人前列腺组织中雄激素受体亚型表达与基因克隆

目的：研究人前列腺组织中雄激素受体（AR）亚型的表达及其基因学基础。方法：应用聚丙烯酰胺凝胶等电泳和分子生物学基因克隆技术,对1例前列腺增生症（BPH）患者手术切除的前列腺组织中的AR亚型蛋白表达与AR亚型基因进行了研究。结果：在该例患者增生良性前列腺组织中,发现有3个AR亚型蛋白表达,并克隆出了1条有1913个核苷酸组成的AR亚型cDNA,命名为PHAR－1。GenBank登记号为：BankIT372205 324243.PHAR－1与GenBank中已登记的AR序列比较,有3段序列共961个核苷酸相同,有952个核苷酸组成的序列不同,显示了这条新的AR cDNA的同源性和特异性。结论：同一组织标本的3个AR亚型蛋白表达并克隆1条ARcDNA基因的结果,提示AR亚型蛋白可能源于一基因的不同起始密码子的转录作用。AR亚 型cDNA的克隆为研究活AR亚型基因的药物,探讨治疗前列腺癌的新策略奠定了基础。     

类固醇受体辅活化子-1和核受体辅阻遏子在人前列腺不同生长方式表达变化

目的探讨类固醇受体辅活化子-1（SRC-1）、核受体辅阻遏子（NCoR）在人前列腺不同生长方式的表达。方法采用免疫组化两步法检测10例胎儿前列腺（EP）、10例正常前列腺（NP）、20例前列腺增生（BPH）、20例激素依赖性前列腺癌（ADPC）、15例激素非依赖性前列腺癌（AIPC）组织SRC-1、NCoR的表达。结果在AIPC、AD-PC、BPH和EP均检测到SRC-1表达,而NP组织,却无SRC-1的明显表达。SRC-1在AIPC的阳性率较ADPC、BPH和NP明显升高（P〈0.01）,而与EP差异无统计学意义（P〉0.05）。NCoR在AIPC、ADPC、BPH、NP和EP均有表达,但在AIPC的表达则出现明显的降低（P〈0.01）。结论 SRC-1和NCoR表达可能与前列腺的生长发育以及前列腺癌的进展密切相关。     

表皮生长因子受体和雄激素受体在人良性前列腺增生症中的…

采用免疫组织化学方法观察表皮生长因子受体和雄激素受体在４０例人良性前列腺增生症前列腺组织中的定位。结果显示：４０例中２７例为ＥＧＦ－Ｒ强阳性表达，ＥＧＦ－Ｒ主要位于增生的前列腺上皮的基底层和鳞化上皮。     

雄激素受体在前列腺增生和前列腺癌组织中的表达

目的：研究雄激素受体（AR）在良性前列腺增生（BPH）和前列腺癌（PCa）组织的表达，探讨雄激素受体与良性前列腺增生和前列腺癌的关系。方法：BPH，PCa和正常对照组各20例，AR采用免疫组织化学SP法检测，用半定量方法计算结果。结果：BPH组腺上皮和间质中AR表达阳性率显著高于对照组（P＝0．0012，P＝0．0276），同时腺上皮中AR强阳性率亦高于对照组（P＝0．008），BPH组中AR在腺上皮中的表达比间质中强（P＝0．0001）。PCa组AR表达明显低于正常前列腺对照组（P＝0．027）。阳性染色颗粒主要分布在前列腺腺上皮的细胞核中，结论：AR在BPH组织中的阳性表达率高于正常前列腺组织，而在PCa组织中的阳性表达率低于正常前列腺组织，AR主要在前列腺腺上皮的细胞核中表达。     

前列腺组织雄激素受体的测定方法

建立雄激素受体测定的放射配基结合分析法测得人前列腺组织中胞浆胞核雄激素受体均可被约5×10^-9mol/L的双氢睾酮饱和，其最大结合容量(Bmax)及平衡解离常数(Kd)分别为；胞浆129．4×10^-15mol/mg，0．88×10^-9mol／L胞核176．2×10^-15mol／mg，3．2×10^-9mol／L。人前列腺癌胞浆、胞核雄澈素受体均高于正常前列腺(n=3)及前列腺肥大(n=32)。用融裱法放射自显影证实雄激素受体主要分布在前列腺组织的腺区，尤其是在腺上皮细胞核内。     

胃癌中雄激素受体和雌激素受体的表达及其临床意义

目的:探讨胃癌组织中雄激素受体(AR)和雌激素受体(ER)的表达及临床意义。方法:1.采用化学发光免疫法测定胃癌病人血清中雌二醇(estradiol,E2),睾酮(testosterone,T)含量;2.用免疫组化SP法检测胃癌标本AR、ER蛋白的表达。结果:1.胃癌同性别组血清T、E2含量比对照组低,有极显著性差异(P<0.01)。2.胃癌组织AR阳性率为47.6%,ER阳性率为34%;癌旁组织中AR、ER阳性率分别为61.9%、66.7%,有显著性差异;AR、ER在胃癌中的阳性表达与肿瘤的组织类型、分化程度、淋巴结转移情况以及TNM分期有关。结论:AR、ER阳性表达的胃癌具有性激素依赖性,检测胃癌组织中的AR、ER对临床判定预后及进行内分泌治疗有一定的指导意义。     

雄激素对大鼠前列腺不同分叶雄激素受体及其mRNA表达的影响

目的 探讨雄激素对大鼠前列腺腹叶及侧叶1(Lateral lobe part1，LP1)、侧叶2(Lateral lobe part2，LP2)、雄激素(Androgen receptor，AR)及AR mRNA表达的影响。方法 选用健康成年雄性Wistar大鼠，随机分成以下3组：正常对照组(N组)；雄激素去势组(C组，共56只)：经阴囊手术切除双侧睾丸，制成雄激素去势动物模型，再分成去势后1d(C1)、3d(C3)、7d(C7)及14d(C14)四个时相点；雄激素替代组(T组，共28只)：双侧睾丸切除后14d，丙酸睾丸酮0．5ml(2．5mg/只)皮下注射，1次／d，分成雄激素替代后1d(T1，14只)，7d(T7，14只)两个时相点。应用免疫组织化学及半定量PCR方法分别检测大鼠前列腺121及LP2 AR、AR mRNA的表达。结果鼠前列腺腹叶、LP1及LP2对雄激素调节的敏感性不同，在腹叶及LP1，雄激素与AR表达呈正相调节关系，雄激素去势后，AR表达下调，AR mRNA呈一过性上调；而在LP2，情形与前者明显不同，雄激素去势后，AR mRNA表达持续上调，而对AR表达无明显影响。结论 鼠前列腺不同分叶对雄激素调节敏感性与其AR表达的调节方式不同有关。     

前列腺干细胞抗原在前列腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨前列腺干细胞抗原（PSCA）在前列腺癌（Pca）中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学方法，对PSCA蛋白在41例Pca、5例正常前列腺组织（NP）和9例前列腺增生组织（BPH）中的表达水平进行检测。结果PSCA在NP、BPH及Pca组织表达阳性率分别为60．0％、66．7％和80．5％，强阳性率分别0、11．1％和61．0％。PSCA在NP和BPH组织之间表达水平差异无显著性；Pca与NP和BPH组织的表达水平差异有显著性（P〈0．05）；PSCA的表达水平与Pca的临床分期和病理分级无相关性，（P〉0．05）。结论PSCA在Pca有稳定的高表达，它可能成为前列腺肿瘤治疗的分子靶点。     

脑膜瘤组织中孕激素受体、雄激素受体及增殖细胞核抗原的表达

目的 :探讨脑膜瘤组织中孕激素受体 (PR)、雄激素受体 (AR)和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达。方法 :应用免疫组化方法检测 70例脑膜瘤PR、AR和PCNA的表达情况 ,分析它们与肿瘤组织学分级、复发及其相互关系。结果 :随组织学分级的升高 ,AR阳性细胞率 (AR LI)增高 ,Ⅰ级组与Ⅲ级组间差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;复发组AR LI高于初发组 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。组织学分级越高 ,PR阳性细胞率 (PR LI)越低 (P <0 .0 1 ) ;复发组PR LI显著低于初发组 (P <0 .0 5 )。AR阳性组PCNA LI高于阴性组 ;PR阴性组PCNA LI高于阳性组 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 :AR表达水平与脑膜瘤组织学分级、分型及肿瘤复发有关     

Expression change of nuclear receptor corepressor （NCoR） in androgen independence prostate cancer and its clinical significance

Objective：To explore the expression of nuclear receptor corepressor （NCoR） in androgen independence prostate cancer （AIPC） and its clinical significance. Methods：The expression of NCoR and androgen receptor （AR） in prostatie tissues, from 15 cases with AIPC, 20 cases with androgen dependence prostate cancer （ADPC） and 20 cases with benign prostatic hyperplasia （BPH）, was detected by immunohistoehemistry respectively. Results：The expression of NCoR was observed mainly in the nucleus and slightly in the nucleus. The positive cell percentage of NCoR in AIPC was significantly lower than that in ADPC and BPH （P〈0. 01）. The NCoR expression was significantly lower in low differentiation prostate cancer （Pca） than that in high differentiation Pca （P〈0. 05）. The rate of NCoR expression was significantly higher in low stage Pca than that in high stage Pca （P〈0. 05）. AR, expressing in the nucleus, was found to be negative in one case of AIPC, while was strongly expressed in other cases of AIPC, and all eases of ADPC and BPH. Conclusion： The transition to AIPC of Pea may be correlated with the decrease of NCoR protein.     

雄激素受体(AR)靶miRNA转录过程中转录复合体的形成初探

 目的  探讨雄激素受体(androgen receptor,AR)调控的靶miRNA在转录过程中受到AR以及一系列蛋白辅助因子形成的转录复合体影响的过程。方法  通过染色质免疫沉淀(ChIP)和实时荧光定量PCR (qPCR)方法,用相应辅助蛋白因子的抗体研究蛋白质和DNA的相互作用,qPCR研究蛋白质和DNA结合的增强或者减弱。通过Western blot实验在不同细胞系中初步研究8 羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)和前列腺癌恶化的相关性。 结果  在LNCaP前列腺癌细胞系中,进行双氢睾酮(DHT)刺激后,在AR靶miRNA的雄激素受体调控元件(androgen response element,ARE)位置发现了赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1),OGG1,脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(Ape1),RNA聚合酶Ⅱ及拓扑异构酶Ⅱ等辅助蛋白因子结合量上升。通过AR和LSD1的siRNA干扰实验,证明是由AR招募了LSD1,LSD1进而招募其余辅助蛋白因子。结论  这些转录因子AR以及LSD1、OGG1、Apel、RNA聚合醇 Ⅱ和拓扑异物酶 Ⅱ等一系列蛋白因子形成的转录复合物,促进了AR调控的靶miRNA转录的发生,且该转录复合物的形成由AR的招募作用发起。     

雄激素受体调控基因组表达与去势抵抗性前列腺癌关系探索

目的 探索雄激素受体调控基因与前列腺癌发生去势抵抗的关系.方法 选取80例经病理检查和临床资料证实并采用内分泌治疗的前列腺癌患者,随访获取发生去势抵抗时间,定量即时聚合酶链锁反应(qRT-PCR)检测确诊时穿刺标本的六个雄激素受体调控基因KLK3(PSA),PMEPA1,NKX3.1,ODC1,AMD1和ERG表达并分...     

PCa患者前列腺与睾丸组织中AR表达相关性

目的探讨雄激素受体（AR）在前列腺癌（PCa）患者前列腺组织与睾丸组织中的表达情况。方法16例PCa患者,于前列腺切除术（或前列腺穿刺活检）后行双侧睾丸切除,按临床分期、病理分级、年龄分组,采用免疫组化方法分析各组织AR表达情况。结果前列腺组织AR表达：早期组表达低于晚期组（P〈0.05）;低分化组表达高于其它病理分级组间（P〈0.01）;AR表达与临床分期及病理分级正相关（P〈0.05）。睾丸组织中早期组AR表达高于晚期（P〈0.05）,AR表达与临床分期负相关（P〈0.05）;前列腺与睾丸组织AR表达间无相关性（P〉0.05）。结论 PCa患者前列腺与睾丸组织间AR表达彼此独立;前列腺AR阳性表达程度与PCa分级、分期有关,其睾丸AR阳性表达程度PCa分期有关,对判断PCa生物学行为有参考价值。     

雄激素受体反义RNA对前列腺癌细胞雄激素受体表达的抑制作用研究

目的 观测雄激素受体（AR）反义RNA逆转录病毒表达载体在前列腺癌细胞中的表达及其对AR表达的影响。方法 将AR反义RNA逆转录病毒表达载体导入前列腺癌细胞株LNCaP，PCR检测AR目的片段在重组LNCaP细胞基因组中的存在，RT－PCR检测AR反义RNA表达和AR mRNA水平，Western blot检测AR蛋白表达水平。结果 PCR在LNCaP^as-AR基因组DNA中扩增出了AR目的片段，表明AR目的片段整合到了细胞基因组。RT－PCR证实LNCaP^as-AR有AR反义RNA表达，且其AR mRNA水平较LNCaP和空载体转染的LNCaP^Neo显著下调（P＜0.05)，Western blot证实LNCaP^as-AR细胞AR蛋白含量显著下降（P＜0.05)。结论 AR反义RNA可抑制前列腺癌细胞AR表达。     

113例前列腺癌AR与凋亡相关因子表达的研究

目的 探讨113例人前列腺癌AR与凋亡相关因子表达的相关性.方法 应用免疫组化标记AR及细胞凋亡相关因子bcl-2、Bax及Tunel标记等,结合光镜、电镜观察及图像分析等方法,研究不同AR表达与Pca凋亡的相互关系.结果 AR(-)组较AR( )组bcl-2阳性表达明显增强,Bax表达增强,bcl-2/Bax比值增高,前列腺癌AR(-)组细胞凋亡作用较AR( )组明显增强.结论 AR表达缺失促进了bcl-2和Bax的表达, Bax表达上调促进细胞凋亡的发生,而bcl-2有癌基因的作用,其表达上调则促进了的细胞增殖,导致前列腺癌凋亡及增殖作用均增强.     

Bmi1在前列腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨Bmi1蛋白在前列腺癌中的表达及临床意义。方法 应用免疫组织化学方法对前列腺癌(65例)和良性前列腺增生(15例)标本中Bmi1蛋白表达进行检测,将Bmi1染色结果与临床病理参数进行对照研究。结果 Bmi1在前列腺癌组织中的表达较良性增生组织明显增加(P <0.01);Bmi1的表达与Gleason评分具有相关性(P <0.01),与危险分级(P=0.013)相关,与前列腺癌复发进展相关(P <0.05),但Bmi1表达和前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)浓度之间无明显的相关性。结论 Bmi1蛋白在前列腺癌组织中的表达增加,其表达与肿瘤的低分化、高风险和不良预后明显相关。     

自噬基因Beclin-1在前列腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨自噬基因Beclin-1在前列腺癌组织中的表达及其相关临床意义,并分析其与根治性前列腺切除术后生化复发的相关性.方法 采用免疫组化Super Vision两步法检测132例前列腺癌组织及癌旁组织中Beclin-1的表达,并分析其与相关临床因素的关系.结果 在前列腺癌组织及癌旁组织中Beclin-1的表达率分别为38.6％及54.5％,差异有统计学意义(P=0.01).Beclin-1在Gleason评分中表现为评分越高,阳性表达率越低(P=0.011).前列腺癌组织中Beclin-1的表达与不同年龄(P=0.138)、家族史(P=0.686)及是否患者前列腺炎病史(P=0.895)等临床因素比较,差异无统计学意义.但在有无淋巴结转移(P =0.017)、有无骨转移(P =0.002)及行根治性前列腺切除术后有无生化复发(P =0.024)间差异均有统计学意义.结论 自噬基因Beclin-1在前列腺癌组织中表达下调,并与淋巴结转移、骨转移及生化复发有关,其表达下调可能参与前列腺癌的发生、发展.