人癌裸小鼠移植瘤的应用研究

人癌裸小鼠移植瘤的应用研究焦伟综述陆胜经审校（广西区人民医院病毒室南宁５３００２１）６０年代由Ｇｒｉｓｔ发现，Ｆｌａｎａｇａｎ等研究证实先天性无毛、无胸腺、Ｔ淋巴细胞缺乏的小鼠（裸小鼠）是进行人癌异种移植的理想动物，并由Ｒｙｇａａｄ和Ｐｏｃｖｌｓｅｎ...     

去势雌性裸小鼠人子宫内膜癌皮下移植瘤动物模型的建立

目的 :确立对雌性裸小鼠行卵巢切除术后建立子宫内膜癌皮下移植瘤的方法。方法 :将裸小鼠随机分为不切除卵巢 (NOVX)、切除卵巢 (OVX)和切除卵巢后给予雌二醇 (OVXE2)等3组 ,术后1周皮下注射子宫内膜癌细胞悬液 ,接种前行全身放射处理 ,观察肿瘤的生长情况 ,测量肿瘤径线并计算体积 ,于术后第4周杀鼠取瘤 ,并称重。结果 :3组成瘤率100 % ;各组肿瘤体积大小不同 ,OVXE2组>NOVX组>OVX组 ,差异显著 (P<0.05) ;3组瘤重不同 ,差异显著 (P<0.05)。结论 :成功地确立了处于3种不同内分泌条件下的裸鼠皮下建立子宫内膜癌移植瘤的方法 ,并证实保留卵巢、切除卵巢和切除卵巢后给予雌激素3种条件下肿瘤的生长速度不同。     

丙氨瑞林联合5-Fu对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及其作用机制

目的 探讨促性腺激素释放激素(GnRH)类似物醋酸丙氨瑞林(alarelin)联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的生长和survivin mRNA表达的影响. 方法 建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,模型建立后20只实验裸鼠随机分为四组:对照组、丙氨瑞林组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)组、丙氨瑞林和5-Fu联合组.测量肿瘤体积,计算抑瘤率,4周后处死裸鼠,切取移植瘤组织称取瘤重,RT-PCR法检测各组肿瘤组织中survivin mRNA的表达. 结果 丙氨瑞林与5-Fu联合用药组抑瘤效果最好,丙氨瑞林组、5-Fu组和联合组抑瘤率依次为16.9%、32.0%、58.3%.RT-PCR法显示丙氨瑞林组、5-Fu组及联合用药组survivin mRNA的表达明显低于对照组,且丙氨瑞林组、5-Fu组及联合用药组两两之间比较表达差异也有统计学意义(P<0.05). 结论 丙氨瑞林可抑制人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长、survivin mRNA的表达.丙氨瑞林与5-Fu联合应用提高了5-Fu的抗肿瘤效果,抑瘤作用可能是通过抑制survivin mRNA的表达来实现的.     

丙氨瑞林联合顺铂对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的 探讨丙氨瑞林(alarelin)联合顺铂(cisplatin)对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的影响及作用机制.方法 建立裸鼠移植瘤模型,将32只荷瘤裸鼠随机分为4组:对照组、丙氨瑞林组、顺铂组、丙氨瑞林+顺铂组.每日观察各组裸鼠移植瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线、计算肿瘤体积、抑瘤率,并用免疫组化法检测移植瘤中Caspase-3的表达.结果 各药物干预组抑瘤率分别为丙氨瑞林组22.14%,顺铂组32.12%,联合用药组63.32%,联合用药组的抑瘤率明显高于顺铂组和丙氨瑞林组(P<0.05).②各药物干预组Caspase-3的表达高于对照组,且各干预组间差异有统计学意义(P<0.001).结论 丙氨瑞林、顺铂均可抑制裸鼠移植瘤的生长,二者联合应用有协同作用,其作用机制可能与上调Caspase-3蛋白表达有关.     

不同部位皮下裸小鼠移植瘤特点比较

裸小鼠先天性无胸腺 ,主要的缺陷为 :11号染色体上有一个隐性突变基因 ,毛发生长发育异常 ,表现为全身形似无毛 ,呈裸体外表 ,无胸腺 ,仅有胸腺残迹或异常的胸腺上皮 ,这种上皮不能使T细胞正常分化 ,缺乏成熟T细胞的辅助、抑制及杀伤功能 ,因而细胞免疫力低下 ,不能执行正常T细胞功能。为了比较不同皮下部位裸小鼠移植瘤特点 ,笔者选用了 2 6只SPF级BalB/CA nu品系 3～ 4周龄的裸鼠做实验 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　材料裸小鼠 2 6只 ,均为雄性 (中国医学科学院动物繁育场提供 ) ,体重 18～ 2 0 g ,人肺腺癌细胞系 (购于上海细胞…     

丙氨瑞林对子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长及FHIT表达的影响

目的观察醋酸丙氨瑞林对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用及可能的作用机制。方法将HEC-1-B细胞注入裸鼠左前肢近腋窝处皮下,选24只雌性荷瘤裸鼠随机分为4组,即低剂量组（18肛g／kg）、中剂量组（36μg／kg）、高剂量组（72μg／kg）和空白对照组（0μg／kg）,采取肌肉注射方式给药4周。将瘤体完整取出,测量体积、绘制生长曲线、计算抑瘤率,并用免疫组织化学法检测瘤组织中FHIT蛋白的表达。结果①随着醋酸丙氨瑞林浓度由低到高,癌细胞受抑制渐趋明显,低、中、高剂量组抑瘤率分别为17．0％、24．1％、42．1％,且与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。②免疫组织化学结果显示,各干预组的FHIT蛋白表达水平较对照组明显升高,且组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论醋酸丙氨瑞林对子宫内膜癌皮下移植瘤生长有抑制作用,且呈剂量依赖关系．其机制可能与上调FHIT蛋白表达有关。     

清热解毒经验方对子宫内膜癌移植瘤的作用及TAMs表达的影响

目的探讨清热解毒经验方对子宫内膜癌移植瘤的作用及对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)表达的影响。方法对子宫内膜癌细胞进行传代培养,建立裸鼠子宫内膜癌移植瘤模型,采用免疫组织化学染色的方法研究子宫内膜癌裸鼠移植瘤组织中TAMs的表达。结果孕激素组及成瘤前中药组、成瘤后中药组肿瘤生长速度均明显低于空白对照组(P0.05),孕激素组及成瘤前中药组、成瘤后中药组肿瘤生长速度比较,差异无统计学意义(P0.05)。TAMs在肿瘤组织中的表达,孕激素组、成瘤前中药组、成瘤后中药组与空白对照组比较明显降低(P0.05);孕激素组与成瘤前中药组、成瘤后中药组比较明显降低。(P0.05)。结论清热解毒经验方具有抑制肿瘤生长的作用,其可能是通过抑制TAMs在肿瘤组织中的表达而发挥抑制肿瘤生长的作用。     

人胃癌移植瘤裸小鼠Ki-ras基因突变的检测

目的：检测人胃癌裸小鼠移植瘤Ki—ras基因的突变情况。方法将人胃癌细胞SGC-7901于裸小鼠脾包膜下移植，12周后处死，采用PCR-DNA测序法检测Ki—ras基因第12、13密码子的突变情况。结果：共检测29例裸鼠移植瘤，DNA经扩增后20例为阳性，其中12例进行DNA测序，未发现第12、13密码子的突变。结论：人胃癌移植瘤裸小鼠Ki—ras基因第12、13密码子有无突变尚不能肯定。     

人子宫内膜癌裸鼠移植瘤株的建立及其生物学特性

目的建立人子宫内膜癌裸鼠移植瘤株,为开展子宫内膜癌的实验性研究奠定基础。方法将3例子宫内膜癌手术标本移植于裸鼠皮下,生长后行鼠间连续传代,对移植瘤进行相关的生物学检测。结果3例标本1例获得生长并行鼠间传代,历时24个月建成人子宫内膜癌裸鼠移植瘤株EnCa-95V,瘤株生长稳定,已传21代,移植成瘤率100％,光镜、电镜、免疫纽化、流式细胞术检测移植瘤与患者原始肿瘤特征基本一致;染色体分析显示人类肿瘤染色体核型,众数为43～92条。结论EnCa-95V是一株新的子宫内膜癌裸鼠移植瘤株,为进一步开展子宫内膜癌的实验性研究提供理想的动物模型。     

大蒜素抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长的实验研究

目的 研究大蒜素抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长的作用,并探讨其可能的作用机制。方法 以不同浓度大蒜素（12.5、25、50μg/ml）和顺铂（40μg/ml）分别干预对数生长期Ishikawa细胞,采用MTT法检测Ishikawa细胞增殖抑制;通过流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡状况,采用Western blot法检测Ishikawa细胞中caspase-3蛋白表达,RT-PCR法检测Ishikawa细胞中Bax mRNA、bcl-2 mRNA表达并计算Bax/bcl-2表达比值。结果 大蒜素能够显著提高子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖抑制率、阻滞Ishikawa细胞周期于G₂/M期,提高细胞凋亡率、上调caspase-3蛋白和Bax mRNA表达、下调bcl-2 mRNA表达、提高Bax/bcl-2表达比值,且上述作用均具有一定的剂量依赖性。结论 大蒜素对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖具有抑制作用以及促其凋亡的作用,从而表现出其抑制Ishikawa细胞生长的作用;作用机制可能与大蒜素能够改变Ishikawa细胞周期以及调节凋亡相关基因、蛋白表达有关。     

VEGF反义寡核苷酸对裸鼠荷胃癌肿瘤的生长抑制作用研究

目的 研究血管内皮细胞生长因子反义寡核苷酸(VEGF-ASODN)对裸鼠荷人胃癌肿瘤的生长抑制作用.方法 人工合成硫代磷酸化VEGF-ASODN,建立人胃癌荷瘤裸鼠移植瘤模型(共3组),实验分为4组,(1)VEGF-ASODN组:于瘤体及瘤周注射VEGF-ASODN66μg;(2)错义寡核苷酸组:注射错义寡核苷酸66μg;(3)生理盐水组:注射生理盐水,每3d1次,共治疗7次;(4)另设无荷瘤对照组.实验结束后2 d,处死动物,取血清测VEGF蛋白,测量肿瘤大小及重量,取肿瘤组织用流式细胞技术测增殖细胞核抗原(PCNA)及HE切片染色检查.结果 VEGF-ASODN能抑制VEGF的表达,显著降低荷瘤裸鼠血清VEGF蛋白水平,减小肿瘤的体积和重量,PCNA表达量VEGF反义治疗组76.16%,错义寡核苷酸组87.50%,生理盐水组91.16%.结论 VEGF-ASODN通过抑制VEGF表达,从而能抑制胃癌细胞的生长、增值.     

两种人乳腺癌裸鼠移植模型的建立

目的 建立简便的人乳腺癌裸鼠移植模型,并探讨其部分生物学特性.方法 采用雌激素受体阴性的MDA-MB-231和SK-BR-3人乳腺癌细胞株,分别接种于10只裸鼠左侧腋窝皮下,移植细胞总数为1 x 107/只.观察肿块生长情况,第42天处死荷瘤鼠,切除肿块作病理切片.结果 MDA-MB-231接种后第5d在接种部位可见结节,成瘤率为90％ (9/10),接种42 d肿瘤体积426.6±333.8,瘤重0.417±0.276,病理学检查为浸润性导管癌;SK-BR -3接种后第11天在接种部位可见结节,成瘤率为80％(8/10),接种42 d肿瘤体积357.5±246,瘤重0.325±0.167,病理学检查为浸润性导管癌.结论 该方法建立的人乳腺癌裸鼠移植模型,皮下移植方法简单,易于操作,成功率较高,肿瘤可部分保持人乳腺癌生物学特性,为研究人乳腺癌提供了重要工具.     

脾切除法建立裸小鼠人结肠癌肝转移模型

为建立大肠癌根治术后肝转移动物模型,在裸小鼠脾内注入人结肠癌细胞,５ｍ ｉｎ 后切除脾脏。术后第３０ 天发现肝转移率为１００％ ,肝外其它脏器未见转移结节,组织学证实肝转移结节为低分化腺癌。结果表明本法可成功地建立裸小鼠人结肠癌肝转移模型     

裸鼠皮下人肝癌移植瘤模型的建立

目的 :建立裸鼠皮下人肝癌移植模型 .方法 :人肝癌细胞株SMMC - 772 1制成 0 2mL 含 5× 10 6个细胞悬液接种于 4～ 6周龄裸小鼠颈背部皮下 ,按时观察肿瘤生长情况 ,36d处死 .瘤组织作病理及电镜检查 ,周围血作与肿瘤相关的甲胎蛋白 (AFP)检测 .结果 :该模型具有类似原发性肝癌的形态学特征 .结论 :成功建立了人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型 .     

博莱霉素A6体内,外抗人鼻咽癌作用

探讨博莱霉素Ａ６地人鼻咽癌的抗肿瘤作用。方法；用ＭＴＴ法检测博莱霉素Ａ６对人鼻咽癌ＳＵＮＥ－１细胞株的杀伤作用，并在可受剂量下，用裸鼠移植人鼻咽癌ＳＵＮＴ－１检测博莱霉素Ａ６的抗肿瘤作用。结果：ＩＣ５０为１．４５μｇ／ｍｌ，在１０ｍｌ／ｋｇ和１５ｍｇ／ｋｇ的剂量下，抑瘤率分别８４．３％和８８．９％。     

hTR-siRNA腺病毒对裸鼠人宫颈癌移植瘤的治疗作用

目的 探讨人端粒酶RNA(hTR)-siRNA腺病毒对裸鼠人宫颈癌移植瘤的治疗作用及其机制.方法 将HeLa细胞注射到裸鼠的右腋皮下建立肿瘤模型,27 d后将荷瘤裸鼠随机分为4组,采用瘤体内多点注射方式,分别向各组荷瘤鼠注射0.1 mL的DMEM、Ad-NT-siRNA(1013 pfu/L)、Ad-hTR-siRNA (1013 pfu/L)或顺铂(1.20 g/L), 以后每隔3 d注射1次, 连续15 d.观察注射腺病毒后移植瘤的体积变化、毒副作用.治疗结束后间隔7 d处死动物,剥离出肿瘤组织称重.切取瘤组织做TUNEL染色测定组织的凋亡指数.结果 将HeLa细胞移植到裸鼠皮下,成瘤率为100%.与Ad-NT-siRNA处理组相比,Ad-hTR-siRNA处理组的裸鼠移植瘤的体积和质量分别降低45.48%和34.68%,TUNEL分析显示凋亡细胞量约11.8%;但是Ad-hTR-siRNA的抗肿瘤作用不及顺铂.结论 hTR-siRNA腺病毒能够明显抑制裸鼠人宫颈癌移植瘤的生长,其抗肿瘤机制与诱导肿瘤细胞凋亡、坏死有关.     

改进原位接种技术建立裸小鼠人大肠癌（SW1116）模型

为改进裸小鼠肠原位肿瘤接种方法和提高肿瘤转移发生,用自上肿瘤肠避粘接和脾切除技术,在裸小鼠体内筛选并建立稳定的,有转移能力的模型要现,对裸小以下接种后生长的无转移移能力的人ＳＷ１１１６大肠癌组织块进行大部切除,可诱发肿瘤转移,用肿瘤肠壁原位粘接技术可获得肿瘤的自发转移个别,同时合作脾切除技术更可获得肿瘤的高转移。结果提示,人大肠癌的转移可在裸小本仙诱导增强肿瘤肠壁原位 妆及脾切除是研究建立人大肠主     

重组质粒hTERT-siRNA对胰腺癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长抑制作用的研究

目的探讨重组质粒pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA对胰腺癌细胞BxPC-3裸鼠皮下移植瘤生长抑制作用.方法建立人原发性胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为4组：（1）肿瘤对照组,未作任何处理;（2）空载组,即pSilencer4.1-CMV neo空质粒组;（3）T1组,即重组质粒pSilencer4.1-CMV neo-hTERT1-siRNA组;（4）T2组,即重组质粒pSilencer4.1-CMVneo-hTERT2-siRNA组）.荷瘤裸鼠分组处理30d后,检测移植瘤体积及瘤重,HE染色光镜观察各组裸鼠皮下移植瘤及各脏器组织形态学,电镜观测各组移植瘤组织超微结构变化.结果 T1组及T2组肿瘤体积及瘤重均明显小于肿瘤对照组和空载组（P〈0.01）.T1组、T2组移植瘤组织癌细胞密度减少,部分癌巢发生程度不等片状坏死.T1组和T2组BxPC-3细胞超微结构发生了明显变化,细胞表面微绒毛减少或消失,部分线粒体肿胀,同时见胞质密度增加,可见凋亡小体.结论重组质粒T1和T2均能在裸鼠体内有效抑制BxPC-3胰腺癌细胞皮下移植瘤的生长,促进胰腺癌细胞凋亡,具有体内抗胰腺癌的作用。