人类IL-3受体α亚单位与小鼠AIC2B蛋白的相互作用

目的探索人类IL-3受体(IL-3R)α亚单位与小鼠内源性AIC2B蛋白在诱导细胞增殖信号表达过程中的相互作用。方法通过PCR扩增技术，构建了IL-3Rα亚单位胞浆域缺失突变子34、22和CD，然后将野生型和突变型IL-3Rα亚单位cDNA分别转染到含小鼠IL-3R基因表达的BaF3细胞．并检测了阳性转染子的增殖信号传导和酪氨酸磷酸化。结果表达野生型hIL-3Rα／βc的BαF3阳性对照克隆在生理浓度hIL-3诱导后即可出现细胞增殖和胞浆信号蛋白βc、Jak2及Shc磷酸化；而含野生型IL-3αRa亚单位和AIC2B的BaF3细胞可出现高浓度hIL-3刺激的细胞增殖反应．但无信号传导分子的活化；共表达突变型IL-3Rα与AIC2B的BaF3细胞及未转染的BaF3细胞则对各种浓度的hIL-3刺激均无反应。结论尽管hIL-3Rβc亚单位在hIL-3诱导的信号传导过程中担负关键作用，但小鼠内源性AIC2B也可与hIL-3Rα重建功能性hIL-3R，这种功能的表达需要hIL-3Rα完整受体分子的存在。     

支架蛋白JLP调控B细胞上CD40诱导的MAPK信号通路活化及细胞增殖

目的 对支架蛋白JLP在小鼠B细胞上CD40诱导信号通路活化及细胞增殖中的作用进行研究,探索支架蛋白JLP在CD40诱导小鼠B细胞信号通路及后续生物学效应中的作用.方法 磁珠分选法分选出jlp野生型和jlp基因敲除小鼠模型脾脏B细胞,使用免疫印迹法检测在接受CD40配体（CD40L）刺激后jlp野生型和jlp基因敲除型小鼠脾脏B细胞p38、Erk和Jnk MAPK,磷酸化c-Jun以及NF-κB信号通路及的活化情况,并使用CFSE检测两种基因型小鼠B细胞在接受CD40L刺激后细胞增殖情况.结果 jlp基因敲除小鼠B细胞在受到CD40L刺激后其p38、Erk、Jnk MAPK信号通路以及c-Jun活化情况均较jlp野生型小鼠B细胞明显减弱,而NF-κB信号通路的激活情况在两种基因型B细胞中并无明显差异,jlp基因敲除小鼠B细胞中CD40诱导的细胞增殖水平较jlp野生型B细胞明显降低.结论 支架蛋白JLP参与调控B细胞上CD40诱导的MAPK信号通路活化及细胞增殖.     

克雷伯氏肺炎杆菌内毒素诱导小鼠β-防御素-4基因表达及其信号传递

目的　探讨用克雷伯氏肺炎杆菌内毒素 (L PS)对小鼠 β-防御素表达的影响及其相关的信号传导通路。方法　分别给予 C3H /He J和 C3H /He N小鼠腹腔注射 L PS (4mg/kg) ,于不同时间点采取气管、肺、肾等组织 ,提取总 RNA。用 RT- PCR检测各组织β-防御素 - 3和 /或β-防御素 - 4m RNA的表达 ,并对扩增出的 c DNA片段进行测序 ;同步用 Western blot法检测该两系小鼠肺脏 I-κBα磷酸化情况 (p- I-κBα)和 I-κBα的含量。结果　 1经L PS处理 2 4小时后的 C3H/He N小鼠 ,其肺脏表达 β-防御素 - 4m RNA 而 C3H/He J小鼠未见表达 ;2与未给予L PS处理小鼠比较 ,经 L PS处理 4小时后 ,C3H/He N小鼠肺组织 p- I- κBα含量明显增高 ;L PS处理后 8小时 ,p- I-κBα以及 I- κBα含量均呈减少趋势 ;至第 2 4小时 ,p- I- κBα和 I- κBα含量均明显减少。而 C3H/He J小鼠肺组织 p- I-κBα及 I- κBα含量均未见相应变化。结论　克雷伯氏肺炎杆菌内毒素能诱导 C3H/He N小鼠肺 β-防御素 - 4的表达 ;其诱导表达作用与 Toll受体蛋白 - 4介导的 NF-κB活化级联信号传递通路有关     

hGM—CSF受体β亚单位胞浆域在配体胞吞过程中的作用

目的 探索人粒－巨噬细胞集落刺激因子受体（hＧＭ－Ｒ）β亚单位胞浆域 在配体诱导 的胞吞过程中的作用。方法 通过ＰＣＲ扩增技术，构建β亚单位胞浆域缺失突变子（１４４１、１５８２、１７２６、２３５４和Ｓｍａ），然后将野生型或突变型β亚单位和ＧＭ－Ｒα亚单位cＤＮＡ共转染入ＣＯＳ－７细胞，并对转染细胞的配体胞吞进行检测。结果 以低亲和力方式与配体结合的ＣＯＳ－ＧＭ－Ｒα胞吞水平仅为结合配体的７％，而以高     

SHP-2酪氨酸磷酸酶激活突变的肥大细胞对IL3呈高增殖敏感性

目的 研究SHP-2酪氨酸磷酸酶激活突变的肥大细胞对白细胞素3(IL3)呈高增殖敏感性的机制.方法 从野生型(WT组)、 SHP-2杂合突变型(SHP-2D61G/+)小鼠骨髓中获取髓系细胞,运用细胞集落形成实验观察髓系细胞集落形成能力,用不同剂量的IL3 0、0.2、2.0、10.0 ng/ml)诱导比较两组髓系细胞形成集落数的差异.从髓系细胞中分离培养出肥大细胞,MTS法观察肥大细胞在IL3诱导下的细胞增殖性,Western blot比较肥大细胞中Erk、Akt的表达及磷酸化水平,免疫共沉淀和Western blot检测肥大细胞中SHP-2与Gab2结合能力.结果 SHP-2 D61G/+组比WT组的髓系细胞集落形成能力增强;IL3诱导下的肥大细胞在SHP-2 D61G/+组显示了更高的增殖活性;SHP-2 D61G/+组肥大细胞中Erk和Akt的磷酸化水平较WT组明显升高;SHP-2 D61G/+杂合突变后与Gab2结合能力增高.结论 SHP-2 D61G/+的肥大细胞对IL3呈高增殖敏感性,其分子机制可能与SHP-2 D61G/+与Gab2的结合能力增强,从而进一步参与对IL3介导的Ras-Erk、PI3K-Akt信号通路的正调控作用有关.     

IL-2促进C6胶质瘤细胞增殖及IL-2R在该细胞的表达

目的　观察 IL - 2对 C6大鼠星形神经胶质瘤细胞增殖的影响 ,并从蛋白及 m RNA水平观察白细胞介素 - 2受体(IL - 2 R)α,β,γ 3条链在 C6神经胶质瘤细胞中的表达 .方法　应用细胞培养、MTT法、3H- Td R掺入法、免疫细胞化学方法和 RT- PCR技术 .结果　 1IL - 2 (1× 10 4 ～ 1× 10 6 U·L- 1 )可显著促进 C6细胞的增殖 ;2 C6细胞中检测到 IL - 2 R的 β、γ2条链的免疫反应阳性物质 ;3IL- 2 Rβ,γ m RNA在C6细胞中均有表达 .结论　 IL - 2可显著促进 C6神经胶质瘤细胞的增殖 ,C6细胞表达 IL- 2 Rβ、γ2条链的蛋白与 m RNA,可能介导 IL- 2增殖信号的传递 ,从而初步证实 IL- 2可直接作用于神经胶质细胞并进一步阐明了 IL- 2增殖信号的转导机制 ,为揭示细胞因子在神经系统中的普遍作用机制提供更多证据 .     

HePTP抑制BCR诱导的未成熟B淋巴细胞的凋亡

目的 研究血细胞专有的酪氨酸磷酸酶（hematopoietic protein tyrosine phosphatase，HePTP）在B细胞凋亡研究模型[B细胞表面抗原受体（B-call antigen receptor，BCR）诱导的WEHI231细胞的凋亡]中的作用及机制。方法 HePTP是BCR诱导WEHI231细胞发生凋亡的信号传导通路中ERK和p38激酶的调节因子。应用PCR定点突变的方法，构建起含有功能性突变的HePTP基因的逆转录病毒载体。将野生型与突变型质粒转染BOSC23细胞，收集病毒上清，感染WEHI231细胞后，加入anti-IgM诱导凋亡，流式细胞仪检测被感染细胞的凋亡情况。western印迹检测野生型及突变型HePTP的表达及作用。结果 野生型HeFTP基因的过量表达抑制WEHI231细胞的凋亡，而失去与底物作用位点及催化域失活的突变型基因的过量表达则均没有抑制凋亡的作用。结论 HePTP抑制BCR诱导的未成熟B淋巴细胞的凋亡，与MAPK底物结合，并同时使其磷酸化的水平发生变化，是HePTP发挥抗凋亡作用的两个必要条件。     

人类GM-CSF受体生物学特性的研究

为了探讨人类ＧＭＣＳＦ受体（ＧＭＲ）的功能特性,将编码人ＧＭＲα和βｃ亚单位的ｃＤＮＡ转染到无ＧＭＲ表达的小鼠前Ｂ细胞系ＢａＦ３中。阳性转染子功能检测表明,表达ＧＭＲα的ＢａＦ３克隆能与配体低亲和力结合（Ｋｄ＝３．４ｎｍｏｌ／Ｌ）,并仅在高浓度配体诱导后出现增殖反应;而共表达ＧＭ－Ｒα／β的ＢａＦ３克隆则能以高亲和力方式与配体结合（Ｋｄ＝９９ｐｍｏｌ／Ｌ）,并表现出配体依赖性细胞增殖;增殖信号的传导与配体通过诱导βｃ磷酸化而活化胞浆Ｊａｋ２、Ｓｈｃ及Ｓｈｃ相关蛋白Ｐ１４５（ＳＨＩＰ）有关。提示这些信号分子可能在连结造血生长因子受体与细胞有丝分裂及其它反应的“激酶瀑布”中发挥着关键作用。     

TF-1细胞增殖特性与信号蛋白JAK2/STAT3表达研究

目的 探索JAK／STAT途径活化与细胞增殖和凋亡之间的关系。方法 通过表达内源性GM-CSF、受体的TF-1细胞，观察细胞增殖与凋亡；建立免疫沉淀和Western blot印迹方法，检测经GM-CSF100 ng／ml瞬时诱导的TF-1细胞信号蛋白JAK2和STAT3酪氨酸磷酸化情况。结果 经过GM-CSF刺激，细胞不但免于凋亡，TF-1细胞还呈现剂量与时间信赖性的增殖反应。当耗竭细胞因子6～12h后，倒置显微镜下TF-1细胞呈现折光性改变，细胞开始凋亡，呈现凋亡特征性形态改变和出现DNA梯形条带，而加入0．1ng／ml的GM-CSF，TF-1细胞即开始进入增殖状态，提示GM-CSF对细胞具有凋亡保护作用。经过100ng／ml GM-CSF的瞬时诱导，在分子量130kd区域见到JAK2蛋白条带，显示GM-CSF可诱导TF-1细胞磷酸化JAK2表达；而在分子量90kd区域未见到STAT3蛋白条带，显示无磷酸化STAT3表达；而未经GM-CSF诱导的TF-1细胞，既无磷酸化JAK2也无磷酸化STAT3表达。结论 GM-CSF、为TF-1细胞增殖诱导和凋亡保护所必需；GM-CSF诱导的TF-1细胞生物学效应涉及到胞浆信号分子JAK2磷酸化而非STAT3磷酸化。     

hGM-CSF受体β亚单位胞浆域在配体胞吞过程中的作用

目的　探索人粒－ 巨噬细胞集落刺激因子受体（ｈＧＭ－ Ｒ）β亚单位胞浆域在配体诱导的胞吞过程中的作用。方法　通过ＰＣＲ 扩增技术,构建β亚单位胞浆域缺失突变子（１４４１、１５８２、１７２６ 、２３５４ 和Ｓｍａ）,然后将野生型或突变型β亚单位和ＧＭ－ Ｒα亚单位ｃＤＮＡ共转染入ＣＯＳ－７ 细胞,并对转染细胞的配体胞吞进行检测。结果　以低亲和力方式与配体结合的ＣＯＳ－ ＧＭ－ Ｒα胞吞水平仅为结合配体的７％ ,而以高亲和力方式与配体结合的ＣＯＳ－ ＧＭ－ Ｒα／β胞吞水平则达３７％ ,为前者的５ 倍,这种胞吞现象可被丝氨酸／苏氨酸激酶抑制剂Ｈ－ ７ 和星形孢菌素抑制,但不被酪氨酸激酶抑制剂木黄酮和制表菌所抑制;从β亚单位胞浆域结构与胞吞关系可见,Ｃ 末端１２２ 个氨基酸缺失可使胞吞受抑,而该１２２ 个氨基酸上游的３００ 个氨基酸区域缺失则可使胞吞水平显著提高。结论　有效的胞吞需要高亲和结合力的功能受体存在,且胞吞过程不涉及酪氨酸激酶磷酸化;而β亚单位胞浆域对胞吞有正性或负性调节作用,提示这些区域含有调节胞吞过程的序列     

逆转录病毒介导IL-2cDNA治疗小鼠淋巴瘤的研究

目的 :研究人白细胞介素 2 (hIL 2 )转基因小鼠淋巴瘤体内成瘤性。方法 :体外将hIL 2基因转入小鼠淋巴瘤p3 88细胞。用PCR、RT PCR、dotblot法检测hIL 2基因在细胞内的整合及表达 ,四甲基偶氮唑盐比色 (MTT)法检测转导细胞hIL 2分泌。体内试验将动物分为A9组、对照组和体内转染治疗组 3组。 17d后处死所有动物 ,观察肿瘤生长状况。结果 :hIL 2基因已成功地整合到小鼠p3 88细胞基因组内。p3 88/IL 2细胞分泌的hIL 2量为 3 7.4U·ml-1。A9组和体内转染治疗组动物肿瘤体积明显减小 ,与对照组肿瘤体积有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 :hIL 2基因经体内或体外法转入p3 88/IL 2细胞后减弱了在小鼠体内的致瘤性     

去甲斑蝥素抗骨髓瘤作用及其机制研究

目的 探讨去甲斑蝥素（norcantharidin,NCTD）抗骨髓瘤作用及其相关机制。方法 MTT法检测NCTD对人骨髓瘤细胞株RPMI 8226增殖的抑制作用,并观察其对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测核因子-κB（NF-κB）p65、磷酸化NF-κB p65（p-NF-κB p65）、NF-κB抑制因子IkBα、磷酸化IkBα（p-IkBα）、IkB激酶α（IKKα）以及Survivin、Bcl-2、Bax蛋白表达水平,分光光度法检测Caspase-3活性,RT-PCR检测NF-κB mRNA表达。结果 NCTD抑制RPMI 8226细胞增殖,促进其凋亡;其剂量为20、40 mg/kg时对荷瘤小鼠的抑瘤率分别为29.8%、53.5%。NCTD抑制胞核NF-κB p65、p-NF-κB p65以及胞浆p-IkBα、IKKα的表达,增加胞浆IkBα的表达,对胞浆NF-κB p65的表达无显著影响。NCTD还抑制Survivin、Bcl-2蛋白的表达,促进Bax的表达和RPMI 8226细胞Caspase-3的活化,Caspase-3抑制剂能部分拮抗NCTD引起的RPMI 8226细胞凋亡（P＜0.05）。结论 NCTD对RPMI 8226细胞有抗增殖和促凋亡作用,其机制可能与NF-κB信号通路有关。     

白细胞介素-21的基础与临床

白细胞介素（IL）-21主要来源于CD4⁺T细胞,与IL-2,IL-15有较高的同源性;其对应的受体由IL-21R和γc两个亚单位构成,前者在氨基酸序列上与IL-2Rβ或IL-4Rα具有很高的一致性,后者则为IL-2,IL-4,IL-15等细胞因子受体的共用γ（common γ,γc）链,是IL-21启动信号转导中不可缺少的亚单位。通常,γc介导的IL-21信号转导通过JAK1,JAK3,以及STAT1和STAT3途径而得到执行,影响B细胞、NK细胞和T细胞等免疫功能的发挥,表现出复杂的生物学效应。鉴于IL-21所具有的多种免疫活性,推测其在肿瘤的防御机制中扮演着重要角色。本文就IL-21及其受体结构、生物学作用、抗肿瘤作用及临床应用作一简介。     

亚硒酸钠对肺癌细胞生物学行为的影响及其相关机制研究

目的 探究亚硒酸钠对肺癌细胞生物学行为的影响以及如何通过NF-κB信号通路影响肺癌凋亡的具体机制.方法 CCK-8细胞增殖实验、细胞划痕实验观察肺癌细胞的增殖和迁移的能力;流式细胞术、qPCR和Western blot实验检测不同浓度亚硒酸钠处理后的肺癌细胞的凋亡率、凋亡标志因子Bcl-2和Bax的mRNA和NF-κB信号通路相关蛋白(NF-κB、p-NF-κB、IkBα、p-IkBα)的变化水平;细胞免疫荧光实验观察p-NF-KB在细胞内的变化水平和分布情况.结果 CCK-8细胞增殖实验和细胞划痕实验显示肺癌细胞增殖和迁移被亚硒酸钠显著抑制.流式结果显示,亚硒酸钠处理后细胞凋亡率明显增加.与对照组相比,亚硒酸钠组的 p-NF-KB、p-IkBα、Bcl-2蛋白的表达水平和Bcl-2 mRNA表达水平均下调,而Bax蛋白和mRNA表达水平则与之相反.细胞免疫荧光实验结果显示亚硒酸钠可使NF-κB的磷酸化水平受到抑制.qPCR结果显示,亚硒酸钠组与BAY11-7082(NF-κB抑制剂)均可使Bcl-2 mRNA表达水平下调,Bax mRNA表达水平则上调.结论 亚硒酸钠可能抑制肺癌细胞的增殖和迁移,同时通过抑制NF-κB信号通路诱导肺癌细胞的凋亡.     

野生型和G88C突变型α-synuclein基因真核表达质粒构建

目的 构建人野生型和突变型(G88C)α-synuclein基因真核表达载体。方法 采用逆转录一聚合酶链反应从人胚脑组织中扩增人α-synuclein基因,克隆至pMD18-T中。采用SOE法定点突变获得G88c突变型α-synuclein基因,并将其克隆至pMD18-T中。酶切鉴定后将野生型和突变型(G88C)α-synuclein基因亚克隆至真核表达质粒pcDNA3．1 中。结果 酶切及DNA测序结果证实,野生型和突变型α-synuclein基因分别插入到pcDNA3．1 中,野生型α-synuclein基因序列与基因库(登录号L08850)完全一致,突变型(G88c)α-synuclein基因除第88位碱基G被C替代以外,其余序列与野生型完全一致。结论 构建野生型和G88c突变型α-synuclein基因真核表达质粒为研究人α-synuclein基因的功能及其突变体的致病机制奠定了基础。     

共刺激分子B7-2对小鼠肝癌治疗作用的实验研究

目的 :应用转染有小鼠B7- 2基因片段的肝癌细胞 ,建立小鼠肝癌模型 ,观察小鼠肿瘤生长和消退情况 ,研究共刺激分子B7- 2对肿瘤的免疫治疗作用。方法 :建立BALB/c小鼠转B7- 2基因肝癌细胞株H2 2 /B7- 2 ,细胞计数法测定肿瘤细胞体外增殖能力 ;BALB/c鼠皮下接种H2 2 /B7- 2及野生型H2 2细胞H2 2 /Wt,以空载体转染细胞H2 2 /neo为对照 ,建立小鼠肝癌模型 ,观察小鼠成瘤期、荷瘤小鼠存活期及肿瘤结节大小 ;同源淋巴细胞肿瘤细胞混合培养 (MTLCs)后测定淋巴细胞增殖指数和CTLs活性 ,同时测定培养上清IL -2、IFNγ ,研究B7- 2分子的抗肿瘤免疫效果。结果 :细胞在体外增殖能力一致 (P =0 .782 ) ;当接种不同肿瘤细胞后 ,三组动物都发生肿瘤 ,接种H2 2 /B7- 2组肿瘤形成有迟发性 ,并在接种 18d后肿瘤都开始缩小 ,但最终不会完全消失 ;接种H2 2 /Wt和H2 2 /neo组动物肿瘤呈进行性生长。H2 2 /B7- 2在体外刺激淋巴细胞增殖和诱导CTLs的能力明显强于对照细胞 (P <0 .0 5 )。结论 :共刺激分子B7- 2能增强肝癌细胞的免疫原性 ,它在抗肿瘤早期发挥作用。用其治疗肝癌是有效的 ,但不能介导完全和长期的抗肿瘤效应。     

抗白介素2受体α链单抗及AK细胞治疗肝癌的实验研究

目的 :探讨一种新的过继免疫治疗肝癌方法。方法 :将肝癌细胞株 (H2 2 )接种于近交系 BAL B/ c小鼠皮下 ,制成荷瘤小鼠模型 ,用 IL - 2 / AK细胞 /抗白介素 2受体α链单抗 (a IL - 2 Rα MAb)治疗 ,以发现其抗肿瘤作用。结果 :荷瘤小鼠脾淋巴细胞 NK活性无明显变化 ,L AK和 CTL活性及淋巴细胞刺激指数在联合治疗组均高于其他各组 (P<0 .0 1) ;肝癌皮下结节在联合治疗明显受到抑制 ,肿瘤小鼠生存期明显延长。结论 :IL- 2 ,a IL- 2 Rα MAb及 AK细胞联合治疗有非常显著的抗肿瘤作用。抗白介素2受体α链单抗及AK细胞治疗肝癌的实…     

抵抗素通过磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路诱导H9c2心肌细胞肥大机制研究

目的探讨抵抗素激活磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路诱导H9c2心肌细胞肥大的分子机制。方法取生长状态良好的H9c2心肌细胞,使用含1 g·L~(-1)胎牛血清的高糖达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)处理24 h使其细胞同步化后进行不同干预。随机将H9c2心肌细胞分为Con组、R50组、LY294002+R50组和LY294002组,Con组为空白对照;R50组细胞应用50μg·L~(-1)抵抗素处理48 h组;LY294002+R50组细胞预先应用PI3K/Akt通路抑制剂LY294002干预2 h后再用50μg·L~(-1)抵抗素处理46 h;LY294002组细胞应用PI3K/Akt通路抑制剂LY294002处理2 h组。4组心肌细胞加含药物DMEM培养48 h后进行细胞面积、单细胞蛋白质合成量测定,Western blot检测心肌细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、原癌基因c-myc蛋白及PI3K/Akt非磷酸化及磷酸化水平表达。观察抵抗素(50μg·L~(-1))处理细胞不同时间(0、1、2、3 h)后运用Western blot测定磷酸化(p-Akt)的蛋白表达水平,检测抵抗素处理1 h后4组心肌细胞PI3K/Akt信号通路磷酸化表达水平。结果抵抗素处理H9c2心肌细胞0、1、2、3 h组p-Akt蛋白表达水平分别为0.60±0.26、0.71±0.67、0.52±0.32、0.51±0.32;与0 h组比较,抵抗素处理H9c2心肌细胞1 h组p-Akt蛋白表达水平显著增高(P<0.01);与1 h组比较,抵抗素处理H9c2心肌细胞2、3 h组pAkt蛋白表达水平显著降低(P<0.01);抵抗素处理H9c2心肌细胞2 h与处理3 h后H9c2心肌细胞中p-Akt蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。抵抗素处理H9c2心肌细胞48 h后,与Con组比较,R50组、LY294002+R50组心肌细胞面积、单细胞蛋白含量及α-SMA蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而LY294002组其心肌细胞面积、单细胞蛋白含量及α-SMA蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与R50组比较,LY294002+R50组、LY294002组心肌细胞面积、单细胞蛋白含量及α-SMA蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与LY294002+R50组比较,LY294002组心肌细胞面积、单细胞蛋白含量及α-SMA蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。Con组、R50组、LY294002+R50组、LY294002组c-myc蛋白表达水平分别为0.45±0.30、0.68±0.32、0.56±0.33、0.16±0.20,4组间比较差异有统计学意义(F=178.91,P<0.05);与Con组比较,抵抗素处理H9c2心肌细胞48 h后,R50组c-myc蛋白表达水平显著增高(P<0.05);而LY294002+R50组c-myc蛋白表达水平较Con组、LY294002组升高但低于R50组(P<0.05)。经抵抗素处理H9c2心肌细胞3 h后,R50组PI3K/Akt信号通路磷酸化水平较Con组、LY294002+R50组、LY294002组显著升高(P<0.05),其余各组PI3K/Akt信号通路磷酸化水平表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论抵抗素通过激活PI3K/Akt通路,提高Akt磷酸化水平来诱导H9c2心肌细胞肥大。     

IL-4/IL-13诱导小鼠支气管上皮细胞中IL-13Rα2基因转录的调节

目的　了解支气管哮喘发病中白细胞介素 13受体α2 (IL 13Rα2 )基因转录的调节作用。方法　采用PCR扩增hIL 13Rα2基因启动子区不同长度的基因片段F1～F6 ,其中F1和F2含有信号转导子和转录活化子 6 (STAT6 )的结合区域。将F1～F6连入载体pGEM Teasy中 ,转化 ,获得菌落 ,经鉴定后将pGEM Teasy构建体的插入部分F1～F6连入增强载体pGL3中 ,转化 ,获得菌落 ,再以pGL3构建体 (F1～F6 ,mock)转染入小鼠支气管上皮细胞TGMBE 0 2 3。转染 2 4h后 ,给予小鼠IL 4 (mIL 4 ,10 μg/L)和小鼠IL 13(mIL 13,5 0 μg/L)处理 ,2 4h后进行荧光分析。 结果　 (1)基因组DNA(编号BCI0 0 1)IL 13Rα2启动子区的碱基序列与GeneBank中登录的序列完全一致。 (2 )各构建体转染后 ,对照组与mIL 4或mIL 13刺激组的相对荧光活性无显著差异 (P均 >0 .0 5 )。结论　IL 4、IL 13的刺激不影响hIL 13Rα2基因的转录活性。