结缔组织生长因子在糖尿病大鼠肾脏中的表达及其意义

目的 :研究结缔组织生长因子 (CTGF)在链脲佐菌素 (STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏中的表达及其与肾小球肥大的关系。方法 :将SD大鼠随机分为正常对照 (N)组与糖尿病肾病(DN)组。大鼠单侧肾切除后 ,腹腔注射STZ诱导糖尿病模型 ,观察第 4、8、12周血糖、体重、尿白蛋白排泄 (Ualb)和 2 4h尿蛋白定量 (2 4hUpro)的变化 ,同时观察 12周时肌酐清除率(Ccr)、肾小球面积及体积、肾重、肾组织总蛋白含量和肾皮质CTGF表达的改变。结果 :DN组 2 4hUpro、Ualb和Ccr较N组明显增加 (P <0 .0 1) ,肾小球面积及体积、肾重和肾组织总蛋白含量均较N组显著增加 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。免疫组织化学半定量检测结果显示 ,DN组肾皮质CTGF表达较N组明显增加 (P <0 .0 1) ,CTGF表达与肾小球体积及 2 4hUalb呈显著正相关关系 (均为P <0 .0 5 )。结论 :糖尿病大鼠早期肾脏CTGF表达增加可能是DN发生的重要机制     

罗格列酮对糖尿病肾病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的:探讨罗格列酮(RGZ)对糖尿病肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:大鼠随机分成治疗组、模型组、正常组(n=9)。治疗组、模型组大鼠用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病模型,均造模成功7只。治疗组大鼠于造模前24h行RGZ灌胃,模型组和正常组以等体积蒸馏水灌胃。12周后处死动物,观察肾小球病理学变化及细胞外基质(ECM)相对面积,用免疫组织化学法检测肾皮质CTGF的表达。结果:治疗组及模型组肾小球ECM相对面积及肾皮质CTGF表达水平均较正常组升高,但治疗组2指标均较模型组低(P<0.01);治疗组肾脏病理学改变较模型组减轻。结论:RGZ能改善糖尿病时肾脏的病理变化,延缓肾纤维化的发生,其作用可能与抑制肾组织中CTGF的表达有关。     

依那普利联合霉酚酸酯对大鼠糖尿病肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨依那普利联合霉酚酸酯(MMF)对大鼠糖尿病肾脏结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法建立单侧肾切除链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病模型。8周后观察24h尿白蛋白排泄率(AER)的变化,并行PAS染色肾小球与肾小管-间质病理观察;应用免疫组化方法检测肾组织CTGF蛋白表达。结果各给药组均可抑制糖尿病大鼠AER增加及肾小球病理结构损害(P<0.05,0.01),联合组尚可明显减轻糖尿病肾小管-间质损伤指数(P<0.05);糖尿病大鼠肾小球与肾小管-间质CTGF蛋白表达明显高于对照组,各给药组肾组织CTGF蛋白表达均明显低于模型组(P<0.05),其中以联合组最明显(P<0.01)。结论依那普利联合MMF对糖尿病肾脏有明显保护作用,其机制部分与抑制糖尿病肾组织CTGF过高表达有关。     

伊贝沙坦对糖尿病大鼠结缔组织生长因子表达的影响

目的：探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂伊贝沙坦（Irbesartan,Irb)对链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF)表达的影响。方法：将SD大鼠随机分为正常对照（N）组、糖尿病肾病（DN）组、Irb治疗（DNI）组。腹腔注射STZ诱导糖尿病模型，观察治疗后第4、8、12周血糖、体重、尿白蛋白排泄量（24hUalb)、尿总蛋白排泄量（24hUpro)的变化，并观察12周时肌酐清除率（Ccr)、肾小球硬化程度（GS）的改变，免疫组织化学方法分析肾皮质CTGF、转化生长因子β1（TGF－β1)的表达。结果：DN组24hUalb、24hUpro的排泄量较N组明显增加（P＜0．01），Ccr明显增高（P＜0．01），DNI组24hUalb、24hUpro和Ccr较DN组显著减少（P＜0．01）。DN组肾小球硬化程度较N组增高（P＜0．01），Irb可显著减轻肾小球硬化程度（P＜0．01）。DN组肾皮质CTGF和TGF－β1的表达较N组增高（P＜0．01），Irb能明显抑制两者的表达（P＜0．05，P＜0．01）。另外，肾皮质CTGF的表达与TGF－β1呈显著正相关关系（P＜0．05）。结论：早期应用Irb对STZ诱导的糖尿病大鼠有肾保护作用，可能与抑制糖尿病大鼠肾皮质CTGF的表达有关。     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾组织结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨霉酚酸酯(MMF)对糖尿病大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法建立单侧肾切除糖尿病模型,大鼠随机分为对照组、糖尿病组与MMF给药组。8周末检测24小时尿白蛋白排泄率(AER)、肾组织与尿丙二醛(MDA)含量;并行肾组织形态学指标观察;应用免疫组化方法检测肾组织CTGF表达。结果MMF 给药组大鼠肾重、肾重/体重、AER与肾小球面积、肾小球容积、系膜区面积明显低于模型组(P<0.05,P<0.01);MMF 给药组可明显减少糖尿病大鼠肾组织及尿MDA含量(P<0.05);模型组肾小球CTGF表达明显高于对照组(P<0.01), MMF给药组这些改变明显减轻(P<0.01)。结论MMF对糖尿病大鼠肾脏有明显保护作用,其机制可能部分与抑制肾组织氧化应激、下调CTGF表达有关。     

氟发他汀对1型糖尿病大鼠血液、尿液结缔组织生长因子表达与肾脏病变干预作用的研究

目的 检测糖尿病大鼠血液、尿液中的结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)含量,探讨其与肾脏病变的关系及氟伐他汀对其含量的影响和可能的机制.方法 实验大鼠随机分组后,复制1型糖尿病(DM)模型,Western印迹检测血液中CTGF、尿液中CTGF含量;测定尿白蛋白、血糖、血脂、肾功等生化指标;观察肾病理改变.结果 糖尿病组(DM组)大鼠出现明显肾病变,血液、尿液中CTGF含量较其它各组明显增加(P<0.01):氟伐他汀治疗组(DM-F组)血液、尿液中CTGF含量和肾病变较DM组明显降低和减轻(P<0.01),但血液、尿液中CTGF水平较正常对照组仍为高(P<0.01).结论 CTGF促进DM肾脏病变发生,监测血液和尿液中CTGF含量,可反映DM肾病变的发生、发展.氟伐他汀可通过降低CTGF,延缓DM肾脏病变发生.     

解毒通络保肾胶囊对糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的研究中药解毒通络保肾胶囊对糖尿病(DM)大鼠肾脏病变的保护作用及其机制.方法将实验动物分为正常对照组、DM对照组、阳性对照组和实验组.检测各组第12周的血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率(UAER)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量及肾脏肥大指标的变化,应用RT-PCR检测肾皮质结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达,免疫组化检测肾内纤维连接蛋白(FN)和Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)蛋白表达水平.结果解毒通络保肾胶囊较DM对照组血糖显著降低(P<0.01),UAER明显减少(P<0.05),尿素氮和血肌酐水平下降,肾脏肥大指标改善(P<0.01).RT-PCR结果表明DM大鼠肾皮质CTGF mRNA表达升高,肾小球FN、Col Ⅳ沉积增多,解毒通络保肾胶囊治疗组CTGF mRNA表达水平和Fn和Col Ⅳ蛋白表达均低于DM对照组(P<0.01).结论解毒通络保肾胶囊对DM肾脏病变有保护作用,其机制可能是减少肾组织中AngⅡ含量,下调CTGF的表达,减少细胞外基质的沉积.     

结缔组织生长因子在糖尿病大鼠心肌的表达及意义

目的观察结缔组织生长因子（CTGF）在糖尿病大鼠心肌中的表达，探讨CTGF在糖尿病心肌病发病机制中的作用。方法SD大鼠60只，均分为对照组和糖尿病组。链脲佐菌素（STZ）一次性腹腔注射建立糖尿病模型。在病程4，8，12周分别从2组中随机选择6只，称质量并计算心体比（H／B）和左室质量指数（LVMI）。电镜观察12周2组心肌超微结构，光镜观察2组冠状动脉病变。RT-PCR方法比较不同病程各组心肌CTGF、纤维连接蛋白（FN）、Ⅲ型胶原（ColⅢ）、转化生长因子-β1（TGF—β1）的表达。结果STZ诱导糖尿病组在病程12周心肌超微结构病变显著，冠状动脉未见病变，糖尿病心肌病已形成。在病程4，8，12周，糖尿病组H／B、LVMI逐渐增加，心肌CTGFmRNA表达显著上调（P〈0．01），并随着病程延长呈逐渐增高趋势，与FN、ColⅢ表达进行性增高相平行。TGF-β1，在糖尿病心肌中mRNA表达增高，但12周时已呈下降趋势。CTGF与TGF-β1，mRNA表达呈正相关（r=0．792，P〈0．01）。CTGF与FN、ColⅢmRNA表达呈明显正相关（r=0．923，0．879，均P〈0．01），其相关性比TGF-β1，显著。结论糖尿病大鼠心肌CTGF表达上调与细胞外基质的积聚密切相关，在糖尿病心肌病形成过程中，CTGF可能起较直接、持久的作用。     

苯那普利对糖尿病大鼠心肌CTGF基因表达的影响及作用机制

目的：研究苯那普利对结缔组织生长因子（CTGF）mRNA在糖尿病（DM）大鼠心肌中表达的影响及相关机制。 方法：用24只Wistar大鼠建立DM模型后,随机分为苯那普利治疗组及DM未治疗组,处理12周末检测血糖、血脂,应用放免法检测心肌血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的含量,应用RT-PCR检测心肌CTGF mRNA表达,并与正常组对照。 结果：DM未治疗组血糖、血脂明显增高,心肌AngⅡ含量及CTGR mRNA表达明显高于正常组和苯那普利治疗组（P<0.01）。结论：持续血糖增高能导致大鼠心肌AngⅡ含量增加和心肌CTGF mRNA表达增加,苯那普利能在一定程度上抑制大鼠心肌CTGF mRNA表达,其机制可能与其减少心肌AngⅡ含量有关。     

醛固酮对大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子基因表达的影响

目的 探讨醛固酮(ALD)对大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子(CTGF)基因表达的影响.方法 ①以不同浓度的ALD (10-11、10-10、10-9、10-8、10-7mol/L)刺激肾小球系膜细胞72 h后,用半定量KT-PCR.法检测细胞中CTGF mRNA的表达.②以10-9 mol/L的ALD刺激肾小球系膜细胞不同时间(12、24、48、72 h)后,用半定量RT-PCR法检测细胞中CTGF mRNA的表达.结果 半定量RT-PCK结果显示,随着ALD浓度的升高,CTGF mKNA的表达量(以CTGF/GAPDH mRNA表示)明显增加.在10-7mol/L时达高峰,与对照组比较,差异有显著性(P＜0.01).表明ALD促进肾小球系膜细胞CTGF mRNA的表达,且具有一定的剂量-反应关系.以10-7mol/L的ALD作用于大鼠肾小球系膜细胞12～72h,随着作用时间的延长,CTGF mRNA的表达量明显增加,在72 h时达高峰,与对照组比较,差异有显著性(P＜0.01).表明ALD促进系膜细胞CTGF mRNA的表达,且具有一定的时间-效应关系.结论 ALD促进大鼠肾小球系膜细胞CTGF mRNA的表达,从而促进慢性肾脏病进展.     

糖基化终产物对小鼠胚胎成纤维细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的：探讨糖基化终产物（AGEs）对NIH Swiss小鼠胚胎成纤维细胞（NIH/3T3）中结缔组织生长因子（CTGF）基因表达的影响,并观察氨基胍（AG）、葛根素（Pue）对NIH/3T3中CTGF mRNA表达的干预作用。方法：葡萄糖和牛血清白蛋白（BSA）共同孵育制备AGEs,运用荧光法测定AGEs水平。用不同浓度葡萄糖（20、50和80 mmol•L^-1）制备的AGEs培养NIH/3T3细胞24 h;用50 mmol•L^-1葡萄糖制备的AGEs培养NIH/3T3细胞0、6、12、24和48 h。观察AG和不同浓度Pue（0.25、0.5、1.0和1.5g•L^-1）的干预作用。应用RT-PCR检测NIH/3T3中CTGF mRNA的表达。结果：与BSA对照组比较,用20、50和80 mmol•L^-1葡萄糖制备的AGEs培养24 h后,NIH/3T3中CTGF mRNA表达增高（P<0.01）,以50 mmol•L^-1最明显。与0 h比较,同一浓度葡萄糖制备的AGEs培养6、12、24及48 h后,NIH/3T3中CTGF mRNA的表达增高（P<0.01）,以24 h最明显。与50 mmol•L^-1葡萄糖制备的AGEs培养24 h比较,AG和不同浓度的Pue干预后NIH/3T3中CTGF mRNA的表达明显降低（P<0.01）。结论：AGEs能增强NIH/3T3中CTGF基因表达,且与孵育AGEs的葡萄糖浓度和作用时间有关,提示AGEs可能促进糖尿病并发症纤维化的发展,AG和Pue可抑制AGEs促纤维化的病理过程。     

复方鳖甲软肝片对阿霉素肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子mRNA及蛋白表达的影响

目的:分析阿霉素肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGE)mRNA及蛋白的变化,研究复方鳖甲软肝片的干预怍用及其机制。方法:采用单侧肾切除阿霉素肾病模型。将45只大鼠随机分为5组:正常组、假手术组、模型组、苯那普利组和复方鳖甲软肝片组。用药10周后处死大鼠,观察肾组织病理改变,应用原位杂交和免疫组织化学方法检测肾组织CTGF mRNA及蛋白的表达。结果:正常组及假手术组肾小球系膜细胞、肾小管上皮细胞以及肾间质细胞胞浆内有少量CTGF mRNA及蛋白的黄色颗粒状阳性反应物;模型组上述部位的CTGF mRNA及蛋白的黄色颗粒状反应物呈强阳性表达;复方鳖甲软肝片组CTGF mRNA及蛋白表达较模型组显著减少,与苯那普利组比较,差异无统计学意义。结论:复方鳖甲软肝片可能通过抑制CTGF mRNA及蛋白的过度表达而减缓肾纤维化病程进展。     

氨基胍与葛根素对糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的 :探讨结缔组织生长因子 (CTGF)在糖尿病肾病发病中的作用及葛根素 (Pue)和氨基胍 (AG)对其表达的干预作用。方法 :将 60只雄SD大鼠随机均分成正常对照组、糖尿病组、氨基胍组和葛根素组 ,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型。氨基胍组在建模基础上喂食氨基胍进行干预 ,葛根素组采用腹腔注射葛根素干预。逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学法观察各组肾组织中CTGF基因和蛋白的表达。结果 :糖尿病大鼠肾皮质CTGF GAPDHmRNA之值为 0 .44± 0 .0 3 ,明显高于葛根素组的 0 .2 2± 0 .0 2和氨基胍组的 0 .2 3± 0 .0 2 (均P <0 .0 1) ,后两组又高于正常对照组的 0 .16± 0 .0 2 (均P <0 .0 1)。免疫组织化学法显示 ,正常对照组大鼠肾小球CTGF阴性 ,葛根素组和氨基胍组染色相近 ,强于正常对照组 ,但显著弱于糖尿病组。结论 :糖尿病大鼠肾皮质CTGF表达增强 ,可能部分参与糖尿病肾病的发生发展过程 ,氨基胍和葛根素降低CTGF表达的作用可能是其肾脏保护的机理之一。     

川芎嗪对糖尿病大鼠肾保护作用及肾间质结缔组织因子及骨桥蛋白表达的影响

目的 观察川芎嗪对糖尿病大鼠肾保护作用及肾小管间质结缔组织生长因子(CTGF)、骨桥蛋白(OPN)表达水平的影响.方法 选用Wistar大鼠采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)方法诱发糖尿病大鼠模型.成模后随机分为5组,每组12只,分别为模型组、空白对照组、贝那普利组、川芎嗪高、低剂量组,除空白组和模型组外,其余各组按组别分别予贝那普利1.7mg/(kg·d)、川芎嗪150mg、50mg/(kg·d)灌胃,共12周.实验第8周和第12周,测定24h尿蛋白定量;治疗期间检测血糖变化.治疗12周后,检测各组大鼠空腹血糖,全自动生化分析仪检测BUN、Scr.RT-PCR测肾小管间质OPNmRNA表达,免疫组化检测肾小管间质CTGF表达.结果 治疗后,各治疗组与模型组比较,血糖水平均明显下降(P<0.05),以川芎嗪高剂量组最为明显;与正常手术组比较,造模后第8周、第12周模型组尿蛋白明显升高(P<0.05);与模型组比较,各治疗组尿蛋白定量均有下降(P<0.05,P<0.01);治疗各组与模型组血清Scr、BUN比较均显著降低,其中以川芎嗪高剂组下降最为明显(P<0.01);与模型组比较,各药物治疗组大鼠肾间质组织CTGF、OPN表达均明显减少(P<0.05).结论 川芎嗪能通过减少模型大鼠蛋白尿排泄,降低肾间质中CTGF、OPN表达,从而发挥减轻肾间质损害,保护肾功能的作用.