层粘连蛋白受体理化性质的进一步研究

从Lewis肺癌纯化的层粘连蛋白受体(Laminin Receptor,LN-R)SDS-PAGE鉴定分子量为70000的单条区带。其用高碘酸-希夫氏试剂显色阳性,说明是一种糖蛋白。等电点为4.93,属酸性蛋白质。氯仿-甲醇提取物TLC分析,提示LN-R伴有磷脂。HPTLC分析表明它伴有中性糖脂未见酸性糖脂。LN-R与LN的结合依赖于Ca~(2+),Mg~(2+)的存在。LN-R可与肌动蛋白结合。     

糖基在层粘连蛋白受体与其配体结合中的作用

本文应用凝集素检测层粘连蛋白受体(Laminin receptor,LN-R)分子中的糖基。结果表明,~(125)I标记的LN-R可与伴刀豆凝集素、麦胚凝集素、花生凝集素和蓖麻凝集素结合,且分别可被甘露糖、N-乙酰氨基葡葡糖、唾液酸及半乳糖所抑制,表明该受体含有这些糖基。此外这几种单糖以及伴刀豆凝集素对层粘连蛋白与其受体的结合呈不同程度的抑制作用。来自Lewis肺癌的糖肽可显著地抑制二者的结合。     

层粘连蛋白及受体、Ⅳ型胶原在肺癌组织中的表达与肺癌的关系

目的:探讨组织中层粘连蛋白(LN)及其受体(67KD LN-R)的表达与肺癌的病理类型、临床分期、转移的关系.方法:选择北京天坛医院呼吸内科2019年1月1日～12月31日确诊为肺癌的36例患者为研究组,同期住院的12例肺炎患者为对照组.检测血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中LN、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的含量,免疫组...     

层粘连蛋白及其受体在葡萄胎中表达与预后的相关研究

目的：探讨层粘连蛋白（Laminin,LN）和受体（Laminin Receptor,LN-R）的表达在葡萄胎预后中的意义.方法：应用免疫组化方法对41例葡萄胎组织（经随访13例发生恶变）和20例正常早孕绒毛组织中LN及LN-R进行检测.结果：LN在正常绒毛、葡萄胎未恶变组和恶变组中的强表达率分别为,90.0%（18/20）、71.4%（20/28）、38.5%（5/13）;LN-R分别为70.0%（14/20）、71.4%（20/28）、84.6%（11/13）.LN表达葡萄胎预后恶变组显著高于其他两组.结论：LN和LN-R在葡萄胎中的表达可能在葡萄胎恶变过程中起重要作用,有望作为判断葡萄胎预后的参考指标之一.     

检测层粘连蛋白夹心ELISA的建立

血清层粘连蛋白(LN)的水平与肝纤维化的程度密切相关,采用两株抗LN的单克隆抗体(mAb)建立了检测血清LN水平的双mAb夹心ELISA法.     

层粘连蛋白对大鼠卵巢排卵前颗粒细胞孕酮分泌的影响

目的 研究层粘连蛋白(LN)对体外培养的大鼠卵巢排卵前颗粒细胞孕酮分泌的影响及其机制.方法 分离未成熟大鼠排卵前颗粒细胞,分3组培养:LN铺板组、未铺板组及LN铺板同时加入抗整合素α6单抗组(GoH3组).比较细胞贴壁情况.血清培养48 h后加入人绒毛膜促性腺激素(HCG),无血清培养48 h后收集培养液作孕酮测定.结果 LN铺板组颗粒细胞6 h贴壁及展开,而未铺板组16 h开始贴壁及展开;无论HCG加入与否LN均可显著刺激颗粒细胞孕酮的产生,且LN能显著增强HCG诱导的颗粒细胞孕酮分泌,5 mg/LGoH3能明显抑制LN的刺激作用.结论 LN通过与细胞表面黏附分子整合素α6β1相互作用,可能为卵巢内的一种局部调节因素,在围排卵期颗粒细胞黄素化过程中发挥重要效应.     

层粘连蛋白LN及其受体LN-R在髓母细胞瘤中的表达

目的测定Laminin(LN)／Laminin Receptor(LN-R)在髓母细胞瘤中的表达情况，进一步探讨其与该肿瘤浸润、转移的关系。方法通过免疫组化方法测定LN和LN-R在70例髓母细胞瘤和10例正常小脑组织中的表达情况。结果LN-R在10例正常小脑组织及70例髓母细胞瘤中表达均为阴性，LN在髓母细胞瘤中低表达。结论LN及其受体在髓母细胞瘤中低表达，其中LN-R不表达可能为原发性中枢神经系统肿瘤不易发生颅外转移的原因之一。     

金属蛋白酶类及层粘连蛋白受体与人黑色素瘤细胞侵袭转移的关系

目的揭示金属蛋白酶类(MMPs)及层粘连蛋白受体(LN-R)与人黑色素瘤细胞侵袭转移的关系,并探讨MMPs及IN-R用以判断肿瘤细胞侵袭转移的可能性。方法通过流式细胞术(FCM)定量研究和蛋白酶活性分析(Zymography),对具有不同潜在转移能力的人黑色素瘤细胞系(WM35,WM134b,WM983a,WM451)进行MMPs及瘤细胞表面67000LN-R的荧光阳性率和全部细胞的平均荧光强度测定。结果早期WM35不产生MMPs;WM1341b仅产生MMP2,不产生MMP9;进展期WM983a和远处转移瘤株WM451既产生MMP2又产生MMP9。瘤细胞表面67000LN-R的荧光阳性率和全部细胞的平均荧光强度大小顺序为WM451>WM983a>WM1341b>WM35。结论MMPS和LN-R与人黑色素瘤细胞侵袭转移能力的获得之间关系密切,并可作为较特异的肿瘤侵袭转移标记物应用于肿瘤研究与治疗中。     

涎腺腺样囊性癌中层粘连蛋白受体表达及其意义

层粘连蛋白受体(laminin receptor,LN-R),是一种跨膜糖蛋白,广泛存在于正常上皮细胞和肿瘤细胞表面.它与层粘连蛋白一起在细胞增殖、分化、迁移、粘附、胚胎发育、神经生长以及肿瘤发生、癌变与转移等多方面发挥着重要的作用.本研究拟用免疫组化方法研究LN-R在涎腺腺样囊性癌中的表达及其与涎腺腺样囊性癌临床病理分型和临床分期的关系.     

层粘连蛋白表达在妇科肿瘤中的意义

层粘连蛋白(LN)是基底膜基质的重要组成部分,粘附分子的配体,具有多种生理功能,它与细胞表面的受体结合可改变细胞的粘附性能,在肿瘤的生长和转移中起重要作用。本文就LN在妇科肿瘤中的研究进展作一综述。1　LN生物学特性LN首先是由Timpl[1]从小鼠的Engel-breth-Holm-Swar...     

层粘蛋白表达与肺癌转移及预后的关系

目的：探讨层粘蛋白（LN）的表达与肺癌转移及预后的关系。方法：采用免疫组化LSAB法检测96例肺癌（鳞癌49例，腺癌47例）组织中LN的表达。结果：LN的表达类型在肺癌不同组织学类型有显著性差异（P＜0．05）；在不同分化，分级的肺癌中有极显著性差异（P＜0．00001）；在有否淋巴结转移及术后不同生存期的肺癌组织有非常显著性差异（P＜0．001）。结论：LN的表达类型可作为判断肺癌细胞分化，淋巴结转移及病人预后的一个独立指标。     

重组人血管内皮抑素对Lewis肺癌抑制作用的实验研究

[目的]研究重组人血管内皮抑素对Lewis肺癌的抑制作用。[方法]采用MTT法检测不同剂量不同时间重组人血管内皮抑素对Lewis肺癌细胞增殖的影响;建立Lewis肺癌自发转移模型,将40只荷瘤小鼠随机分为重组人血管内皮抑素小、中、大剂量组(5、15、30 mg.kg-1.d-1)及对照组各10只,连续给药14 d,停药1周后处死小鼠,绘制肿瘤生长曲线,计算原发瘤抑瘤率;利用光镜和透射电镜技术,观察重组人血管内皮抑素对Lewis肺癌细胞以及对荷瘤小鼠血管内皮细胞和肿瘤细胞的形态学改变。[结果]重组人血管内皮抑素对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用与浓度和作用时间呈正相关,400 ng处理72 h后的抑制率为(68.4±1.5)%,与处理24 h后的抑制率(21.9±2.1)%比较,差异有显著性意义(P<0.05)。各给药组肿瘤生长均较对照组缓慢,小、中、大剂量组的抑瘤率分别为28.2%、49.7%、52.8%。各给药组小鼠瘤组织内均有大面积坏死,血管内皮细胞和肿瘤细胞均发生早期凋亡的改变,且具有剂量依赖性。[结论]重组人血管内皮抑素对Lewis肺癌的抑制作用可能表现为对肿瘤细胞和毛细血管内皮细胞的双重抑制作用。     

细胞外基质的表达与滋养细胞肿瘤的侵袭转移

目的 探讨层粘连蛋白和纤维粘连蛋白在滋养细胞肿瘤的发生及侵袭转移过程中的作用。方法 采用免疫组织化学方法检测１５例葡萄胎、６例侵蚀性葡萄胎和６例绒毛膜癌组织中层粘连蛋白和纤维粘连蛋白的表达状况。结果 葡萄胎、层粘连蛋白在绒毛上皮基膜呈强阳性表达,在间质呈阳性,纤维粘连蛋白在线间质内呈阳性表达。侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌,层粘连蛋白和纤维粘连蛋白在细胞浆中呈强阳性表达,在细胞间质内呈弱阳性或阴性表达。结     

塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖及移植瘤的抑制作用

目的:探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对Lewis肺癌细胞株增殖及小鼠皮下移植瘤的影响。方法:常规培养Lewis肺癌细胞,实验分为对照组和塞来昔布用药组。MTT法检测细胞增殖水平,损伤修复实验检测细胞迁移能力;将Lewis肺癌细胞接种于12只C57BL/6小鼠皮下,对照组隔日腹腔注射生理盐水;塞来昔布用药组隔日腹腔注射塞来昔布30 mg/kg,24 d后处死,计算抑瘤率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测移植瘤组织中VEGF mRNA表达水平,同时酶联免疫检测小鼠血清中MMP-9浓度。结果:塞来昔布对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用呈时间-剂量依赖性效应(P<0.05)。20μmol/L塞来昔布组细胞迁移速度(0.37±0.03)μm/h明显减慢,与对照组(3.17±0.22)μm/h相比具有显著性差异(P<0.01);在体实验显示,塞来昔布具有明显的抑制Lewis肺癌移植瘤增殖的作用,同时能抑制移植瘤组织中VEGF表达、降低血清MMP-9浓度。结论:塞来昔布可以显著抑制Lewis肺癌细胞的增殖与迁移能力,且对Lewis肺癌移植瘤有明显抑制作用。     

转移性癌细胞对表皮生长因子和层粘连蛋白的反应及其三磷酸肌醇含量的测定

为探讨不同转移性癌细胞（ＭＦＣ和ＣＮＥ－２Ｚ）不同克隆细胞株的三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量、侵袭能力以及这些细胞对表皮生长因子（ＥＧＦ）和层粘连蛋白（ＬＮ）的反应性。方法利用放射性受体竞争结合法和人工基底膜（ｍａｔｒｉｇｅｌ）侵袭试验法进行了测定。结果显示了低转移性癌细胞比高转移性者的ＩＰ３含量高，对ＥＧＦ的反应性更大，但ＭＦＣ高、低转移性克隆细胞对ＬＮ的反应性差别无显著意义。而ＣＮＥ－２Ｚ高转移细胞比低转移者对ＬＮ的反应性更大。结论说明高、低转移性癌细胞在跨膜信息传递方面存在差别，深入研究其具体机制将有重要意义。     

胸腹水中CEA Fer LN水平检测的临床意义

目的观察胸腹水中CEA、Fer、LN浓度在鉴别良恶性胸腹水中的价值。方法采用放射免疫分析技术,对251例胸腹水中CEA、Fer、LN进行了综合性检测。结果CEA、Fer、LN指标在良恶性胸腹水中均存在显著性差异(P<0.01),其在恶性胸腹水中的诊断阳性率依次为65.8%、80.8%、75.8%,联合测定后阳性率提高到90.0%。结论CEA、Fer、LN联合测定对于良恶性胸腹水性质的鉴别具有重要价值。     

层粘连蛋白对人胃癌细胞内游离钙及钙调蛋白和核DNA含量的影响

本文研究外源性层粘连蛋白与人胃癌细胞膜上其受体介导细胞内Ｃａ２＋浓度及钙调蛋白（ＣａＭ）和ＤＮＡ发生的变化。结果表明，层粘连蛋白可引起细胞内Ｃａ２＋浓度升高和钙调蛋白含量显著升高。同时伴有核ＤＮＡ含量增加。提示外源性层粘连蛋白与质膜上的层粘连蛋白受体结合后可能通过细胞内Ｃａ２＋影响核内ＣａＭ，进而促进ＤＮＡ的合成。该信息通路在层粘连蛋白促进肿瘤细胞粘着，铺展，增殖等生物学效应中可能起重要调节作用。     

直肠癌组织中层粘连蛋白的免疫组化研究

目的　探讨层粘连蛋白 (LN)在直肠癌组织中的表达特点。方法　应用免疫组化法对 31例直肠癌 ,5例直肠腺瘤病人的LN进行了检测 ,并分析其与临床及病理学指标间的关系。结果　LN在 5例直肠腺瘤中完整表达 ,在 31例直肠癌中仅 16例有完整或部分表达 ,两者比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。LN在直肠癌浸润深度方面差异亦有显著性 (P <0 .0 5 ) ,而在病人的年龄、性别、淋巴结转移、远处转移、肿块外形、肿瘤的病理类型及分级方面差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　直肠癌病人LN与其浸润深度有关 ,检测直肠癌病人LN可为其预后提供重要参考指标     

人参皂甙Rg3抑制肿瘤新生血管形成的研究

目的 :探讨人参皂甙 Rg3抗肿瘤生长的作用机制。方法 :利用鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM)观察 Rg3作用后肿瘤新生血管的生长情况 ,并采用 L ewis肺癌模型进一步探讨 Rg3在体内对肿瘤生长及肿瘤新生血管形成的影响。结果 :Rg3浓度为 0 .1和 0 .5 mm ol/L时 ,CAM血管生长抑制指数分别达 (6 2 .4± 9.3) %和 (4 5 .6± 5 .7) % ,与对照组相比差异非常显著 (P<0 .0 1)。对 L ewis肺癌荷瘤小鼠分别以 5、10、2 0 mg/kg的剂量隔日灌胃一次给予 Rg3,连续 10次 ,2 0 d后观察到 3组的肿瘤瘤质量分别为 (1.77± 0 .2 1)、(1.5 8± 0 .17)及 (1.2 2± 0 .2 9) g,与对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 1) ,生长抑制率分别为 2 3.0 4%、31.30 %和 47.10 % ,同时观察到 Rg3组的新生血管数也明显减少。 结论 :人参皂甙 Rg3可明显抑制 L ewis肺癌的生长 ,其抑瘤作用部分是因为抑制了肿瘤诱导的新生血管形成     

CIK细胞对Lewis肺癌细胞凋亡作用的影响

目的观察CIK(cytokine induced killer)细胞对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用,探讨其抑瘤机制。方法常规方法培养CIK细胞,以CIK细胞为效应细胞,Lewis肺癌细胞为靶细胞,检测Lewis肺癌细胞的凋亡情况。结果电镜观察CIK细胞能促进Lewis肺癌细胞凋亡超微结构的改变;流式细胞仪检测CIK细胞组凋亡率明显高于对照组。结论CIK细胞可在体内及体外抑制Lewis肺癌细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡。