型。双抗体夹心酶联免疫法检测大鼠血清和海马组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素-1β(IL-1β)水平,TUNEL染色法检测海马组织细胞凋亡数,Western blot分别检测海马组织活化半胱氨酸基天冬氨酸酶-3 (CleavedCaspase-3)、B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TLR4、兔抗大鼠p-核因子-κB亚基p65亲和肽(p-NF-κBp65)和磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκB-α)表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠脑电频率显著降低(P<0.05),波幅显著升高(P<0.05);血清和海马组织TNF-α和IL-1β水平,海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4和p-NF-κBp65蛋白明显升高(P<0.05);IL-10水平,Bcl-2和p-IκB-α蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,阳性药组、天麻素组和天麻素+LPS大鼠脑电频率显著升高(P<0.05),波幅显著降低(P<0.05),血清和海马组织TNF-α和IL-1β水平,海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4和p-NF-κBp65蛋白明显降低(P<0.05),IL-10水平,Bcl-2和p-IκB-α蛋白表达显著升高(P<0.05);LPS组大鼠脑电频率、血清及海马组织IL-10水平、Bcl-2蛋白显著降低(P<0.05),血清与海马组织TNF-α与IL-1β水平、海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4、p-NF-κBp65和p-IκB-α蛋白表达明显升高(P<0.05)。与LPS组比较,天麻素+LPS组大鼠脑电频率显著升高(P<0.05),波幅显著降低(P<0.05);血清及海马组织TNF-α与IL-1β水平、海马组织细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3、Bax、TLR4、p-NF-κBp65蛋白表达均明显降低(P<0.05),IL-10水平、Bcl-2及p-IκB-α蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:天麻素可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路对毛果芸香碱诱发的癫痫大鼠发挥脑保护作用。     

滇黄精对急性肺损伤模型大鼠的炎症因子及体内氧自由基的影响

[目的]探讨滇黄精对急性肺损伤模型大鼠的炎性因子及体内氧自由基的影响。[方法] 50只雄性SD大鼠随机分为5组,包括正常对照组(NCG)、模型组(NMG)和滇黄精低(LLG)、中(MLG)、高剂量(HLG)实验组(5、10、15 mg/kg),每组10只。气管内滴灌脂多糖(LPS,5 mg/kg)方法建立急性肺损伤(ALI)模型大鼠,造模成功4 h后给模型大鼠腹腔注射不同浓度的滇黄精水提液,24 h后采集动脉血,检测大鼠的动脉血氧分压(PaO_2)、肺泡灌洗液中炎性细胞的数量、丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)浓度以及谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)的含量。取肺部组织检测肺生理相关指标肺系数(LI)、肺含水率[(W-D)/W]以及左肺湿/干质量比(W/D),以期探讨滇黄精对急性肺损伤模型大鼠的炎性因子和氧自由基影响。[结果]与空白对照相比,模型组大鼠的LI、W/D、(W-D)/W指数低,而注射了滇黄精的实验组比模型组高(P0.01),PaO_2结果相反,这种趋势有剂量依赖性;模型组大鼠的各种炎性细胞数量比空白对照组高(P0.01),而各实验组大鼠炎性细胞数量低于模型组(P0.05),高剂量组数量明显低于中剂量组(P0.05)。炎性因子检测结果表明,模型鼠的IL-1β、IL-6、TGF-α水平高于空白对照组,IL-10比空白组低(P0.05),而实验组大鼠的IL-1β、IL-6、TGF-α水平比模型组高(P0.05),IL-10水平低于模型组,高剂量组与中剂量组相比,差异有统计学意义(P0.01)。模型组大鼠肺泡灌洗液中MDA和MPO水平明显高于空白对照组,SOD和GSH-Px活性低(P0.05),实验组大鼠MDA、MPO水平低于模型组,SOD、GSH-Px活性明显高于模型组(P0.05),高剂量组和中剂量组相比,差异具有统计学意义(P0.05)。[结论]中药滇黄精可以有效缓解LPS诱导急性肺损伤性大鼠的肺部损伤症状,改善炎症反应水平,减轻ALI大鼠肺组织的氧自由基损伤,而且这种效应有剂量依赖性。     

大黄素对类风湿关节炎模型大鼠的治疗作用及抗炎机制研究

目的：观察大黄素对类风湿关节炎模型大鼠的治疗作用,并探索其抗炎机制。方法：选取60只3周龄SD大鼠,采用随机数字表法分为空白对照组、模型组、大黄素低剂量组和大黄素高剂量组。除空白对照组外其余各组采用不完全氟氏佐剂及牛Ⅱ胶原乳化剂制成类风湿关节炎大鼠模型。大黄素低剂量组和高剂量组分别予40 mg/kg和80 mg/kg大黄素灌胃,空白对照组和模型组予等量生理盐水灌胃,每日1次,持续14 d。造模与给药期间每周检测各组大鼠足肿胀度,计算足肿胀率;采用ELISA试剂盒检测治疗后各组大鼠血清炎症因子白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量;比较各组大鼠滑膜病理学评分;采用蛋白质印迹检测各组大鼠关节组织中高迁移族转移蛋白1（HMGB1）及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）及Bcl-2关联X蛋白（Bax）的表达。结果：造模后各造模组大鼠足肿胀率明显高于空白对照组（P<0.01）;经大黄素低剂量、中剂量干预后,足肿胀率明显低于同期模型组（P<0.01）,高剂量治疗效果明显优于低剂量（P<0.01）。与空白对照组比较,模型组大鼠血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量,滑膜细胞增生评分、炎症评分、血管新生评分及总病理评分,HMGB1、Caspase-3及Bax蛋白表达均显著升高（P<0.01）,Bcl-2蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,大黄素低、高剂量组大鼠上述指标均有明显改善（P<0.01）,高剂量组改善程度明显优于低剂量组（P<0.01）。结论：大黄素可以通过降低类风湿关节炎模型大鼠体内炎症反应同时抑制关节组织细胞的凋亡,从而缓解类风湿关节炎症状。     

黄芪总黄酮对脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激、炎症、凋亡的影响

目的探讨黄芪总黄酮对脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激、炎症、凋亡的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平(15 mg/kg)组及黄芪总黄酮低、高剂量组(30、60 mg/kg),灌胃给药15 d后线栓法制备脑缺血模型(缺血2 h后再灌注24 h)。然后,计算神经功能学评分、脑组织含水量,ELISA法检测MDA水平和GSH-Px、SOD活性,放射免疫法检测IL-1β、TNF-α水平,实时荧光定量PCR法检测caspase-3、Bcl-2、Bax mRNA表达,Western blot法检测p-PI3K、p-AKT蛋白表达。结果与模型组比较,黄芪总黄酮组神经行为学评分,脑组织含水量,MDA、IL-1β、TNF-α水平,caspase-3、Bax mRNA表达显著下降(P0.05),GSH-Px、SOD活性,Bcl-2 mRNA表达,p-PI3K、p-AKT蛋白表达显著升高(P0.05)。结论黄芪总黄酮对脑缺血再灌注损伤大鼠具有明显的保护作用,其机制可能与抑制氧化应激水平、减少炎症反应、抗凋亡作用有关。     

甘草酸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及Bcl-2和Bax表达的影响

目的:观察甘草酸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)的保护作用及B细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达的影响,探讨其可能机制。方法:50只SD大鼠随机分为假手术组,心肌缺血再灌注损伤组(模型组),甘草酸预处理低、中、高剂量组。采用结扎左冠状动脉前降支建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。假手术组穿线后不结扎;模型组于缺血前30 min腹腔注射2 mg·kg-1生理盐水;甘草酸低、中、高剂量组于缺血前30 min腹腔注射2,4,10 mg·kg-1甘草酸。光镜下观察心肌组织的病理组织学变化;检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性,乳酸脱氢酶(LDH)活性,心肌肌钙蛋白-T(c Tn T)水平,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,白细胞介素-6(IL-6)水平,髓过氧化物酶(MPO)活性,超氧化物歧化酶(SOD)活性,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)水平;末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡指数;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌Bcl-2和Bax的表达。结果:与模型组比较,甘草酸预处理低剂量组、中剂量组、高剂量组明显减轻心肌缺血再灌注损伤;与模型组比较,甘草酸预处理低剂量组、中剂量组、高剂量组显著降低CKMB,LDH,c Tn T,TNF-α,IL-6,MPO,MDA水平,显著升高SOD,GSH-Px活性(P0.05,P0.01);与模型组比较,甘草酸预处理低剂量组,中剂量组,高剂量组显著降低心肌细胞凋亡指数(P0.01);与模型组比较,甘草酸预处理低、中、高剂量组显著上调心肌Bcl-2表达,下调Bax表达及上调Bcl-2/Bax(P0.05,P0.01)。结论:甘草酸预对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,且能上调心肌Bcl-2表达和下调心肌Bax表达,从而抑制细胞心肌凋亡。     

单味黄芩煎剂对内毒素“二次打击”脓毒症大鼠体内Fn及肺组织EPCR、AMPK表达的影响

目的 观察单味黄芩煎剂对内毒素“二次打击”脓毒症大鼠体内纤维结合蛋白（Fn）及肺组织血管内皮细胞蛋白C受体（EPCR）、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）表达的影响。方法 28只健康SPF级成年雄性SD大鼠，随机分为假手术组、模型组、黄芩正常剂量组、黄芩高剂量组，每组7只，予腹腔注射内毒素（LPS）(1 mg/kg),16 h后气管内注入LPS(5 mg/kg)，建立大鼠脓毒症急性肺损伤模型。黄芩正常剂量、高剂量组建模术前6 h分别经口灌胃2 mL不同剂量的黄芩煎剂，其中正常剂量组为1 g/kg，高剂量组为4 g/kg；假手术组和模型组均注射等体积的生理盐水，每天给药1次，连续3 d。结束实验后留取肺组织、血标本，HE染色观察肺组织病理学变化，测定肺组织湿/干重比，酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、Fn，血气分析检测氧气分压（PaO2）并计算氧合指数，蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测肺组织EPCR、AMPK。结果 模型组较假手术组肺组织出现炎性病理改变，血清Fn明显下降，TNF-α、IL-6显著上升，湿干重比升高明显，氧...     

芹菜素预处理对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究

目的探讨芹菜素对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及可能作用机制。方法将180只实验用SD大鼠按随机数字表法分为6组各30只,假手术组和模型组给予0.9%氯化钠溶液腹腔注射,芹菜素低、中、高剂量预处理组分别给予10 mg/(kg·d)、20 mg/(kg·d)、40 mg/(kg·d)芹菜素腹腔注射,地塞米松预处理组给予5 mg/(kg·d)地塞米松腹腔注射,均1次/d,连续注射7 d后,采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症大鼠模型(假手术组不结扎和穿孔)。造模手术24 h后,检测肺功能(呼吸频率、肺泡通透指数、动脉血氧分压),计算肺组织湿/干重比,HE染色法行肺组织病理学检查并行损伤评分,检测肺组织中内毒素(LPS)、炎症因子指标[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)]、氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)]水平,Western bolt法检测肺组织中磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)表达水平。结果模型组大鼠呼吸频率、肺泡通透指数、肺组织湿/干重比、肺组织病理损伤评分和LPS、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平及p-NF-κB蛋白表达量均明显高于假手术组(P均0.05),动脉血氧分压及肺组织中SOD、CAT、T-AOC活性均明显低于假手术组(P均0.05);芹菜素中、高剂量预处理组和地塞米松预处理组呼吸频率、肺泡通透指数、肺组织湿/干重比、肺组织病理损伤评分和LPS、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平及p-NF-κB蛋白表达量均明显低于模型组(P均0.05),动脉血氧分压及肺组织中SOD、CAT、T-AOC活性均明显高于模型组(P均0.05);芹菜素高剂量预处理组上述各指标改善情况均优于地塞米松预处理组(P均0.05)。结论芹菜素预处理可抑制脓毒症大鼠急性肺损伤,保护肺功能,可能与其抑制炎症反应、氧化应激及NF-κB信号通路有关。     

二草清肝汤含药血清对人源HL-7702肝细胞凋亡的影响及其机制研究

目的：探究二草清肝汤（EQD）含药血清对脂多糖（LPS）诱导的人源HL-7702肝细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法：制备急性肝衰竭小鼠模型，分组后分别对各组小鼠以相应剂量EQD和生理盐水进行灌胃，末次注射LPS 24h后，提取含药血清备用；采用LPS诱导人源HL-7702肝细胞建立细胞凋亡模型，随机分为空白对照组、LPS组、LPS+EQD低剂量组、LPS+EQD中剂量组、LPS+EQD高剂量组，分别采用相应剂量的含药血清100μL预处理2h后，然后再加入10μg/mL的10μL LPS处理24h，空白对照组予相同剂量的生理盐水。采用流式细胞术检测细胞凋亡率，免疫荧光法观察GSK3β核易位情况，实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测兔抗人单克隆抗体（Bax）、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)mRNA的表达，Western-blot法检测HL-7702细胞内AKT、p-AKTS、GSK3β、p-GSK3β的表达。结果：与空白对照组比较，LPS处理后，HL-7702凋亡率显著上升（P<0.05）；经低、中、高EQD处理后，...     

山楂酸通过调节HMGB1/TLR4信号通路抑制炎症反应和细胞凋亡保护急性肺损伤的研究

目的 研究山楂酸对急性肺损伤的影响及对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)信号通路的调控作用。方法 78只SD大鼠饲养1周后，随机选取15只作为正常组，其余大鼠腹腔注射5 mg/kg脂多糖制备急性肺损伤模型。将造模成功大鼠随机分为肺损伤组、山楂酸低剂量组、山楂酸高剂量组、地塞米松组，每组15只。山楂酸低剂量组和山楂酸高剂量组大鼠分别腹腔注射25 mg/kg和100 mg/kg山楂酸溶液，地塞米松组大鼠腹腔注射2 mg/kg地塞米松注射液，正常组和肺损伤组大鼠均腹腔注射等量生理盐水，均1次/d,连续注射8周。称重法计算肺组织湿/干重比值，HE染色观察肺组织病理形态，ELISA法检测支气管肺泡灌洗液中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量，TUNEL染色观察肺组织细胞凋亡情况，Western blot法检测肺组织中HMGB1、TLR4蛋白表达情况。结果 肺损伤组大鼠肺组织出现明显病理损伤，肺组织湿/干重比值、肺组织细胞凋亡率和支气管肺泡灌洗液中IL-6、IL-8、TNF-α含量及肺组织中HMGB1、TLR4蛋白相...     

茵栀黄注射液对急性肝衰竭大鼠细胞凋亡的影响

目的：观察茵栀黄注射液对急性肝衰竭大鼠细胞凋亡的影响。方法：30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和茵栀黄组。茵栀黄组大鼠予0.2g/（kg·d）茵栀黄注射液腹腔注射,连续给药7d,末次给药后1h,除正常组外其余两组给予 D-氨基半乳糖（D-Ga1N）和内毒素脂多糖（LPS）腹腔注射制备大鼠急性肝衰竭模型。造模后6h,取大鼠肝组织,采用原位末端标记（TUNEL）法检测肝细胞凋亡情况,并以免疫组化法（SP法）检测各组大鼠肝组织Bcl-2和Bax蛋白表达情况。结果：与正常组比较,模型组肝组织中Bcl-2蛋白表达明显下降,肝细胞凋亡指数和Bax蛋白表达均明显升高（P均<0.01）;与模型组比较,茵栀黄组肝细胞凋亡指数和Bax蛋白表达均明显下调,而Bcl-2蛋白表达明显上调（P均<0.05）。结论：茵栀黄注射液对急性肝衰竭大鼠肝细胞凋亡有保护作用,其作用机制可能与上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax蛋白表达有关。     

柴胡皂苷b_2对LPS/GalN诱导的小鼠急性肝损伤炎症和能量代谢的影响

该研究旨在探讨柴胡皂苷b2(SS-b2)对注射脂多糖/氨基半乳糖(LPS/Gal N)诱导的小鼠急性肝损伤炎症因子的调控和对能量代谢的影响。将小鼠随机分为空白对照组(等量生理盐水),模型组(100μg·kg~(-1)LPS+400 mg·kg~(-1)Gal N),SS-b2低、中、高剂量组(5,10,20 mg·kg~(-1)·d-1)和阳性对照组(地塞米松,10 mg·kg~(-1))。除空白对照组外,其余各组每天腹腔注射LPS/Gal N建立急性肝损伤小鼠模型。计算脏器指数;血清生化指标检测ALT和AST的含量和肝脏ATP酶(Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶)活性的变化;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中TNF-α,IL-1β,IL-6的含量;微量酶标法测定肝脏LDH的含量; HE染色观察肝组织病理学变化;免疫组化法测定LDH-A的蛋白表达; Western blot法检测肝脏Sirt-6和NF-κB蛋白表达情况。结果显示,与模型组相比,SS-b2高剂量组小鼠脏器指数均有明显变化(P0. 05); SS-b2中、高剂量组能明显降低肝损伤小鼠血清中ALT,AST,TNF-α,IL-1β,IL-6的水平及LDH活性(P0. 01),随着SS-b2剂量的增加,小鼠肝脏病变范围减少,损伤程度减轻,各剂量组能够显著增强小鼠肝脏Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性(P0. 01); SS-b2中、高剂量组能够显著下调肝组织NF-κB的蛋白表达(P0. 01),同时,各剂量组能够显著提高急性肝损伤小鼠肝脏中Sirt-6蛋白表达量(P0. 01)。综上,SS-b2对LPS/Gal N诱导的小鼠急性肝损伤具有显著的保护作用,该作用可能与其下调NF-κB蛋白表达以及上调Sirt-6蛋白表达改善炎症损伤以及能量代谢有关。     

角黄素对脂多糖诱导急性肺损伤小鼠模型免疫功能的影响

目的:研究角黄素对脂多糖(LPS)所致小鼠急性肺损伤(ALI)免疫功能的保护作用。方法:将雄性昆明种小鼠60只,随机分为正常对照组、ALI模型组、地塞米松阳性对照组(15mg/kg)以及角黄素低、中、高剂量组(10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg)共6组。不同剂量角黄素给大鼠连续灌胃30d后,腹腔注射脂多糖6.0mg/kg建立ALI模型。在注射后6h,收集腹主动脉血并进行左侧支气管肺泡原位灌洗以收集灌洗液,测定血中淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素8(IL-8)及丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;测定各组的肺湿重/干重比、肺组织中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)含量及肺组织匀浆TNF-α、白细胞介素10(IL-10)含量。结果:角黄素各剂量组均能降低因LPS诱发的血TNF-α、IL-8、MPO、MDA含量与肺组织湿重/干重比的升高,同时抑制肺组织IL-10含量、血SOD与GSH-Px活性的降低,改善血中淋巴细胞亚群分布。结论:角黄素对LPS所致急性肺损伤小鼠免疫功能具有预防性保护作用。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨积雪草酸对急性肺损伤大鼠氧化应激和NLRP3炎症小体的影响

目的 观察积雪草酸对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤大鼠氧化应激和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体相关蛋白的影响，并探讨其相关分子机制。方法 将60只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、积雪草酸低剂量组、积雪草酸高剂量组和地塞米松组，每组12只。除对照组外，其余组大鼠均采用LPS气管滴注法建立急性肺损伤模型。模型建立成功后第2天，积雪草酸低、高剂量组大鼠分别腹腔注射25 mg/kg和75 mg/kg积雪草酸溶液，地塞米松组大鼠腹腔注射2 mg/kg地塞米松注射液，对照组和模型组大鼠腹腔注射等量生理盐水，均1次/d,连续注射8周。HE染色观察大鼠肺组织病理形态，称重法计算肺组织湿/干重比值，TUNEL染色检测大鼠肺组织细胞凋亡情况，试剂盒检测大鼠支气管肺泡灌洗液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量，Western blot法检测肺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)...     

针刺对老年大鼠术后认知功能障碍的影响及机制研究

目的:观察针刺对老年大鼠术后认知功能障碍的影响及血清TNF-α、IL-1β和IL-6和海马神经元凋亡的情况。方法:健康SD老年大鼠50只,按1∶3∶3∶3比例随机分配到A组(空白对照组),B组(单纯麻醉组),C组(麻醉手术组),D组(麻醉手术加针刺干预组)。A组不予任何干预措施;B组予腹腔内注射芬太尼20 ug/kg+氟哌利多500 ug/kg;C组予腹腔内注射芬太尼20 ug/kg+氟哌利多500 ug/kg后。D组于麻醉前20 min,取百会、印堂和双侧内关穴行针刺,接G6805-2型电针仪连续刺激,20 min后进行手术操作,电针刺激持续至手术操作完毕。采用Y迷宫实验观察大鼠学习记忆的变化,对各组大鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6进行测试,TUNEL法观察海马神经元凋亡,免疫组化检测海马中神经细胞的凋亡及Bcl-2、Bax的表达。结果:D组老年大鼠Y迷宫逃避时间和逃避反应达标率均优于B、C组(均P0.05),而其TNF-α、IL-1β、IL-6水平均低于其它各组(均P0.05),Bcl-2/Bax比率高于其余组(均P0.05)。结论:针刺干预会减少老年大鼠早期炎症介质的合成,抑制海马组织神经元细胞凋亡,减轻大鼠术后认知功能障碍的发生。     

泻肺汤通过Bcl-2/Bax表达调控肺纤维化大鼠自由基代谢的实验研究

目的:探讨敦煌医方泻肺汤治疗特发性肺纤维化的作用机制。方法:采用Szapiel法复制大鼠肺纤维化模型以泻肺汤进行干预;肺功能测定仪检测吸气时间(inspiratory time,TI)、呼气时间(expiratory time,TE)、潮气量(tidal volume,TV)、肺泡通气量(alveolar ventilation,AV),ELISA法检测转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)和肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)含量,比色分析法测定一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase,NOS)活性和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,RT-PCR法和Western-blot法测定bcl-2/bax基因表达及Bcl-2/Bax蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠TE、TV和AV等指标下降, bcl-2基因和蛋白表达均降低,TNF-α含量、TGF-β_1含量、NOS活性、NO含量、bax基因和蛋白表达均升高。与模型组比较,泻肺汤各干预组大鼠TV和AV升高,高剂量组大鼠TE显著升高;泻肺汤中、高剂量组bcl-2基因和蛋白表达均升高,TNF-α含量、TGF-β_1含量、NOS活性、NO含量、bax基因和蛋白表达均降低。结论:泻肺汤通过下调Bax和上调Bcl-2表达调控氧化应激反应,从而发挥抗肺纤维化作用。     

复方佛耳草合剂对慢性阻塞性肺疾病大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨复方佛耳草合剂对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响。方法 大鼠随机分为空白组(10只)和造模组(50只),造模组连续12周采用香烟烟雾联合气管注射LPS建立COPD大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、地塞米松组(0.5 mg/kg)和复方佛耳草合剂低、中、高剂量组(6.8、13.6、27.2 g/kg),每组10只。给药干预24周后,采用动物肺功能仪检测大鼠肺功能,HE染色法观察肺组织病理变化,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平及SOD活性,RT-qPCR法检测肺组织TLR4、MyD88、NF-κB及caspase-3 mRNA表达,Western blot法检测肺组织TLR4、MyD88、NF-κB及TNF-α蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠存在肺通气功能障碍,肺组织和支气管受损明显,SOD活性降低(P<0.01),血清TNF-α、IL-1β、IL-6及MDA水平升高(P<0.01),肺组织TLR4、MyD88、NF-κB、caspase-3 mRNA表达和TLR4、MyD8...     

基于PI3K/Akt/NF-κB通路探讨复方甘草酸苷对病毒性肺炎小鼠肺损伤的保护作用

目的 探讨复方甘草酸苷注射液对POLY(I:C)诱导的小鼠肺损伤的作用及机制。方法 通过向气管内缓慢滴注POLY(I:C)建立病毒性肺炎小鼠模型，建模成功后随机分为模型组、阳性药组(地塞米松5 mg/kg)和复方甘草酸苷低、高剂量(26、52 mg/kg)组，每组10只；另取10只正常小鼠为正常组，给药组腹腔注射相应剂量药物，正常组和模型组腹腔注射等量生理盐水。给药24 h后，采集各组小鼠BALF,检测其中总细胞数、总蛋白水平，ELISA法检测白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平；收集肺组织，计算肺湿/干重比，HE染色观察肺组织病理变化，采用试剂盒检测肺组织匀浆液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)水平，Western blot法检测PI3K/Akt/NF-κB通路相关蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组小鼠肺部损伤严重，肺湿/干重比值升高(P<0.01),BALF中总细胞数、蛋白水平和炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平升高(P<0.01),肺组织SOD、GSH-Px...     

黄芪甲苷对大鼠肺缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

目的:研究黄芪甲苷(Astragalosides)对大鼠肺缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响。方法:100只实验用大鼠随机分为假手术组、模型组和黄芪甲苷低、中、高剂量(20、40、80mg/kg)组,每组20只。各组大鼠分别于术前30min腹腔注射给药或生理盐水,除假手术组以外,其余各组大鼠采用夹闭左肺门45min后松夹的方法制备肺缺血再灌注损伤模型,假手术组行手术通路,不夹闭。再灌注2h后,测定各组大鼠肺组织湿/干重比(W/D),HE染色法观察肺组织病理学改变,末端标记法(TUNEL)观察肺细胞凋亡状况并计算凋亡指数(Apoptosis Index,AI),逆转录-PCR(RT-PCR)法检测肺组织中Bcl-2 m RNA、Bax m RNA表达并计算Bcl-2/Bax比值,测定肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量,采用Western blotting法测定肺组织中核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达并进行半定量分析。结果:与模型组比较,黄芪甲苷中、高剂量组大鼠肺组织W/D、肺细胞凋亡指数显著降低,肺组织形态结构变化和肺细胞病变显著减轻,肺组织中Bcl-2 m RNA表达显著升高,Bax m RNA表达显著降低,Bcl-2/Bax比值显著升高,肺组织中SOD、CAT活性显著升高,MDA含量显著降低,NF-k B蛋白表达量显著降低,上述差异均具有统计学意义(P0.05,P0.01),其中以黄芪甲苷高剂量效果最为显著。结论 :黄芪甲苷对大鼠肺缺血再灌注损伤后肺细胞凋亡有一定的抑制作用,其作用机制可能与黄芪甲苷能够上调抑凋亡基因Bcl-2表达,下调促凋亡基因Bax表达,提高Bcl-2/Bax表达比值以及提高抗氧化酶活性,降低氧化应激反应,上调NF-k B蛋白表达有关。     

上中下通用痛风方对痛风性关节炎大鼠NLRP3/Caspase－1/IL－1β信号通路的影响

目的：探索上中下通用痛风方对尿酸钠诱导的痛风性关节炎（GA）大鼠NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路的影响。方法：56只SD雄性大鼠,随机分为空白组、模型组、秋水仙碱组、痛风舒组和上中下通用痛风方低、中、高剂量组。空白组和模型组给予生理盐水灌胃,秋水仙碱组、痛风舒组分别给予秋水仙碱混悬液（0.5 mg/kg）及痛风舒混悬液（375 mg/kg）灌胃,上中下通用痛风方低、中、高剂量组给予上中下通用痛风方5、10、15 g/kg灌胃。末次给药1 h后,空白组在大鼠左侧关节腔内注射0.2 mL生理盐水,其余6组大鼠均在腹腔注射3%氧嗪酸钾盐混悬溶液,在左膝关节腔内注射0.2 mL尿酸钠混悬液制备GA大鼠模型。采用ELISA法检测大鼠血清中IL-1β、TNF-α的含量;Western blot检测滑膜组织中NLRP3、cleaved Caspase-1的蛋白含量。结果：模型组大鼠血清IL-1β、TNF-α水平较空白组上升（P <0.05）;与模型组比较,上中下通用痛风方低、中、高各剂量组与秋水仙碱组、痛风舒组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量下降（P <0.05）;与...